MỞ ĐẦU Lý do chọn đề tài Công tác bảo quản nông sản, thực phẩm luôn là mối quan tâm hàng đầu của các nước trên thế giới nói chung cũng như ở Việt Nam nói riêng, mà trọng tâm là bảo quản nông sản và thực phẩm tránh khỏi sự xâm nhiễm của các vi sinh vật (VSV) gây bệnh cho người, động vật và các VSV gây ảnh hưởng đến giá trị dinh dưỡng, giá trị thẩm mỹ của nông sản, thực phẩm. Hiện nay, thực phẩm tiêu thụ trên thị trường đang được bảo quản bằng nhiều phương pháp khác nhau như: phương pháp vật lý, phương pháp hoá học, trong đó việc bảo quản bằng các chất hóa học được sử dụng khá phổ biến. Tuy nhiên do thiếu hiểu biết, nhiều nơi đã dùng cả các hóa chất không được phép sử dụng hoặc dùng quá liều lượng quy định đã gây nguy hiểm cho người tiêu dùng (Kỹ thuật và công nghệ bảo quản - chế biến – tiêu thụ - Số 3/III/2009). Một số chất bảo quản thường được sử dụng trong bảo quản các loại thực phẩm chế biến như axit benzoic, sodium benzoat, sodium propionate, potassium sorbate, methyl paraben, vv Các chất này có thể ức chế hoạt động hoặc tiêu diệt vi khuẩn gây hư hỏng thực phẩm mà không làm ảnh hưởng đến trạng thái bên ngoài cũng như mùi vị, chất lượng của thực phẩm. Nhưng trên thực tế nhiều loại thực phẩm trên thị trường phần lớn sử dụng những loại chất này với hàm lượng vượt quá mức quy định cho phép đã gây ảnh hưởng đến sức khỏe của người sử dụng (Nguyễn Hương- Tạp chí Công nghiệp hoá chất số 6/2003). Các phương pháp bảo quản này còn rất nhiều hạn chế, đặc biệt bảo quản bằng phương pháp hoá học có thể làm ảnh hưởng lâu dài tới sức khoẻ con người và môi trường. Do đó, việc nghiên cứu, tìm ra và sử dụng các chất có nguồn gốc sinh học để bảo quản nông sản và thực phẩm đã thu hút được sự chú ý của nhiều nhà khoa học trên thế giới, bởi sự an toàn của nó đối với sức khỏe con người và tính thân thiện với môi trường sống. Đó là những chất đã được tổ chức 1 lương thực thế giới (FAO) và tổ chức y tế thế giới (WHO) kiểm định là an toàn, chúng có hoạt tính ức chế sự sinh trưởng của VSV hoặc bào tử, đôi khi tiêu huỷ cả VSV gây bệnh trên nông sản và thực phẩm cũng như các VSV gây ảnh hưởng đến giá trị dinh dưỡng, giá trị thẩm mỹ của nông sản, thực phẩm. Trong thời gian gần đây, các nhà khoa học trên thế giới đã nghiên cứu và bước đầu tìm ra một chất bảo quản mới có ứng dụng và đạt hiệu quả cao trong công tác bảo quản nông sản và thực phẩm, đó là axít phenyllactic (PLA). PLA là một hợp chất kháng VSV, nó được chứng minh là có khả năng ức chế sự sinh trưởng và phát triển của một số loài vi khuẩn Gram âm, Gram dương trong đó có một số loài gây bệnh đường ruột cùng nhiều loài nấm men, nấm mốc gây hại nông sản, thực phẩm [12] Việc ứng dụng PLA trong bảo quản được xem là hướng ứng dụng mới trong việc sử dụng hợp chất tự nhiên để kiểm soát, ngăn ngừa sự xâm nhiễm của vi sinh vật gây hại nhằm kéo dài thời gian bảo quản nông sản và thực phẩm. Đồng thời lại an toàn cho sức khoẻ người sử dụng, không gây ảnh hưởng tới môi trường sống. Ở Việt Nam, việc nghiên cứu tuyển chọn và phân lập được các chủng vi khuẩn lactic có khả năng sinh PLA đạt hiệu suất cao là mục tiêu và nội dung nghiên cứu chính của đề tài cấp nhà nước “Nghiên cứu công nghệ sản xuất chế phẩm Phenyllactic acid từ vi khuẩn lactic phục vụ bảo quản nông sản và thực phẩm ” thuộc “Đề án phát triển và ứng dụng công nghệ sinh học trong lĩnh vực công nghiệp chế biến đến năm 2020”. Chúng tôi đã tiến hành lựa chọn đề tài “Nghiên cứu chọn chủng vi khuẩn lactic để sản xuất axít phenyllactic ứng dụng trong bảo quản nông sản và thực phẩm”, với mong muốn tìm ra các chất bảo quản nông sản và thực phẩm có nguồn gốc sinh học, an toàn để thay thế các chất bảo quản hóa học đang sử dụng hiện nay. 2 Mục tiêu của đề tài: Nghiên cứu tuyển chọn chủng vi khuẩn thuộc nhóm vi khuẩn lactic để sản xuất PLA có khả năng ức chế vi sinh vật gây hại, phục vụ công tác bảo quản nông sản và thực phẩm. Nội dung nghiên cứu chính của đề tài: Nội dung 1: Phân lập, tuyển chọn chủng vi khuẩn lactic sinh PLA hiệu suất cao từ các nguồn thực phẩm của Việt Nam. Nội dung 2: Nghiên cứu đặc tính sinh học cơ bản của chủng vi khuẩn lactic tuyển chọn được. Nội dung 3: Nghiên cứu, lựa chọn các điều kiện lên men tối ưu sinh tổng hợp PLA quy mô phòng thí nghiệm. Nội dung 4: Bước đầu nghiên cứu khả năng ức chế vi khuẩn, nấm gây hại nông sản và thực phẩm của PLA. 3 NỘI DUNG CHƯƠNG I. TỔNG QUAN 1.1.Thực trạng về ngộ độc thực phẩm và những tổn thất do ngộ độc thực phẩm trên thế giới và ở Việt Nam 1.1.1. Trên thế giới Ngày nay, với sự phát triển mạnh mẽ của nền kinh tế thế giới, dân số ngày càng đông, lối sống của con người thay đổi, nhu cầu cho cuộc sống tăng lên, các hoạt động giao lưu, du lịch, sự phân phối thực phẩm trên phạm vi rộng, các mầm bệnh do VSV ngày càng nhiều,… đó là những nguyên nhân làm cho ngộ độc thực phẩm (NĐTP) dễ xảy ra và ngày càng trở lên nghiêm trọng hơn trên toàn thế giới. Vi khuẩn gây bệnh là nguyên nhân dẫn đầu gây ra NĐTP cho con người. NĐTP có thể đe dọa đến tính mạng con người hoặc làm suy yếu sức khỏe kéo dài, gây bệnh mãn tính, không chữa trị có thể dẫn đến tử vong, gây tổn thất lớn về kinh tế cho các nước. Theo uỷ ban Khoa học và Công nghệ Hoa Kỳ, ước tính rằng có tới 76 triệu trường hợp bị bệnh do NĐTP xảy ra hàng năm với 325.000 người phải nhập viện và 5000 người tử vong. Thực phẩm chính là thịt lợn, thịt gia cầm, trứng, hải sản và các sản phẩm sữa bị nhiễm khuẩn đã tiêu tốn từ 6,5 - 34,9 tỷ đô la [38] Nguyên nhân chủ yếu là do VSV gây ra, ở Mỹ có 3 tác nhân gây bệnh chủ yếu là Salmonella, Listeria và Toxoplasma gây tử vong, khoảng 1500 trường hợp mỗi năm. Các loại vi khuẩn gây bệnh trên rau và quả gồm: Salmonella, Shigella, Escherichia coli, Campylobacter sp [40] Năm 1999 tại Australia, trên 500 người ngộc độc do uống phải nước cam nhiễm vi khuẩn Salmonela. Năm 2003 ở Hoa Kỳ, hành lá nhiễm khuẩn bị quy là thủ phạm chính gây ra dịch viêm gan làm 400 người mắc bệnh và 3 ca 4 tử vong. Năm 2004, Hoa Kỳ và Canada, 3 đợt dịch nhiểm khuẩn Salmonela liên quan tới cà chua Roma làm 561 người bị ngộ độc [40] Trong những năm gần đây, tình trạng NĐTP có liên quan đến Listeria monocytogenes đã bùng phát tại nhiều nước trên thế giới. Theo thống kê của Mỹ, hàng năm tại nước này số bệnh nhân nhiễm bệnh do vi khuẩn Listeria khoảng 2500 người với gần 500 người chết, còn tại Anh từ 2001 - 2005 đã có 1993 người mắc phải vi khuẩn này. Với đặc điểm dịch tễ học phức tạp, vi khuẩn Listeria đã được Tổ chức y tế thế giới xếp vào nhóm tác nhân sinh học có nguy cơ cao trong lĩnh vực an toàn vệ sinh thực phẩm. Listeria phân tán rộng rãi trong môi trường đất, nước,… nên rất dễ lây nhiễm qua thực phẩm, nguy cơ của loại vi khuẩn này không chỉ dừng lại ở việc gây ra ngộ độc thực phẩm mà chúng còn gây ra các bệnh lý nguy hiểm như: viêm não, nhiễm trong máu Do đó, việc nghiên cứu để đưa vào sản suất và ứng dụng các hợp chất có nguồn gốc sinh học có khả năng ức chế hoặc tiêu diệt Listeria là một yêu cầu cấp thiết [34]. Trong những ngày cuối tháng 5 và đầu tháng 6, năm 20 vừa qua, ở một số nước Châu Âu đã xảy ra tình trạng NĐTP do sử dụng thức ăn bị nghi ngờ là nhiễm vi khuẩn E.coli, đã cướp đi sinh mạng của nhiều người và gây tổn thất lớn cho nền kinh tế của các quốc gia đó. Theo báo cáo, đợt bùng phát dịch E.coli tại châu Âu đã gây ra 24 trường hợp tử vong và khiến 2.400 người bị lây nhiễm cho đến nay. Theo WHO, có khoảng 3.255 người nhiễm khuẩn E.coli tại 14 quốc gia ở châu Âu, Mỹ và tại Canada. Hầu hết trường hợp nhiễm khuẩn E.coli là ở những người đến từ Đức hoặc từng du lịch đến nước này, nơi được coi là trung tâm đầu mối phát sinh vi khuẩn E.coli [35] 1.1.2. Ở Việt Nam 5 Ở Việt Nam, cùng với mức sống của người dân từng bước được nâng cao, vệ sinh an toàn thực phẩm đang trở thành vấn đề ngày càng bức xúc của toàn xã hội, đặc biệt khi Việt Nam gia nhập WTO thì đây là một thách thức to lớn. Ô nhiễm thực phẩm gây tổn thất về kinh tế, ảnh hưởng đến sức khoẻ người tiêu dùng, an ninh xã hội và hội nhập kinh tế quốc tế của Việt Nam. Từ năm 1997 đến năm 2000, thống kê cho thấy có 1364 vụ NĐTP với 24.514 người mắc và 207 người chết. Chỉ tính riêng 5 bệnh (tả, thương hàn, lỵ trực trùng, lỵ amibe và tiêu chảy) đã có 3.540.719 người mắc và 205 người chết, những tổn thất về NĐTP mỗi năm ước tính khoảng 500 tỷ đồng [4]. NĐTP xảy ra trên cả nước, với số lượng người mắc lên đến hàng trăm, thậm chí hàng nghìn người. Theo tổng kết của Cục an toàn vệ sinh thực phẩm, từ năm 1999 đến năm 2004, mỗi năm nước ta có từ 145 đến 327 vụ NĐTP với số lượng người bị ngộ độc từ 3584 đến 7576 người và từ 37 đến 71 người tử vong. Nguyên nhân do vi sinh vật (32,8-55,8%) [45]. Bảng 1. Tình hình ngộ độc thực phẩm ở nước ta từ 1999 đến 2005 Năm Số vụ ngộ độc Số nạn nhân Số người tử vong Số vụ ngộ độc hàng loạt 1999 327 7.576 71 - 2000 213 4.233 59 - 2001 245 3.901 63 30 2002 218 4.984 71 41 2003 238 6.428 37 42 2004 145 3.584 41 27 2005 144 4.304 53 32 (Cục An Toàn Vệ Sinh Thực Phẩm, Bộ Y Tế), (-): không thống kê được Từ đầu năm 2008 tính đến tháng 7 năm 2008, ở nước ta đã có 106 vụ NĐTP, gần 5000 người mắc và 43 người đã bị tử vong. Trong năm 2009, theo thống kê của Cục vệ sinh an toàn thực phẩm, số vụ ngộ độc có giảm nhưng số người mắc và tử vong lại tăng lên đến mức lo ngại. Trong tổng số 7.828 người mắc có đến 61 vụ tử vong [42] 6 Cùng với đó, từ ngày 21/3/2009 đến ngày 20/4/2009, nguyên Bộ trưởng Bộ y tế Nguyễn Quốc Triệu cho biết cả nước xảy ra 4 vụ ngộ độc thực phẩm tại 4 tỉnh với 936 người mắc, số người phải nhập viện là 859 người và số người tử vong là 7 người. Tại Hà Giang xảy ra 5 vụ, Đồng Nai 1 vụ, Nghệ An 1 vụ, thành phố Hồ Chí Minh 1 vụ [39] Tình trạng NĐTP ngày càng gia tăng, thông tin từ Bộ Y tế cho biết trong tháng 3/2010 đã xảy ra 9 vụ ngộ độc làm 161 người mắc, 149 người phải nhập viện. Như vậy, từ ngày 17/12/2009 đến 17/3/2010 toàn quốc đã xảy ra 23 vụ NĐTP với 738 người mắc, 686 người nhập viện, trong đó có 12 trường hợp tử vong[37]. Theo ông Nguyễn Quốc Triệu, nguyên Bộ Trưởng Bộ Y tế cho biết, trong 3 tháng đầu năm 20, toàn quốc xảy ra 16 vụ ngộ độc thực phẩm với 442 người mắc và 5 người tử vong, trong đó có 1 vụ ngộ độc tập thể 30 người [38]. Vì vậy, việc nghiên cứu, tìm ra những công nghệ bảo quản mới để ngăn ngừa sự hư hỏng và nhiễm độc thực phẩm là vấn đề cấp bách. Vấn đề nghiên cứu công nghệ sản xuất và sử dụng PLA, hoặc kết hợp sử dụng PLA với xử lý hoá lý có thể là biện pháp hiệu quả để đảm bảo hàm lượng dinh dưỡng của nguyên liệu thô và thực phẩm, kéo dài thời gian bảo quản, kìm hãm vi khuẩn làm hỏng, gây bệnh cho người tiêu dùng [16]. 1.2. Tình hình nghiên cứu, sản xuất và ứng dụng axít phenyllactic từ vi sinh vật trên thế giới 1.2.1. Axít phenyllactic và hoạt tính kháng vi sinh vật PLA là một loại axít thơm, thuộc nhóm chất bảo quản có nguồn gốc sinh học được sinh tổng hợp bởi một số chủng vi sinh vật. PLA có công thức phân tử là C 9 H 10 O 3 , trong phân tử có chứa vòng thơm (thể hiện ở hình 1 dưới đây), nó là chất dễ dàng hoà tan trong nước tạo thành dung dịch, nhiệt độ tan 7 chảy là 121-125 0 C, khối lượng phân tử 166,2 đvc, có thể bảo quản ở nhiệt độ 2-8 0 C [31] Hình 1. Công thức cấu tạo của PLA PLA được chứng minh là có khả năng ức chế sinh trưởng và sự phát triển của một số loài vi khuẩn gram âm, gram dương, cùng nhiều loài nấm men, nấm mốc gây hại thực phẩm [14],[21]. Paola Lavermicocca cùng cộng sự (2002) đã nghiên cứu và chỉ ra rằng PLA được sinh ra từ chủng Lactobacillus plantarum có khả năng ức chế khả năng sinh trưởng và phát triển của 23 chủng nấm mốc thuộc 14 loài của 3 chi Aspergillus, Penicillium, và Fusarium, đặc biệt có những loài sinh độc tố như Aspergillus ochraceus, Aspergillus flavus, Penicillium roquefoti, Penicillium verrucosum và Penicillium citrium phân lập từ các sản phẩm như bánh, bột và ngũ cốc. Với liều lượng thấp hơn 7,5 mg/ml PLA có khả năng ức chế 90% sự phát triển của các chủng này[20]. Dieuleveux và cộng sự (1998) đã chứng minh được rằng PLA ở liều lượng 13mg/ml có khả năng ức chế Listeria monocytogenes và ở nồng độ 20 mg/ml ức chế một số vi khuẩn gây bệnh đường ruột ở người là Staphylococcus aureus, Escherichia coli, và Aeromonas hydrophila [12]. PLA có tác dụng gây ra những biến đổi trong cấu trúc và hoạt động của vi khuẩn Listeria monocytogenes, cơ chế diệt khuẩn này được lý giải như sau: khi có mặt PLA, vi khuẩn tập hợp thành các khối và các polysaccarit được tách ra, thành tế bào mất đi tính chất mềm dẻo, tính linh hoạt, tính bán thấm, 8 làm cho tế bào trương nước, căng ra, cuối cùng các tế bào vi khuẩn bị vỡ và tan rã [13]. Cũng trong nghiên cứu này đã chỉ ra rằng, ở nồng độ 7mg/ml, PLA có thể tiêu diệt được Listeria monocytogenes trên môi trường dịch chiết đậu tương và dịch chiết nấm men (TSB – YE). Mật độ Listeria monocytogenes đã giảm 100 lần so với ban đầu sau 4 ngày nuôi cấy ở 25 0 C trên môi trường TSB – YE có PLA, mật độ của vi khuẩn này cũng giảm 1000 lần khi có mặt PLA trong giai đoạn vi khuẩn đang tăng trưởng. PLA có tác dụng kìm khuẩn trong sữa tiệt trùng, lượng vi khuẩn đã giảm 4,5 lần so với lượng vi khuẩn ban đầu kiểm tra trong sữa [13]. 1.2.2. Tính an toàn của Axít phenyllactic Bên cạnh việc ứng dụng PLA như là chất kháng vi sinh vật trong thực phẩm, gần đây PLA còn được sử dụng trong một số dược phẩm như thuốc chữa bệnh Trung Quốc có tên là “Danshensu”[30] hay sản phẩm kem chống nhăn da [26]. Hơn nữa, PLA còn được chứng minh là có ảnh hưởng có lợi đến hệ thống miễn dịch và khả năng đẻ trứng của gà khi nó được bổ sung vào thức ăn hàng ngày. Tỷ lệ đẻ trứng của gà tăng lên, độ cứng của vỏ trứng cũng tăng hơn khi bổ sung 0,3% PLA vào khẩu phần ăn hàng ngày cho gà [29]. Một số khảo sát nghiên cứu cho thấy PLA hoàn toàn không gây độc với con người và động vật [24]. PLA có mặt trong một số loại mật ong tự nhiên với hàm lượng tương đối cao [32], an toàn với môi trường. Do đó, PLA hoàn toàn được phép sử dụng trong công tác bảo quản thực phẩm và nông sản. 1.2.3. Công nghệ sản xuất PLA Quá trình sản xuất PLA được biết đến thông qua hai con đường chính là hoá học và sinh học. 1.2.3.1. Sản xuất bằng phương pháp hoá học 9 PLA được tổng hợp bằng con đường hoá học thông qua quá trình khử của kẽm và axít hydrochloric và azlactone [10] hoặc quá trình hydrogen hoá dưới sự xúc tác của Raney-N hoặc hợp kim của Pd-C [23]. Tuy nhiên, việc sản xuất PLA theo phương pháp này còn nhiều hạn chế như điều kiện tiến hành phản ứng phải tuân thủ một cách nghiêm ngặt và gây ảnh hưởng tới môi trường. 1.2.3.2. Sản xuất bằng phương pháp lên men vi sinh vật Ngược lại với phương pháp hoá học thì quá trình sinh tổng hợp PLA bằng con đường sinh học tỏ ra có nhiều ưu điểm, bởi nó là phương pháp thân thiện với môi trường và sản phẩm tạo ra lại an toàn với người sử dụng. Do vậy chúng dễ dàng được người tiêu dùng chấp nhận [9]. Ở quá trình này, PLA được sản sinh ra bởi một số loài vi sinh vật thông qua quá trình lên men trên. Nhiều nghiên cứu đã chỉ ra rằng PLA là sản phẩm cuối cùng của quá trình biến đổi phenlalanine, trong đó phenylalanine chuyển hóa thành axít phenylpyruvic (PPA), rồi từ đó PLA được tạo ra nhờ sự hoạt hóa của enzym D-phenyllactic axít dehydrogenase [27]. Do vậy, sản lượng PLA được tạo ra phụ thuộc rất nhiều vào thành phần và điều kiện môi trường nuôi cấy của chủng vi sinh vật sinh PLA. Cơ chế sinh tổng hợp PLA được minh họa ở sơ đồ hình 2 dưới đây : 10 [...]... loại vi khuẩn bằng kĩ thuật PCR[6],[15] ( Nội dung này do nhóm nghiên cứu đề tài Nghiên cứu công nghệ sản xuất chế phẩm Phenyllactic acid từ vi khuẩn lactic phục vụ bảo quản nông sản và thực phẩm ” Vi n cơ điện nông nghiệp và công nghệ sau thu hoạch phối hợp với vi n Công nghệ sinh học thực hiện) Mục đích: Xác định trình tự nu thuộc gen 16S riboxom của chủng vi khuẩn để định loại chính xác chủng đã chọn. .. cứu, sản xuất và ứng dụng axít phenyllactic để bảo quản nông sản ở Vi t Nam Năm 2008, Bộ môn nghiên cứu công nghệ sinh học sau thu hoạch, Vi n Cơ điện nông nghiệp & Công nghệ sau thu hoạch, Bộ Nông nghiệp và phát triển nông thôn đã bước đầu phân lập, tuyển chọn một số chủng vi khuẩn lactic có khả năng sinh PLA từ một số mẫu nước dưa, nước cà muối chua và bột bánh mỳ Kết quả đã tuyển chọn được 10 chủng. .. kiện nghiên cứu sâu về các yếu tố khác của công nghệ lên men trong sản xuất PLA Vì những lý do trên, nên sản lượng PLA của các chủng phân lập trên còn rất thấp (đạt khoảng 0,46g PLA thô/l), hàm lượng của PLA trong dịch lên men rất thấp PLA đã và đang được các nhà khoa học trên thế giới nghiên cứu và ứng dụng bảo quản nhiều loại thực phẩm để ngăn ngừa các vi sinh vật gây ngộ độc thực phẩm ở người Ở Vi t... 121 0C trong 20 phút Để nguội sau đó cấy chủng vi khuẩn cần khảo sát vào ống nghiệm và nuôi ở 30oC trong 48 giờ Sau 48 giờ kiểm tra kết quả, nếu ống nghiệm Durham nổi lên trên bề mặt môi trường thì chứng tỏ vi khuẩn đã sinh khí CO 2 Nếu ống Durham chìm trong môi trường chứng tỏ vi khuẩn không sinh khí 2.2.1.5 Nghiên cứu ảnh hưởng của thành phần môi trường đến khả năng sinh axít phenyllactic của chủng. .. người Ở Vi t Nam, sản phẩm này hoàn toàn mới chưa có trên thị trường, vi c nhập khẩu sản phẩm này đòi hỏi chi phí rất cao, hơn 40000 USD/kg PLA tinh khiết [36] Do đó, vi c chủ động sản xuất PLA trong nước là rất cần thiết 1.4 Vi sinh vật sinh tổng hợp axít phenyllactic 1.4.1 Phân loại vi khuẩn lactic Các chủng thuộc loài vi khuẩn lactic đều là các loài ưu nhiệt, chúng hô hấp yếm khí hoặc vi hiếu khí, phần... nguội để làm môi trường thạch ứng - Phương pháp tiến hành thí nghiệm: Chủng vi khuẩn nghiên cứu được cấy thẳng theo một đường trong môi trường MT1 thạch ứng, sau khi cấy xong đem đi nuôi trong tủ ấm ở 30 oC trong 48 giờ Sau 48h kiểm tra kết quả, nếu vi khuẩn chỉ mọc theo đường cấy chứng tỏ vi khuẩn không có khả năng di động Nếu vi khuẩn mọc lan ra xung quanh đường cấy chứng tỏ vi khuẩn có khả năng di... toán học thống kê, EXCEL 2007 xử lý kết quả và vẽ đồ thị cho các kết quả nghiên cứu trong đề tài 35 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 3.1 Nghiên cứu, phân lập, tuyển chọn chủng vi sinh vật để sản xuấn axít phenyllactic hiệu suất cao từ các nguồn thực phẩm ở Vi t Nam 3.1.1 Phân lập một số chủng vi khuẩn Lactobacillus sp từ nguồn nước dưa và nước cà muối chua Từ 80 mẫu nước dưa, nước cà muối chua (đã lên men... chủng vi khuẩn lactic có khả 12 năng sinh PLA Thời gian lên men tối thích cho sự tạo PLA cao là 90 giờ, ở 320C bằng phương pháp lên men tĩnh Nhưng do điều kiện còn nhiều hạn chế, hiệu suất sinh PLA của chủng vi khuẩn lactic tuyển chọn được chưa cao, công nghệ lên men và thu hồi sản phẩm chưa được nghiên cứu hoàn thiện, Vì vậy, nhóm nghiên cứu mới dừng ở nghiên cứu công nghệ lên men yếm khí chủng Lactobacillus... nhất đối với vi khuẩn vẫn là monosaccharide và disaccharide Nguồn thức ăn này được sử dụng để cung cấp năng lượng, nguyên liệu để xây dựng cấu trúc tế bào và để sinh tổng hợp các axít hữu cơ [7] Vì vậy, những hợp chất carbon có ý nghĩa hàng đầu trong sinh trưởng của vi sinh vật nói chung và của vi khuẩn Lactobacillus plantarum nói riêng b Nhu cầu dinh dưỡng về nguồn nitrogen Phần lớn vi khuẩn lactic đều... PPA và khử nó để chuyển hoá thành PLA PLA và đồng đẳng của nó như: axít p- aminophenyllactic, axít pnitrophenyllactic và axít p- hydroxyphenyllactic có thể được tạo ra nhờ quá trình biến đổi của cơ chất Để nâng cao sản lượng PLA, nhóm tác giả đã sản xuất enzyme D-PLDH tái tổ hợp từ chủng E coli và sử dụng enzyme này cho chuyển hoá PPA và cũng thu được kết quả rất khả quan [27] 1.3 Thực trạng nghiên