Đang tải... (xem toàn văn)
Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần hóa học và một số tác dụng sinh học của cây Giảo cổ lam quả dẹt (Gynostemma compressum X.X. Chen D.R. Liang).Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần hóa học và một số tác dụng sinh học của cây Giảo cổ lam quả dẹt (Gynostemma compressum X.X. Chen D.R. Liang).Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần hóa học và một số tác dụng sinh học của cây Giảo cổ lam quả dẹt (Gynostemma compressum X.X. Chen D.R. Liang).Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần hóa học và một số tác dụng sinh học của cây Giảo cổ lam quả dẹt (Gynostemma compressum X.X. Chen D.R. Liang).Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần hóa học và một số tác dụng sinh học của cây Giảo cổ lam quả dẹt (Gynostemma compressum X.X. Chen D.R. Liang).Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần hóa học và một số tác dụng sinh học của cây Giảo cổ lam quả dẹt (Gynostemma compressum X.X. Chen D.R. Liang).Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần hóa học và một số tác dụng sinh học của cây Giảo cổ lam quả dẹt (Gynostemma compressum X.X. Chen D.R. Liang).Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần hóa học và một số tác dụng sinh học của cây Giảo cổ lam quả dẹt (Gynostemma compressum X.X. Chen D.R. Liang).Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần hóa học và một số tác dụng sinh học của cây Giảo cổ lam quả dẹt (Gynostemma compressum X.X. Chen D.R. Liang).Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần hóa học và một số tác dụng sinh học của cây Giảo cổ lam quả dẹt (Gynostemma compressum X.X. Chen D.R. Liang).Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần hóa học và một số tác dụng sinh học của cây Giảo cổ lam quả dẹt (Gynostemma compressum X.X. Chen D.R. Liang).Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần hóa học và một số tác dụng sinh học của cây Giảo cổ lam quả dẹt (Gynostemma compressum X.X. Chen D.R. Liang).Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần hóa học và một số tác dụng sinh học của cây Giảo cổ lam quả dẹt (Gynostemma compressum X.X. Chen D.R. Liang).Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần hóa học và một số tác dụng sinh học của cây Giảo cổ lam quả dẹt (Gynostemma compressum X.X. Chen D.R. Liang).Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần hóa học và một số tác dụng sinh học của cây Giảo cổ lam quả dẹt (Gynostemma compressum X.X. Chen D.R. Liang).Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần hóa học và một số tác dụng sinh học của cây Giảo cổ lam quả dẹt (Gynostemma compressum X.X. Chen D.R. Liang).Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần hóa học và một số tác dụng sinh học của cây Giảo cổ lam quả dẹt (Gynostemma compressum X.X. Chen D.R. Liang).Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần hóa học và một số tác dụng sinh học của cây Giảo cổ lam quả dẹt (Gynostemma compressum X.X. Chen D.R. Liang).Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần hóa học và một số tác dụng sinh học của cây Giảo cổ lam quả dẹt (Gynostemma compressum X.X. Chen D.R. Liang).Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần hóa học và một số tác dụng sinh học của cây Giảo cổ lam quả dẹt (Gynostemma compressum X.X. Chen D.R. Liang).Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần hóa học và một số tác dụng sinh học của cây Giảo cổ lam quả dẹt (Gynostemma compressum X.X. Chen D.R. Liang).Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần hóa học và một số tác dụng sinh học của cây Giảo cổ lam quả dẹt (Gynostemma compressum X.X. Chen D.R. Liang).Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần hóa học và một số tác dụng sinh học của cây Giảo cổ lam quả dẹt (Gynostemma compressum X.X. Chen D.R. Liang).Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần hóa học và một số tác dụng sinh học của cây Giảo cổ lam quả dẹt (Gynostemma compressum X.X. Chen D.R. Liang).Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần hóa học và một số tác dụng sinh học của cây Giảo cổ lam quả dẹt (Gynostemma compressum X.X. Chen D.R. Liang).Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần hóa học và một số tác dụng sinh học của cây Giảo cổ lam quả dẹt (Gynostemma compressum X.X. Chen D.R. Liang).Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần hóa học và một số tác dụng sinh học của cây Giảo cổ lam quả dẹt (Gynostemma compressum X.X. Chen D.R. Liang).Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần hóa học và một số tác dụng sinh học của cây Giảo cổ lam quả dẹt (Gynostemma compressum X.X. Chen D.R. Liang).Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần hóa học và một số tác dụng sinh học của cây Giảo cổ lam quả dẹt (Gynostemma compressum X.X. Chen D.R. Liang).Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần hóa học và một số tác dụng sinh học của cây Giảo cổ lam quả dẹt (Gynostemma compressum X.X. Chen D.R. Liang).Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần hóa học và một số tác dụng sinh học của cây Giảo cổ lam quả dẹt (Gynostemma compressum X.X. Chen D.R. Liang).Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần hóa học và một số tác dụng sinh học của cây Giảo cổ lam quả dẹt (Gynostemma compressum X.X. Chen D.R. Liang).Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần hóa học và một số tác dụng sinh học của cây Giảo cổ lam quả dẹt (Gynostemma compressum X.X. Chen D.R. Liang).Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần hóa học và một số tác dụng sinh học của cây Giảo cổ lam quả dẹt (Gynostemma compressum X.X. Chen D.R. Liang).Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần hóa học và một số tác dụng sinh học của cây Giảo cổ lam quả dẹt (Gynostemma compressum X.X. Chen D.R. Liang).
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ VIỆN DƯỢC LIỆU ĐINH THỊ THANH THỦY NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT, THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ MỘT SỐ TÁC DỤNG SINH HỌC CỦA CÂY GIẢO CỔ LAM QUẢ DẸT (Gynostemma compressum X.X Chen & D.R Liang) LUẬN ÁN TIẾN SĨ DƯỢC HỌC HÀ NỘI, 2023 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ VIỆN DƯỢC LIỆU ĐINH THỊ THANH THỦY NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT, THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ MỘT SỐ TÁC DỤNG SINH HỌC CỦA CÂY GIẢO CỔ LAM QUẢ DẸT (Gynostemma compressum X.X Chen & D.R Liang) LUẬN ÁN TIẾN SĨ DƯỢC HỌC CHUYÊN NGÀNH: DƯỢC LIỆU - DƯỢC HỌC CỔ TRUYỀN MÃ SỐ: 9720206 Người hướng dẫn khoa học: GS.TS Phạm Thanh Kỳ PGS.TS Phạm Thanh Huyền HÀ NỘI, 2023 LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan luận án cơng trình khoa học riêng hướng dẫn GS.TS Phạm Thanh Kỳ PGS.TS Phạm Thanh Huyền Kết trình bày luận án trung thực, khách quan chưa công bố cơng trình khác Tác giả luận án NCS Đinh Thị Thanh Thủy LỜI CẢM ƠN Trong trình học tập, nghiên cứu hồn thành luận án, nhận nhiều giúp đỡ quý báu Thầy Cô giáo, Nhà khoa học từ nhiều đơn vị, đồng nghiệp, gia đình bạn bè Đầu tiên, tơi xin bày tỏ lịng kính trọng biết ơn sâu sắc tới GS.TS Phạm Thanh Kỳ PGS.TS Phạm Thanh Huyền, người Thầy trực tiếp hướng dẫn, tận tình bảo động viên tơi suốt q trình học tập nghiên cứu khoa học Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành tới PGS.TS Đỗ Thị Hà, PGS.TS Phạm Thị Nguyệt Hằng, Thầy, Cô giáo, Nhà khoa học công tác Viện Dược liệu, ThS Nghiêm Đức Trọng, Trường Đại học Dược Hà Nội, PGS.TS Phạm Thị Vân Anh (Bộ môn Dược lý - Trường Đại học Y Hà Nội) giúp đỡ đóng góp ý kiến cho tơi suốt q trình thực nghiên cứu Nhân dịp này, chân thành cảm ơn Ban Giám đốc, anh chị em đồng nghiệp Bệnh viện Nhiệt đới Trung ương tạo điều kiện động viên tơi suốt q trình học tập, nghiên cứu hồn thành luận án Tơi xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến Ban Giám đốc, Phòng Khoa học Đào tạo, thư viện Viện Dược liệu tạo điều kiện thuận lợi cho suốt trình học thực luận án Lời sau cùng, tơi xin bày tỏ lịng biết ơn chân thành tới gia đình bạn bè ln động viên chia sẻ giúp đạt kết ngày hôm Tôi xin chân thành cảm ơn! NCS Đinh Thị Thanh Thủy MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG I: TỔNG QUAN 1.1 TỔNG QUAN VỀ CHI GYNOSTEMMA BLUME 1.1.1 Vị trí phân loại, đặc điểm thực vật phân bố chi Gynostemma Blume 1.1.2 Thành phần hóa học chi Gynostemma Blume 1.1.3 Tác dụng sinh học độc tính chi Gynostemma Blume 21 1.2 TỔNG QUAN VỀ LOÀI GIẢO CỔ LAM QUẢ DẸT .32 1.2.1 Đặc điểm thực vật Giảo cổ lam dẹt 32 1.2.2 Sinh thái phân bố Giảo cổ lam dẹt .33 1.2.3 Thành phần hóa học Giảo cổ lam dẹt 33 CHƯƠNG II: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 35 2.1 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 35 2.1.1 Mẫu nghiên cứu 35 2.1.2 Động vật thí nghiệm 35 2.1.3 Thuốc thử, hóa chất, dung mơi tế bào .35 2.1.4 Máy móc, thiết bị dụng cụ nghiên cứu 37 2.2 ĐỊA ĐIỂM NGHIÊN CỨU 39 2.2.1 Địa điểm nghiên cứu thực vật 39 2.2.2 Địa điểm nghiên cứu thành phần hóa học .39 2.2.3 Địa điểm nghiên cứu độc tính tác dụng sinh học .39 2.3 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 39 2.3.1 Phương pháp nghiên cứu thực vật 39 2.3.2 Phương pháp nghiên cứu thành phần hóa học .39 2.3.3 Phương pháp nghiên cứu độc tính cấp 42 2.3.4 Phương pháp nghiên cứu tác dụng sinh học 43 CHƯƠNG III: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 51 3.1 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VỀ THỰC VẬT 51 3.1.1 Đặc điểm hình thái thực vật lồi Giảo cổ lam dẹt (Gynostemma compressum X.X.Chen & D R Liang) .51 3.1.2 Kết giám định tên khoa học mẫu nghiên cứu 53 3.1.3 Kết nghiên cứu đặc điểm vi học mẫu nghiên cứu 54 3.2 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VỀ THÀNH PHẦN HÓA HỌC 59 3.2.1 Kết định tính nhóm chất hữu .59 3.2.2 Kết chiết xuất, phân lập xác định cấu trúc hợp chất .61 3.3 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VỀ ĐỘC TÍNH CẤP VÀ MỘT SỐ TÁC DỤNG SINH HỌC 105 3.3.1 Kết nghiên cứu độc tính cấp 105 3.3.2 Kết nghiên cứu số tác dụng sinh học Giảo cổ lam dẹt 109 BÀN LUẬN 138 4.1 Về thực vật 138 4.2 Về thành phần hóa học .140 4.2.1 Về kết định tính nhóm chất hữu 140 4.2.2 Về kết phân lập hợp chất .140 4.3 Về độc tính cấp 145 4.4 Về số tác dụng sinh học .146 4.4.1 Về tác dụng hoạt hóa MPK, CC, ức chế F S SREBP-1c tế bào 3T3-L1 Giảo cổ lam dẹt .147 4.4.2 Tác dụng hạ glucose máu mơ hình đái tháo đường typ thực nghiệm 151 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 153 KẾT LUẬN 153 KIẾN NGHỊ 155 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH ĐÃ CƠNG BỐ 156 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT Kí hiệu Viết đầy đủ ACC Acetyl-CoA carboxylase ADN Acid deoxyribonucleic ALT Alanine transaminase AMPK Adenosine monophosphate-activated protein kinase ARN Acid ribonucleic AST Aspartate transaminase BuOH n-Butanol DCM Dichloromethane DEPT Distortionless Enhancement by Polarization Transfer (Phổ DEPT) ĐTĐ Đái tháo đường EtOAc Ethyl acetate EtOH Ethanol FAS Fatty acid synthase (Enzym tổng hợp acid béo) GL Các hợp chất gypenosid L GCB Cao n-butanol GCH Cao n-hexan GCL Giảo cổ lam GCE Cao ethyl acetat GCT Cao ethanol 80% GCT1 Cao ethanol 80% để thử độc tính GLI Gypenosid LI GPE Cao chiết giàu saponin từ G pentaphyllum GPG G pentaphyllum giàu gypenosid UL4 GCW Cắn nước cao EtOH 80% Glc β-ᴅ-Glucopyranosyl HDL High density lipoprotein (Lipoprotein tỷ trọng cao) HFD High fat diet (Chế độ ăn giàu chất béo) HMBC Heteronuclear Multiple Bond Correlation (Phổ tương quan dị nhân đa liên kết) Kí hiệu H-NMR Viết đầy đủ Proton Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy (Phổ cộng hưởng từ hạt nhân proton) HR-ESI-MS High-resolution Electrospray Ionisation - Mass Spectrometry (Phổ khối ion hóa phun mù điện tử phân giải cao) HSQC Heteronuclear Single Quantum Coherence (Phổ tương tác dị nhân lượng tử đơn) IL Interleukin J Hằng số tương tác (đơn vị Hz) KLPT Khối lượng phân tử m/z Mass to charge ratio (Tỉ lệ khối lượng/điện tích) LD0 Lethal Dose 0% (Liều cao không gây chết động vật thử nghiệm) LD50 Median Lethal Dose (Liều gây chết 50%) LD100 Absolute Lethal Dose (Liều thấp gây chết 100% động vật thử nghiệm) LDL Low density lipoprotein (Lipoprotein tỷ trọng thấp) MAPK Mitogen-activated protein kinase (Protein kinase hoạt hóa phân bào) MCD Methionine- and choline-deficient (Thiếu methionin cholin) MeOH Methanol MDA Malondialdehyde MTT 3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-tetrazolium bromide NAFLD Nonalcoholic fatty liver disease (Bệnh gan nhiễm mỡ không rượu) NASH Nonalcoholic steatohepatitis (Viêm gan nhiễm mỡ không rượu) NFD Normal fat diet (Chế độ ăn bình thường) NF-κB Nuclear factor kappa B (Yếu tố nhân kappa B) PGC-1α PP Rγ coactivator-1α SIRT Sirtuin SOD Superoxide dismutase SREBP-1c Sterol Regulatory Element-Binding Protein-1c (Protein-1c liên kết yếu tố điều hịa sterol) STT Số thứ tự Kí hiệu Viết đầy đủ STZ Streptozocin Rg3 Ginsenosid Rg3 TC Total cholesterol (Cholesterol toàn phần) TG Triglyceride TLTK Tài liệu tham khảo TNF Tumor necrosis factor (Yếu tố hoại tử khối u) δ Độ dịch chuyển hóa học (đơn vị ppm) DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1: Danh sách loài thuộc chi Gynostemma Blume [15] Bảng 1.2: Danh sách loài Gynostemma Trung Quốc [16] Bảng 1.3: Danh sách loài Gynostemma Thái Lan Malaysia [14] Bảng 1.4: Danh sách loài Gynostemma Việt Nam [6] Bảng 1.5: Các flavonoid phân lập từ chi Gynostemma Blume 20 Bảng 2.1: Chế độ ăn NFD HFD tính 100 g thức ăn 48 Bảng 3.1: Kết định tính nhóm chất hữu dược liệu .59 Bảng 3.2: Kết định tính saponin flavonoid cao chiết từ GCL dẹt 60 Bảng 3.3: Dữ liệu phổ NMR hợp chất GC1 68 Bảng 3.4: Dữ liệu phổ NMR hợp chất GC2 69 Bảng 3.5: Dữ liệu phổ NMR hợp chất GC3 70 Bảng 3.6: Dữ liệu phổ NMR hợp chất GC4 73 Bảng 3.7: Dữ liệu phổ 1H-NMR (500 MHz, CD3OD) hợp chất GC5 - GC7 .80 Bảng 3.8: Dữ liệu phổ 13C-NMR (125 MHz, CD3OD) hợp chất GC5 - GC7 81 Bảng 3.9: Dữ liệu phổ NMR hợp chất GC8 82 Bảng 3.10: Dữ liệu phổ NMR hợp chất GC9 84 Bảng 3.11: Dữ liệu phổ 1H-NMR (500 MHz, CD3OD) hợp chất GC10 - GC13.92 Bảng 3.12: Dữ liệu phổ 13C-NMR (125 MHz, CD3OD) hợp chất GC10 - GC13 94 Bảng 3.13: Dữ liệu phổ NMR hợp chất GC14 .95 Bảng 3.14: Dữ liệu phổ NMR hợp chất GC15 .98 Bảng 3.15: Dữ liệu phổ NMR hợp chất GC16 .100 Bảng 3.16: Dữ liệu phổ NMR hợp chất GC17 .103 Bảng 3.17: Kết thử độc tính cấp cao chiết nước Giảo cổ lam dẹt .106 Bảng 3.18: Kết thử độc tính cấp cao chiết cồn EtOH 80% GCT1 108 Bảng 3.19: Ảnh hưởng mẫu thử lên khả sống sót tế bào HepG2 .109 Bảng 3.20: Ảnh hưởng mẫu thử kết hợp với acid oleic lên khả sống sót tế bào HepG2 110 Bảng 3.21: Ảnh hưởng mẫu thử kết hợp với acid oleic lên tế bào HepG2 (%) 110