Đang tải... (xem toàn văn)
MỞ ĐẦU 1 CHƯƠNG I. TỔNG QUAN 2 1.1. Giới thiệu về cây chè 2 1.2. Thành phần hóa học của trà xanh 2 1.3. Các tác dụng dược lý của trà xanh 4 CHƯƠNG II. THỰC NGHIỆM 5 2.1. Đối tượng 5 2.2. Hóa chất và thiết bị 5 2.3. Phương pháp nghiên cứu 5 2.3.1. Phương pháp chiết xuất đun hồi lưu sử dụng cồn 5 2.3.2. Phương pháp phân tách catechin 5 2.3.3. Các phương pháp xác định cấu trúc 5 CHƯƠNG III. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 7 3.1. Kết quả chiết xuất catechin tổng số 7 3.2. Phân lập và xác định cấu trúc các hợp chất catechin 8 3.3. Bán tổng hợp dẫn xuất ocetyl của các catechin chè xanh và đánh giá hoạt tính chống oxy hóa 12
VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ TIỂU LUẬN MÔN CẤU TRÚC CÁC HỢP CHẤT HỮU CƠ VÀ HOẠT TÍNH SINH HỌC GIẢNG VIÊN: TS TRẦN HỒNG QUANG HỌC VIÊN: ĐÀO THỊ MAI LỚP: CHE2019B-1 Hà Nội - 2021 MỤC LỤC MỞ ĐẦU CHƯƠNG I TỔNG QUAN 1.1 Giới thiệu chè 1.2 Thành phần hóa học trà xanh .2 1.3 Các tác dụng dược lý trà xanh CHƯƠNG II THỰC NGHIỆM 2.1 Đối tượng 2.2 Hóa chất thiết bị 2.3 Phương pháp nghiên cứu 2.3.1 Phương pháp chiết xuất đun hồi lưu sử dụng cồn 2.3.2 Phương pháp phân tách catechin 2.3.3 Các phương pháp xác định cấu trúc CHƯƠNG III KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Kết chiết xuất catechin tổng số 3.2 Phân lập xác định cấu trúc hợp chất catechin .8 3.3 Bán tổng hợp dẫn xuất o-cetyl catechin chè xanh đánh giá hoạt tính chống oxy hóa .12 KẾT LUẬN 15 TÀI LIỆU THAM KHẢO .16 MỞ ĐẦU Chè sử dụng loại đồ uống phương thuốc y học phương đông từ hàng ngàn năm trước Công nguyên Tuy nhiên, việc đẩy mạnh nghiên cứu chế tìm cách ứng dụng hoạt chất phenolic chè xanh vào y học đại nửa sau kỷ 20 Cho đến nay, với hoạt tính chống ôxy hóa mạnh, hợp chất catechin chè xanh (chiếm tới 30 % hàm lượng khô) sử dụng mỹ phẩm thực phẩm chức Trong Y học, catechin áp dụng điều trị nhiều loại bệnh tim mạch, viêm ung thư Các hoạt chất đặc biệt hiệu sử dụng phối hợp với biệt dược xử lý bệnh viêm, dị ứng, tim mạch alzheimer, béo phì, tiểu đường không phụ thuộc Insulin, parkinson, HIV-1, ung thư da số loại ung thư khác Năm 2006, Cục Quản lý Dược Thực phẩm Hoa Kỳ công nhận cao chiết chè xanh, polyphenol chè xanh catechin loại Dược phẩm thực phẩm chức phép sử dụng Mỹ [1] Trong chè xanh, thành phần catechin chủ yếu Epigallocatechin gallat (EGCG, có hàm lượng > 50 % tổng catechin) chất có hoạt tính mạnh Hiện công ty Dược phẩm giới tách riêng EGCG, đăng ký thương mại hóa thành dược chất có tác dụng tác nhân đơn Tại thị trường Việt Nam, xuất nhiều sản phẩm mỹ phẩm, thực phẩm chức dƣợc phẩm chứa polyphenol chè xanh EGCG nguồn gốc nhập từ Trung Quốc (Nguồn: Cục Quản lý Dược Bộ Y tế 2008) CHƯƠNG I TỔNG QUAN 1.1 Giới thiệu chè Trà đồ uống phổ biến tiêu thụ toàn giới Trà, từ Camellia sinensis , tiêu thụ nhiều nơi khác giới dạng trà xanh, đen trà Ô long Tuy nhiên, số tất điều này, tác động đáng kể sức khỏe người quan sát thấy uống trà xanh [2] Trà xanh xuất từ Ấn Độ sang Nhật Bản vào kỷ 17 Người ta ước tính khoảng 2,5 triệu chè sản xuất năm khắp giới, với 20% sản xuất dạng chè xanh, chủ yếu tiêu thụ Châu Á, số vùng Bắc Phi, Hoa Kỳ Châu Âu [3] Mối liên hệ việc tiêu thụ chè, đặc biệt chè xanh sức khỏe người từ lâu đánh giá cao [4, 5] Trà xanh trà đen chế biến khác trình sản xuất Để sản xuất trà xanh, tươi sau thu hoạch hấp để ngăn trình lên men, cho sản phẩm khơ, ổn định Q trình hấp phá hủy enzym chịu trách nhiệm phá vỡ sắc tố màu cho phép trà giữ màu xanh trình sấy Các quy trình bảo tồn polyphenol tự nhiên liên quan đến đặc tính tăng cường sức khỏe Khi trà xanh lên men thành Ô long sau trà đen, hợp chất polyphenol (catechin) trà xanh đime hóa để tạo thành nhiều loại theaflavins, loại trà có hoạt tính sinh học khác Hình 1.1 Hình ảnh chè 1.2 Thành phần hóa học trà xanh Thành phần hóa học trà xanh phức tạp: protein (15-20% trọng lượng khô), mà enzym chúng chiếm phần quan trọng; axit amin (1-4% trọng lượng khô) theanine 5- N-ethylglutamine, axit glutamic, tryptophan, glycine, serine, axit aspartic, tyrosine, valine, leucine, threonine, arginine lysine; carbohydrate (5-7% trọng lượng khô) cellulose, pectins, glucose, fructose sucrose; khoáng chất nguyên tố vi lượng (5% trọng lượng khô) canxi, magiê, crom, mangan, sắt, đồng, kẽm, molypden, selen, natri, phốt pho, coban, stronti, niken, kali, flo, nhôm; lượng vi lượng lipid (axit linoleic α-linolenic), sterol (stigmasterol), vitamin (B, C, E), bazơ xanthic (caffein, theophylline), sắc tố (diệp lục, carotenoid) hợp chất dễ bay (aldehyde, rượu , este, lacton, hiđrocacbon) Do tầm quan trọng to lớn diện khoáng chất trà, nhiều nghiên cứu xác định hàm lượng chúng trà [ 6] Lá tươi chứa trung bình 3-4% ancaloit gọi methylxanthines, chẳng hạn caffein, theobromine theophylline [7] Ngồi ra, cịn có axit phenolic axit gallic axit amin đặc trưng theanine [7] Bảng 1.1 Thành phần (%) hợp chất trà xanh [6] STT Hợp chất Hàm lượng (%) Chất đạm 15 Axit amin Chất xơ 26 Carbohydrate khác Lipid Sắc tố Khoáng chất Hợp chất phenolic 30 Trà xanh có chứa polyphenol, bao gồm flavanol, flavandiols, flavonoid axit phenolic; hợp chất chiếm tới 30% khối lượng khơ Hầu hết polyphenol trà xanh (GTP) flavonols, thường gọi catechin Các sản phẩm chiết xuất từ trà xanh chủ yếu chiết xuất từ trà xanh dạng lỏng bột với tỷ lệ polyphenol khác (45-90%) hàm lượng caffein (0,4-10%) Các flavonoid trà xanh catechin khác nhau, tìm thấy với số lượng nhiều trà xanh so với trà đen trà long [8] Có bốn loại catechin chủ yếu tìm thấy trà xanh: epicatechin, epigallocatechin, epicatechin-3gallate EGCG [9] Các phương pháp chuẩn bị ảnh hưởng đến catechin mặt định lượng chất lượng; lượng catechin khác chè ban đầu khác biệt giống, nguồn gốc điều kiện trồng trọt [10] Việc chuẩn bị trà xanh tươi khơng thể chiết xuất hồn tồn catechin từ lá; đó, nồng độ tìm thấy khác với giá trị tuyệt đối xác định thơng qua q trình chiết xuất hồn tồn [11] Hơn nữa, catechin tương đối không ổn định thay đổi mặt định lượng chất lượng khung thời gian thí nghiệm [12, 13] Do đó, khơng thể so sánh liều uống nghiên cứu động vật việc định lượng catechin trước dùng thường 1.3 Các tác dụng dược lý trà xanh Từ xa xưa (khoảng 2.700 năm trước đây), người dân phương Đông phát trà dùng chúng làm thuốc Sau thời gian dài nghiên cứu ứng dụng người ta thấy rằng, dùng trà có tác dụng sau: tiêu viêm, kháng khuẩn, hưng phấn thần kinh, giảm xơ cứng động mạch, chống giảm xạ, chống ung thư, chống suy nhược, lợi tiểu, phòng ngừa sâu răng, giúp tiêu hóa, giảm đường, giảm huyết áp, giảm mỡ máu Trong số tài liệu thầy thuốc y dược cổ truyền lưu trữ (Bản thảo cương mục Lý Thời Trân, đời Minh) cho rằng, hỏa nguyên nhân hàng đầu gây hàng trăm thứ bệnh, uống trà giúp hạ hỏa Trong đó, Vĩnh Tây Thiền sư Nhật Bản cho rằng, trà tiên dược dưỡng sinh, diệu thuật nâng cao tuổi thọ Thần nông thảo kinh Tôn Hồng Diễn, đời Thanh viết, trà có vị đắng, uống vào tỉnh táo, sáng suốt, ngủ, sáng mắt, nhẹ người, Thực tế cho thấy, trà mang tác dụng ngăn ngừa sỏi thận, sỏi mật, cảm mạo, viêm khí quản, giải độc cho gan, giải rượu Trong trà có nhiều vitamin, vi lượng, chất khống cần thiết phịng trị nhiều chứng bệnh khác Tuy nhiên để tận dụng hết cơng trà, bạn cần biết sử dụng chúng Trà mang lại tác dụng lớn sức khỏe cách thực vô đơn giản, giúp tinh thần trở nên hưng phấn, giải trừ mệt nhọc, ngăn ngừa số bệnh lý Tuy nhiên tính chất gây hưng phấn nên làm cho tim đập nhanh Theo người suy nhược thần kinh, người có tiền sử tim đập nhanh, thần kinh, người tỳ vị hư nhược, phụ nữ có thai, người bệnh trĩ, táo bón, khơng nên sử dụng Để an toàn với sức khỏe, bạn nên tham khảo ý kiến thầy thuốc YHCT người có chun mơn để sử dụng chúng hiệu CHƯƠNG II THỰC NGHIỆM 2.1 Đối tượng Lá chè xanh - Camellia sinensis (L.) O.Kuntze thu mua từ hộ sản xuất kinh doanh chè huyện Đại Từ, Thái Nguyên, chè thái nhỏ đem sấy nhiệt độ 110oC 15 phút để diệt men, sau sấy lại đồng hóa đến độ ẩm trung bình - 10 % sau xay mịn đến kích thước rây 1,5 mm đóng vào túi HDPE kín, hút chân khơng, bảo quản tối nhiệt độ < 25oC 2.2 Hóa chất thiết bị Methanol, ethanol, ethyl acetate, n-hexane, sodium sunfate khan, sunfuric acid đặc, pyridine, silica gel Merck 60 (15 - 40 µm), Sephadex LH 20, Diaion HP 20, v.v Hóa chất dùng trình thực nghiệm hóa chất tinh khiết pA hãng Merck, Sigma Aldrich, hóa chất kỹ thuật Việt Nam, Trung Quốc Singapore 2.3 Phương pháp nghiên cứu 2.3.1 Phương pháp chiết xuất đun hồi lưu sử dụng cồn Đây phương pháp chiết phân tích polyphenol chè xanh chung áp dụng Trung Quốc giới, phương pháp tóm tắt sau: Chè vụn nghiền nhỏ chiết đun hồi lưu hệ thống chiết Soxhlet 20 lít với ethanol thời gian thích hợp Dịch chiết làm nguội, lọc cô kiệt loại ethanol áp suất thấp thu cao chè Tiếp đó, cao chè chiết phân bố loại tạp phân cực (defat) n-hexane Phần dịch nước đƣợc chiết phân bố với ethyl acetate để thu nhận Catechin Caffeine tách loại khỏi Polyphenol tổng số cách đun hồi lƣu với chloroform thời gian thích hợp Bột cao chiết sau loại hết caffeine lại gọi Catechin tổng số 2.3.2 Phương pháp phân tách catechin Các catechin EGCG nghiên cứu phân tách hệ thống sắc ký lỏng cao áp điều chế bán công nghiệp với hệ thống cột tách gồm cột Diaion HP 20 kết nối trực tuyến với cột Sephadex LH 20 2.3.3 Các phương pháp xác định cấu trúc Sắc kí lớp mỏng (TLC) Sắc ký lớp mỏng thực lớp mỏng Silica gel với hệ dung mơi Chloroform/Methanol/Axít citric 0,5 % - 3:2:0,2 (v/v);Chỉ thị UV/Vis 360 nm; Thuốc hiện: Von’s (Ce/NH4/MoO4) Sắc ký lỏng hiệu cao kết nối phổ khối lượng Các sản phẩm catechin phân lập từ chè xanh Việt Nam phân tích định tính định lượng sắc ký lỏng hiệu cao kết nối khối phổ (HPLC-MS) hệ thiết bị LC/MSD-Trap-SL Agilen 1100 Phổ cộng hưởng từ hạt nhân EGCG sản phẩm khác từ chè xanh EC, EGC, Caffeine dẫn xuất đƣợc khẳng định cấu trúc phổ cộng hưởng từ hạt nhân 1H 13C NMR máy NMR Brucke AVAN 500 MHz CHƯƠNG III KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Kết chiết xuất catechin tổng số Tiến hành lấy 100kg chè vụn nghiền nhỏ đến rây 1,5 mm sau nạp vào thiết bị trộn, khuấy trộn với 500 lít nước có pha 50 gam citric acid thành khối nguyên liệu nhão Nguyên liệu nạp vào phễu nạp máy chiết tiến hành chiết với tốc độ nạp liệu ~ 125 kg/giờ Dung môi chiết (dung dịch citric acid 0.05 ) bơm bơm định lượng vào đường nạp dung môi máy chiết với tốc độ ~ 150 lít/giờ theo đƣờng cấp dịch ngược chiều dịch chuyển nguyên liệu Tổng cộng sau h hoàn thành việc chiết 600 kg bột chè nhão Bã chiết (độ ẩm từ 40 - 50 %) vắt khô kiệt máy vắt ly tâm 1400 vòng/phút đem ép máy ép thủy lực với áp suất 75 kg/cm2 thành bánh có độ ẩm cuối cịn < 10 % Các dịch chiết, dịch lọc vắt dịch ép gộp lại tổng cộng ~ 1000 lít bơm vào thiết bị phản ứng hồi lưu có khuấy gia nhiệt Bổ sung chlohydric acid 1N đến pH ~ - 3; gia nhiệt đến 85°C khuấy liên tục nhiệt độ Sau phản ứng kết thúc, dịch chiết làm nguội xuống nhiệt độ phịng, tồn phần dịch chè bã lọc máy lọc ép thu lại dịch thủy phân Dịch thủy phân đưa vào hệ thống chiết phân bố tuần hoàn với chloroform theo tỷ lệ : thể tích (dịch chiết/chloroform) tiến hành chiết bơm khuấy trộn bơm ly tâm cao tốc (200 lít/phút) - 15 phút, để phân lớp tách thu riêng phần dịch nước phần dịch chloroform Sau cùng, dịch nước chiết lại lần với ethyl acetate hệ thống chiết phân bố tuần hoàn Dịch chiết ethyl acetate gộp lại, làm khan Na 2SO4 khan cô cất chân không để thu nhận “Catechin tổng số” thu hồi ethyl acetate Phần dịch chloroform cô kiệt 50°C, 350 mbar thu nhận cao diệp lục màu xanh đen tối chứa chủ yếu caffeine chlorophyll Đây nguyên liệu thô để tách tinh chế caffeine chlorophyll (sản phẩm phụ cho nghiên cứu tiếp theo) Quá trình thu nhận catechin tổng số từ dịch thủy phân thể hình 3.1 Hình 3.1 Sơ đồ quy trình thu nhận catechin tổng số từ dịch thủy phân 3.2 Phân lập xác định cấu trúc hợp chất catechin Hình 3.2 Sơ đồ phân tách catechin chè xanh: EC; EGC; EGCG Kết từ 25g Catechin tổng số thu phân đoạn phân đoạn III, V, VI VII chứa catechin chủ yếu chè xanh Các phân đoạn chứa EC, EGC EGCG loại kiệt dung môi nhiệt độ 55 oC, áp suất 80 mbar; chất tinh chế cách kết tinh lại dung mơi thích hợp Đánh giá phân đoạn III Từ kết phân tích liệu phổ (bảng 3.1), kết hợp với phân tích phổ HSQC HMBC, ta dự đốn hợp chất phân đoạn III thuộc nhóm chất flavan Kết hợp với so sánh tài liệu tham khảo, khẳng định, hợp chất có cấu trúc hồn tồn phù hợp với cấu trúc (2R,3R)-2-(3,4-dihydroxyphenyl)chroman3,5,7-triol (EC) Hình 3.3 Cấu trúc hóa học epi-catechin Bảng 3.1 Độ dịch chuyển hóa học epi-Catechin 10 Hình 3.4 Phổ 1H-NMR epi-catechin Hình 3.5 Phổ 13C-NMR epi-catechin Hình 3.6 Phổ DEPT epi-catechin Đánh giá phân đoạn V Từ độ chuyển dịch hóa học epi-Gallocatechin so sánh liệu phổ với hợp chất EC cho thấy có tương đồng, dự đốn hợp chất 11 phân đoạn V thuộc nhóm flavan Kết hợp với tư liệu phổ tham khảo, khẳng định, hợp chất có cấu trúc hồn tồn phù hợp với cấu trúc (2R,3R)2-(3,4- trihydroxy-phenyl)chroman-3,5,7-triol (EGC) Kết phân tích phổ cộng hưởng từ hạt nhân 1D 2D NMR cho thấy cấu trúc phù hợp với (2R,3R)-2(3,4,5- trihydroxyphenyl)chroman-3,5,7-triol (EGC) Hình 3.7 Cấu trúc hóa học epi- Gallocatechin Đánh giá phân đoạn VI, VII Từ phân tích liệu phổ so sánh với phổ hợp chất III, V tư liệu tham khảo, khẳng định hợp chất có cấu trúc phù hợp với (2R,3R)-2-(3,4,5-trihydroxyphenyl)chroman-3,5,7-triol (EGCG) Hình 3.8 Cấu trúc hóa học epi- Gallocatechin gallate 3.3 Bán tổng hợp dẫn xuất o-cetyl catechin chè xanh đánh giá hoạt tính chống oxy hóa Hoạt tính dọn gốc tự catechin chè xanh cao hẳn chất chống ơxi hóa vitamin C, vitamin E, resveratrol… [14] Tuy nhiên catechin dễ bị phân hủy nhiệt độ ánh sáng, làm cho khả ứng dụng chúng bị giới hạn nhiều Những nghiên cứu gần cho thấy dẫn xuất 12 catechin có khả ứng dụng rộng rãi tính bền cao Thậm chí số dẫn xuất catechin chè xanh xuất hoạt tính mạnh EGCG, chẳng hạn nhƣ dẫn xuất metyl catechin có hoạt tính chống dị ứng cao [15], dẫn xuất acetyl catechin có hoạt tính ức chế protein mạnh [16, 17], dẫn xuất glycosyl catechin khó bị ơxy hóa chuyển màu (antibrowning) [18] Do đó, ngày nhiều nghiên cứu tập trung vào cải biến catechin nhằm tăng độ bền khả ứng dụng chúng Trong luận án thực acyl hóa chất EC, EGC EGCG nhằm tạo dẫn xuất acetyl catechin, khảo sát đánh giá mức độ suy giảm khả bị ôxy hóa dẫn xuất Phản ứng bán tổng hợp thực với điều kiện phản ứng đơn giản, dễ thực Hóa chất sử dụng an tồn, dễ kiếm Khơng sử dụng hóa chất độc hại pyridin [19], N,N- dimethyl amino pyridin [20] Đây ưu điểm lớn phản ứng Từ khảo sát đánh giá mức độ suy giảm khả bị ơxy hóa dẫn xuất Phản ứng acyl hóa catechin từ nguyên liệu đầu EC, EGC EGCG (sản phẩm tách, tinh chế cột sắc ký) acyl hóa anhydrit acetic nhiệt độ 0-5 oC 24h Theo sơ đồ phản ứng sau: 13 Hình 3.9 Sơ đồ phản ứng acyl hóa catechin Kết thử hoạt tính dọn gốc tự DPPH catechin dẫn xuất Oacetyl thu bảng 3.2 14 Bảng 3.2 Kết khảo sát hoạt tính chống oxy hóa Catechin dẫn xuất O-acetyl Kết thử hoạt tính chống oxy hóa cho thấy epi-catechin acetate có hoạt tính giảm 7,5 lần so với chất gốc EC, epi-gallocatechin acetate có hoạt tính giảm 10 lần so với chất gốc EGC; dẫn xuất EGCG acetate suy giảm hoạt tính nhất, ~ lần so với EGCG nhƣng lại có hoạt tính mạnh Hoạt tính chống oxy hóa dẫn xuất giảm cao với giá trị EC50 từ 34,58 52,99 µg/ml Tính tan nước dẫn xuất gần nhƣ khơng thay đổi: epi-Catechin acetate chất khó tan nước EC, dẫn xuất EGC acetate EGCG acetate tan tốt nước Hoạt tính chống oxy hóa dẫn xuất giảm lại làm tăng độ bền dẫn xuất điều kiện thường, nhờ mà khả ứng dụng dẫn xuất tăng lên 15 KẾT LUẬN Đã đánh giá khả dọn gốc tự EC50 catechin chè xanh EC, EGC, EGCG tương ứng 7,08; 4,60; 5,00 μg/ml Kết cho thấy, nhóm hydroxy-aren cấu trúc catechin có vai trị quan trọng hoạt tính chống ơxy hóa chất Đã nghiên cứu bán tổng hợp dẫn xuất O-acetyl catechin EC, EGC EGCG không sử dụng dung môi pyridin Đã đánh giá khả dọn gốc tự dẫn xuất acetate so sánh với catechin gốc, resveratrol Các dẫn xuất acetyl có hoạt tính dọn gốc tự suy giảm so với catechin gốc trì mức cao: EC O-acetyl; ECG O-acetyl EGCG O-acetyl có giá trị EC50 tương ứng 45,64 µg/ml; 52,99 µg/ml 34,58 µg/ml Sự suy giảm hoạt tính dọn gốc tự dẫn xuất catechin O-acetyl lại làm tăng tính bền ổn định chất 16 TÀI LIỆU THAM KHẢO Zaveri Nurulain T (2006), “Green tea and its polyphenolic catechins: Medicinal uses in cancer and noncancer applications”, Life Sciences, 78, 2006, pp 2073-2080; Cabrera C, Artacho R, Giménez R Beneficial effects of green tea: a review J Am Coll Nutr 2006;25:79–99 Japanese Green Tea Online.com Weisburger JH Approaches for chronic disease prevention based on current understanding of underlying mechanisms Am J Clin Nutr 2000;71(6):1710S– 1714S Sato T, Miyata G The nutraceutical benefit, part I: green tea Nutrition 2000;16:315–317 doi: 10.1016/S0899-9007(99)00301-9 Belitz DH, Grosch W Quı'mica de los Alimentos Zaragoza: Acribia; 1997 Graham HN Green tea composition, consumption, and polyphenol chemistry Prev Med 1992;21:334–350 doi: 10.1016/0091-7435(92)90041-F Vinson JA Black and green tea and heart disease: a review Biofactors 2000;13:127–132 doi: 10.1002/biof.5520130121 Sano M, Tabata M, Suzuki M, Degawa M, Miyase T, Maeda-Yamamoto M Simultaneous determination of twelve tea catechins by high-performance liquid chromatography with electrochemical detection Analyst 2001;126:816–820 doi: 10.1039/b102541b 10 Khokhar S, Magnusdottir SGM Total phenol, catechin, and caffeine contents of teas commonly consumed in the United Kingdom J Agric Food Chem 2002;50:565–570 doi: 10.1021/jf010153l 11 Fernandez PL, Martin MJ, Gonzalez AG, Pablos F HPLC determination of catechins and caffeine in tea Differentiation of green, black and instant teas Analyst 2000;125:421–425 doi: 10.1039/a909219f 12 Chen ZY, Zhu QY, Wong YF, Zhang Z, Chung HY Stabilizing effect of ascorbic acid on green tea catechins J Agr Food Chem 1998;46:2512–2516 doi: 10.1021/jf971022g 13 Chen ZY, Zhu QY, Tsang D, Huang Y Degradation of green tea catechins in tea drinks J Agr Food Chem 2001;49:477–482 doi: 10.1021/jf000877h 14 Rice-Evans C.A., Miller N.J., Bolwell P.G., Bramley P.M., Pridham J.B (1995), “The relative antioxidant activities of plant-derived polyphenolic flavonoids”, Free Radical Research, 22 (4), 1995, pp 375-383; 17 15 Sano M., Suzuki M., Miyase T (1999), “Novel anti-allergic catechin derivatives isolated from oolong tea”, J Agric Food Chem., 47 (5), 1999, pp 1906-1910; 16 Lanis-Piwowar K.R., Huo C., Chen D (2007), “A novel prodrug of the green tea polyphenol (-)-Epigallocatechin-3-Gallate as a potential anticancer agent”, Cancer Research, 67 (9), 2007, pp 4303-4310; 17 Vyas S., Shama M., Sharma P.D., Singh T.V (2007), “Design, semisynthesis, evaluation O-acyl EGCG as antitumor agents”, J Agric Food Chem., 55 (15), 2007, pp 6319-6324; 18 Moon Y.H., Lee J.H., Ahn J.S (2006), “Synthesis, structure analyses, and characterization of novel epigallocatechin gallate (EGCG) glycosides using the glucansucrase from Leuconostoc mesenteroides B-1299CB”, J Agric Food Chem., 54 (4), 2006, pp 1230-1237 19 Hợp N.H (1972), “Hóa học Hóa sinh chế biến chè”, Nhà xuất Nông nghiệp, Hà Nội, 1972; 20 Chang C.J., Chiu K.L., Chen Y.L and Chang C.Y (2000), “Separation of catechins from green tea using carbon dioxide extraction”, Food Chem., 68 (1), 2000, pp.109-113; 18 ... men thành Ơ long sau trà đen, hợp chất polyphenol (catechin) trà xanh đime hóa để tạo thành nhiều loại theaflavins, loại trà có hoạt tính sinh học khác Hình 1.1 Hình ảnh chè 1.2 Thành phần hóa. .. hóa catechin Kết thử hoạt tính dọn gốc tự DPPH catechin dẫn xuất Oacetyl thu bảng 3.2 14 Bảng 3.2 Kết khảo sát hoạt tính chống oxy hóa Catechin dẫn xuất O-acetyl Kết thử hoạt tính chống oxy hóa. .. nhiên, việc đẩy mạnh nghiên cứu chế tìm cách ứng dụng hoạt chất phenolic chè xanh vào y học đại nửa sau kỷ 20 Cho đến nay, với hoạt tính chống ơxy hóa mạnh, hợp chất catechin chè xanh (chiếm tới