ĐẠI HOC NGUYỄN TÁT THÀNH NGUYEN TAT THANH THỤC HỌC - THỤC HÀNH - THỤC DANH - THỤC NGHIỆP KHOA CỒNG NGHỆ SINH HỌC KHÓA LUẬN TÓT NGHIỆP NGHIÊN CỨU XÁC ĐỊNH PHƯƠNG THỨC PHỐI TRỘN BỘT VÀ ĐẲNH giá ảnh hưởng CỦA VI TẢỊ HÀEMATOCOCCVSPLVV1ALISNẢữ TRONG THỨC ĂN NI CÁ LÊN SINH TRƯỞNG CỦA CÁ KOI TẠI TP HÒ CHÍ MINH Sinh viên thực : Nguyễn Hồng Tâm MSSV : 1511535940 GVHD : ThS Ông Bỉnh Nguyên TP HCM, 2020 MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN i MỤC LỤC ii TÓM TẮT iv SUMMARY V DANH MỤC CÁC HÌNH ẢNH vi DANH MỤC BẢNG BIẾU vii DANH MỤC CHŨ’ VIẾT TẮT viii ĐẶT VẤN ĐÈ ix CHƯƠNG TÓNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Vi tảo H pluivalìs 1.1.1 Sự phân bố H pỉuvialis 1.1.2 Hình thái tế bào vịng đời 1.1.3 Thành phần sinh hoá học vi tảo 1.2 Astaxanthin 1.2.1 Tổng quan Astaxanthin 1.2.2 Nguồn gốc Astaxanthin vi tảo 1.2.3 ủng dụng Astaxanthin thủy sản 1.3 Tong quan Cá Koi 1.4 Tình hình nghiên cứu ứng dụng vi tảo H pluvỉalis nuôi trồng thủy sản 10 1.4.1 Tình hình nghiên cứu nước 10 1.4.2 Tình hình nghiên cứu ngồi nước 11 CHƯƠNG NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN cứu 13 2.1 Nơi thực 13 2.2 Nội dung nghiên cứu 13 ii 2.3 Phương pháp nghiên cứu 14 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 17 3.1 Ket phân tích giá trị dinh dưỡng bột vi tảo H.pluvialis bị li trích astaxanthin 17 3.2 Ket nghiên cứu phối trộn bột vi tảo H pluvialis li trích astaxanthin vào thức ăn cho cá .19 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 30 TÀI LIỆU THAM KHẢO 32 PHỤ LỤC 35 iii TÓM TẤT Đe tài: “Nghiên cứu xác định phương thức phối trộn bột đánh giá ảnh hưởng ciia vỉ tảo Heantatococcus pluvialis vào thức ăn nuôi cá lên sinh trưởng cá Koi TP Hồ Chí Minh” thực từ tháng 5/2020 đen tháng 9/2020 phịng thí nghiệm Công Nghệ Sinh Học - Viên Khoa học Kỳ thuật Công nghệ cao Nguyễn Tất Thành - Trường Đại học Nguyễn Tất Thành 298 Nguyễn Tất Thành, phường 13, Quận 4, Tp Hồ Chí Minh, Với mục tiêu: Xác định giá trị dinh dưỡng bột vi tảo H pluvialis bị li trích astaxanthin, xác định phương thức phối trộn bột vi tảo H pluvialis vào thức ăn cho cá xác định ảnh hưởng cùa thức ăn bổ sung bột vi tảo lên sinh trưởng màu sắc cá Ket đạt được: Thành phần dinh dưỡng bã tảo H.pluvialis chứa: 35,5 % protein, 14,9 % béo, 36,8 % glucide, 4,48 % xơ thô Phương pháp xử lý bã vi tảo NaOH O,1M cho kết cao (0,3110 pg/ml) so với phương pháp lại (PPI: HC1 0,lM 0,4059 pg/ml, pp 3: Hấp 121 °C dung môi nước 0,1791 pg/ml, pp 4: Hấp 121 °C dung môi dầu 0,3578 pg/ml) Thức ăn phối trộn nghiên cứu đạt độ bền nước vào khoảng giờ, trình sấy phối trộn ảnh hưởng không đáng kể đen lượng astaxanthin cho vào ban đầu Ket thử nghiệm cá KOI cho thấy nhóm TNI, TN2, TN3 thức ăn có sằn thị trường có tác dụng tương tự lên màu sắc cá IV SUMMARY Subject: "Research to determine the method of mixing powder and evaluate the effect of microalgae Heamatococcus pluvialis on fish feed on growth and aesthetic value of koi fish in Ho Chi Minh City " was conducted from May 2020 to September 2020 at Biotechnology Laboratory - Nguyen Tat Thanh High-Tech Science and Technology Laboratory - Nguyen Tat Thanh University 298 Nguyen Tat Thanh, Ward 13, District 4, Ho Chi Minh City, With goals: Determining the nutritional value in astaxanthin microalgae powder H pluvialis, and determining the method of mixing microalgae powder H pluvialis to fish feed and determined the effect of microalgae fortified food on fish growth and color Result: The nutritional composition of H.pluvialis residue contains: 35.5 % protein, 14.9 % fat, 36.8 % glucide, 4.48 % crude fiber The method of treating microalgae with 0.1M NaOH gave the highest result (0.3110 pg/ml) compared with the other methods (PPI: 0.1M HC1 0.4059 pg/ml, pp 3: Autoclave at 121 °C in 0.1791 pg/ml aq in water solvent, pp 4: 121 °C in oil solvent 0.3578 pg/ml) The blended feed in our study was stable in water at about hours, during drying and mixing had a negligible effect on the initial amount of astaxanthin The experimental results on KOI fish showed that groups TNI, TN2, TN3 and food available on the market have similar effects on fish color V DANH MỤC CÁC HÌNH ẢNH Hình 1.1 Hình chụp qua kính hiển vi quang học hình thái tế bào H pluviaỉis Hình 1.2 Vịng đời H.pluvialis 10 Hình 1.3 Con đường sinh tổng họp astaxanthin vi tảo H.pluvialỉs25 Hình 1.4 Cá chép koi Hình 1.5 Các loại cá Koi nuôi Việt Nam 10 Hình 2.1 Bảng so màu để đánh giá màu sắc cá 34 16 Hình 3.1 Biểu đồ hàm lượng astaxanthin thu phưong pháp khác 23 Hình 3.2 Hàm lượng astaxanthin có thức ăn sau phối trộn 25 Hình 3.3 Thức ăn ngâm nước 27 Hình 3.4 Cá chép KOI trước sau nuôi 14 ngày 30 vi DANH MỤC BẢNG BIÉU Bảng 1.1 Thành phần vi tảo H pluvialis hai giai đoạn sinh trưởng khác 14 Bảng 1.2 Cấu trúc astaxanthin đồng phân hình học Bảng 3.1 Hàm lượng protein, glucide chất béo có bã tảo 17 Bảng 3.2 Sử dụng phương pháp phá vỡ vách tế bào vi tảo đe giải phóng chất dinh dường tế bào 19 Bảng 3.3 Thành phần dinh dưỡng cùa thức ăn thử nghiệm 24 Bảng 3.4 Thời gian rà cùa thức ăn thử nghiệm 25 Bảng 3.5 Khối lượng, chiều dài màu sắc cá Koi 27 vii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẤT DWG: Daily Weight gain (tốc độ tăng trưởng khối lượng bình quân/ngày) Đ/C: Đối Chứng H pluvialis: Haematococcus pluviaỉis ISO: International Organization for Standardization NT: Nghiệm Thức OD: Optical Density PP: Phưong Pháp PH: Potential of Hydrogen SGR: Specific Growth Rate (Tốc độ tăng trưởng đặc biệt) TACS: Thức Àn Có sẵn INVE TCVN: Tiêu Chuân Việt Nam viii ĐẶT VÁN ĐÈ Tính cấp thiết đề tài Cá chép Koi chủng loại cá cảnh nhiều người u thích, có tên khoa học Cyprinus carpio, hóa lai tạo với mục đích làm cảnh hồ nhỏ, chúng ni biến Nhật Bản Trong văn hóa nhật bản, cá chép Koi xem biểu tượng may mắn, giá trị cùa cá Koi từ 200 triệu hay lên đen hàng tỷ đồng phụ thuộc vào hình dáng màu sắc cá Tuy nhiên, hầu hết lồi cá cảnh khác, ni dường điều kiện nhân tạo, màu sắc cá trở nên nhợt nhạt Màu sắc cá định carotenoid (Sefc, 2014), cá tự tổng hợp carotenoid, chúng lấy chù yếu phần ăn Vì để cá trì màu rực rỡ, cần phải bổ sung vào khấu phần ăn chúng lượng carotenoid thích họp Trong ni trồng thủy sản, loại carotenoid thường sử dụng astaxanthin, ngồi việc cung cấp sắc tố, tạo màu sắc đẹp cho tôm, cá , astaxanthin cịn có chức tăng cường bảo vệ thể, chống lại oxi hóa, tăng cường hệ miễn dịch, sức đề kháng cùa tôm, cá Trong lồi vi tảo nước ngọt, H pluvialis có khả tích lũy hàm lượng astaxanthin đạt đến - % sinh khối khô Astaxanthin từ tảo H pluvialis chứng minh an toàn hiệu cho màu sắc thịt cá, có tác dụng tăng cường màu sắc thịt, tăng cường hệ thống chống ơxy hóa, tăng chất lượng trứng cá, giúp tăng trưởng tốt tăng tỷ lệ sống sót cá Tại Việt Nam, Mơ hình ni cấy vi tảo H pluvialis hệ thống Twin-layer porous substrate photobioreactor đă nghiên cứu thành công, hàm lượng astaxanthin thu đạt % sinh khối khô Mặc khác thị trường thức ăn cho cá cảnh Việt Nam, đa dạng nhiều chủng loại hầu hết điều sản phẩm nhập khẩu, với giá thành đắc đỏ, chất lượng khơng kiểm sốt chặc chẽ Do đó, toi định chọn đềi tài “Nghiên cứu xác định phương thức phối trộn bột đánh giá ảnh hưởng vi tảo Heamatococcus pluvialìs vào thức ăn ni cá lên sinh trưởng cá Koi TP Hồ Chí Minh” IX Mục tiêu ciia đề tài - Xác định giá trị dinh dưỡng bột vi tảo H pluvialis đă bị li trích astaxanthin; - Xác định phưong thức phối trộn bột vi tảo H pluvialỉs vào thức ăn cho cá; - Xác định ảnh hưởng cùa thức ăn bổ sung bột vi tảo lên sinh trưởng màu sắc cá X KÉT LUẬN VÀ ĐÈ NGHỊ Ket luận Thành phần dinh dưỡng bã tảo H.pluvialis chứa: 35,5 % protein, 14,9 % béo, 36,8 % glucide, 4,48 % xơ thô Phương pháp xử lý bã vi tảo NaOH O,1M cho kết cao (0,4059 pg/ml) so với phương pháp lại (PPI: HC1 O,1M 0,3110 pg/ml, pp 3: Hấp 121 °C dung môi nước 0,1791 pg/ml, pp 4: Hấp 121 °C dung môi dầu 0,3578 pg/ml) Thức ăn phối trộn nghiên cứu đạt độ bền nước vào khoảng giờ, trình sấy phối trộn ảnh hưởng không đáng kể đến lượng astaxanthin cho vào ban đầu Ket thử nghiệm cá Koi cho thấy nhóm TNI, TN2, TN3 thức ăn có sằn thị trường có tác dụng tương tự lên màu sắc cá Đề nghị Thời gian rà thức ăn ngắn nên cho cá ăn yếu tố bất lợi, thức ăn gây biến đoi màu nước nên dề dần đến tình trạng nhiễm nguồn nước dư thừa thức ăn Vì vậy, cần nghiên cứu thêm bo sung số thành phần bám dính để làm tăng độ bền khơng làm thay đoi môi trường nước nuôi cá Thời gian nghiên cứu ngắn chưa thể thấy ảnh hưởng lâu dài cá Koi, chưa thể đo yếu tố khác trọng lượng, chiều dài cá Koi 31 TÀI LIỆU THAM KHẢO Bold HC, Wynne MJ Introduction to the Algae: Structure and reproduction Englewood Cliffs, NJ: Prentice-Hall Inc 1985 Dragos N, Bercea V, Bica A, Druga B, Nicoara A, Coman c Astaxanthin production from a new strain of Haematococcus pluvialis grown in batch culture Ann Roman Soc Cell Biol 2010:15; (2): 353-361 Klochkova TA, Kwak MS, Han JW, Motomura T, Nagasato c, Kim GH Coldtolerant strain of Haematococcus pluvialis (Haematococcaceae, Chlorophyta) from Blomstrandhalvoya (Svalbard) Algae 2013;28(2): 185-192 Chekanov K, Lobakova E, Selyakh I, Semenova L, Sidorov R, Solovchenko A Accumulation of astaxanthin by a new Haematococcus pluvialis strain BM1 from the white sea coastal rocks (Russia) Mar Drugs 2014:12 (8): 4504-4520 Gacheva G, Dimitrova p, Pilarski p (2015) New strain Haematococcus cf pluvialis Rozhen-12- growth, biochemical characteristics and future perspectives Genet Plant Physiol 5(1): 29-38 Kim, D Y., Vijayan, D., Praveenkumar, R., Han, J I., Lee, K., Park, J Y., & Oh, Y K Cell-wall disruption and lipid/astaxanthin extraction from microalgae: Chlorella and Haematococcus Bioresource technology 2016:199, 300-310 Proctor VW Some controlling factors in the distribution of Haematococcus pluvialis Ecology 1957;38(3):457-462 Johnson EA, An GH Astaxanthin from microbial source Crit Rev Biotechnol 1991;ll(4):297-326 Gwak, Y., Hwang, Y s., Wang, B., Kim, M., Jeong, J., Lee, c G., & Jin, E Comparative analyses of lipidomes and transcriptomes reveal a concerted action of multiple defensive systems against photooxidative stress in Haematococcus pluvialis Journal of experimental botany 2014:65(15),4317-4334 10 Wang JF, Han DX, Sommerfeld MR, Lu CM and Hu Ọ Effect of initial biomass density on growth and astaxanthin production of Haematococcus pluvialis in an outdoor photobioreactor J Appl Phycol 2013;25: 253-260 11 Hagen c, Siegmund s, Braune w Ultrastructural and chemical changes in the cell wall of Haematococcus pluvialis (Volvocales, Chlorophyta) during aplanospore formation Eur JPhycol 2002;37(2): 217-226 12 Triki, A., Maillard, p., & Gudin, c (1997) Protoplasts from zoospores and cysts of Haematococcus pluvialis alga (Chlorophyta, Volvocales) Russian journal of plant physiology c/c offiziologiia rastenii 1997;44:809-815 13 Boussiba s (2000) Carotenogenesis in the green alga Haematococcus pluvialis' cellular physiology and stress response Physiol Plant 2000; 108(2): 111-117 32 14 Grewe, c B., & Griehl, c (2012) The carotenoid astaxanthin from Haematococcus pluvialis Microalgal Biotechnology: Integration and Economy eds c Posten and c Walter (Berlin} 2012; 129-144 15 Margalith PZ (1999) Production of ketocarotenoids by microalgae Appl Microbiol Biotechnol, 1999;51:431-438 16 Tominaga, K., Hongo, N., Karato, M., & Yamashita, E Cosmetic benefits of astaxanthin on humans subjects Acta Biochimica Polonica 2012;59(l) 17 Ambati, R R., Phang, s M., Ravi, s., & Aswathanarayana, R G Astaxanthin: sources, extraction, stability, biological activities and its commercial applications—a review Marine drugs, 12(V) 2014; 128-152 18 Lorenz, R T., & Cysewski, G R Commercial potential for Haematococcus microalgae as a natural source of astaxanthin Trends in biotechnology 2000; 18(4), 160-167 19 Tsubokura, A., Yoneda, H., & Mizuta, H (1999) Paracoccus carotinifaciens sp nov., a new aerobic gram-negative astaxanthin-producing bacterium International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology 1999;49( 1),277-282 20 Dominguez-Bocanegra, A R., Ponce-Noyola, T., & Torres-Munoz, J A (2007) Astaxanthin production by Phaffia rhodozyma and Haematococcus pluvialis' a comparative study Applied Microbiology and Biotechnology 2007;75(4),783791 21 Kim JH, Affan MA, Jang J, Kang MH, Ko AR, Jeon SM Morphological, molecular, and biochemical characterization of astaxanthin-producin of green microalga Haematococcus sp KORDI03 (Haematococcaceae, Chlorophyta) isolated from Korea J Microbiol Biotechnol 2015;25(2): 238-246 22 Andrewes, A.G, & Andrewes G.A Animal carotenoids IX On the absolute configuration of astaxanthin and actinioerythrin Acta Chem Scand B 28 1974:No 23 Turujman, s A., Warner, w G., Wei, R R., & Albert, R H Rapid liquid chromatographic method to distinguish wild salmon from aquacultured salmon fed synthetic astaxanthin Journal ofAOAC International 1997;80(3), 622-632 24 Yuan, c., Jin, z., & Xu, X Inclusion complex of astaxanthin with hydroxypropyl-P-cyclodextrin: uv, FTIR, 1H NMR and molecular modeling studies Carbohydrate polymers 2012;89(2), 492-496 25 Vidhyavathi, w Molecular and biochemical studies of astaxanthin biosynthesis in Haematococcus pluvialis [Doctoral dissertation], Inida : University of Mysore; 2008 26 Jin E, Lee CG, Polle JEW Secondary carotenoid accumulation in Haematococcus (ChlorophyceaeỴ biosynthesis, regulation, and biotechnology J Microbiol Biotechnol 2006; 16(6): 821-831 33 27 Tolasa s, Cakli s, Ostermeyer u Determination of astaxanthin and canthaxanthin in salmonid Elif Food Res Technol 2005/221(6): 787-791 28 Sheikhzadeh N, Panchah IK, Asadpour R, Tayefi-Nasrabadi H, Mahmoudi H Effects of Haematococcus pluvialis in maternal diet on reproductive performance and egg quality in rainbow trout (Ọncorhynchus mykissf Anim Reprod Sei 2012; 130(1-2): 119-123 29 Amar EC, Kiron V, Satoh s, Watanabe T Influence of various dietary synthetic carotenoids on bio-defense mechanisms in rainbow trout Oncorhynchus mykiss (Walbaum) Aquae Res 2ỚỚ7;32(1):162-173 30 Parisenti J, Beirao LH, Maraschin M, Mourino JL, Nascimento Viera F, Do Nascimento Vieira F, Bedin LH Pigmentation and carotenoid content of shrimp fed with Haematococcus pluvialis and soy lecithin Aquacult Nutr 2011; 17:530— 535 31 Li HX, Lu XJ, Li CH, Chen J Molecular characterization and functional analysis of two distinct liver-expressed antimicrobial peptide (LEAP-2) genes in large yellow croaker (Larimichthys croceaỴ Fish Shellfish Immunol 2014;38(2): 330339 32 Jagruthi c, Yogeshwari G, Anbazahan SM, Mari LS, Arockiarai J, Marianppan p, Sudhakar GR, Balasundaram c, Harikrishnan R Effect of dietary astaxanthin against Aeromonas hydrophila infection in common carp, Cyprinus carpio Fish Shellfish Immunol 2014;41(2): 674-680 33 Lê T L, Phạm D H, Nguyền V N Tran V K Ảnh hưởng cùa nguồn protein thực vật khấu phần thức ăn đến chất lượng nước sinh trưởng cá chép Koi (Cyprỉnus carpio, 1758) Bộ Nông nghiệp PTNT 2012 34 Alice Costa Kiperstok Optimizing immobilized cultivation of Haematococcus pluvialis for astaxanthin production [PhD Thesis], Cologne, German : The University of Cologne; 2016 35 Boonyaratpalin, M., and Unprasert, N Effects of pigments from different sources on colour changes and growth of red Oreochromis niloticus Aquaculture 1989; 79(1-4); 375-380 36 Vũ D G Dinh dưỡng thức ăn thủy sản Hà nội: Đại Học Nông Lâm HN; 2006 37 Zhang L, Ruan D, and Gao s Dissolution and regeneration of cellulose in NaOH/thiourea aqueous solution Journal of Polymer Science Part B: Polymer Physics 2002;40(14): 1521-1529 34 PHỤ LỤC PHỤ LỤC 1: KẾT QUẢ HÀM LƯỢNG DINH DƯỠNG CỦA THỨC ĂN Hàm lượng dinh dưỡng Cám Protein lipid thô cacbonhydrate Độ ấm % 55% 4,20% 1,50% 9% 200g 110g 8.4g 3g 18g Hàm lượng dinh dưỡng kết dính Protein lipid thơ cacbonhydrate Độ âm % 75% 2,50% 1,50% 9% 60g 45g 1.5g 0.9g 5.4g Hàm lượng dinh dưỡng bột ruốt Protein lipid thô cacbonhydrate Độ âm % 85% 10% 22% 10% 50g 42,5 g 5g llg 5g Tổng khối lượng trung bình thức ăn trộn Protein 64% lipid thô 4.8% cacbonhydrate 4.8% Độ ấm 9.2% 35 PHỤ LỤC 2: KẾT QUẢ CÁC PHƯƠNG PHÁP PHÁ VỠ VÁCH TẾ BÀO VI TẢO ĐẾ GIẢI PHÓNG CHẤT DINH DƯỠNG TRONG TẾ BÀO Bã tách bột • vi tảo + Acetone Mầu A 1:0.525 Mẩu A2:0.456 Mẩu A3:0.496 Ttb:0.490ug/ml y=0.665*0.490+0.008236 OD 530nm 0,5250 0,4560 0,4960 0,665 Hàm lượng Astaxanthin 0,49 0,3356 0,0082 36 Bã nguyên bột vi tảo + Acetone Mẩu B 1:0.334 0,334 0,3586 Mầu B2:0.340 0,34 67 Mẩu B3:0.402 0,402 Ntb:0.358ug/ml ¥=0.665*0.358+0.008236 Bã tách bột vi tảo + HC1 0,lM Mẩu c 1:0.432 0,432 0,4553 Mầu C2:0.496 0,496 33 MầuC3:0,438 0,438 Ttb:0.455ug/ml ¥=0.665*0.455+00.08236 Bã tách bột vi tảo + NaOH 0,lM Mẩu E 1:0.576 0,576 Mẩu E2:0.575 0,575 0,598 Mầu E3:0.643 0,643 Ttb:0.598 ug/ml ¥=0.665*0.598+0.008236 Bã Nguyên bột vi tảo + dầu 0,551 0,5256 G2:0.514 0,514 67 G3:0.512 0,512 Mẩu dấu chuân=0.22 DNtb:0.525-0.22=0.305ug/ml ¥=0.665*0.035+0.008236 0,2467 0,3110 0,4059 Gl:0.551 36 0,3578 Mầu Nguyên 4- enzym viscozym mẫu N:0.468ug/ml Y=0.665*0.468+0?008236 0,468 0,468 0,3195 Mầu Nguyên + Nước Mầu N:ố.274ug/ml Y=o.665*0.274+0.008236 0,274 0,274 0,19045 37 PHỤ LỤC 3: KẾT QUẢ KHÓI LƯỢNG CHIỀU DÀI CỦA CÁ KOI Đối 100mg/kg (+) chứng(-) Cá thê 3g Cá thê 3g Cá 4g Cá thê 3g Cá thê 3g Khối lượng trung bình cá thể Đối (-) chứng(+) Cá thê 3g Cá thê 2g Cá 2g Cá thê 1,5 g Cá thê 1,5g Khối lượng trung bình cá the Thức ăn thường (cám thái lan N]IVE) Cá thê 2,5g Cá 3g Cá 2,5 g Cá thê 2g Cá thê 3g Khối lượng trung bình ciia cá thể Thí nghiệm (50 g) Cá thê 4g Cá thê 3g Cá 3g Cá 2g Cá 3g Khối lượng trung bình cá thể Thí nghiệm 2’ Cá thê Cá thê M=5* 1*0.05*32=0.8 3,2g M=5* 1*0.05*2=0.5 2g M=5* 1*0.05*2.6=0.65 2,6g M=5* 1*0.05*3=0.75 3g (100 g) 4g 5g 38 Cá thê 5g Cá thê 5g Cá thê 4,5g Khối lượng trung bình ciia cá thể Thí nghiệm (150 g) 3' Cá thê 5g Cá thê 5g Cá 5g Cá 4g Cá 5g Khối lượng trung bình cá thể M=5* 1*0.05*4.7=1.75 4,7g M=5* 1*0.05*4.6=1.15 4„6g 39 PHỤ LỤC KẾT QUẢ SUMMARY Groups Count Sum 1,477 1,076 1,366 3 1,794 0,771 1,577 df Within Groups 55 0,22503 0,01191 Total 0,23695 Đ/Cl Đ/C2 PP1 PP2 PP3 PP4 ANOVA Source of Variation Between Groups 12 Average 0,49233 0,35866 0,45533 0,598 0,257 0,52566 MS 0,04500 0,00099 17 40 Variance 0,0012 0,00141 0,00124 0,00151 9,1E-O5 0,00048 F 45,3147 p-value 2,22E07 F crit 3,10587 PHỤ LỤC KẾT QUẢ ĐÁNH GIÁ MÀU SẮC CÁ SAU 14 NGÀY Đ/C(+) 8 Đ/C(.) 8 Cá Cá Cá Cá Cá NT1 9 TACS 8 NT2 9 NT3 9 P-value 0,01266 F erit SUMMA]RY Groups Đ/C(-) Đ/C(+) TACS NT1 NT2 NT3 Count 5 5 5 Sum 38 38 40 43 43 43 Average 7,6 7,6 8,6 8,6 8,6 ANOVA Source of Variation Between Groups ss 6,16666 df Within Groups 24 MS 1,23333 0,33333 Total 14,1666 29 41 Varianc e 0,3 0,3 0,5 0,3 0,3 0,3 F 3,7 2,620654 PHỤ LỤC 6: KẾT QUẢ PHÂN TÍCH GIÁ TRỊ DINH DƯỠNG TRONG BỘT VI TẢO H.PLUVIALIS ĐÃ BỊ LI TRÍCH ASTAXANTHIN p Ml -MMI2OW.2015I «411 SỔ KHOA KX •p CASE TRUNG TÁM D|CH vụ PHẢN TXHTHI nghiễm TP hơ chi minh M1 só mỉu Sarcptc Gtxlc BNI2KMIM44S MM12008 20 1514441 Tên khùch hàng/ Customer Địa chỉ/ fidtiwjH Tên mđa/ Vơeir cự 'satụpie CƠNC» NGHỂ TT? HỔ MÍNH KÉT QUÀ THỬ NGHIÊM TISTR&ORT BMKDO3/3-LHHOO Nfậy/ Date Ứ1AHQ020 TRƯỜNG BẠI HỌC NGUYỄN TÁ I THẢNH 298A NGƯYÊN TÁT THÀNH PHƯỜNG 13 QUÂN I THÀNH PHỔ I lò CH1 MINH VIET NAM HOEMATỌCOCCUS PLƯV1ALIS - SINH VIÊN NGUYÊN HOÀNG TÂM SÁ luợng' Quanlii) :1 Mõ ta mỉu' Sampie dticrtpnon : Dang vyn Ngày nhặn mỉu Dare ơfreceiving : 2UW2O2O Ngáy hẹn ira KH' /Aa/e tíỊ issue : 28.'li8/2020 STT/ Vo Chi tUu klỉm nghiịm/ Parameters Đen vị tính/ v'nU Kíl qui.' Jĩ»r/ử Phtrưng |>hA|>' Teư method Cko % I4»9(' phđn) TCVN 4331:2001 Glucidc % 34.Ỉ TCVN 4594:1988 Prottin % 55.5 (Nile tổng sỏ X 6J5) CASE.NS.0039(]ỉef AOAC 990.03) Xo thỏ % 4.48 CASE.NS.0022 (Ref Ref ANKOM Technology Mmỉxid 10) 1L.GIÁM DƠC.1 pp DI RECTOR Ptiy trách phơng thử nghiím/ í>ồ0 Thị Bội Hanh ĨVS NsiNtQ Thành Day www.case.Yn 42 PHỤ LỤC 7: KẾT QUẢ HÌNH THÁI TẾ BÀO VI TẢO CHUA QUA LI TRÍCH Hình thái tế bào vi tảo chưa qua li trích Hình dạng tế bào Số tế vào bị vỡ Số tế bào chưa vỡ Trên phải 125 348 Dưới phải 55 280 Trên trái 75 324 Dưới trái 50 275 43 PHỤ LỤC 8: KẾT QUẢ HÌNH THÁI TẾ BÀO VI TẢO ĐÃ ĐƯỢC LI TRÍCH Hình thái tể bào li trích Hình dạng tế bào Số tể bào bị vỡ Số tế bào chưa vỡ Trên phải 190 108 Dưới phải 130 65 Trên trái 155 95 Dưới trái 202 89 44 PHỤ LỤC 9: KỂT QUẢ KIẾM TRA LẠI HÀM LƯỢNG ASTAXANTHIN SAU KHI PHỐI TRỘN THÚC ĂN 45 ... dưỡng bột vi tảo H pluvialis bị li trích astaxanthin, xác định phương thức phối trộn bột vi tảo H pluvialis vào thức ăn cho cá xác định ảnh hưởng cùa thức ăn bổ sung bột vi tảo lên sinh trưởng màu... bột vi tảo H pluvialis đă bị li trích astaxanthin; - Xác định phưong thức phối trộn bột vi tảo H pluvialỉs vào thức ăn cho cá; - Xác định ảnh hưởng cùa thức ăn bổ sung bột vi tảo lên sinh trưởng. .. định phương thức phối trộn bột đánh giá ảnh hưởng vi tảo Heamatococcus pluvialìs vào thức ăn ni cá lên sinh trưởng cá Koi TP Hồ Chí Minh? ?? IX Mục tiêu ciia đề tài - Xác định giá trị dinh dưỡng bột