Đang tải... (xem toàn văn)
Lily (Lilium) là một loài hoa đẹp, đa dạng màu sắc, kiểu dáng và hương thơm, đã và đang góp phần quan trong trong ngành công nghiệp hoa thế giới. Để tạo ra các giống hoa lily mới lạ, có nhiều đặc điểm nổi bật, các nhà khoa học trên thế giới (Hà Lan, Nhật Bản, Trung Quốc, Hàn Quốc, …) đặc biệt chú trọng đến việc tìm kiếm các loài lily bản địa quý hiếm là vật liệu cho việc thuần hoá, lai tạo giống, hoa lily mới (Zhao et al.,1996; Kim, 1996; Baranova, 1996). Trong những năm gần đây, các hội nghị này vẫn thường xuyên công bố thêm các loài lily mới được phát hiện, đặc biệt là những loài bản đại quý hiến có bản sắc riêng. Ở Việt Nam, theo Phạm Hoàng Hộ (1999), có 3 loài hoa lily hoang dại thuộc chi Lilium được ghi nhận là Lilium browine F.E Brown, Lilium polianei Gagnep và Lilium arboricola. Trong đó, Lilium polianei Gagnep được tìm thấy ở Sapa, vùng núi phía Bắc Việt Nam (Nguyễn Thị Phương Thảo, 2009) được cho là loài hoa quý hiếm trên thế giới, có màu sắc hoa đẹp, bền và có hương thơm là nguồn gen rất có ý nghĩa trong chọn tạo giống. Theo hệ thống phân loại của Comber (1949), L.poilanei thuộc nhóm Sinomartagon, là nhóm quan trọng để lai tạo các giống lai với Asiatic Royal Horticulture Society (RSH) thì hiện nay chưa có công bố nào về việc sử dụng nguồn gen này làm vật liệu để tạo ra các giống thương mại.
NGHIÊN CỨU TẠO CỦ IN VITRO TỪ CỦ LILY SAPA (LILIUM POILANEI) Phạm Thị Thanh Xuân1, Bùi Thị Thu Hương1 Học viện Nơng nghiệp Việt Nam TĨM TẮT ĐẶT VẤN ĐỀ Lily (Lilium) loài hoa đẹp, đa dạng màu sắc, kiểu dáng hương thơm, góp phần quan trong ngành cơng nghiệp hoa giới Để tạo giống hoa lily lạ, có nhiều đặc điểm bật, nhà khoa học giới (Hà Lan, Nhật Bản, Trung Quốc, Hàn Quốc, …) đặc biệt trọng đến việc tìm kiếm loài lily địa quý vật liệu cho việc hoá, lai tạo giống, hoa lily (Zhao et al.,1996; Kim, 1996; Baranova, 1996) Trong năm gần đây, hội nghị thường xuyên cơng bố thêm lồi lily phát hiện, đặc biệt lồi đại q hiến có sắc riêng Ở Việt Nam, theo Phạm Hoàng Hộ (1999), có lồi hoa lily hoang dại thuộc chi Lilium ghi nhận Lilium browine F.E Brown, Lilium polianei Gagnep Lilium arboricola Trong đó, Lilium polianei Gagnep tìm thấy Sapa, vùng núi phía Bắc Việt Nam (Nguyễn Thị Phương Thảo, 2009) cho loài hoa quý giới, có màu sắc hoa đẹp, bền có hương thơm nguồn gen có ý nghĩa chọn tạo giống Theo hệ thống phân loại Comber (1949), L.poilanei thuộc nhóm Sinomartagon, nhóm quan trọng để lai tạo giống lai với Asiatic Royal Horticulture Society (RSH) chưa có công bố việc sử dụng nguồn gen làm vật liệu để tạo giống thương mại Như vậy, để phát triển giống cho mục đích lâu dài, cần tiến hành nhân giống lily quý Việc nhân giống in vitro từ củ có hiệu cao ……………… Do việc nghiên cứu tạo củ lily Sapa cần thiết nhằm góp phần phát triển loài quý VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 21.Vật liệu: Củ hoa Lilium poilanmei Gagep Hình 2: Mẫu củ lily Sapa (Lilium poilanei Gapnep) (Ảnh chụp tháng 12/2021) 2.2 Tạo vật liệu khởi đầu in vitro * Khử trùng bản: Các mẫu vảy củ đảm bảo không bị nhiễm nấm mốc, dập nát , tách vảy dài từ 2-3 cm, rửa xà phòng vòi nước chảy , rửa nước cất 2-3 lần Sau , chúng đưa vào tủ cấy lắc rửa mẫu cồn 70° phút , rửa mẫu nước cất lần * Khử trùng HgCl2 0,1% khử trùng mẫu phút (Theo B.T.T Hương cs, 2021) Sau đó, tráng mẫu với nước cất từ - lần Khi mẫu khử trùng, tiến hành cấy vào môi trường MS + 30g/l đường + 7,5g/l agar (B.T.T Hương cs ,2013) Xác định tỷ lệ mẫu (%), tỷ lệ mẫu sống (%) sau tuần, tuần 2.3 Nghiên cứu khả tái sinh củ từ vảy củ, lát cắt vảy củ in vitro * Ảnh hưởng kích thước vảy củ đến khả tạo củ in vitro Lilium poilanei Vật liệu khởi đầu đóng vai trò quan trọng phản ứng tạo củ, bao gồm giống, lồi, tuổi mẫu, kích thước mẫu hướng đặt mẫu môi trường (Nhut cs, 2003) Theo nghiên cứu Bùi Thị Thu Hương cs (2021) cho mơi trường tốt cho hình thành củ in vitro MS+ 7,5 g/l agar + 30 g/l đường + 0,3 mg/l BA Chính mơi trường sử dụng môi trường cho Nghiên cứu ảnh hưởng kích thước vảy củ đến khả tạo củ in vitro Lilium poilanei Các vảy củ tác từ củ lily vị trí khác vảy vịng (kích thước < 3cm, lấy vị trí gần trung tâm củ lily; vảy vịng củ (kích thước – 6cm, lấy vị trí của lily); vảy vịng ngồi ( kích thước > 6cm, lấy vị trí ngồi củ lily) nuôi cấy môi trường Sau 4, tuần nuôi cấy, đánh giá mẫu với tiêu tỉ lệ tạo củ, hệ số tạo củ *Nghiên cứu ảnh hưởng kích thước lát cắt vảy củ đến khả tạo củ Lilium poilanei Vật liệu khởi đầu đóng vai trò quan trọng phản ứng tạo củ, bao gồm giống, lồi, tuổi mẫu, kích thước mẫu hướng đặt mẫu môi trường (Nhut cs, 2003) Theo nghiên cứu Bùi Thị Thu Hương cs (2021) cho mơi trường tốt cho hình thành củ in vitro là: MS + 7,5 g/l agar + 30 g/l đường + 0,3 mg/l BA Chính môi trường sử dụng môi trường cho Nghiên cứu ảnh hưởng kích thước lát cắt vảy củ đến khả tạo củ Lilium poilanei Bố trí thí nghiệm: Cơng thức Kích thước lát cắt vảy cù CT1 Lát cắt vảy củ ngắn 1cm, bao gồm phần đế vảy CT2 Lát cắt vảy củ dài 2cm, bao gồm phần đế vảy CT3 Lát cắt vảy củ không cắt (để nguyên, gồm phần đế vảy) Mỗi công thức lặp lại lần, lần 20 mẫu/ công thức Đánh giá mẫu sau 4, tuần nuôi cấy với tiêu chí: tỉ lệ mẫu tạo củ, hệ số mẫu tạo củ * Nghiên cứu khả tạo củ từ mẫu in vitro lily Takayama Misawa (1979, 1982) mối tương tác giũa auxin (NAA) cytokinin (BA) đồi với hình thành củ, rễ, tỷ lệ auxin/cytokinin cao làm tăng hình thành rễ, ngược lại tỷ lệ thấp làm tăng hình thành củ Ngồi ra, Tang et al, 2010 nghiên cứu cho thấy mẫu Lilium leucanthum cho tỉ lệ tạo mô sẹo cao môi trường có bổ sung 1mg/l 2,4-D Trong thí nghiệm này, ta tiến hành nghiên cứu ảnh hưởng BA kết hợp ∝-NAA đến khả tái sinh củ từ in vitro Các lát cắt in vitro nuôi cấy môi trường kết hợp 0,3mg/l BA bổ sung nồng độ NAA khác công thức (Vì theo Nguyễn Thị Hương 2018, sử dụng 0,3mg/l BA + 0,5mg/l NAA cho kết tạo củ cho lily Sapa tốt nhất) Do đó, mảnh in vitro dài 1cm nuôi cấy mơi trường thay đổi MS có bổ sung 30 g/l đường + 7,5 g/l agar, pH = 5,5 – 5,8 bổ sung 0,3 mg/l BA NAA với nồng độ khác từ 0; 0,25; 0,5; 0,75; mg/l Đánh giá mẫu sau 4, tuần với Tỉ lệ tạo củ, hệ số tạo củ, tỉ lệ tạo chồi lá, tỉ lệ nhiễm 2.4 Nghiên cứu tạo rễ cho củ 2.5.Bố trí thí nghiệm xử lý số liệu: Các cơng thức thí nghiệm lặp lại lần, 20 mẫu/ công thức Các số liệu thu thí nghiệm xử lý chưởng trình Excel 2019 phần mềm thống kê IRRISTAT KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Khả tạo vật liệu khởi đầu in vitro từ vảy củ Khử trùng mẫu vảy củ HgCl 0,1% cấy vào môi trường MS (Murashige Skoong, 1962), kết thu thể bảng 4.1 Bảng Khả tạo vật liệu vảy củ in vitro loại vảy Công thức Loại vảy củ ban đầu Tỉ lệ mẫu sống (%) Tỉ lệ mẫu sống (%) Tuần Tuần Tuần Tuần CT1 VT 100 100 83,33 81,67 CT2 VG 100 100 78,33 75 CT3 VN 100 93,33 53,33 50 Ghi chú: TV- Vảy vịng (kích thước 6cm) Kết bảng cho thấy, vảy vịng (VT- có kích thước < 3cm) có tỉ lệ mẫu sống, sống cao …………………… 3.2 Ảnh hưởng kích thước vảy củ đến khả tạo củ in vitro Lilium poilanei Để nghiên cứu ảnh hưởng kích thước vảy củ đến khả tạo củ in vitro Lilium poilanei, ta tiến hành lựa chọn vảy củ có kích thước đạt chuẩn 6cm tương ứng với CT1, CT2, CT3 Sau khử trùng HgCl 0,1% vảy củ cấy vào mơi trường MS có bổ sung 0,3mg/l BA + 7,5g/l agar + 30g/l đường saccarose Thí nghiệm theo dõi 4, tuần Kết nuôi cấy thu bảng 4.2 sau: Bảng Ảnh hưởng kích thước (nguồn gốc vảy) vảy củ đến khả tạo củ in vitro Lilium poilanei sau 4, tuần ni cấy Cơng thức Kích thước vảy củ ban đầu Tỉ lệ tạo củ (%) Hệ số tạo củ Tuần Tuần Tuần Tuần CT1 6cm 30 40 1,06b 1,08b LSD0,05 0,19 0,26 CV 7,4 9,7 Ghi chú: chữ a, b, c cột sai khác có ý nghĩa mức ∝=0,05 (MTN: MS + 0,3mg/l BA + 7,5g/l agar + 30g/l đường saccarose) Từ số liệu bảng cho thấy, sau tuần ni cấy, kích thước vảy củ khác có ảnh hưởng rõ rệt đến tỉ lệ nhiễm , tỉ lệ tạo chồi hệ số nhân chồi vảy củ Xét tỉ lệ nhiễm, tỉ lệ nhiễm thấp CT1 16,67%; sau tăng dần từ CT2 (21,67%) CT3 (46,667%) Xét tỉ lệ tạo củ, cao CT2 với tỉ lệ 50%; thứ nhì CT1 với tỉ lệ 36,67% thấp CT3 với tỉ lệ 30% Xét hệ số tạo củ, tỉ lệ tạo củ CT1 đứng thứ tiêu hệ số tạo củ lại cao 1,37; CT2 CT3 có hệ số tạo củ 1,08 Sau tuần ni cấy, nhìn chung tiêu có tăng lên rõ tỉ lệ tạo củ hệ số tạo củ Xét tỉ lệ nhiễm, công thức tăng thêm khoảng 5% mẫu nhiễm khuẩn Cụ thể CT1 18,33%; CT2 25%; CT3 50% Xét tỉ lệ tạo củ, CT1 CT3 tỉ lệ tạo củ tăng lên 10%; riêng CT2 tỉ lệ tạo củ tăng 13,33% Xét hệ số tạo củ, CT2 CT3 hệ số tạo củ tuẩn khơng có tăng lên rõ rệt (chỉ tăng từ 0,01 – 0,02); riêng CT1 hệ số tạo củ tăng từ 1,37 lên 1,43 (tức 0,06) Vì vậy, thí nghiệm kích thước vảy củ khác có ảnh hưởng đến tỉ lệ nhiễm, tỉ lệ tạo củ hệ số tạo củ củ vảy củ Nghiên cứu cho ta thấy, vảy củ có kích thước nhỏ (CT1) - tương ứng với vị trí vảy củ Vì vậy, chúng có mức độ tiếp xúc với yếu tố nấm, khuẩn nên tỉ lệ nhiễm khuẩn sau khử trùng thấp Tương tự vảy củ có kích thước 3-6cm (CT2) CT3 (>6cm) có vị trí nằm dần phía nên tỉ lệ nhiễm sau khử trùng tăng lên dần Theo công bố Islam Md S & S K (2020), củ nhỏ sức sống kém, khả sống sót, sinh trưởng, chống chịu thấp Như vậy, tương tự thí nghiệm này, vảy củ có kích thước 3- cm CT2 đạt tiêu chuẩn để tái sinh tốt trải qua q trình khử trùng vừa đủ, cịn vảy CT1 cịn q non nên tế bào bị tác động nên khả tái sinh khơng Cịn vảy CT3 già nên tỉ lệ tạo củ bị ảnh hưởng Tuy nhiên, hệ số tạo củ CT1 cao nhất, cịn non nên q trình phản phân hố thấp nên hệ số tạo củ cao Hình Củ lily hình thành từ vảy củ có kích thước khác Ghi chú: (A): Vảy củ ban đầu có kích thước 6cm ni cấy Tuần (D): Vảy củ ban đầu có kích thước 6cm nuôi cấy Tuần 3.3 Nghiên cứu ảnh hưởng kích thước lát cắt vảy củ đến khả tạo củ Lilium poilanei Để nghiên cứu ảnh hưởng kích thước lát cắt vảy củ đến khả tạo củ in vitro Lilium poilanei, ta tiến hành cắt vảy củ tủ cấy vơ trùng để có kích thước đạt chuẩn gồm lát cắt 1cm; lát cắt 2cm; lát cắt không cắt tương ứng với CT1, CT2, CT3 Sau khử trùng HgCl 0,1% vảy củ cấy vào mơi trường MS có bổ sung 0,3mg/l BA + 7,5g/l agar + 30g/l đường saccarose Thí nghiệm theo dõi 4, tuần Kết nuôi cấy thu bảng 4.2 sau: Bảng Ảnh hưởng kích thước vảy củ đến khả tạo củ in vitro Lilium poilanei sau 4, tuần nuôi cấy Cơng thức Kích thước lát cắt vảy củ Tỉ lệ tạo củ (%) Hệ số tạo củ Tuần Tuần Tuần Tuần CT1 1cm 23,33 35 1,00a 1,14a CT2 2cm 35 43,33 1,14a 1,21a CT3 Không cắt 41,67 53,33 1,24a 1,30a LSD0,05 0,43 0,21 CV% 1,7 7,9 Ghi chú: chữ a, b, c cột sai khác có ý nghĩa mức ∝=0,05 (MTN: MS + 0,3mg/l BA + 7,5g/l agar + 30g/l đường saccarose) Xét tỉ lệ tạo chồi, sau tuần nuôi cấy tỉ lệ tạo chồi cao CT3 (53,33%) với lát cắt không cắt giảm dần tỉ lệ tạo củ CT2 (43,33%) CT1 (35%) Xét hệ số tạo củ, sau tuần ni cấy hệ số tạo củ khơng có sai khác có ý nghĩa Bui Thi Thu Huong, Dong Huy Gioi & Bui Van Thang (2017) tiến hành nhân củ với loại lát cắt vảy củ khác (lát cắt gồm đế, lát vảy, lát cắt cùng) cho kết lát cắt gồm đế có hệ số nhân củ cao Trong thí nghiệm này, tất lát cắt thí nghiệm dù có kích thước khác nhau, bao gồm đế nên hệ số nhân củ sai khác khơng có ý nghĩa Hình Củ lily hình thành từ vảy củ có kích thước lát cắt khác (bao gồm phần đế vảy) Ghi chú: Lát cắt vảy củ ban đầu có kích thước 1cm (A); 2cm (B); không cắt (C) nuôi cấy tuần Lát cắt vảy củ ban đầu có kích thước 1cm (D); 2cm (E); không cắt (F) nuôi cấy tuần 4.3 Khả tạo củ mẫu in vitro Để nghiên cứu ảnh hưởng BA kết hợp với NAA đến hình thành củ lily in vitro, mẫu in vitro có kích thước dài khoảng 1cm cấy vào mơi trường MS có bổ sung 0,3mg/l BA kết hợp với NAA với nồng độ khác Kết sau 4, tuần nuôi cấy thu kết bảng 4.4 Bảng Khả tạo củ in vitro từ mảnh Công thức NAA (mg/l) Tỉ lệ nhiễm (%) Tỉ lệ tạo củ (%) Hệ số tạo củ tuần tuần tuần tuần tuần tuần Tỉ lệ mẫu tạo củ có chồi (%) CT1 0 16,67 28,33 1a 1,05a 10 CT2 0,25 0 25 33,33 1a 1,11a 18,33 CT3 0,5 0 50 66,67 1,21a 1,25a 55 CT4 0,75 0 26,67 35 1a 1a 26,67 CT5 0 18,33 25 1a 1,05a 15 LSD0,05 0,93 1,17 CV% 4,7 8,2 Ghi chú: chữ a, b, c cột sai khác có ý nghĩa mức ∝=0,05 (MTN: MS + 0,3mg/l BA + 7,5g/l agar + 30g/l đường saccarose) Xét tỉ lệ nhiễm, thí nghiệm tỉ lệ nhiễm đạt mức 0% tất công thức sau tuần ni cấy Vì vậy, ni cấy mẫu in vitro đạt tỉ lệ mẫu tuyệt đối 100% Xét tỉ lệ tạo củ, sau tuần nuôi cấy tỉ lệ tạo củ đạt cao CT3 (66,67%), sau tỉ lệ giảm dần phía; cao thứ nhì CT4 (35%) CT2 (33,33%); thấp CT5 (25%) CT1 (28%) Xét hệ số tạo củ, sai khác có ý nghĩa sau tuần nuôi cấy Tuy nhiên, hệ số tạo củ cao CT3 1,25; cao thứ nhì CT5 (1,17) CT2 (1,11); thấp CT4 CT1 với hệ số tạo củ 1,05 Hình Mảnh môi trường bổ sung NAA 0.3 mg/l BA khác Ghi chú: Mẫu in vitro 1cm nuôi cấy sau tuần môi trường MS + 30g/l đường + 7,5g/l agar + 0,3mg/l BA nồng độ NAA khác (A): 0mg/l NAA; B): 0,25mg/l NAA ; (C): 0,5mg/l NAA ; (D): 0,75mg/l NAA; (F): 1mg/l NAA Mẫu in vitro 1cm nuôi cấy sau tuần môi trường MS + 30g/l đường + 7,5g/l agar + 0,3mg/l BA nồng độ NAA khác (A1): 0mg/l NAA (B2): 0,25mg/l NAA (C2): 0,5mg/l NAA (D2): 0,75mg/l NAA (F2): 01mg/l NAA 3.5 Tạo hoàn chỉnh cho củ in vitro Khi đạt kích thước định, củ cắt bỏ chồi tách khỏi vảy củ cấy vồ mơi trường MS + 30g/l đường Saccarose + 7,5g/l agar + 2ppm nano Bạc bổ sung nồng độ THT khác Kết nghiên cứu ảnh hưởng THT kết hợp với nano Bạc đến củ in vitro hoa lily Sapa sau tuần thể bảng 4.4 sau: Bảng Ảnh hưởng THT kết hợp với ppm nano bạc đến củ lily in vitro sau tuần nuôi cấy Công thức THT (g/l) Tỉ lệ rễ (%) Số rễ TB Chiều dài rễ TB CT1 61,67 3,56d 0,97c CT2 0,5 100 5,97c 1,91b CT3 1,0 100 9,37a 2,17a CT4 1,5 100 6,95b 1,97b LSD0,05 0,88 0,11 CV% 7,9 3,7 Ghi chú: chữ a, b, c cột sai khác có ý nghĩa mức ∝=0,05 (MTN: MS + 2ppm nano Bạc + 7,5g/l agar + 30g/l đường saccarose) Từ kết bảng cho thấy sau tuần ni cấy, có sai khác có ý nghĩa tất tiêu theo dõi Cụ thể bổ sung nano Bạc THT vào môi trường tạo rễ với hàm lượng từ 0,5 – 1,5g/l kết hợp với nồng độ 2ppm nano Bạc có hiệu kích thích hình thành rễ từ củ in vitro lily Sapa Tỉ lệ rễ CT2; CT3 CT4 đạt 100% kết hợp thêm nano Bạc cao CT1 không bổ sung nano Bạc Số rễ trung bình tăng dần từ CT1 đến CT3 nhiên đến CT4 lại bắt đầu giảm trở lại Ở chiều dài rễ cao CT3; cao thứ nhì CT2 CT4 Sau xét tiêu, ta nhận thấy điều kết hợp THT nano Bạc đến mức định (cụ thể thí nghiệm 2ppm nano Bạc + 1g/l THT) tăng thêm khả rễ chiều dài rễ bị ảnh hưởng theo Kết cho thấy có tương đồng với kết Nguyễn Thị Phương Thảo cs (2011) cho kết 1g/l THT tốt Tuy nhiên hiệu tích cực lên tỉ lệ tạo rễ củ lil trường hợp hiệu cộng gộp THT 1mg/l kết hợp với nano bạc Hình 4.4 Củ rễ môi trường MS bổ sung 2ppm nano bạc than hoạt tính Ghi chú: Củ lily in vitro đựo nuôi cấy tuần môi trường MS + 30g/l đường + 7,5g/l agar + 2ppm nano bạc nồng độ THT khác (A): 0g/l THT; (B): 0,5g/l THT; (C): 1g/l THT; (D): 1,5g/l THT KẾT LUẬN TÀI LIỆU THAM KHẢO Phạm Hoàng Hộ (1999) Cây cỏ Việt Nam Nhà xuất trẻ Vũ Thị Ngọc Anh (2018) “Nghiên cứu sử dụng thử nghiệm chế phẩm nano bạc nuôi cấy mô hoa lily Sapa” Khố luận tốt nghiệp, Học viện Nơng nghiệp Việt Nam Nguyễn Thị Phương Thảo, Vũ Quang Khánh, Cao Việt Anh, 2009 Đánh giá đa dạng hình thái đặc điểm nông sinh học lily địa Lilium poilanei Gapnep Tạp chí Khoa học Phát triển: Tập 7, số 4: 460 – 467 Nguyễn Thị Phương Thảo, Nông Thị Huệ, Vũ Quang Khánh, Nguyễn Hữu Cường, 2010 “Nghiên cứu nhân nhanh in vitro hoa loa kèn Lilium poilanei Gapnep” Tạp chí Khoa học Phát triển 2011: Tập 9, số 5: 743 – 750 Nguyễn Thị Lý Anh, 2005, “ Sự tạo củ lily in vitro sinh trưởng lily trịng từ củ in vitro”, Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Nông nghiệp, số 5, tr.349 – 353 Nguyễn Thị Hương, 2018 Nghiên cứu ảnh hưởng số yếu tố đến phát sinh hình thái in vitro L poilanei Gapnep Báo cáo khoá luận tốt nghiệp, Học viện Nông nghiệp Việt Nam Nguyễn Quang Thạch, Nguyễn Thị Nhẫn, Nguyễn Thị Phương Thảo, 1996 Nghiên cứu ứng dụng kĩ thuật nuôi cấy mô công tác nhân giống hoa loa kèm Kết nghiên cứu Khoa học Nông nghiệp 1995 – 1996 Trường Đại học Nông nghiệp I, Nhà xuất Nông nghiệp Bùi Thị Thu Hương, Trịnh Khắc Quang (2013) Khả tạo củ lily in vitro số sòng lily nhập nội, Tạp chí Nơng nghiệp Phát triển Nơng thơn 3+4: 53 – 59 Bùi Thị Thu Hương, Tăng Thị Hoa Mai, Trịnh Khắc Quang, Lên Trần Bình, 2013 Ứng dụng Công nghệ Sinh học tạo lai xa chi Lilium, Báo cáo hội nghị Công nghệ Sinh học toàn quốc, Hà Nội – 9/2013: 846 – 850 10 Bùi Thị Thu Hương, Đồng Huy Giới, 2017 “Tối ưu hố q trình nhân giống in vitro nguồn gen lily quý” Tạp chí Journal of forestry science anh technology NO.5 – 2017 11 Bùi Thị Thu Hương cs, 2010 Kết nghiên cứu khảo nghiệm số giống hoa lily nhập nội trồng Gia Lâm – HN Mộc Châu – Sơn La Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nơng thơn Việt Nam Tạp chí Nông nghiệp Phát triển Nông thôn 3/2010: 122 – 126 12 Nguyễn Như Khanh, 2006 Sinh học Phát triển Thực vật NXB Giáo dục, trang 30 – 60 13 Bùi Thị Thu Hương, 2015 Ứng dụng công nghệ tế bào công nghệ gen đánh giá, chọn lọc tạo dịng Lilium có khả chống chịu nóng Luận án Tiến sỹ Cơng nghệ Sinh học, Viện Công nghệ Sinh học, Viện Hàn Lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam 14 Nguyễn Thị Huyền, 2021 Báo cáo Khoá luận Tốt nghiệp “Nghiên cứu ảnh hưởng số yếu tố đến nuôi cấy mô lily (Lilium poilanei)”, Học viện Nông Nghiệp Việt Nam 15 Đào Thị Thương, 2008 Luận văn Tốt nghiệp “Khảo sát yếu tố ảnh hưởng đến tái sinh chồi, hình thành rễ củ lily (Lilium sp.) Đại học Nông lâm TP HCM 16 Dương Công Kiên, 2002 Nuôi cấy mô thực vật NXB Đại học Quốc gia TP HCM, 200 trang 17 Dương Công Kiên, 2002 Nuôi cấy mô thực vật NXB Đại học Quốc gia TP HCM, 200 trang 18 Nguyễn Như Khanh, 2006 Nhập môn Công nghệ sinh học NXB Giáo dục, trang 3060 Tài liệu tham khảo nước A Tribulato, P C Remotti, H J M Löffler & J M van Tuyl (1997) “Somatic embryogenesis and plant regeneration in Lilium longiflorum Thunb" Plant Cell Reports (17): 113–118 Baranova, M.V (1996) The lily species in the flora of the former soviet union and their classification within the genus Lilium Acta Hort (ISHS) 414:133-136 BarbaGonzalez.R, Lim.K.B., Ramanna M.S and Van Tuyl.J.M 2005, “Use of 2n games for inducing intergenomic recombination in hybrids Acta Hort" 673 p.161-166 Duong Tan Nhut, Bui Van Le, Michico Tanaa, K Tran Thanh Van (2000) Effects of activated charcoal, explantsize, explant position and sucrose concentration plant and shoot regeneration of Lilium longiflorum via on young stem culture Plant Growth Regulation, 33: 59-65 Kim, Y (1996) lily industry and research, and native Lilium species in korea Acta Hort (ISHS) 414:69-80 Bui Thi Thu Huong, Dong Huy Gioi, Bui Van Thang (2017) Optimisation of an in vitro propagation protocol for a valuable lily (Lilium ssp) Journal of forestry science and technology Vol 5: 18-25 Murashige T, Skoog F (1962) “A revised medium for rapid growth and bioassays with tobacco tissue cultures" Physiol Plant 15:473-497 Nhut DT, Thuy DTT, Don NT, et al (2007) In vitro stem elongation of Paphiopedilum delenatii Guillaumin and shoot regeneration via stem node culture Propag Ornam Plants, 7, 29–36 Pelkonen V P (2005) Biotechnology approaches in lily (Lilium) production University of Oulu OULU 65pp 10 Sarma, K., & Rogers, S M (2000) Plant regeneration from seedling explants Juncus effusus Aquatic Botany 68(3), 239–247 11 Stanilova.M and Zagorska (1993) “Morphogenetic potential and in vitro micropropagation of endangered plant species Leucojum aestivum L and Lilium rhodopaeum Delip" Plant Cell Reports, 13(8):451-454 12 Stewart, J McD., (1981) "In vitro fertilization and embryo rescue" Env Exp Bot 21:301-315 13 Takayama & Misawa (1979) Differentiation in Lilium Bulbscales Grown in vitro Effect of Various Cultural Conditions Physiologia Plantarum, 46: 184- 190 14 Van Aartrijk, J., & Blom-Barnhoorn, G J (1981) Growth regulator requirements for adventitious regeneration from Lilium bulb-scale tissue in vitro, in relation to duration of bulb storage and cultivar Scientia Horticulturae, 14(3), 261-268 15 Van Meeteren, U and M de Proft (1982) "Inhibition of flower bud abscission and ethylene evolution by light and silver thiosulphate in Lilium" Physiol Plant 56:236240 16 Wickremesinhe, E R M., Holcomb, E J., & Arteca, R N (1994) A practical method for the production of flowering Easter lilies from callus cultures Scientia Horticulturae, 60(1-2), 143–152 17 Zhao, X., Chen, X., Li, D and Liu, K (1996) Resoure and research situation of the genus Lilium in China Acta Hort (ISHS) 414:59-68 18 Islam Md S & S K (2020) Factors Affecting Bulblet Growth of Lilium sp - Tracking Ontogenic Development and Bulb Production in vitro Plant Tissue Culture and Biotechnology, 30, 1–13 https://doi.org/10.3329/ptcb.v30i1.47786 ... mẫu tạo củ, hệ số mẫu tạo củ * Nghiên cứu khả tạo củ từ mẫu in vitro lily Takayama Misawa (1979, 1982) mối tương tác giũa auxin (NAA) cytokinin (BA) đồi với hình thành củ, rễ, tỷ lệ auxin/cytokinin... 2.3 Nghiên cứu khả tái sinh củ từ vảy củ, lát cắt vảy củ in vitro * Ảnh hưởng kích thước vảy củ đến khả tạo củ in vitro Lilium poilanei Vật liệu khởi đầu đóng vai trị quan trọng phản ứng tạo củ, ... vảy củ đến khả tạo củ in vitro Lilium poilanei Các vảy củ tác từ củ lily vị trí khác vảy vịng (kích thước < 3cm, lấy vị trí gần trung tâm củ lily; vảy vịng củ (kích thước – 6cm, lấy vị trí của lily) ;