Đang tải... (xem toàn văn)
PHƯƠNG PHÁP PHÁT HIỆN THỰC PHẨM CÓ NGUỒN GỐC TỪ NGÔ BIẾN ĐỔI GENDanh sách nhóm 4 Nguyễn Hoài Bảo Ngọc BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠOTRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINHKHOA KHOA HỌC SIN
Trang 1PHƯƠNG PHÁP PHÁT HIỆN THỰC PHẨM CÓ NGUỒN GỐC TỪ NGÔ BIẾN ĐỔI GEN
Danh sách nhóm 4 Nguyễn Hoài Bảo Ngọc
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO
TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINHKHOA KHOA HỌC SINH HỌC
BÁO CÁO
Trang 22.3 Phương pháp nghiên cứu
3.1 Kết quả mong muốn
Trang 4Chương 2 Vật liệu và phương pháp nghiên cứu 2.1 Vật Liệu oThực phẩm có chứa ngô
oCối và chày nhỏ oCân phân tích oMáy ly tâm oMáy PCR
oBộ cung cấp nguồn điện (power source) oBồn điện di (gel box)
oKhay gel (casting tray), lược gel (combs)
Trang 6Bổ sung vào tube 500 μL PCI và lắc nhẹ 1 phút, li tâm với vận tốc 10.000 rpm trong 5 phút, sau đó hút dịch nổi cho vào ống tube mới.
Bổ sung 400 μL Chloroform vào, lắc nhẹ 3 phút, li tâm 10.000 rpm/5 phút, hút dịch nổi chuyển qua tube mới.
Thêm 600 μL Ethanol 99°, lắc nhẹ 2 phút Ủ ở -20°C trong 30 phút Sau đó li tâm 12.000 rpm/5 phút, bỏ dịch nổi, thu phần tủa Phơi tube ở nhiệt độ phòng.
Thêm vào kết tủa DNA 30 μL nước khử ion hấp khử trùng (không chứa DNase) hoặc 30 μL TE 0,5X, vortex nhẹ và bảo quản ở 4°C hoặc -20°C.
2.3 Phương pháp nghiên cứu2.3.1 Ly trích DNA
Trang 7Gene Bt Cry 1A(b) (delta-endotoxin):
Trang 82.3 Phương pháp nghiên cứu
Chu kỳ nhiệt cho phản ứng PCR:
Trang 9• Cho 0,5g agarose vào 50 ml dung dịc TAE ( nồng độ 2%). • Cho 0,5g agarose vào 50 ml dung dịch TAE ( nồng độ 2%).
• Đun sôi hỗn hợp trong khoảng 1,5 phút trong lò Viba • Để nguội ở nhiệt độ phòng.
• Đổ gel vào bể điện di (đặt lược tạo giếng trước khi đổ gel).
• Để nguội cho gel cứng hoàn toàn, cẩn thận rút lược ra khỏi gel, cho dung dịch TAE 0,5X vào bể điện di sao cho ngập gel khoảng 1 đến 1,5cm.
• Trộn 5µl sản phẩm PCR với 2µl loading dye 6X và cho hỗn hợp vào các giếng của gel Vận hành máy điện di trong 30 phút.
• Nhuộm gel và đọc kết quả
• Thuốc nhuộm GelRed có thể được trộn trực tiếp với mẫu DNA trước khi điện di hay
2.3 Phương pháp nghiên cứu2.3.3 Điện di
Trang 12CREDITS: This presentation template was created by Slidesgo, including icons by Flaticon, and infographics &
images by Freepik
Thanks!