Đang tải... (xem toàn văn)
Nghiên cứu mối liên quan giữa cccDNA tế bào gan với HBV DNA, HBV RNA huyết tương ở bệnh nhân viêm gan B mạn tính và xơ gan do HBVNghiên cứu mối liên quan giữa cccDNA tế bào gan với HBV DNA, HBV RNA huyết tương ở bệnh nhân viêm gan B mạn tính và xơ gan do HBVNghiên cứu mối liên quan giữa cccDNA tế bào gan với HBV DNA, HBV RNA huyết tương ở bệnh nhân viêm gan B mạn tính và xơ gan do HBVNghiên cứu mối liên quan giữa cccDNA tế bào gan với HBV DNA, HBV RNA huyết tương ở bệnh nhân viêm gan B mạn tính và xơ gan do HBVNghiên cứu mối liên quan giữa cccDNA tế bào gan với HBV DNA, HBV RNA huyết tương ở bệnh nhân viêm gan B mạn tính và xơ gan do HBVNghiên cứu mối liên quan giữa cccDNA tế bào gan với HBV DNA, HBV RNA huyết tương ở bệnh nhân viêm gan B mạn tính và xơ gan do HBVNghiên cứu mối liên quan giữa cccDNA tế bào gan với HBV DNA, HBV RNA huyết tương ở bệnh nhân viêm gan B mạn tính và xơ gan do HBVNghiên cứu mối liên quan giữa cccDNA tế bào gan với HBV DNA, HBV RNA huyết tương ở bệnh nhân viêm gan B mạn tính và xơ gan do HBVNghiên cứu mối liên quan giữa cccDNA tế bào gan với HBV DNA, HBV RNA huyết tương ở bệnh nhân viêm gan B mạn tính và xơ gan do HBVNghiên cứu mối liên quan giữa cccDNA tế bào gan với HBV DNA, HBV RNA huyết tương ở bệnh nhân viêm gan B mạn tính và xơ gan do HBVNghiên cứu mối liên quan giữa cccDNA tế bào gan với HBV DNA, HBV RNA huyết tương ở bệnh nhân viêm gan B mạn tính và xơ gan do HBVNghiên cứu mối liên quan giữa cccDNA tế bào gan với HBV DNA, HBV RNA huyết tương ở bệnh nhân viêm gan B mạn tính và xơ gan do HBVNghiên cứu mối liên quan giữa cccDNA tế bào gan với HBV DNA, HBV RNA huyết tương ở bệnh nhân viêm gan B mạn tính và xơ gan do HBVNghiên cứu mối liên quan giữa cccDNA tế bào gan với HBV DNA, HBV RNA huyết tương ở bệnh nhân viêm gan B mạn tính và xơ gan do HBVNghiên cứu mối liên quan giữa cccDNA tế bào gan với HBV DNA, HBV RNA huyết tương ở bệnh nhân viêm gan B mạn tính và xơ gan do HBVNghiên cứu mối liên quan giữa cccDNA tế bào gan với HBV DNA, HBV RNA huyết tương ở bệnh nhân viêm gan B mạn tính và xơ gan do HBVNghiên cứu mối liên quan giữa cccDNA tế bào gan với HBV DNA, HBV RNA huyết tương ở bệnh nhân viêm gan B mạn tính và xơ gan do HBVNghiên cứu mối liên quan giữa cccDNA tế bào gan với HBV DNA, HBV RNA huyết tương ở bệnh nhân viêm gan B mạn tính và xơ gan do HBVNghiên cứu mối liên quan giữa cccDNA tế bào gan với HBV DNA, HBV RNA huyết tương ở bệnh nhân viêm gan B mạn tính và xơ gan do HBVNghiên cứu mối liên quan giữa cccDNA tế bào gan với HBV DNA, HBV RNA huyết tương ở bệnh nhân viêm gan B mạn tính và xơ gan do HBVNghiên cứu mối liên quan giữa cccDNA tế bào gan với HBV DNA, HBV RNA huyết tương ở bệnh nhân viêm gan B mạn tính và xơ gan do HBVNghiên cứu mối liên quan giữa cccDNA tế bào gan với HBV DNA, HBV RNA huyết tương ở bệnh nhân viêm gan B mạn tính và xơ gan do HBVNghiên cứu mối liên quan giữa cccDNA tế bào gan với HBV DNA, HBV RNA huyết tương ở bệnh nhân viêm gan B mạn tính và xơ gan do HBVNghiên cứu mối liên quan giữa cccDNA tế bào gan với HBV DNA, HBV RNA huyết tương ở bệnh nhân viêm gan B mạn tính và xơ gan do HBVNghiên cứu mối liên quan giữa cccDNA tế bào gan với HBV DNA, HBV RNA huyết tương ở bệnh nhân viêm gan B mạn tính và xơ gan do HBVNghiên cứu mối liên quan giữa cccDNA tế bào gan với HBV DNA, HBV RNA huyết tương ở bệnh nhân viêm gan B mạn tính và xơ gan do HBVNghiên cứu mối liên quan giữa cccDNA tế bào gan với HBV DNA, HBV RNA huyết tương ở bệnh nhân viêm gan B mạn tính và xơ gan do HBVNghiên cứu mối liên quan giữa cccDNA tế bào gan với HBV DNA, HBV RNA huyết tương ở bệnh nhân viêm gan B mạn tính và xơ gan do HBVNghiên cứu mối liên quan giữa cccDNA tế bào gan với HBV DNA, HBV RNA huyết tương ở bệnh nhân viêm gan B mạn tính và xơ gan do HBVNghiên cứu mối liên quan giữa cccDNA tế bào gan với HBV DNA, HBV RNA huyết tương ở bệnh nhân viêm gan B mạn tính và xơ gan do HBVNghiên cứu mối liên quan giữa cccDNA tế bào gan với HBV DNA, HBV RNA huyết tương ở bệnh nhân viêm gan B mạn tính và xơ gan do HBVNghiên cứu mối liên quan giữa cccDNA tế bào gan với HBV DNA, HBV RNA huyết tương ở bệnh nhân viêm gan B mạn tính và xơ gan do HBVNghiên cứu mối liên quan giữa cccDNA tế bào gan với HBV DNA, HBV RNA huyết tương ở bệnh nhân viêm gan B mạn tính và xơ gan do HBVNghiên cứu mối liên quan giữa cccDNA tế bào gan với HBV DNA, HBV RNA huyết tương ở bệnh nhân viêm gan B mạn tính và xơ gan do HBV
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHÒNG HỌC VIỆN QUÂN Y ĐỖ THỊ LỆ QUYÊN NGHIÊN CỨU MỐI LIÊN QUAN GIỮA cccDNA TẾ BÀO GAN VỚI HBV DNA, HBV RNA HUYẾT TƯƠNG Ở BỆNH NHÂN VIÊM GAN B MẠN TÍNH VÀ XƠ GAN DO HBV LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC HÀ NỘI – 2024 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHÒNG HỌC VIỆN QUÂN Y CHỦ NHIỆM BỘ MÔN TS LÊ VĂN NAM ĐỖ THỊ LỆ QUYÊN NGHIÊN CỨU MỐI LIÊN QUAN GIỮA cccDNA TẾ BÀO GAN VỚI HBV DNA, HBV RNA HUYẾT TƯƠNG Ở BỆNH NHÂN VIÊM GAN B MẠN TÍNH VÀ XƠ GAN DO HBV Ngành: Truyền nhiễm Bệnh nhiệt đới Mã số: 9720109 LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC THẦY HƯỚNG DẪN THẦY HƯỚNG DẪN PGS.TS HOÀNG TIẾN TUYÊN TS HỒ HỮU THỌ Hướng dẫn khoa học: PGS.TS Hoàng Tiến Tuyên TS Hồ Hữu Thọ HÀ NỘI – 2024 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu tơi với hướng dẫn khoa học tập thể cán hướng dẫn Các kết nêu luận án trung thực công bố phần báo khoa học Luận án chưa cơng bố Nếu có điều sai tơi xin hoàn toàn chịu trách nhiệm Tác giả Đỗ Thị Lệ Quyên MỤC LỤC Lời cam đoan Lời cảm ơn Mục lục Danh mục chữ viết tắt Danh mục bảng Danh mục biểu đồ Danh mục hình ĐẶT VẤN ĐỀ Chương 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU .3 1.1 Tình hình nhiễm HBV Thế giới Việt Nam 1.1.1 Tình hình nhiễm HBV Thế giới 1.1.2 Tình hình nhiễm HBV Việt Nam 1.2 Cơ chế bệnh sinh diễn biến nhiễm HBV mạn .5 1.2.1 Cơ chế bệnh sinh bệnh HBV gây 1.2.2 Tiến trình tự nhiên nhiễm HBV mạn tính .7 1.3 Viêm gan virus B mạn tính xơ gan HBV .10 1.3.1 Viêm gan virus B mạn tính 10 1.3.2 Xơ gan HBV 12 1.4 Một số dấu ấn HBV 13 1.4.1 HBV DNA 13 1.4.2 HBV pgRNA – HBV RNA .15 1.4.3 cccDNA 16 1.5 Các phương pháp định lượng HBV RNA cccDNA 21 1.5.1 Một số phương pháp định lượng HBV RNA máu ngoại vi bệnh nhân VGBMT 21 1.5.2 Một số phương pháp định lượng cccDNA tế bào gan 22 1.6 Vai trò sinh thiết gan hình ảnh mơ bệnh học viêm gan virus 30 1.7 Các nghiên cứu cccDNA HBV DNA, HBV RNA bệnh nhân nhiễm HBV mạn Thế giới Việt Nam 31 1.7.1 Các nghiên cứu Thế giới .31 1.7.2 Các nghiên cứu Việt Nam .35 Chương 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 37 2.1 Đối tượng nghiên cứu .37 2.1.1 Tiêu chuẩn lựa chọn 37 2.1.2 Tiêu chuẩn loại trừ 37 2.2 Phương pháp nghiên cứu 38 2.2.1 Thiết kế nghiên cứu 38 2.2.2 Thời gian địa điểm nghiên cứu 38 2.2.3 Cỡ mẫu phương pháp chọn mẫu 38 2.3 Các tiêu nội dung nghiên cứu .39 2.3.1 Các tiêu nghiên cứu .39 2.3.2 Các nội dung nghiên cứu 40 2.3.3 Phương pháp thu thập số liệu .41 2.4 Kỹ thuật phương tiện nghiên cứu 41 2.4.1 Quy trình thu thập bảo quản mẫu 41 2.4.2 Phương pháp thực tiêu xét nghiệm .42 2.4.3 Phương pháp thực tiêu xét nghiệm sinh học phân tử 44 2.4.3 Phương pháp phân tích xử lý số liệu 60 2.5 Vấn đề đạo đức nghiên cứu 61 Chương 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 63 3.1 Đặc điểm chung đối tượng nghiên cứu 63 3.1.1 Tuổi giới bệnh nhân nghiên cứu 63 3.1.2 Một số triệu chứng lâm sàng, cận lâm sàng hai nhóm bệnh nhân .64 3.2 Nồng độ cccDNA tế bào gan, tải lượng HBV DNA, nồng độ HBV RNA huyết tương bệnh nhân nghiên cứu 68 3.2.1 Nồng độ cccDNA tế bào gan nhóm bệnh nhân nghiên cứu .68 3.2.2 Nồng độ HBV RNA huyết tương hai nhóm bệnh nhân nghiên cứu 72 3.2.3 Tải lượng HBV DNA hai nhóm bệnh nhân nghiên cứu 76 3.3 Mối liên quan nồng độ cccDNA với HBV DNA HBV RNA hai nhóm bệnh nhân nghiên cứu .81 3.3.1 Mối liên quan nồng độ cccDNA với tải lượng HBV DNA nhóm bệnh nhân 81 3.3.2 Mối liên quan nồng độ cccDNA tế bào gan với HBV RNA huyết tương hai nhóm bệnh nhân 84 Chương 4: BÀN LUẬN 90 4.1 Đặc điểm chung bệnh nhân nghiên cứu 90 4.1.1 Đặc điểm tuổi giới tính .90 4.1.2 Một số biểu lâm sàng, cận lâm sàng hai nhóm bệnh nhân nghiên cứu .91 4.2 cccDNA tế bào gan, HBV RNA, HBV DNA huyết tương bệnh nhân nghiên cứu .96 4.2.1 Nồng độ cccDNA bệnh nhân nghiên cứu 96 4.2.2 Nồng độ HBV RNA bệnh nhân nghiên cứu 99 4.2.3 Tải lượng HBV DNA bệnh nhân nghiên cứu 104 4.3 Mối liên quan cccDNA với HBV DNA HBV RNA hai nhóm bệnh nhân nghiên cứu 108 4.3.1 Mối liên quan cccDNA tế bào với HBV DNA huyết tương 108 4.3.2 Mối liên quan cccDNA tế bào gan với HBV RNA huyết tương .110 4.3.3 Mối tương quan nồng độ HBV RNA với tải lượng HBV DNA huyết tương 113 KẾT LUẬN 119 HẠN CHẾ CỦA ĐỀ TÀI 121 KIẾN NGHỊ 122 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH NGHIÊN CỨU CỦA TÁC GIẢ ĐÃ CÔNG BỐ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT TT Phần viết tắt Phần viết đầy đủ ALT AFP Alanine aminotransferase AST Alpha-fetoprotein VGBMT Aspartate aminotransferase cccDNA Viêm gan virus B mạn tính Cs Covalently closed circular Deoxyribonucleic acid DNA Cộng Dsl DNA Deoxyribonucleic acid ddPCR double-stranded linear DNA: Sợi đôi DNA tuyến tính 10 EASL droplet digital Polymerase Chain Reaction European Asscociation for the Study of the Liver 11 FFPE Hiệp hội Gan mật Châu Âu 12 GAPDH Formalin-Fixed Paraffin-Embedded: parafin cố định 13 HAI formalin 14 HBV Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase 15 HBcAb Histology Activity Index: số hoạt động mô bệnh 16 HBeAb học Hepatitis B Virus: Virus viêm gan B 17 HBeAg Hepatitis B core antibody: kháng thể kháng kháng 18 HBsAb nguyên lõi virus viêm gan B Hepatitis B e antibody 19 HBsAg kháng thể kháng kháng nguyên e virus viêm gan 20 HBcrAg 21 HCC B Hepatitis B e antigen 22 IC 23 Kb kháng nguyên e virus viêm gan B Hepatitis B surface antibody: kháng thể kháng kháng nguyên bề mặt virus viêm gan B Hepatitis B surface antigen kháng nguyên bề mặt virus viêm gan B Hepatitis B core related Antigen Hepatocellular Carcinoma Ung thư biểu mô tế bào gan Internal control: kiểm soát nội Kilobase TT Phần viết tắt Phần viết đầy đủ 24 LHBs Large Hepatitis B Surface Protein 25 MHBs Protein lớn bề mặt virus viêm gan B 26 NA Middle Hepatitis B Surface Protein 27 NTCP Protein trung bình bề mặt virus viêm gan B 28 NK Nucleot(s)ide Analogue 29 NKT Na+/ taurocholate co-transporting polypeptide: 30 mRNA 31 RCA Polypeptide đồng vận chuyển taurocholate phụ thuộc 32 rcDNA 33 RNA Na + 34 RT Natural killer cells: tế bào diệt tự nhiên 35 SHBs Natural killer T cells: tế bào T diệt tự nhiên Messenger RNA: RNA thông tin 36 ssDNA Rolling Circle Amplification 37 PCR Relaxed circular DNA 38 qPCR Ribonucleic acid 39 qHBsAg Reverse Transcriptase: enzym mã ngược 40 Pg RNA Small Hepatitis B Surface Protein 41 POL 42 PSAD Protein nhỏ bề mặt virus viêm gan B single-stranded DNA: DNA chuỗi đơn 43 RACE Polymerase Chain Reaction 44 tDNA Quantitative PCR Quantitative Hepatitis B surface antigen Pregenomic Ribonucleic: RNA tiền gen Polymerase Plasmid Safe ATP-dependent DNAase DNAase phụ thuộc ATP an toàn Plasmid A rapid amplification of complimentary DNA (cDNA)-ends: Kỹ thuật khuếch đại nhanh phản ứng chuỗi polymerase thời gian thực (PCR) dựa DNA circle DNA tự Total Deoxyribonucleic acid: DNA toàn