Nghiên cứu dịch tễ học một số loài ấu trùng sán lá truyền lây qua cá chép (Cyprinus carpio) và biện pháp phòng, trị

137 526 1
Nghiên cứu dịch tễ học một số loài ấu trùng sán lá truyền lây qua cá chép (Cyprinus carpio) và biện pháp phòng, trị

Đang tải... (xem toàn văn)

Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống

Thông tin tài liệu

Nghiên cứu dịch tễ học một số loài ấu trùng sán lá truyền lây qua cá chép (Cyprinus carpio) và biện pháp phòng, trị

BăGIỄOăDCăVĨăĐĨOăTO TRNGăĐIăHCăNỌNGăNGHIPăH̀ăṆI KIMăVĔNăVN NGHIÊN CU DCH T HC MT S LOÀI U TRÙNG SÁN TRUYN LÂY QUA CHÉP (Cyprinus carpio) BIN PHÁP PHÒNG, TR CHUYÊN NGÀNH: KÝ SINH TRÙNG VI SINH VT HC THÚ Y MẩăS: 62 64 01 04 NGIăHNGăDNăKHOA HC: PGS.ăTS.ăNGUYNăVĔNăTH PGS.ăTS.ăNGUYNăTHăLAN HĨăNI,ă2013 i LIăCAMăĐOAN TôiăxinăcamăđoanărằngănhữngăsăliuătrongăbáoăcáoănƠyălƠ hoàn toàn trungăthựcăvƠăchínhăxác,ălƠăktăquăcaăquáătrìnhăthựcăhinăLunăánăTinăsƿ, khôngăsaoăchépăcaăbtăkỳătácăgiănƠoăkhác. TôiăxinăcamăđoanămiătƠiăliuăthamăkhoăđưătríchădnăđuăđcănêuătên trongăphnătƠiăliuăthamăkho. ảà Nội, ngày 2 tháng 12 năm 2013 Nghiên cứu sinh KimăVĕnăVn ii LICMN Để đạt đ- ợc kết quả nh- ngày hôm nay Nghiên cứu sinh nhận đ- ợc rất nhiều sự giúp đỡ quý báu, tận tình từ tập thể thầy, cô h- ớng dẫn. Nhân đây xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến PGS. TS. Nguyễn Văn Thọ, PGS. TS. Nguyễn Thị Lan (Khoa Thú Y, Tr- ờng ĐHNN Hà Nội), GS.TS. Kurt Buchmann, GS.TS. Anders Dalgaard (ĐH Copenhagen, Đan Mạch) PGS.TS. Lê Thanh Hoà (Viện CNSH); Không thể có kết quả này nếu không có sự giúp đỡ, tạo điều kiện từ các cán bộ trong các Bộ môn: Nuôi trồng Thủy sản; Môi tr- ờng Bệnh Thủy sản; Ký sinh trùng Thú Y (ĐHNN Hà Nội) anh chị em Phòng Miễn Dịch (Viện CNSH). Nhân đây xin cảm ơn sự giúp đỡ chân thành từ các thầy, cô, anh chị em đồng nghiệp; Mọi nghiên cứu dù thành công hay ch- a thành công không thể không nhắc đến kinh phí, trong nghiên cứu này ngoài sự nỗ lực từ gia đình Nghiên cứu sinh còn nhận đ- ợc sự giúp đỡ kinh phí từ Dự án Ký sinh trùng truyền lây FIBOZOPA (Viện Nghiên cứu Nuôi trồng Thủy sản 1), Trung tâm Phát triển liên ngành Việt-Bỉ (Tr- ờng ĐHNN Hà Nội). Nhân đây NCS xin gửi lời cảm ơn đến các nhà tài trợ; Trong quá trình thực hiện Luận án Nghiên cứu sinh còn nhận đ- ợc nhiều sự giúp đỡ từ các đối tác cùng thực hiện Dự án FIBOZOPA nh- Trung tâm Quan trắc, cảnh báo Môi tr- ờng Dịch bệnh (Viện NCNTTTS1), Bộ môn Ký sinh trùng (Viện Thú Y-Quốc gia), Bộ môn KST (Viện KST, sốt rét TW), Bộ môn KST (Viện Sinh thái Tài nguyên Sinh vật), Bộ môn KST (Tr- ờng Đại học Y Mahidol-Thái Lan). Nhân đây tôi xin gửi lời cảm ơn tới toàn thể các anh chị em trong Dự án đã chia sẻ, cung cấp nguồn mẫu cũng nh- thông tin khoa học. Cây có cội, n- ớc có nguồn, không thể không nhắc tới sự động viên, sẻ chia tinh thần từ bố, mẹ, anh chị em hai bên gia đình cùng vợ 2 con thân yêu đã động viên, khích lệ kịp thời để hoàn thành tốt nghiên cứu này. Hà Nội, ngày 2 tháng 12 năm 2013 Nghiên cứu sinh Kim Văn Vạn iii MCăLC Trang Liăcamăđoan i Li cmăn ii Mc lc iii Danh mc các chữ vit tắt vi Danh mc các bng vii Danh mc các hình ix M ĐU 1 Tính cp thit caăđ tài nghiên cu 1 Mc tiêu nghiên cu 3 ụănghƿaăkhoaăhc thực tin caăđ tài 4 Nhữngăđóngăgópămi ca Lun án 4 Chngă1.ăTNG QUAN TÀI LIU 5 1.1. Tng quan v vùng nghiên cu 5 1.2. Khái nim v dch t hcăvƠăphngăphápănghiênăcu dch t hc 6 1.3. Tng quan v điătng nghiên cu 7 1.3.1. Hình thái, phân loiăvƠăđặcăđim sinh hc chép 7 1.3.2. Cácăgiaiăđon phát trin ca chép 10 1.3.3. H thngăng,ănuôiăcáăchép 10 1.4. Tng quan v ký sinh trùng ký sinh trên chép 12 1.5. Tng quan v các loài sán truyn lây qua 14 1.6. Dch t hc các loài u trùng sán truyn lây qua 16 1.6.1. Vòngăđi ca sán truyn lây qua 16 1.6.2. Đặcăđim hình thái mt s u trùng sán ký sinh trên 17 1.6.3. Mt s nghiên cu v u trúng sán ký sinh trên chép 18 1.7. Tng quan v gen ITS2  đng vt sán 19 1.8. Tng quan v nghiên cu u trùng C. formosanus  trên th gii Vit Nam 21 1.8.1. Đặcăđim sinh hc chu kỳ phát trin 21 1.8.2. Tình hình nghiên cu trên th gii Vit Nam v C. formosanus 23 1.9. Phòng bnh tng hp do u trùng sán trên nuôi 27 iv 1.9.1. Ngĕnăchặn sự xâm nhp kìm hãm sự phát trin u trùng sán trong h thng nuôi 27 1.9.2. Nâng cao scăđ kháng ca nuôi 32 1.9.3. QunălỦămôiătrng nuôi thích hp năđnh 33 1.10.ăNgĕnăchặn xử lý u trùng sán ký sinh trên 40 1.11. Mt s hoá chtăthngă dùngă điu tr bnh ký sinh trùng trong nuôi trng thy sn 43 1.11.1.ăSulphatăđng - Copper sulphate - CuSO 4 . 5 H 2 O 43 1.11.2. Formalin - Formol (36 - 38%) 44 Chngă2.ăNIăDUNGăVĨăPHNGăPHỄPăNGHIểNăCU 46 2.1. Ni dung nghiên cu 46 2.2. Vt liu, thiăgianăvƠăđaăđim nghiên cu 46 2.2.1. Vt liu, thiăgianăvƠăđaăđim nghiên cu dch t hc u trùng sán 46 2.2.2. Vt liu, thiăgianăvƠăđaăđim nghiên cu gii trình tự gen ITS2 mt s loài sán rut nh 47 2.2.3. Vt liu, thiăgianăvƠăđaăđim nghiên cu sự nhăhng ca u trùngă sánă lênă sinhă trng ca chép thử nghim thuc, hoá chtăđiu tr bnh 48 2.3. Phngăpháp nghiên cu 49 2.3.1.ăPhngăphápăthuămu 49 2.3.2. Phngăphápăépămô 52 2.3.3. Phngăphápătiêuăc 52 2.3.4. Nhn dng u trùng sán 53 2.3.5.ăPhngăphápăgii trình tự gen ITS2 sán rut nh 53 2.3.6. Phngăphápătheoădõiănhăhng caăATSLălênăsinhătrng ca chépăhngăvƠăcáăchépăging 55 2.3.7. Thử nghimăđiu tr bnh kênh mang chép do ATSL C. formosanus 56 2.3.8. PhngăphápătínhătoánăvƠăxử lý s liu 57 Chngă3.ăKT QU THO LUN 59 3.1. Kt qu nghiên cu u trùng sán ký sinh trên chép 59 v 3.1.1. Kt qu kim tra u trùng sán trên chép bt 59 3.1.2. Kt qu kim tra uătrùngăsánăláătrênăcáăchépăhng 60 3.1.3. Kt qu kim tra u trùng sán trên chép ging 68 3.1.4. Kt qu kim tra uătrùngăsánăláătrênăcáăchépăthngăphm 83 3.2. Kt qu tho lun vic gii trình tự gen ITS2 mt s loài sán rut nh 89 3.2.1. Kt qu chy PCR 90 3.2.2. Kt qu gii trình tự gen ITS2 91 3.2.3. So sánh sự tngăđng nucleotide trong gen ITS2 95 3.2.4. Kt qu phân tích xây dựng cây ph h 97 3.3. Kt qu theo dõi nhăhng ca uătrùngăsánăláălênăsinhătrng ca chépăhngăvƠăcáăchépăging 98 3.4. Bin pháp phòng bnh do u trùng sán mt cách tng hp 101 3.4.1. Chun b tt ao, rungătrcăkhiăng,ănuôiăcáăchép 101 3.4.2. Khử trùngăncăaoătrc khi th ging 101 3.4.3. Chun b ging 102 3.4.4. ChĕmăsócăvƠăqun lý sau khi th ging 102 3.5. Kt qu thử nghimăđiu tr bnh kênh mang  chép ging 104 3.5.1. Kt qu dùng CuSO 4 điu tr bnh kênh mang chép do ATSL C. formosanus 105 3.5.2. Kt qu dùngă Formalină điu tr bnh kênh mang chép do ATSL C. formosanus 108 3.5.3. Kt qu dùngăPraziquantelăđiu tr bnh kênh mang chép ging do u trùng sán C. formosanus gây ra 110 KT LUN KIN NGH 113 KT LUN 113 KIN NGH 114 DANH MC CÔNG TRÌNH Ðà CÔNG B CA TÁC GI LIÊN QUAN ÐN LUN ÁN 115 TÀI LIU THAM KHO 116 vi DANHăMCăCÁCăCHăVITăTT Từăvitătt Nghĩaăđyăđ ATSL uătrùngăsánălá CĐN C. formosanus cs. C. sinensis Cngăđănhim Centrocestus formosanus Cộng sự Clonorchis sinensis ĐBSCL ĐngăbằngăsôngăCửuălong ĐBSH H. pumilio H. taichui ĐngăbằngăsôngăHng Haplorchis pumilio Haplorchis taichui FIBOZOPA Fishborne Zoonotic Parasites (Ký sinh trùng truynălơyăquaăcá) HTX Hpătácăxã KHV Kínhăhinăvi KSH Khí sinh hc KST Ký sinh trùng NTTS Nuôi trngăThyăsn TBX Trùng bánh xe TLN Tỷălănhim vii DANHăMCăCÁCăBNG TT Tênăbng Trang 2.1. Danh sách ngun gc mu sán Haplorchis spp. trong nghiên cu 48 2.2. Thông tin v vic thu mu chép gingăđ phân tích ATSL ký sinh 50 2.3. Thông tin v vic thu mu chép ging theo mùa 50 2.4. Thông tin v vic thu muăcáăchépăthngăphm 51 2.5. B trí thí nghim thử thuc, hoá chtăđiu tr bnh kênh mang chép do ATSL C. formosanus gây ra 57 3.1. Kt qu kim tra u trùng sán trên chép bt 60 3.2. Kt qu kimătraăATSLăkỦăsinhătrênăcáăchépăhngătừ cácăaoăng 61 3.3. Tỷ l vƠăCngăđ nhimăATSLăkỦăsinhătrênăcáăchépăhng 62 3.4a. Thành phn tỷ l nhimăATSLăkỦăsinhătrênăcáăchépăhng 64 3.4b. Tn sut xut hinăloƠiăATSLăkỦăsinhătrênăcáăchépăhng 64 3.5. Cngăđ nhimăATSLăvƠăcăquanăkỦăsinhătrênăcáăchépăhng 66 3.6. Kt qu kim tra ATSL  chép ging trong các h thng nuôi 69 3.7. Cngăđ nhim ATSL  chép ging trong các h thng nuôi 70 3.8. Thành phn loài tỷ l nhim ATSL ký sinh trên chép ging 71 3.9. Tn sut nhim các loài ATSL trên chép ging 73 3.10. Tng s ATSL từng loài ký sinh trên chép ging trong các h thng nuôi 73 3.11. Kt qu kim tra ATSL trên chép ging theo mùa 75 3.12. Kt qu kimătraăcngăđ nhim ATSL trên chép ging theo mùa 77 3.13. Thành phn loài, s chép ging nhim tng s ATSL trong v Xuân-Hè 78 3.14. Thành phn loài tỷ l ATSL ký sinh trên chép ging trong v Xuân-Hè 79 3.15. Cngăđ nhim ATSL ký sinh trên chép ging trong v Xuân-Hè 80 3.16. Thành phn loài, s chép ging nhim tng s ATSL trong v Thu-Đông 81 viii 3.17. Thành phn loài tỷ l ATSL ký sinh trên chép ging trong v Thu-Đông 82 3.18. Cngăđ nhim từng loi ATSL ký sinh trên chép ging trong v Thu-Đông 83 3.19. Kt qu kim tra tỷ l nhim ATSLătrênăcáăchépăthngăphm 84 3.20. Cngăđ nhimăATSLătrênăcáăchépăthngăphm 85 3.21. Thành phn loài s mu chép thngăphm nhim ATSL 87 3.22. Sự tngăđng các nucleotides trong vùng gen ITS2 giữa các Haplorchis spp. 96 3.23. Kt qu theo dõi sự nhăhng ca ATSL C. formosanus lên tcă đ sinhătrng ca chép ging 99 3.24. Tỷ l vƠăCĐNăATSLăC. formosanus  mang chép ging 100 3.25. Kt qu điu tr bnh kênh mang cho chép 106 3.26. Kt qu điu tr bnh kênh mang cho chép 107 3.27. Kt qu điu tr bnh kênh mang cho chép do ATSL C. formosanus bằngăphngăphápăngơmăFormalin 108 3.28. Kt qu điu tr bnh kênh mang cho Chép do ATSL C. formosanus bằng phngăphápătắm Formalin 109 3.29. Kt qu điu tr bnh kênh mang cho chép do u trùng sán C. formosanus bằngăphngăphápătrn thuc Praziquantel vào thcăĕn 111 ix DANHăMCăCÁCăHỊNH TT Tên hình Trang 1.1. chép (Cyprinus carpio) 8 1.2. Vòngăđi ca sán truyn lây qua 17 1.3. u trùng sán rut nh Haplorchis pumilio 18 1.4. u trùng sán rut nh Haplorchis taichui 18 1.5. Vùng gen ribosom ca h gen nhân t bào (18S - 5,8S - 28S)ăvƠăđim bám mi (3SF - BD2R)ănhơnăđon gen ITS2. 20 1.6. u trùng sán song ch Centrocestus formosanus 22 1.7. Cu trúc phân tử ca Praziquantel (C 19 H 24 N 2 O 2 ) 41 3.1. Thành phn loài ATSL kỦăsinhătrênăcáăchépăhngă21ăngƠyătui 65 3.2. Thành phn loài ATSL kỦăsinhătrênăcáăchépăhngă28ăngƠyătui 66 3.3. chépăhngăb kênh nắp mang do nhim ATSL C. formosanus 67 3.4. Cngăđ nhim ATSL ký sinh trên ging 74 3.5. Tỷ l loài ATSL ký sinh trên chép ging trong v Xuân-Hè 79 3.6. Tỷ l loài ATSL ký sinh trên chép ging trong v Thu-Đông 82 3.7. Tỷ l nhim từng loi ATSL trong chépăthngăphm 87 3.8. Cngăđ nhim ATSL  chépăthngăphm 88 3.9. Sn phm PCR vùng gen ITS2 trên thch agarose 1%. 91 3.10. Trình tự vùng gen ITS2 ca sán Haplorchis spp. thu  Bắc Vit Nam Thái lan 94 3.11. Phân tích cây ph h ca sán Haplorchis spp. dựa trên trình tự nucleotide caăđon gen ITS2 97 3.12. chépăhngăb bnh kênh mang do ATSL 99 3.13. u trùng sán C. formosanus sng ký sinh trên mang chép ging 112 3.14. u trùng sán C. formosanus chtă sauă khiă điu tr bằng thuc Praziquantel 112 [...]... m l n trong phân lo i nh n d ng m t s ATSL truy n lây qua Xu t phát từ những lý do trên chúng tôiă đưă ti n hành thực hi nă đ tài: Nghiên c u d ch t h c một s loài u trùng sán truyền lây qua chép (Cyprinus carpio ) bi n pháp phòng, tr ” M cătiêu nghiên c u Tìmăraăsựăphơnăb ăcácălo iăATSL truy n lây trên chép các giaiăđo n phát tri n, trong các h th ng nuôi tác h i c a ATSL nhằm... nă đ ă kỦă sinhă trênă da,ă mắt,ă vơy,ă mang, c ă c aă hìnhă thƠnhă uă trùng metacercariae.ă Vòngăđ iă c aă sán truy nă lơyă qua đ tómă tắt,ă môă ph ngă l iătrongăHình 1.2 Nguồn: Dự án FẤBOZOPA Hình 1.2 Vòngăđ i c a sán truyền lây qua 1.6.2 Đặc điểm hình thái một số ấu trùng sán ký sinh trên 1.6.2.1 u trùng sán ruột nhỏ ảaplorchis pumilio, Loos 1896 u trùng sán cóăhìnhăôvanădƠiăkho... ă hi nă chép ă giaiă đo nă nh ă ngătừ b tătrongăkho ngă1ătháng chép gi ng: chép gi ngălƠ đ ngălênătừ chép h ng, cóă đ ătu iătừă1,5 thángătr ălên,ătuỳătheoăkíchăcỡămƠăcóăkháiăni m chép gi ngăc pă1,ă2ă 3 t ngăđ ng gi ngănh ă5 - 10ăg/con, gi ngănhỡă20 - 50ăg/conăvƠ gi ngă l nă100 - 300g/con chép th ngăph m: chép th lƠmăthực ph măchoăng ngăph mălƠ chép đ... cácămùaătrongănĕmăvƠătrongăcácăh ăth ngănuôi 1.3 T ngăquanăvềăđ iăt ng nghiên c u 1.3.1 Hình thái, phâ n lo i đặc điểm sinh học chép V ăphơnălo i chép: B chép: Cypriniformes H chép: Cyprinidae Gi ng chép: Cyprinus Loài chép: Cyprinus carpio (Linnaeus, 1758) chép Cyprinus carpio (Linnaeus,ă 1758)ă lƠă loƠiă ngon,ă cóă giáă tr ă kinhă t ă cao, đ căphơnăb ăr tăr ngătrênăth ăgi i,ătrừăNamăMỹ,ăMadagascaăvƠăChơuăÚc,ă... iăchu i Nguồn: Dự án FẤBOZOPA Hình 1.3 u trùng sán ruột nh Hình 1.4 u trùng sán ruột nh Haplorchis pumilio Haplorchis taichui 1.6.3 Một số nghiên cứu về ấu trúng sán ký sinh trên chép Khi nghiên c uăv ăvòngăđ iăc a sán ru tă H pumilio nĕmă2006ăUmadeviă vƠă Madhaviă choă th yă ATSL nhi mă vƠoă c ă đuôiă c aă chép ă ngƠyă tu iă th ă 15.ă Theoă nghiên c uă c aă Nguy nă Th ă H pă vƠă... nălơy qua chép m tăcáchăđ ngăb ătrênăcácăgiaiăđo năphátătri năvƠăcác h ăth ngănuôi chép ăkhuăvựcăphíaăBắc,ăVi tăNam.ăĐặcăbi tăk tăqu nghiên c uă gi i trìnhătựăgenăc aăcác các loài sán ăcácăgiaiăđo năphátă tri nă choăth yăsựăsaiă khácăgiữaă2ăloƠi sán ru tănh ăcóăỦănghƿaăkhoaăh căchuyênăsơuătrongăv năđ ăphơnă lo i sán d iăgócăđ ăsinhăh căphơnătửăvƠăxơyădựngăcơyăph ăh choăth yăm i liên quanăchặtăgiữaăcácăgiaiăđo... nuôi chép Đ iăv i chép trongăgiaiăđo nă ngătừ b tălên h ngăch ăy uălƠă ngă trongăcácăaoăđ tăbằngăcáchăgơyămƠuăt oăth căĕnătựănhiênăvƠăcóădùngăthêmăth căĕnă b ăsungăhoặcăcámăcôngănghi p,ătrongăgiaiăđo nănƠyăaoă khôngăth ăl n khácădo chép th ngăch ă ngămình chép ngăđẻăs m h năkhiămƠ các khácăch aăchoă đẻ.ăH nănữaăgiaiăđo nănƠy ĕnăđ ngăv tăphùăduălƠăchínhăgi ngăcácăloƠi khácă... lênă chép gi ng (cá- lúa).ă M đíchă đ uă t nă d ngă mặtă n c,ăt năd ngăth căĕnătựănhiênầ Nuôi chép th cácăloƠi n chép th ngăph m:ăKhuăvựcăphíaăBắc chép đ cănuôiăghépăv iă căng tăkhácătrongăaoălƠăchính.ăTrongăcácăaoănuôi thôngăth ngăđ ng cănuôiăghépăv iătỷăl ă7 - 10%ăt ngăs th ,ăn uătĕngătỷăl ăth chép s ă ch mă l nă doă khôngă cungă c pă đ ă th ĕnă choă cá. ă Mặcă dùă ... Trong các loài nuôi ghép truy n th ng, chép loài có ch tă l ng th tă th m,ă ngonă đ bi n nhi uă mónă ĕn.ă chép đ c nhi uă ng i tiêu dùng lựa ch n trong ch ng,ă nuôiă quanhă nĕmă trongă nhi u h th ng nuôi trong tự nhiên Trong quáătrìnhă ngănuôi chép ch a n nhi u lo i u trùng sán cóănguyăc ătruy n lây sang ng iăvƠăđ ng v t khi sử d ng thực ph m khôngăđ c n uăđ nhi tămƠăch aăcó nghiên c... nayăđưănh păcácădòng chép từăIndonesia,ăHungaryầăđưălai v i chép Vi tăđ ă t oă conă laiă vƠă đ nuôiă ph ă bi n.ă Doă đặcă đi m uă th ă laiă c aă conă laiă giữaă chép Vi tă (chép trắng)ă v iă chép Hungă vƠă chép Indonesiaă lƠă cóă t đ ă sinhătr ng,ătỷăl ăs ngăvƠăkh ănĕngăkhángăb nhăcaoăh n thu nănênăhi nănayă cácăh ădơnătrongăc ăn căsửăd ngăch ăy u chép laiăđ ănuôiăth . lây qua cá 14 1.6. Dch t hc các loài u trùng sán lá truyn lây qua cá 16 1.6.1. Vòngăđi ca sán lá truyn lây qua cá 16 1.6.2. Đặcăđim hình thái mt s u trùng sán lá ký sinh trên cá. hc cá chép 7 1.3.2. Cácăgiaiăđon phát trin ca cá chép 10 1.3.3. H thngăng,ănuôi cá chép 10 1.4. Tng quan v ký sinh trùng ký sinh trên cá chép 12 1.5. Tng quan v các loài sán lá. KIMăVĔNăVN NGHIÊN CU DCH T HC MT S LOÀI U TRÙNG SÁN LÁ TRUYN LÂY QUA CÁ CHÉP (Cyprinus carpio) VÀ BIN PHÁP PHÒNG, TR CHUYÊN NGÀNH: KÝ SINH TRÙNG VÀ VI SINH VT HC

Ngày đăng: 18/04/2014, 18:14

Từ khóa liên quan

Tài liệu cùng người dùng

Tài liệu liên quan