ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG CỦA SẢN PHẨM NUTRIBULL LÊN TĂNG TRƯỞNG VÀ CẢI THIỆN TÌNH TRẠNG SỨC KHỎE CỦA CÁ TRA (Pangasianodon hypophthalmus) EFFECT OF NUTRIBULL ON GROWTH PERFORMANCE AND FISH HEALTH IMPROVEMENT OF TRA CATFISH (Pangasianodon hypophthalmus) Lê Thị Nga, Nguyễn Hữu Thịnh, Lê Thanh Hùng Khoa Thủy Sản, Trường Đại học Nông Lâm TP HCM ABSTRACT Nutribull is a product that consists nucleotides, beta-1,3-1,6 glucan, glucuronolactone and amino acids They are supplied in pelleted feed to improve growth, feed ulitization, disease and stress resistance of fish Tra catfish (Pangasianodon hypophthalmus) (17,2 ± 2,92 g in weight) were used in this study Fish were fed with three diets including basal diet (NT1), basal diet supplemented with 0,1% (NT2) and 0,2% Nutribull (NT3) The first trial was aimed to evaluate effect of Nutribull on growth performances, feed utilization and non-specific immune response of fish After ten weeks of feeding, NT3 feed supplied with 0,2% Nutribull increased significantly growth performances, specific growth rate (SGR) (P < 0,05) However, Nutribull at levels of 0,1% and 0,2% in basal diets could not improve feed intake and food conversion ratio (P > 0,05) Both tested diets enhanced significantly lysozyme activity of sera, one important component of non-specific immune respond (P < 0,05) The second trial was to evaluate the effect of the Nutribull product on fish health improvement Fish fed different feed in 10 weeks were challenged with Edwardsiella ictaluri by immersion 14 days after challange, fish fed NT3 were protected better than those fed other feed The third trial was done to test stress resistance of tra catfish against high ammonia concentration (150 ppm) and salinity (15‰) Fish fed NT2 and NT3 supplied with 0.1 and 0.2 % of Nutribull, respectively, survived better than those fed basal diet ĐẶT VẤN ĐỀ Ngày nay, nuôi thủy sản xác định ngành kinh tế mũi nhọn quốc gia Nhiều đối tượng có giá trị đưa vào ni với nhiều hình thức ni khác nhau, nghề ni cá tra đồng sông Cửu Long phát triển mạnh Trong bối cảnh hội nhập nay, giới quan tâm đến việc sản xuất tiêu thụ sản phẩm Những sản phẩm đáp ứng điều dần chiếm lĩnh thị trường quốc tế với giá trị cao nhiều Do vậy, việc nâng cao suất, tạo nguồn cá vấn đề sống cịn nghề ni thủy sản nước ta Hiện nay, việc nuôi thâm canh cá tra ngày cao khơng có quy hoạch dẫn đến thiệt hại dịch bệnh ngày tăng Mặt khác, ni trồng thủy sản phịng bệnh trị bệnh, cần tập trung vào cải thiện sức khỏe vật nuôi cách đảm bảo môi trường sống thích hợp tăng cường sức đề kháng cho đối tượng nuôi Để tăng sức đề kháng cho đối tượng ni người ta thường kích thích hệ miễn dịch tự nhiên chúng Đối với động vật thủy sản, nghiên cứu tập trung vào việc giúp đối tượng nuôi chống lại stress bệnh cách tự nhiên thay dùng kháng sinh để phịng điều trị gây ảnh hưởng nghiêm trọng đến sản phẩm, người môi trường Ngày nay, hoạt chất sinh học nhằm kích thích hệ miễn dịch khơng đặc hiệu sử dụng thức ăn thủy sản ngày phổ biến, đặc biệt chất kích thích miễn dịch có nguồn gốc từ tự nhiên 139 Trên giới có nhiều nghiên cứu lĩnh vực dinh dưỡng sử dụng loại hoạt chất sinh học bổ sung vào thức ăn nhằm cải thiện sức khỏe vật nuôi beta glucan, nucleotide, mannan oligosaccharide (MOS), Các sản phẩm đánh giá có khả nâng cao đáp ứng miễn dịch tăng trưởng cải thiện tỉ lệ sống nhiều lồi vật ni Nutribull sản phẩm chứa thành phần chủ yếu gồm beta glucan, nucleotide, glucuronolactone Đây chất có tác dụng kích thích miễn dịch, giúp cá tăng trưởng nhanh, nâng cao tỉ lệ sống động vật thủy sản nói riêng vật ni nói chung Mục tiêu nghiên cứu nhằm đánh giá hiệu Nutribull lên tăng trưởng, hiệu sử dụng thức ăn đáp ứng miễn dịch không đặc hiệu cá tra Đồng thời, ảnh hưởng Nutribull lên khả đề kháng cá tra vi khuẩn Ewardsiella ictaluri khả chịu đựng stress thay đổi môi trường (ammonia độ mặn) đề cập VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Sản phẩm Nutribull: Sản phẩm Nutribull công ty Nutriway sản xuất, có thành phần gồm beta glucan, nucleotide, glucuronolactone amino acid Tác dụng sản phẩm giúp kích thích tăng trưởng, tăng tỉ lệ sống, tăng cường đáp ứng miễn dịch không đặc hiệu giúp cho đối trượng nuôi chịu đựng tốt với điều kiện stress mơi trường Trong thí nghiệm, thức ăn ép đùn chứa 28% protein sử dụng Nutribull bổ sung vào thức ăn theo tỉ lệ 0; 0,1% 0,2% Bảng Thành phần phầm thức ăn dành cho cá tra thí nghiệm NT1 NT2 NT3 (Đối chứng) (0,1% Nutribull) (0,2% Nutribull) Bột cá 5,00 5,00 5,00 Bột đậu nành 27,80 27,80 27,80 Cám gạo 37,60 37,50 37,40 Bột xương thịt 13,70 13,70 13,70 Bột sắn 15,00 15,00 15,00 Dầu cá 0,15 0,15 0,15 Vitamin, khoáng 0,50 0,50 0,50 Methionine 0,25 0,25 0,25 Nutribull 0,10 0,20 Tổng 100,00 100,00 100,00 Nguyên liệu (%) Cá thí nghiệm: Cá tra (Pangasianodon hypophthalmus) giống có trọng lượng trung bình từ 17,2 ± 2,92 g chiều dài trung bình 12,1 ± 0,74 cm Thí nghiệm 1: Thí nghiệm thiết lập để so sánh ảnh hưởng Nutribull lên tăng trưởng, tỉ lệ sống, hiệu sử dụng thức ăn khả miễn dịch cá tra nghiệm thức bổ sung Nutribull với tỉ lệ khác (0; 0,1 0,2%) Cá tra thí nghiệm bố trí theo kiểu khối ngẫu nhiên vào bể xi măng (2 x x 1,5 m) Bố trí 12 giai (1 x x m) bốn bể xi măng cho nghiệm thức (NT) với lần lặp lại với mật độ 150 cá/giai Trong q trình thí nghiệm tiến hành thay nước lần/tuần lần thay 1/3 lượng nước bể kết hợp với xi phông đáy Cá cho ăn với thức ăn thí nghiệm 10 tuần 140 Sau cân trọng lượng đếm số lượng để đánh giá tỉ lệ sống, tăng trọng, hiệu sử dụng thức ăn, đánh giá tiêu đáp ứng miễn dịch không đặc hiệu cá (bạch cầu lysozyme hyết thanh) Thí nghiệm 2: Thí nghiệm tiến hành nhằm đánh giá ảnh hưởng Nutribull lên khả đề kháng vi khuẩn Edwardsiella ictaluri Bố trí thí nghiệm gồm nghiệm thức, nghiệm thức có lần lặp lại, tương ứng có 24 bể bố trí ngẫu nhiên theo bảng Bảng Sơ đồ bố trí bố trí gây cảm nhiễm với vi khuẩn Edwardsiella ictaluri Nghiệm thức Tỉ lệ Nutribull bổ sung (%) E ictaluri NT1Đ Không cảm nhiễm NT2Đ 0,1 Không cảm nhiễm NT3Đ 0,2 Không cảm nhiễm NT1 Gây cảm nhiễm NT2 0,1 Gây cảm nhiễm NT3 0,2 Gây cảm nhiễm Cá cảm nhiễm phương pháp ngâm với E ictaluri vòng Mật độ vi khuẩn gây nhiễm 10 cfu/mL Sau ngâm, cá chuyển vào ni bể composite (100 lít) để theo dõi tỉ lệ chết vịng 14 ngày Thí nghiệm 3: Thí nghiệm nhằm đánh giá khả chịu đựng cá ăn thức ăn bổ sung 0,1 0,2 % Nutribull ammonia độ mặn nước bể thí nghiệm Thí nghiệm gây sốc ammonia nồng độ cao (150 ppm): Sau 10 tuần thí nghiệm ăn thức ăn thử nghiệm, 15 cá giai chuyển vào bể composite chứa 60 lít nước có pH điều chỉnh với nồng độ ammonia 150 ppm Bố trí thí nghiệm gồm nghiệm thức, nghiệm thức có lần lặp lại, tương ứng có 24 bể bố trí ngẫu nhiên theo bảng Kết tỷ lệ sống cá ghi nhận vịng 24 sau bố trí thí nghiệm Bảng Sơ đồ bố trí thí nghiệm gây sốc ammonia Nghiệm thức Tỉ lệ Nutribull bổ sung (%) Gây sốc ammonia NT1 Đ Không gây sốc NT2 Đ 0,1 Không gây sốc NT3 Đ 0,2 Không gây sốc NT1 Gây sốc NT2 0,1 Gây sốc NT3 0,2 Gây sốc Thí nghiệm gây sốc với nồng độ muối cao (15‰): Gây sốc nồng độ muối cao cho cá để đánh giá ảnh hưởng sản phẩm Nutribull lên giảm stress cá tra trước thay đổi độ mặn Bố trí thí nghiệm thành nghiệm thức (bảng 4), nghiệm thức có lần lặp lại, tương ứng có 24 bể nhựa Mật độ 20 cá/bể Quan sát ghi nhận tỷ lệ cá chết sau 24 48 141 Bảng Sơ đồ bố trí thí nghiệm gây sốc độ mặn Nghiệm thức Tỉ lệ Nutribull bổ sung (%) Gây sốc độ mặn 15‰ NT1Đ Không gây sốc NT2Đ 0,1 Không gây sốc NT3Đ 0,2 Không gây sốc NT1 Gây sốc NT2 0,1 Gây sốc NT3 0,2 Gây sốc Phương pháp phân tích xử lý số liệu Tất liệu thu tăng trọng (WG, SGR), hệ số chuyển đổi thức ăn (FCR), tỉ lệ sống phân tích phần mềm Excel SAS V.8 Sử dụng trắc nghiệm Turkey để so sánh khác có ý nghĩa nghiệm thức KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN Thí nghiệm Tăng trưởng, tỉ lệ sống hiệu sử dụng thức ăn Bảng Hệ số chuyển đổi thức ăn tăng trưởng cá sau 10 tuần thí nghiệm Nghiệm thức NT1 (ĐC) NT2 NT3 a a Trọng lượng đầu (g) 17,28 ±0,10 17,26 ± 0,10 17,24 a ± 0,10 Trọng lượng cuối (g) 82,43a ± 5,59 89,09 ab ± 6,79 93,73 b ± 2,80 SGR (%/ngày) 2,37a ± 0,10 2,48ab ± 0,12 2,56 b ± 0,05 FCR 1,17a ± 0,10 1,18 a ± 0,08 1,07a ± 0,02 a a Lượng ăn (g/cá/ngày) 1,15 ± 0,14 1,25 ± 0,10 1,24 a ± 0,06 ab a Tỷ lệ sống (%) 97,00 ± 2,8 92,67 ± 3,93 99,17 b ± 1,26 Ghi chú: Những giá trị nghiệm thức hàng ngang chứa ký tự giống sai khác khơng có ý nghĩa mức độ tin cậy 95% (P > 0,05) Kết từ bảng cho thấy, trọng lượng cá tra ban đầu bố trí thí nghiệm đồng nghiệm thức (P > 0,05) Tuy nhiên, trọng lượng cuối thí nghiệm lại có khác biệt rõ rệt Trong đó, trọng lượng trung bình cá NT3 bổ sung 0,2% Nutribull lớn (93,73 g/con), trọng lượng trung bình giảm dần đến NT2 (89,09 g/con) thấp NT1 (82,43 g/con) Tuy nhiên, khác biệt NT1 NT2, NT2 NT3 ý nghĩa mặt thống kê (P > 0,05) Chỉ có khác biệt NT1 NT3 có ý nghĩa mặt thống kê (P < 0,05) Về tỷ lệ tăng trưởng đặc biệt (SGR) tăng dần từ NT1 (2,37 %/ngày) đến NT3 (2,56 %/ngày) Tuy nhiên, khác biệt SGR NT1 so với NT2 NT2 so với NT3 khơng có khác biệt ý nghĩa mặt thống kê (P > 0,05) Còn khác biệt NT1 NT3 lại có ý nghĩa mặt thống kê (P < 0,05) Kết cho thấy việc bổ sung Nutribull vào thức ăn có khả giúp cá tăng trưởng nhanh Trong thành phần Nutribull gồm có beta-1,3-1,6 glucan, nucleotide glucuronolactone Tuy nhiên, glucuronolactone chất hoạt hóa gan, có vai trị việc khử độc loại thải độc tố gan Do đó, vai trị kích thích tăng trưởng cá thí nghiệm 142 tác dụng nucleotide hay beta glucan Nucleotide beta glucan giúp cho cá tăng cường q trình biến dưỡng thức ăn, kích thích tăng trưởng vật ni Kết phù hợp với kết Li ctv (2007) nghiên cứu ảnh hưởng hỗn hợp nucleotide tinh khiết lên tăng trưởng sức khỏe ấu niên cá đù đỏ (Sciaenops ocellatus) Nucleotide bổ sung vào thức ăn cá với liều lượng khác nhau, quan sát thí nghiệm tuần Kết cho thấy, cá cho ăn thức ăn với mức độ bổ sung nucleotide giúp nâng cao tăng trưởng hiệu sử dụng thức ăn Burrells (2001) nghiên cứu ảnh hưởng thức ăn bổ sung nucleotide đến tỷ lệ tăng trưởng cá hồi Atlantic Khi bổ sung vào thức ăn 0,03% nucleotide, tác giả nhận thấy tỷ lệ tăng trưởng cá tăng từ 15 – 22% so với cá ăn thức ăn Borda ctv (2003) nghiên cứu ảnh hưởng thức ăn bổ sung nucleotide lên ấu trùng cá tráp biển (Sparus aurata), kết cho thấy cá cho ăn thức ăn bổ sung nucleotide có tốc độ tăng trưởng nhanh cá ăn thức ăn đối chứng (trích dẫn Li ctv., 2007) Đối với beta glucan, số nghiên cứu cho thấy cho nhiều loài cá khác ăn thức ăn bổ sung -1,3-1,6 glucan giúp cá cải thiện tăng trưởng giảm tỷ lệ chết (Raa ctv., 1990; trích dẫn Raa, 2000) Một nghiên cứu khác Sung ctv (1994) cho thấy rằng, cho tôm ăn -1,3-1,6 glucan cho tăng trưởng nhanh, giảm tỷ lệ chết sử dụng thức ăn tốt Hệ số chuyển đổi thức ăn (FCR) Qua kết bảng cho thấy, hệ số biến đổi thức ăn (FCR) cá NT3 thấp so với NT lại, nhiên khác biệt lại khơng có ý nghĩa mặt thống kê NT (P > 0,05) Điều chứng tỏ việc bổ sung Nutribull chưa mang lại hiểu rõ ràng lên hiệu sử dụng thức ăn cá Từ kết bảng cho thấy NT3 (bổ sung 0,2% Nutribull) có tỷ lệ sống cao (99,17%) Nhưng tỷ lệ sống NT3 NT1, NT2 NT1 khơng có khác biệt mặt thống kê (P > 0,05) Tuy nhiên, cá chết nghiệm thức mắc gai vây ngực vào giai lúc bơi lội, thức ăn không ảnh hưởng đến tỷ lệ sống cá tra thí nghiệm Số lượng bạch cầu cá sau thí nghiệm Máu cá sau 10 tuần ăn thức ăn thức ăn thử nghiệm thu cho mục đích xác định mật độ bạch cầu máu Chỉ tiêu kiểm tra ống trộn bạch cầu buồng đếm Neubauer Kết số lượng bạch cầu đếm mẫu máu cá tra sau 10 tuần thí nghiệm thể qua bảng Bảng Số lượng bạch cầu đếm mẫu cá tra thí nghiệm Số lượng bach cầu đếm Tổng số lượng bạch cầu 64 ô (tế bào) (x103 tế bào/mm3) a NT1 (ĐC) 4308 ± 592 215,4a ± 29,6 b NT2 5174 ± 529 258,7b ± 26,5 NT3 5047ab ± 426 252,4 ab ± 21,3 Ghi chú: Những giá trị nghiệm thức hàng dọc chứa ký tự giống sai khác khơng có ý nghĩa mức độ tin cậy 95% (P > 0,05) Nghiệm thức 143 Kết cho thấy số lượng bạch cầu đếm NT2 cao nhất, NT3 thấp NT1 Sự khác biệt NT2 NT1 có ý nghĩa thống kê (P 0,05) Điều chứng tỏ mức bổ sung 0,1% Nutribull có tác dụng tốt việc kích thích làm gia tăng hoạt động bạch cầu Từ nâng cao đáp ứng miễn dịch không đặc hiệu cá Tác dụng hoạt hóa bạch cầu thành phần nucleotide -1,3-1,6 glucan có sản phẩm Nutribull Theo Engstad Robertsen (1994), -1,3-1,6 glucan kết hợp đặc biệt với receptor bề mặt bạch cầu Khi receptor gắn -1,3-1,6 glucan, tế bào trở nên hoạt động hơn, tiêu diệt dung giải tế bào vi khuẩn với cường độ cao Và lúc đó, chúng tiết phân tử báo hiệu (cytokine) kích thích hình thành bạch cầu Các nghiên cứu số lồi cá cho thấy có gia tăng hoạt động thực bào đại thực bào bạch cầu trung tính (neutrophil) hợp chất bổ sung vào thức ăn Tuy nhiên chế phản ứng miễn dịch không đặc hiệu cá sau bổ sung chất kích thích miễn dịch chưa nghiên cứu đầy đủ Lysozyme Phân tích lysozyme huyết cá thực theo phương pháp Ellis (1990) Trong phân tích này, chúng tơi dựa tiêu giảm vi khuẩn Gram dương nhạy với lysozyme Microccoccus luteus ATCC 9341, từ làm giảm mật độ quang đo máy so màu sau 0,5 phút 4,5 phút bước sóng 530 nm Kết thu thể bảng Bảng Kết phân tích lysozyme huyết cá thí nghiệm Nghiệm thức Sự giảm mật độ quang (x10 -3) Hoạt lực lysozyme (unit/mL) NT1 (ĐC) 5,0 a ± 0,8 12,5 a ± 2,0 b NT2 7,7 ± 0,5 19,4 b ± 1,2 c NT3 10,8 ± 1,3 26,9 c ± 3,1 Ghi chú: Những giá trị nghiệm thức hàng dọc chứa ký tự giống sai khác khơng có ý nghĩa mức độ tin cậy 95% (P > 0,05) Dựa vào bảng nhận thấy hoạt lực lysozyme nghiệm thức có khác biệt Hoạt lực cao NT3 (26,9 unit/mL), NT2 (19,4 unit/mL) thấp nghiệm thức đối chứng (12,5 unit/mL) Sự khác biệt ba nghiệm thức có ý nghĩa mặt thống kê (P < 0,05) Kết thí nghiệm cho thấy, việc bổ sung 0,2% Nutribull vào thức ăn cho kết kích thích hoạt lực lysozyme tốt Một số nghiên cứu cho thấy, glucan nấm men có khả nâng cao hoạt lực lysozyme cá hồi Atlantic, cá hồi vân cá bơn (Engstad ctv., 1992; Jørgensen ctv., 1993; Thompson ctv., 1995; Baulny ctv., 1996) Mặt khác, Sakai ctv (2001) báo cáo rằng, nucleotide ngoại sinh làm tăng hoạt lực lysozyme thực bào sản xuất anion superoxide thể thực bào thận cá chép (Cyprinus carpio) (trích dẫn Heisuke ctv., 2007) Low ctv (2003) báo cáo cá bơn ăn thức ăn bổ sung nucleotide cho thấy thành phần miễn dịch không đặc hiệu hoạt lực lysozyme tăng lên lách thận ảnh hưởng khơng rõ ràng mang 144 Thí nghiệm Kết cho thấy nghiệm thức đối chứng, cá sống hoạt động bình thường chứng tỏ yếu tố môi trường không ảnh hưởng đến cá Ở NT1, NT2 NT3 kết cho thấy cá có biểu đặc trưng bệnh gây Edwardsiella ictaluri Tiến hành phân lập định danh vi khuẩn cho thấy, xuất khuẩn lạc vi khuẩn E ictaluri môi trường nuôi cấy BHIA Điều chứng tỏ cá chết nghiệm thức vi khuẩn gây Đồ thị thể tỷ lệ sống cá từ ngày lúc kết thúc thí nghiệm NT1 NT2 NT3 Tỉ lệ sống (%) 100 80 60 40 20 10 11 12 13 14 Ngày thí nghiệm Đồ thị Tỷ lệ sống cá sau gây cảm nhiễm Edwardsiella ictaluri Đồ thị cho thấy, từ ngày thứ trở đi, cá bắt đầu chết lơ thí nghiệm Tuy nhiên, ban đầu khơng thấy có khác biệt tỷ lệ chết nghiệm thức Vào ngày thứ đến ngày thứ 10, tỷ lệ cá chết nghiệm thức có khác rõ rệt NT1 có tỷ lệ cá chết cao chết toàn vào ngày thứ 10, NT2 NT3 Trong NT có tỷ lệ cá cịn sống sau thí nghiệm cao Bảng thể tỷ lệ sống trung bình cá tra sau kết thúc thí nghiệm Bảng Tỷ lệ sống cá tra sau 14 ngày gây cảm nhiễm Edwardsiella ictaluri Nghiệm thức Tỷ lệ cá sống cá (%) NT1 (ĐC) 0,00 a ± 0,00 NT2 2,50 a ± 2,89 NT3 23,75 b ± 9,46 Ghi chú: Những giá trị nghiệm thức hàng dọc chứa ký tự giống sai khác khơng có ý nghĩa mức độ tin cậy 95% (P > 0,05) Kết bảng cho thấy, tỷ lệ sống cá sau 14 ngày cảm nhiễm với vi khuẩn Edwardsiella ictaluri nghiệm thức có khác nhau, NT3 có tỷ lệ sống cao (23,75%) Ở NT1 NT2, tỷ lệ sống cá thấp, 0% 2,5% Tỷ lệ sống NT1 NT2 khơng có khác biệt mặt thống kê (P > 0,05) Tuy nhiên, khác biệt tỷ lệ sống NT3 so với NT2 NT1 có ý nghĩa mặt thống kê (P < 0,05) Điều chứng tỏ, thức ăn có bổ sung 0,2% Nutribull có khả giúp cá kháng lại cảm nhiễm bệnh vi khuẩn E ictaluri gây tốt nhờ thành phần beta glucan nucleotide, từ nâng cao tỷ lệ sống cá Kết phù hợp với nghiên cứu cá hồi Atlantic (Salmo salar), sau gây cảm nhiễm với vi khuẩn gây bệnh Vibrio salmonicida V anguillarum, cá cho ăn thức ăn bổ sung beta glucan Kết nhận thấy, cá cho ăn thức ăn bổ sung beta glucan 145 có khả chống chịu bệnh tốt Thí nghiệm khác tiến hành cá hồi Atlantic, bổ sung beta glucan giúp cá có khả chống chịu tốt bệnh hoại tử mô tạo máu gây IHNV (Infectious Hematopoietic Necrosis Virus) Tương tự, loài cá nước cá trê cá nheo Mỹ (Ictalurus punctatus), bổ sung beta glucan giúp gia tăng tính đề kháng vi khuẩn gây bệnh Aeromonas hydrophila, Edwardsiella tarda Mặt khác, Burrells ctv (2001) tiến hành nghiên cứu ảnh hưởng thức ăn bổ sung nucleotide cá hồi Atlantic Trước cảm nhiễm cá với virus hai tuần, người ta tiến hành cho cá ăn thức ăn bổ sung nucleotide Quan sát tỉ lệ chết cá sau 53 ngày cảm nhiễm phương pháp tiêm với virus gây bệnh nhiễm trùng thiếu máu cá hồi (infectious salmon anaemia) kết cho thấy nhóm cá ăn thức ăn bổ sung nucleotide có tỉ lệ chết tích lũy 35,75% so với cá ăn thức ăn 48% Sự khác tỉ lệ chết hai nghiệm thức có ý nghĩa mặt thống kê Leonardi ctv (2003) báo cáo tất cá hồi vân cho ăn thức ăn bổ sung nucleotide sau 60 ngày sống sót tiêm virus IPN, tất cá tiêm virus cho ăn thức ăn chết (trích dẫn Heisuke ctv., 2007) Thí nghiệm Thí nghiệm gây sốc ammonia nồng độ cao 150 ppm Trong trình sốc tiến hành thu mẫu nước đo tiêu môi trường Kết tiêu mơi trường bể thí nghiệm thể bảng Bảng Kết phân tích mẫu nước thí nghiệm gây sốc ammonia Nghiệm thức Nhiệt độ (oC) pH Ammonia tổng (ppm) NH3 (ppm) Nghiệm thức 1Đ, 2Đ, Đ 0,0570 0,0004 26,5 Nghiệm thức 1, 2, 107 0,6720 Qua bảng nhận thấy, nghiệm thức đối chứng 1Đ, 2Đ, Đ có hàm lượng NH3 0,0004 ppm Với điều kiện nước trên, không thấy cá chết bể đối chứng Theo Nguyễn Phú Hòa (2000), hàm lượng NH3 thích hợp cho cá tơm nên mức giới hạn thấp 0,1 mg/L Do đó, kết hợp lý với nồng độ NH3 0,0004 ppm thấp, phù hợp cho cá sống hoạt động bình thường, khơng ảnh hưởng đến cá tra thí nghiệm Đối với nghiệm thức 1, 2, có hàm lượng NH3 0,6720 ppm Ở điều kiện gây độc chết cá tất bể Kết thể bảng 10 Bảng 10 Tỷ lệ cá chết trung bình sau thí nghiệm gây sốc ammonia Nghiệm thức Tỷ lệ cá chết sau thí nghiệm (%) NT1 (ĐC) 61,67 a ± 10,00 NT2 33,33 b ± 9,43 NT3 16,67 b ± 3,85 Ghi chú: Những giá trị nghiệm thức hàng dọc chứa ký tự giống sai khác khơng có ý nghĩa mức độ tin cậy 95% (P > 0,05) Dựa vào bảng 10 nhận thấy: Tỷ lệ chết nghiệm thức giảm dần từ NT1, NT2 thấp NT3 Kết tỷ lệ chết 61,67%; 33,33% 16,67% Sự khác biệt tỷ lệ chết trung bình cá NT1 so với NT2 NT3 có ý nghĩa mặt thống kê (P < 0,05) Tuy nhiên, tỷ lệ chết trung bình NT2 NT3 khơng có 146 khác biệt (P > 0,05) Điều chứng tỏ, thức ăn có bổ sung 0,1 % 0,2 % Nutribull có khả giúp cá chống lại sốc ammonia nồng độ cao Theo nghiên cứu Sheehan Lewis (1986) pH 7,8, nhiệt độ 22 oC LC50 cá nheo 0,7 – 2,2 ppm vịng 24 Nhìn chung, hàm lượng ammonia gây độc cá nheo khoảng từ 0,5 – mg/L Sự thích ứng với hàm lượng ammonia cao cá nheo thể qua tăng hàm lượng cortisol, hàm lượng đạt cực đại sau trở bình thường sau 24 (Tomasso ctv., 1981) Điều chứng tỏ pH 7, nhiệt độ 26,5oC nồng độ NH3 0,6720 ppm gây chết cá với tỷ lệ cao thí nghiệm chúng tơi phù hợp Thí nghiệm gây sốc độ mặn 15‰ cho cá thí nghiệm Cá nghiệm thức đối chứng hoạt động bình thường, điều chứng tỏ cá tra nghiệm thức lại chết yếu tố môi trường khác mà hóa chất gây sốc Kết tỷ lệ chết cá sau sốc độ mặn 24 48 thể đồ thị Tỉ lệ cá chết (%) 100.00 80.00 60.00 75.00a 65.00a 55.00a 50.00a Sau 24 Sau 48 40.00 18.33b 20.00 3.33b 0.00 NT1 NT2 NT3 Nghiệm thức Đồ thị Tỷ lệ cá chết sau 24 48 gây sốc độ mặn 15‰ Qua đồ thị cho thấy sau 24 giờ, tỷ lệ chết NT3 (cho ăn thức ăn bổ sung 0,2% Nutribull) thấp (3,33%), NT2 (18,33%) cao NT1 (50,00%) Sự khác biệt NT1 so với NT2 NT3 có ý nghĩa mặt thống kê (P < 0,05) Điều chứng tỏ cá ăn thức ăn bổ sung Nutribull (tỷ lệ 0,1% 0,2%) giúp cá chịu đựng với điều kiện stress độ mặn Sau 48 giờ, tỷ lệ chết nghiệm thức tăng dần NT3 (55,00%), đến NT2 (65,00%) cao NT1 (75,00%) Tuy nhiên, khác biệt nghiệm thức khơng có ý nghĩa xét mặt thống kê (P > 0,05) Điều hoàn toàn hợp lý 24 đầu, sức khỏe cá cịn tốt nên cá có khả chịu đựng với điều kiện độ mặn cao Do đó, khác biệt nghiệm thức thể rõ xác Tuy nhiên, kéo dài điều kiện sốc vòng 48 giờ, tất cá chịu đựng điều kiện sốc kéo dài, sức khỏe cá bị giảm theo thời gian Theo Nguyễn Tuần (2000), độ mặn 15‰, cá basa sống 72 Do đó, kết nghiên cứu chúng tơi hồn tồn phù hợp Rõ ràng, bổ sung Nutribull vào thức ăn với tỉ lệ 0,1 0,2% có tác dụng giúp cho cá tra thí nghiệm chịu đựng tốt với nhân tố gây stress (ammonia độ mặn) Điều lý giải thành phần glucuronolactone sản phẩm Nutribull kích thích gan tăng cường q trình thải muối ammonia làm cho cá tra thí nghiệm có khả chịu đựng tốt điều kiện gây sốc ammonia nồng độ cao gây sốc muối nồng độ cao 147 Gan nơi xảy chuyển hóa glucose khởi đầu enzyme Tiền chất glucuronolactone D-glucuronic acid (ở dạng UDP-glucuronic acid) tạo gan nhiều loài động vật Thành phần kết hợp với độc tố giúp hòa tan pha lỗng độc tố Từ giúp cho việc thải chất độc hiệu Một số nghiên cứu khác cho thấy, cá ăn thức ăn bổ sung nucleotide có khả chống chịu tốt với tác nhân stress chất lượng nước kém, nuôi mật độ cao, cá bị nhốt giữ (Burrells ctv., 2001; Low ctv., 2003) Thức ăn bổ sung nucleotide có khả tác động lên hệ miễn dịch cá cách hạn chế cortisol tiết cá bị stress Burrells ctv (2001) đưa giả thuyết thức ăn bổ sung nucleotide nâng cao khả chịu đựng stress cung cấp số chứng cách so sánh khả điều chỉnh thẩm thấu tăng trưởng cá hồi Atlantic cho ăn thức ăn bổ sung nucleotide với nhóm đối chứng sau gây stress Giả thuyết không chứng minh đầy đủ Leonardi ctv (2003) chứng minh cho cá ăn thức ăn bổ sung nucleotide giúp làm giảm mức độ cortisol huyết cá hồi vân sau 90 – 120 ngày cho ăn (trích dẫn Heisuke ctv., 2007) KẾT LUẬN Thức ăn bổ sung 0,2% Nutribull ảnh hưởng tốt lên tăng trưởng đáp ứng miễn dịch không đặc hiệu (tăng cường hoạt lực lysozyme,), giúp nâng cao khả đề kháng cá tra E ictaluri, giúp cá chịu đựng tốt với stress ammonia độ mặn cao Các tỷ lệ bổ sung Nutribull 0,1 0,2 % vào thức ăn khơng có tác dụng rõ ràng lên lượng ăn, hệ số chuyển đổi thức ăn tỉ lệ sống cá tra thí nghiệm TÀI LIỆU THAM KHẢO Nguyễn Phú Hòa, 2000 Bài giảng Chất lượng nước nuôi trồng thủy sản Khoa Thủy sản, Đại học Nơng Lâm, TP Hồ Chí Minh Nguyễn Tuần, 2000 Cơ sở sinh học sinh sản nhân tạo cá Basa (Pangasius bocourti Sauvage, 1880) Luận án tiến sĩ sinh học, Viện nghiên cứu nuôi trồng Thủy Sản II, TP Hồ Chí Minh Baulny M O D., Quentel C., Fournier,V., Lamour F., Gouvello R L., 1996 Effect of longterm oral administration of β-glucan as an immunostimulant or an adjuvant on some nonspecific parameters of the immune response of turbot Scophthalmus maximus Dis Aquat Org 26: 139–147 Burrells C., Williams P D., Forno P F., 2001 Dietary nucleotides: a novel supplement in fish feeds: Effects on resistance to disease in salmonids Aquaculture 199: 159-169 Engstad R E and Robertsen B., 1994 Specificity of a β-glucan receptor on macrophages from Atlantic salmon (Salmo salar L.) Developmental and Comparative Immunology 18 (5): 397-408 Ellis, A.E (1990) Lysozyme assays Techniques in Fish Immunology, Volume SOS Publication, 43 DeNormandie Ave, Fair Haven, NJ 07704-3303 USA, pp 101-103 Engstad R E., Robertsen B., Frivold E., 1992 Yeast glucan induces increase in activity of lysozyme and complement-mediated haemolytic activity in Atlantic salmon blood Fish Shellfish Immunol 2: 287–297 Heisuke N., Minoru S., Delbert M Gatlin, 2007 Dietary Supplements for the Health and Quality of Cultured Fish CABI Publisher, 244 pages 148 Jørgensen J B., Lunde H., Robertsen B., 1993 Peritoneal and head kidney cell response to intraperitoneally injected yeast glucan in Atlantic salmon, Salmo salar L J Fish Dis 16: 313–325 Li P., Gatlin D M., Neill W H., 2007 Dietary supplementation of a Purified nucleotide mixture transiently enhanced growth and deed utilization of juvenile red drum, Sciaenops ocellatus Journal of the World Aquaculture Society 38 (2): 281-286 Low C., Wadsworth S., Burells C., Secombes C J., 2003 Expression of immune genes in turbot (Scophthalmus maximus) fed a nucleotide-supplemented diet Aquaculture 221: 23-40 Raa J., 2000 The use of immune-stimulants in fish and shellfish feeds In: Avances en Nutrición Accola V Memorias del V Simposium Internacional de Nutrición Accola, pp 47-56 Sheehan R J and Lewis W M., 1986 Influence of pH and ammonia salts on ammonia toxicity and water balance in young channel catfish American Fisheries Society 115: 891 899 Thompson K D., Cachos A., Inglis V., 1995 Immunomodulating effects of glucans and oxytetracycline in rainbow trout, Oncorhynchus mykiss, on serum lysozyme and protection Diseases in Asian Aquaculture 11: 433–439 Tomasso J R., Goudie B A., Simco B A and Davis K B., 1980 Effects of environment pH and calcium on ammonia toxicity in channel catfish Transactions of the American Fisheries Society 109: 229 -234 149 ... CỨU Sản phẩm Nutribull: Sản phẩm Nutribull cơng ty Nutriway sản xuất, có thành phần gồm beta glucan, nucleotide, glucuronolactone amino acid Tác dụng sản phẩm giúp kích thích tăng trưởng, tăng. .. tăng trưởng cải thiện tỉ lệ sống nhiều lồi vật ni Nutribull sản phẩm chứa thành phần chủ yếu gồm beta glucan, nucleotide, glucuronolactone Đây chất có tác dụng kích thích miễn dịch, giúp cá tăng. .. vực dinh dưỡng sử dụng loại hoạt chất sinh học bổ sung vào thức ăn nhằm cải thiện sức khỏe vật nuôi beta glucan, nucleotide, mannan oligosaccharide (MOS), Các sản phẩm đánh giá có khả nâng cao