Đang tải... (xem toàn văn)
Kháu luân tót nghiệp ĐOÀN THỊ THÚY VIỆN ĐẠI HỌC MỚ HÀ NỘI KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC ĩoBQcễỉ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP NGHIÊN cúu XÂY DỤNG QUY TRÌNH SẢN XUẤT SINH KHÓI VI KHUÁN TÍA QUANG HỢP CÓ KHẢ NÀNG SINH.
ĐỒN THỊ THÚY Kháu ln tót nghiệp VIỆN ĐẠI HỌC MỚ HÀ NỘI KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC ĩoBQcễỉ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP NGHIÊN cúu XÂY DỤNG QUY TRÌNH SẢN XUẤT SINH KHĨI VI KHN TÍA QUANG HỢP CĨ KHẢ NÀNG SINH TƠNG HỢP ACID BÉO KHÔNG NO (MUFAs VÀ PUFAs) sử DỤNG LÀM THÚC ĂN TUOĨ SĨNG TRONG NI TRỒNG THỦY SẢN Tên sinh viên : Đồn Thị Thúy Ngành : Cơng nghệ sinh học Lóp : 1302 Mã sinh viên : 13A31010162 GV hướng dẫn : TS Hồng Thị Yến Hà Nội-2017 Khóa ln tơt nghiệp ĐỒN THI THÚY LỜI CẢM ƠN Tơi xin bày tở lòng biết ơn sâu sắc tới TS Hồng Thị Yến - Cán Phịng Thí nghiệm trọng điềm Công nghệ gen thuộc Viện Công nghệsinh học - Viện Hàn lâm Khoa học & Công nghệ Việt Nam, người thầy tận tình hướng dần, tạo điều kiện thuận lợi chia sẻ khó khăn suốt thời gian thực hồn thành khóa luận Tơi xin chân thành cảm ơn TS Bùi Văn Ngọc - nhóm trường cụm gen 7, chị Trần Thị Thu Quỳnh chị Trịnh Thị Thùy Linh cán kỹ thuật viên cùa Phòng Thí nghiệm trọng điếm Cơng nghệ gen, tận tình chi bão, giúp đỡ cho ý kiến đóng góp bố ích cà cơng việc sống Tơi trân trọng tình cảm giúp đỡ q báu Tiếp theo, tơi xin gừi lời cảm ơn Thầy, Cô khoa Công nghệsinh học - Viện Đại học Mớ Hà Nội tận tình dạy bão tơi suốt q trình học tập trường Thư viện Viện Đại học Mở Hà Nội Cuối cùng, tơi xin bày tỏ lịng biết ơn vơ hạn tới Bố, Mẹ tồn người thân gia đình, tồn thê bạn bè, ln bên cạnh giúp đỡ, động viên, khuyến khích, trờ thành nguồn động lực lớn lao thúc tơi đoi mặt, vượt qua khó khăn suốt thời gian qua Hà Nội, ngày 15 thángO5 năm 2017 Sinh viên thực Đồn Thị Thúy ii Khóa ln tơt nghiệp ĐỒN THI THÚY MỤC LỤC LỜI CÁM ƠN i LỜI CAM ĐOAN iii MỤC LỤC iv DANH MỰC BẢNG vi DANH MỤC HÌNH vii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT viii TÓM TẮT X PHẦN I: MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích 1.3 Nội dung PHẦN II: TỒNG QUAN 2.1 Giới thiệu vi khuẩn tía quang hợp 2.2 ửng dụng VKTQH làm thức ăn tươi.sống nuôi trồng thủy sản giới 2.2.1 Cơ sở khoa học cua việc sử dụng vi táo vi khuân làm nguồn thức ăn tươi sống nuôi trồng thúy sản 2.2.2 Giá trị dinh dưỡng cùa VKTQH không lưu huỳnh 2.2.3 Sứ dụng VKTQH làm thức ăn cho gia súc, gia câm nuôi trông thúy săn 2.2.4 2.3 Công nghệ sàn xuất sinh khối VKTQH 11 ứng dụng VKTQH làm thức ăn tươi sống nuôi trồng thúy sản Việt Nam 13 PHẦN III: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN cứu 15 3.1 3.1.1 Vật liệu hóa chất 15 Vật liệu 15 3.1.2 Hóa chất 15 3.1.3 Môi trường nuôi cấy 15 iv Khóa luân tơt nghiệp 3.1.4 ĐỒN THI THÚY Thiết bị máy móc 15 Phương pháp nghiên cứu 16 3.2 3.2.1 Phương pháp nuôi cấy VKTQH 16 3.2.2 Phương pháp đánh giá sinh trướng cùa VKTQH .16 3.2.3 Phương pháp xác định ánh hướng cùa nhiệt độ 17 3.2.4 Phương pháp xác định ánh hướng cùa pH 17 3.2.5 Phương pháp xác định ảnh hưởng cùa nồng độ muôi 18 3.2.7 Phương pháp xác định ánh hướng oxy 18 3.2.8 Phương pháp lựa chọn hàm lượng bột đậu tương 19 3.2.9 Phương pháp lựa chọn hàm lượng cao nám men 19 3.2.10 Phương pháp xác định hàm lượng lipit tông sô 20 3.2.11 Phương pháp sắc ký khí phoi phơ 20 PHẦN IV: KÉT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 21 Ảnh hưởng số điều kiện ngoại cánh đến sinh trưởng chúng 4.1 VKTQH lựa chọn^|ìtr vjệfl y.jện.0ạị.|tọe.y0f.Ị4Ặ.ĩ^ệị 22 ỉ Anh hưởng cùa nhiệt độ 22 4.1.2 Anh hưởng cùa pH ban đầu 24 4.1.3 Anh hường cùa nồng độ muối 25 4.1.4 Anh hường cùa oxy 27 4.1.5 Anh hưởng cùa cường độ ánh sáng 28 4.2 Nghiên cứu quy trình săn xuất sinh khối VKTQH 30 4.3 Xây dựng quy trình sản xuất sinh khối VKTQH quy mơ pilot nhỏ (120 lít/bể) 33 4.4 Phân tích đánh giá chất lượng sinh khối thu quy mơ pilot 120 lít/ bế 36 PHẦN V: KÉT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 38 TÀI LIỆU THAM KHÁO 39 PHỤ LỤC 44 Khóa ln tơt nghiệp ĐỒN THI THÚY DANH MỤC BẢNG Bàng 2.1 Hàm lượng protein, carbonhydrat, lipid, chất khoáng số lồi VKTQH khơng lưu huỳnh Băng 2.2 Hàm lượng, thành phần axit amin tế bào số lồi VKTQH khơng lưu huỳnh so với số nguồn SPC khác Báng 2.3 Ảnh hưởng nguồn thức ăn lên mức độ sống sót artemia Bàng 2.4 Ánh hưởng thức ăn lên tăng trường artemia Báng 4.1 Khá sinh trướng (theo AOD660), phần trăm lipid trongSKK tổng hợp acid béo không no chùng NA2.6 21 Bàng 4.2 Mức độ tích lũy sinh khối (theo AODftfio) cùa chủng NA2.6 khoảng nhiệt độ khác 23 Bâng 4.3 Mức độ tích lũy sinh khối (theo AOD660) cùa chủng VKTQH NA2.6 khoảng pH khác 24 Bàng 4.4.MỨC độ tích lũy sinh khối (theo AODftfto) chủng NA2.6 nồng độ muối khác 26 Bàng 4.5 Mức độ tích lũy sinh khối (theo AOD66()) chung NA2.6 điều kiện nuôi khác 28 Bàng 4.6 Mức độ tích lũy sinh khối (theo AODftM)) chúng NA2.6 cường độ sáng khác 29 Bàng 4.7 Mức độ tích lũy sinh khối khơ (theo AOD8(X)) chúng NA2.6 ni mơi trường có hàm lượng bột đậu tương khác 31 Bàng 4.8 Mức độ tích lũy SKK (theo AODgoo) chúng VKTQH NA2.6 ni mơi trường có hàm lượng cao nam men khác 32 Bàng 4.9 Ket quà hàm lượng sinh khối khô (g), lipid (%) hàm lượng acid béo không no (MUFAs PUFAs) cùa chủng NA2.6 36 vi Khóa ln tơt nghiệp ĐỒN THI THÚY DANH MỤC HÌNH Hình 2.1 Chuỗi thức ăn thủy vực tự nhiên Hình 4.1 Ket phân tích GC - MS chủng NA2.6 ni mơi trường TH 22 Hình 4.2 Mức độ tích lũy sinh khối (theo AODfM)) chùng NA2.6 khoáng nhiệt độ khác 23 Hình 4.3 Mức độ tích lũy sinh khối (theo AODfifio) cùa chùng VKTQH NA2.6 khoáng pH khác 25 Hình 4.4 Mức độ tích lũy sinh khối (theo AOD6W) cùa chùng NA2.6 nồng độ muôi khác 27 Hình 4.5.Mức độ tích lũy sinh khối (theo AOD660) cùa chúng NA2.6 điều kiện nuôi khác 28 Hình 4.6.Mức độ tích lũy sinh khối (theo AOD66o) cùa chùng NA2.6 cường độ sáng fc/zíỉ?fơWđW.Ỳn Y.lên.Đ.ậlJ.ìỌ.C MỚ Ỉ?í.à.N.ộl 29 Hình 4.7 Mức độ tích lũy sinh khối khơ (SKK) cùa chủng NA2.6 ni mơi trường có hàm lượng hột đậu tương khác 32 Hình 4.8 Mức độ tích lũy SKK chúng VKTQH NA2.6 ni mơi trường có hàm lượng cao nam men khác 33 Hình 4.9 Mơ hình nhân ni giong VKTQH cap 1, cap II 35 Hình 4.10 Phăn tích GC - MS thành phần acid béo chùng NA2.6 mơi trường TH (bình 120 lít) 36 vii Khóa ln tơt nghiệp ĐỒN THI THÚY DANH MỤC CHŨ VIẾT TẤT 3-PGA phospho glyxeric acid pl Microlitre ATP Adenosine triphosphate ARN Ribonucleic acid Bchl Bacteriochlorophyll bp Base pair bPOME Sinh khối VKTQH nuôi môi trường nước thải nhà máy dầu cọ PB Sinh khối VKTQH ni mơi trường hóa chất cs Cộng Cyt Cytochrome C18:l Thư viện Viện ĐạtítaỊc Mớ Hà Nội C16:0 Palmitic C18:0 Steric DNA Deoxyribonucleic acid ĐTVS Động vật thủy sản dNTPs Deoxynucleoside Triphosphate ED Doudoroff EMF Meyerhof FAO Food and Agriculture Organization KDG 2-keto-3-deoxy glucanae GS/GOGAT Glutamine synthase/ Glutamet synthase MUFA Monounsaturated fatty acids NAD Nicotinamide adenine dinucleotide viii Khóa ln tơt nghiệp NADH ĐỒN THI THÚY Nicotinamide adenine dinucleotide khử OD Optical Density PCR Polymerase Chain Reaction PEP PEP-synthase (phosphate enol pyruvate synthase) PUFA Polyunsaturated fatty acids s Lưu huỳnh SPC Sigle cell protein TAC Kreb acid cutric TNHH Trách nhiệm hữu hạn VK.TQH Vi khuẩn tía quang hợp Thư viện Viện Đại học Mớ Hà Nội Khóa ln tơt nghiệp ĐỒN THI THÚY TĨM TẤT Trong nghiên cứu này, sử dụng chùng VKTQH phân lập từ nước thái cùa nhà máy sàn xuất chế biến thúy sán Nghệ An Chúng VKTQH lựa chọn (ký hiệu NA2.6) có khả sinh trưởng mạnh (&OD(M)dạt 1,365 ± 0,067),sinh khối khô đạt 0.732 ± 0.016 (g/l), hàm lượng lipid đạt 27,59 ± 2,281% so với trọng lượng khơ Đặc biệt, chúng có tong hợp MUFAs PUFAs với hàm lượng là: 58,28%; 26,62% tông acid béo Qua nghiên cứu, xác định sinh trưởng toi ưucủa chúng VK điều kiện: ■ Nhiệt độ: 26°C- 28°c đạt 92% khoảng nhiệt độ 38°c 40°C so với khoáng nhiệt độ toi ưu ■ Khoảng pH rộng: 5,5-8,5 Mơ Hà Nội • ữủínồng độ hĩuối.từJ)^5-6%^ * Cường độ sáng từ 4.000 - 14.000 lux ■ Sinh trướng tối ưu điều kiện kỵ khí điều kiện vi hiếu khí đạt 90% so với sinh trướng ỡ điều kiện toi ưu Đã lựa chọn nguồn chat (bột đậu tương: 2g/l; cao nám men: lg/l) xây dựng quy trình sàn xuất sinh khoi VKTQH quy mơ pilot (120 lít) X PHẦN I: MÔ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề Với đường bờ biển trải dài 3.260 km với hệ thống sơng ngịi dày đặc, Việt Nam có điều kiện thuận lợi đế phát triển hoạt động khai thác nuôi trồng thủy sàn Theo Tống cục Thủy sản, kim ngạch xuất (XK) thúy sàn năm 2016 đạt khoáng tỷ USD tăng 6,5% so với năm 2015 Tống sàn lượng thủy sân đạt 6,7 triệu Trong đó: sản lượng khai thác 3,1 triệu tấn, sản lượng ni trồng 3,6 triệu tấn; diện tích ni trồng 1,3 triệu So với năm 2015, tống sản lượng thủy sản tăng 2,5% Thủy sản ngành kinh tế mũi nhọn Việt Nam, có giá trị ngoại tệ xuất khấu đứng hàng thứ tư ngành kinh tế quốc dân (sau dầu thô, gạo hàng may mặc) Hàng năm, xuất khấu thuý sản mang cho ngân sách Nhà nước khoán ngoại tệ lớn góp phần quan trọng việc I 11U V1VI1 v 1CII MỈU 1IUC IV1Ơ Id 1NU1 xây dựng phát triển đất nước Ngoài ra, thuỳ sàn cịnđóng vai trị quan trọng việc cung cấp thực phẩm cho nhân loạivà tạo công ăn việc làm cho nhiều cộng đồng dân cư đặc biệt vùng nông thôn ven biến Nghề khai thác nuôi trồng thúy sản cung cấp công ăn việc làm thường xuyên cho khoảng 1,1 triệu người (tương ứng với 2,9% lực lượng lao động) Với tiềm vô dồi điều kiện tự nhiên người, việc phát triền nuôi trồng, khai thác chế biến thủy sản phục vụ tiêu dùng nước xuất khấu mục tiêu sống cịn kinh tế Việt Nam Trong ni trồng thủy sản loại thức ãn tươi sống vi tảo động vật phù du thường sừ dụng giai đoạn sàn xuất giống Một so loài vi tảo thuộc chi Nannochloropsis, Chlorella, Chaetoceros lựa chọn.Tuy nhiên, sinh khối cùa vi tảo thu không cao không ổn định mùa vụ sàn xuất, không đáp ứng đủ nhu cầu thực tiền 35 4.4 Phân tích đánh giá chất trọng sinh khối thu 6' quy mô pilot 120 lít/ bễ Sau ngày (96h) ni cấy, chúng tơi tiến hành thu sinh khối tươi cách ly tâm 8.000 vịng/phút 15 phút, sau đem sấy khô (ờ 70(,C) đến trọng lượng không đổi Cuối cùng, đánh giá mức độ tích lũy sinh khối (theo SKK), hàm lượng lipidvà xác định thành phần axit béo GC - MS bế 120 lít Kết ỜBáng 4.9và Hình 4.10 Bảng 4.9 Kết hàm lưọng sinh khối khô (g), lipid (%) hàm luọng acid béo không no (MUFAs PUFAs) chủng NA2.6 Chủng VKTQH Chủng X NA2.6 thu sinh khối ly tâm Đặc diem X (bể 120 lít) Sinh khối khô (g/1) 2.114+0,224 Lipid 11(1' Vlẽn Yien L> MUFAs (%) bặW]^NỘ PUFAs (%) 44.69 23.03 Hình 4.10 Phân tích GC - MS thành phần acid béo chủng NA2.6 mơi trường TH (bình 120 lít) 36 Từ Báng 4.9 Hình 4.10 cho thấy, sinh khối khơ chùng NA2.6 đạt 2,114 ± 0,224 (g/1) hàm lượng lipid đạt 25.641+0,523%, hàm lượng MUFAs, PUFAs đạt 44,09% 23,03% Như vậy, so sánh hàm lượng lipid tồng số hàm lượng MUFAs, PUFAs tích bình lít bề 120 lít chúng tơi thấy: hàm lượng lipid (% trọng lượng khô) sinh khối tế bào VKTQH bể 120 lít (đạt 25,641 ± 0.523) tương ứng vớikhoảng93% so với hàm lượng lipid sinh khối tế bào bình lít (27,59 ± 2,281) Các acid béo không no sinh khối tế bào VKTQH cùa bình 120 lít (tính theo % tổng acid béo) MUFAs đạt: 44,69% PUFAs đạt: 23,03% tương ứng với 85% 87% so với hàm lượng MUFAs PUFAs sinh khối tế bào bình lít (MUFAs: 58,28%; PUFAs: 26.62%) Tuy nhiên, hàm lượng sinh khối khơ VKTQH bế 120 lít (đạt 2,114 + 0,224 ) gấp khoảng lần so với hàm lượng sinh khối khơ bình lít (0,732 ± 0.016) Tóm lại, từ kết nghiên cứu ảnh hưởng điểu kiện ngoại cảnh, lựa chọn nguồn cớ chất thích liợpì, chủng tơi xây dựng quy trình sản xuất sinh khối VKTQH quy mơ 120 lítỉbể Sau tiến hành kiếm tra chất lượng sinh khối, thấy hàm lượng lipid, acid béo không no noi dôi (MUFAs) acid béo không no đa nồidơi (PVFAs) bể ni VKTQH (120 lít) dạt đến gần 90% so với bình lít ni VKTQH quy mơ phịng thí nghiệm điều đặc biệt hàm lượng sinh khối khô bế 120 lít tăng lên gấp lần so vói ni VKTQH quy mơ phịng thí nghiệm Ket nghiên cứu có ý nghĩa vơ quan trọng việc giảm thiêu nguồn CO' chất nuôi VKTQH vào môi trường nuôi ầu trùng động vật biển 37 PHÀN V: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ KÉT LUẬN - Đã xác định điều kiện ngoại cành ảnh hường đen khả sinh trường chủng NA2.6 sau: ■ Nhiệt độ: tối ưu khoảng nhiệt độ 26{)c - 28°c đạt 92% khoảng nhiệt độ38"c - 40°C so với khoảng nhiệt độ tối ưu ■ Khoáng pH rộng: từ 5,5 - ■ Nồng độ muối rộng: từ 0,5 - 6% • Cường độ chiếu sáng: 4.000 - 14.000 lux ■ Oxy: tối ưu điều kiện kỵ khí điều kiện vi hiếu khí đạt 90% so với sinh trướng điều kiện tối ưu - Đãlựa chọn thành phầnmôi trường nuôi cấy (nồng độ bột đậu tương g/1 cao nấm men g/1) xây dựng quy trình sàn xuất sinh khối VKTQH quy mơ pilot (120 lít/bế) KIẾN NGHỊ - Tiếp tục nghiên cứu, tìm kiếm, bơ sung, thay nguồn chất đè giám thiểu tối đa nguồn chất có mơi trường ni vi khuấn đế tránh ô nhiễm môi trường nước nuôi trồng thuý sản - Xây dựng quy trình sán xuất sinh khối phục vụ nuôi trồng thủy hài sán quy mô lớn (3 - 5m’/bế) 38 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài Liệu Tiếng Việt Dương Đức Tiến (2006), Phân loại, phân lập, bảo quản số vi táo biền quy trình sán xuất phục vụ cho ni trồng thủy sản Báo cáo tống kết đề tài đặc biệt cấp Đại học quốc gia Trung tâm công nghệ sinh học, Đại học Quốc gia Hà Nội Đặng Đình Kim (2002), Giáo trình kỹ thuật nhân giống nuôi sinh khối động vật phù du NXB Nông Nghiệp Đặng Đình Kim, Đặng Hồng Phước Hiền (1999), Cơng nghệ sinh học vi tào NXB Nông Nghiệp 203 trang Đỗ Thị Tố Uyên, Trần Văn Nhị “Nghiên cứu tổng hợp ngoại tiết 5- aminolevulinic acid chúng VKTQH phân lập Việt Nam’’ Tạp chí công nghệ sinh học 4(1), tr: 73-80 2006 „ 2, Li „ Tliir vi eh Viện Đại hoc Mớ Hạ Nôi Đồ Thị Tố Uyên, Văn Thị Nhừ Ngọc, Trần Văn Nhị “ Sứ lý tái xử dụng nước thải chế biển tinh bột gạo vi khuấn tía quang hợp”, Báo cáo hội nghị CNSH tồn quốc 12/2004, tr: 416-420, 2003 Hà, Lê Thị Phương Hoa, Phạm Thị Bích Đào, Lưu Thị Thu Giang, Trần Thị Điệp (2009), Phân lập tuyên chọn tào Tetraselmis đê nuôi ấu trùng tu hài Vân Đồn, Quãng Ninh Hội nghị lần thứ Hiệp hội Vi sinh vật Châu Á (ACM) Ngày 27 tháng 11 Hà Nội Tr.39-47 Trần Thị Tho, Nguyễn Trọng Nho Đặng Đình Kim (2000), nghiên cứu kỹ thuật ni sinh khối tảo Chlorellas pyrennoidosa phục vụ nuôi trồng thủy sàn Tuyên tập báo cáo khoa học Hội thào khoa học hàn quốc nuôi trồng thủy sản tr, 147-151 Vũ Văn Dũng (1998), Cơ sở khoa học quy trình lưu giữ giống ni sinh khối s Costatum (Grevile) Clcve Tuyên tập báo cáo khoa học toàn quốc 39 nuôi trông thủy sản, 9/1998, Viện nghiên cứu nuôi trông thủy sán 1, tr 189198 Vũ Văn Vụ, Vũ Thanh Tâm, Hoàng Minh Tấn (2001), “ Sinh lý học thực vật” NXB Giáo dục 10 Hoàng Thị Yen, “Nghiên cứu vi khuẩn tía quang hợp khơng lưu huỳnh phân lập Việt Nam làm thức ăn tươi sống cho giong động vật hai mánh vỏ” Luận án Tiến sĩ Sinh học, Viện Công nghệ Sinh học, Hà Nơi, tra: 1266, 2010 Tài Liệu Nưóc Ngồi 11 Alef K„ Aip D and Zumpet w G.(1981) Nitrogenase swithch-off by ammonia in Rhodopseudomonas palustrr loss under nitrogen deficiency and indepence from adenylylation state of glutamin sylhetase, Arch Microbiol 130, pp 138-142 12 A zad s A., Chong V c., and Vikineswary s (2002), Phototrophic I „„ JJa.Nql „ , _ _ bacteria as feed supplement for rearing Penaeus monodon larvae, World Aqua Soci (33) 2,pp 158-168 13 Azad s A., Vikineswary s., Ramachandran K B., and Chong v.c (2001), Growth and production of biomass Rhodovulum sulfidophilum in sardine processing wastewater, Lett App Microbiol 33(4), pp 264-268 14 Bancijee s., Azad s A., Vikineswary s., Selvaraj o s., and Mukherjee T K (2000), Phototrophic bacteria as fish feed supplement, Asia-Australasian Anim Scien 13, pp 991 -994 15 Buchanan B B E vans M c w., and Arnon D I (1967), Feredoxindependent carbon asimilation in RhodosiriUum rubrum, Arch Microbiol 59, pp 32-40 16 Brurris R H., and Robert G p (1993), Biological Nitrogen Fixation, Annu Rev Nutr 13, pp 317-335 40 17 Condrad R., and Schelegel H G (1977b), Different degradation pathways for glucose and fructose in Rhodoseudomonas capsulatus, Arch Microbiol 112, pp 38-48 18 Fang X u., Wei c., Zhao-ling c., and Fan o (2004), Effect of air flow rate and co? concentration on the growth of Nannochloropsis sp and EPA accumulation in an airlift photobioreator The Chinese journal of process engineering , (5), pp 457-461 19 Fuller R c (1978), The photosynthetic carbon metabolism in the green and purple bacteria In Clayton R K., and Sistrom WR (eds) The phototrophic bacteria, PlenumPress New York, pp 691-705 20 Getha K., Chong V c., and Vikineswary s (1998b), Potenial use of the phototrophic baterium Rhodopseudomonas palus trisas an acquaculture feed, Asian Fish Scicn 10, pp 223-232 21 Getha K., Vikineswary s., and Chong V c (1998a), Isolation and growth of the phototrophic bacterium Rhodopscudomonas palustris strain Bl Bl in sago- starch processing waster, Microbiol Biotechnol 14, pp 505-511 22 Glover J., Kamen M D., and Van Gendersen H (1952), Studies on the metabolism of photosythetic bateria XII Compative light and dark metabolism of acetate and carbonate by Rhodospirillum rubrum, Arch Biophys 35, pp 343-408 23 Imhoff J F„ and Truper H G (1989), Purple non-sulfur bacteria, Bergey’s manual of Systematic Bacteriology, Williams and Wilkins Baltimore 3, pp 1658-1680 24 Imhoff J F., Petri R., and Suling J (1989a), Reclassification of species of the spiral-shape photolrophic purple non-sulfur bacteria of the Proteobacteria: description of the new genera Phaeospirillum fulvum comb, nov., Rhodovibrio gen nov., Rhodothalassium gen nov andRoseospira gen nov as well as tranfer of Rhodospirillum fulvum to Phaeospirillum molischianum comb, nov., of Rhodospirillum salinarum to Rhodovibrio 41 salinarum comb, nov., Rhodospirillum salexigens to Rhodovibrio sodomensis comb, nov., of Rhodospirillum somdomense to Rhodothalassium salexigens comb nov and of Rhodospirillum mediosalinum to Roeospira mediosalina comb, nov, Int J Syst Bacterial 48, pp 793-798 25 Lavens p., “Manual the of the production and use of live food for aquaculture” Ghent Belgium, Rom FAO 361, pp 295, 1996 26 Lucking D., Pike L., and Sojka G.(1976), Glycerol utilization by a mutant Ò Rhodospeudomonas capsulata, J Bacterial 125 pp 750-752 27 Merrick M J., Edwards R A (1995), Nitrogen trol in bacterial Microbiological reviews 59 (4), pp 604-622 28 Michiharu K., Michihiko K., “Waste remediation and treatment using anoxygenic phototrophic bacteria” In: Anoxygenic phototrephic bacteria, Robert E Blankenship (Eds) Kluwer Academic Publishers, pp 12691282,1995 29 Okamoto N., Hirotani H.j Sano T:,)Kpbay,sia M (1988), Antiviral activity of extracts of phototrophic bacterial to fish viruses Nippon suisan Gakkaishi 54, pp 2225-2231 30 Ponasano E H G„ Lacava p M„ Pinto M F (2003), Chemical composition of Rhodocyclus gelatinonus biomas produce in poultry slaughterhouse wastewater, Braz Arch Biol Tech 46(2), pp 143-147 31 Pratoomyot J., Srivilas p and Noiraksar T (2005), Fatty acids composition of 10 microalgae species Sonkalanakarin J Sci Technol 27(6),pp 11791187 32 Pulz o and Cross, w, (2004), Valuable products from biotechnology of microagae App Microbiol Biotechnol 65, pp 304-306 33 Tabita F R (1995) The biochemistry and metabolic regulation of carbon metabolism and co2 fixation in purple bacteria In Anoxygenic phototrophic bacteria Robert E Blankenship (ed) Kluwer academic Publishers, pp 885- 914 42 34 Quayle, J R., and Keech, D B (1959), Carboxydismutase activity in formate and oxalate-grown Pseudomonas axalaticus (strain OX), Biochim Biophys Acta 31, pp 587-588 35 Ramana V., Anil kumar p„ Srijivas T.N.R, Sasikala Cand Ramana (2009), Rhodobacter aestuarii sp nov., a c.v phototrophic alphaproteobacterium isolated from an estuarine enviroment Int.J.Syst Evol Microbiol 59, pp 1133-1136 36 Roncarati A., Meluzzi A, Acciarri s, tallarico N and Melotti P(2004), Fatty acid composition of diferent microalgae strains (Nannochloropsis sp., Nannochloropsis oculata (drop) Hibbere, Nannochloropsis atomus Butcher and Isochrysis sp.) according to the culture phase and the carbon dioxide concentration Journal of the world aquaculture society Vol:35 N().3,pp 401-411 37 Sasikala c., and Voelskow H (1976), Pyruvate fermentation in Rhodospirilluinrubrum after transfer front aerobic to anaerobic conditons in the dark Arch Microbiol 107, pp 82-92 38 Wedd K L and Chu F E (1983), Phytoplankton as a food source forbivalval larvae Proceeding of the Second International Conference on Aquaculture Nutrition: Biochemiacal and physiological approaches to sellfish nutritioa Louisiana State University, pp 272-293 Tài Liệu Internet 1,http://www.fistenet.gov.vn/b-tin-tuc-su-kien/a-tin-van/nganh-thuy-san-tong- ket-cong-tac-nam-2016 2,http://timnhanhvietnam.vn/cong-ty-tnhh-mot-thanh-vien-thuv-san-mifa- Id 17065809 http://www.vietlinh.vn/moi-truong/vi-khuan-quang-hop.asp 4.http://vienthuvsan2.org.vn/index.php/vi/thu-vien/So-6/Ung-dung-vi-khuanquang-hop-tia-trong-nuoi-trong-thuy-san-o-Viet-Nam-106/ 43 PHỤ LỤC Bảng Kết đo ODtóo chủng NA2.6 thịi gian ni cấy dưói ảnh hưởng khoảng nhiệt độ khác Nhiệt độ 14 - 16°c 26 - 28°c 38 - 40°C ODôoo (ngày 1) OD660 (ngày 5) AODôôo 0,166 1,182 1,016 0,17 1,302 1,132 0,168 1,257 1,089 0,146 1.859 1,71.3 0,118 1.692 1,574 0,132 1,849 1,717 0,184 1,791 1,607 0,133 1,592 1,459 0.159 1.683 1,524 Bảng Kết đo OD660của chủng NA2.6 thịi gian ni cấy dưói ảnh hường ỏ- khoảng pH khác pH Lần đo OD6(>0 (ngày 1) OD660 (ngày 4) AODếío 0,139 0,771 0,632 4,5 0,171 0,832 0,661 0,109 0,667 0,558 0,203 1,288 1,085 0,211 1,353 1,142 0,197 1,054 0,857 0,135 1,523 1,388 0,155 1,582 1,427 0,274 1,683 1.409 0,186 1,753 1.567 0,225 1,854 1,629 0,198 1,826 1,628 0,171 1,885 1,714 5,0 5,5 6,0 6,5 44 7,0 7,5 8,0 8,5 9.0 0,234 1.91 0.207 1,776 1,569 0.140 1,816 1,676 0,223 1,82 1,597 0,205 1,897 1,692 0,151 1,697 1,401 0,167 1,735 1,568 0,202 1,841 1,602 0,122 1,497 1,357 0,167 1,763 1,596 0.298 1,74 1,442 0,118 1,448 1,330 0,156 1,419 1,263 0,275 1,54 1,265 0,138 1,24 1,102 0,178 1,344 9,5 10,0 'hư việìỸ^iện Đ li học w Hà N 1,676 1.166 0.861 0,174 0,703 0,721 0.234 0.865 0,631 0,259 0.88 0,621 0.081 0.415 0,334 0,167 0,356 0,189 0.241 0,357 0,116 45 Bảng 3.Ket đo OD660ciia chủng NA2,6 thịi gian ni cấy dưói ảnh hưởng nồng độ muối khác Nồng độ muối 0% 0,5% 1% 1,5% 2% 2,5% 3% 3,5% 4% 5% ODèóo (ngày 1) OD66(| (ngày 5) AODsso 0,162 1.344 1.182 0,124 1.401 1.277 0,103 1.142 1,039 0,135 1.457 1,322 0,182 1.646 1.464 0.125 1.698 1,573 0,128 1.652 1.524 0,162 1,745 1.583 0,158 1.719 1,561 0,158 1,819 1.661 0,123 1.695 1.572 0,141 1,373 1,474 0.152 )ại Iiọịp^ớ Hà 1.492 0,193 1.769 1,576 0,125 1.797 1,672 0,115 1.597 1.482 0,194 1.836 1.642 0,145 1,794 1.649 0,149 1.761 1.612 0,173 1,812 1,639 0.143 1,695 1.552 0,101 1,735 1.634 0,184 1.695 1,511 0,126 1,532 1.658 0,167 1,269 1.102 0,201 1,247 1.046 0,167 1.343 1.176 0,117 1,626 1.509 46 6% 7% 8% 9% 10% ĩ 0,152 1,708 0,11 1,773 1,633 0,142 1,26 1,402 1,556 0,172 1,232 1,404 0,12 1,208 1,328 0,166 1,287 1,121 0,123 1,319 1.196 0,168 1,562 1.394 0,153 0.761 0,914 0,142 1,432 1,29 0,168 1,03 0.862 0,161 1,052 0,891 0,182 0,965 0,783 0,174 0.75 0,576 0,14 0.499 0,359 0,183 0,845 0,662 hư việH^iện )ại họ&^ớ Hà Mội 0,533 Bảng 4.Kốt đo OD66()ciía chủng NA2.6 thịi gian ni cấy dưói ảnh hưởng điều kiện nuôi khác Điều kiện Hiếu khí Vi hiếu khí Kỵ khí OD660 (ngày 1) OD660 (ngày 5) AODééo 0,201 0,967 0,766 0.147 1.101 0,954 0.158 1.072 0,914 0.167 1.521 1,354 0.138 1.639 1,501 0.147 1.51 1,363 0.154 1,882 1,728 0.242 1,912 1.67 0,245 1,818 1.573 47 Bảng 5.Ket đo OD660ciia chủng NA2.6 thòi gian ni cấy dưói ảnh hưởng cường độ sáng khác Cường độ sáng (nghìn lux) OD6M (ngày 1) ODơío (ngày 5) 0,136 0,136 0,141 0,88 0,739 0,137 1,304 1,167 0,133 1,822 1,689 0,125 1,736 1,661 10 0,155 1,809 1,654 12 0,167 1,714 1,547 14 0,184 1,663 1,479 16 0,124 1,46 1,336 AODoóo Bảng Kết đo ODsoo chủng NA2.6 thịi gian ni cấy nồng độ bột đậu tưong khác Bột đậu (g/1) ODgón (ngày ì) A ODgoi) (rigày 5) AODsoo 0,164 1,312 1,148 0,138 1,29 1,152 0,167 1,146 0,979 0,161 1,387 1,226 0,195 1.249 1.054 0,164 1,586 1.422 0,194 1,71 1,516 0,128 1,652 1,524 0,174 1,823 1,649 0,174 1,768 1,594 0,126 1,724 1,598 0,185 1,751 1,566 0,167 1,76 1,593 0,191 1,786 1,595 0,17 1,806 1.636 48 0,169 1,922 1,753 0,144 1.895 1,751 0,198 1,617 1,419 Bảng Kết đo ODíionCÌia chùng NA2.6 thịi gian ni cấy nồng độ cao nấm men khác Cao nấm men (g/1) ODsoo (ngày 1) ODsoo (ngày 5) AODsoo 0.194 1.189 0,995 0.157 1,053 0,896 0,154 1,077 0,923 0,168 1,824 1,656 0,134 1.59 1,456 0.184 1,989 1,805 0,166 1.992 1,826 0,195 1,923 11111' vuỉni Viện i )ại họơ-MỚ Hà 1,728 slộl 1.549 0,164 1,961 0,142 1,935 1,793 0,122 1.80 1,678 1,797 0,138 1.967 1,829 0,171 2.007 1,836 0,148 1,877 1,729 0,136 2.028 1,892 0,164 1,957 1,793 0,124 1.863 1.739 49 ... thiệu vi khuẩn tía quang hợp 2.2 ửng dụng VKTQH làm thức ăn tươi. sống nuôi trồng thủy sản giới 2.2.1 Cơ sở khoa học cua vi? ??c sử dụng vi táo vi khuân làm nguồn thức ăn tươi sống nuôi trồng. .. ứng dụng chùng VK làm thức ăn tươi sống sàn xuất giống động vật Chúng tiến hành đề tài: ? ?Nghiên cún xây dụng quy trình sản xuất sinh khối vi khuẩn tía quang hạp có khả tống họp axit béo không no. .. không no (MUFAs PUFAs) sử dụng làm thức ăn tiari sống nuôi trồng thủy sản? ?? 1.2 Mục đích Xác định ánh hường cũa cácđiều kiện ngoại cánh xây dựng quy trình sàn xuất sinh khối VKTQH có khà tống hợp axit