TUYN CHN B GING VI SINH VT NHM NNG CAO QU TRèNH X Lí PH THI CH BIN TINH BT SN DNG RN THNH THC N CHN NUễI Lng Hu Thnh 1 , V Thuý Nga 1 , Lờ Th Thanh Thu 1 , o Vn Thụng 1 , Cao Hng Giang 1 , H Th Thuý 1 , Lu Th Hng Thm 1 SUMMARY Selection of microorganisms handle cassava starch processing waste solid into animal feed Identified 01 combination of 2 strains of cellulolytic, proteinic fungi and 1 strain of cellulolytic, proteinic yeast. That combination used in production of microorganism innoculant waste handling cassava starch processing waste solid into animal feed. The microbial strains used in this study are intended to species that are not in the list of restricted microorganisms used (according to the European Community) and ensure the level of biosafety level 2. The results open the potential of applying these combination in conversion of cassava starch processing waste into animal feed. Keywords: microorganism innoculant , cassava starch processing waste, animal feed. I. Đặt vấn đề Quỏ trỡnh ch bin tinh bt sn thi ra mt lng ph thi khng l bao gm phn v sau s ch (chim 20 - 35% trng lng c) v lng bó thi trong quỏ trỡnh tỏch, lc tinh bt. Thnh phn ca ph thi dng rn sau ch bin tinh bt sn cha hm lng dinh dng thp, ch yu l hp cht hydratcacbon (>50%), hm lng protein, lipit v mt s loi khoỏng khỏc. c bit trong ph thi cũn cha mt lng axit hydrocyanic (HCN), nng cao cú th gõy c cho ng vt. Vi mc tiờu ci thin cht lng ph thi sau ch bin tinh bt sn ch bin thnh thc n chn nuụi dng thụ, nhúm cỏn b nghiờn cu thuc B mụn Sinh hc Mụi trng - Vin Mụi trng Nụng nghip ó tin hnh tuyn chn b ging vi sinh vt cú kh nng phõn gii cht x sinh tng hp protein, tớch ly protein v cỏc axit amin t do. Nhng chng vi sinh vt tuyn chn c cú tỏc dng phõn gii cht x thnh tinh bt v ng (cú giỏ tr dinh dng cho vt nuụi), bờn cnh ú quỏ trỡnh chuyn húa cỏc hp cht cha cacbon thnh ng glucoza s l tỏc nhõn, cú tỏc dng lm thay i cu trỳc ca axit cyanhydric (HCN) thnh mui C 7 H 13 C 6 N khụng cú tớnh c vi vt nuụi. II. Vật liệu và phơng pháp nghiên cứu 1. Vt liu nghiờn cu B ging vi sinh vt lu gi ti B mụn Sinh hc Mụi trng - Vin Mụi trng Nụng nghip v B mụn Nghiờn cu cụng ngh sinh hc sau thu hoch - Vin C in Nụng nghip v Cụng ngh Sau thu hoch. 2. Phng phỏp nghiờn cu - Xỏc nh mt vi sinh vt (theo phng phỏp Koch): Mt vi sinh vt c xỏc nh da trờn phng phỏp nuụi cy trờn mụi trng thch a, tớnh s lng vi sinh vt trờn mililit hoc trờn gam mu 1 Vin Mụi trng Nụng nghip thông qua s khuNn lc phát trin trong các ĩa môi trưng. - Phân lp, tuyn chn, xác nh mt s c im sinh hc và nh hưng ca iu kin nuôi cy n hot tính sinh hc ca các chng vi sinh vt, ưc xác nh theo các phương pháp nghiên cu vi sinh vt thông thưng. - Hot tính sinh hc phân gii các hp cht hu cơ ca các chng vi sinh vt theo phương pháp o vòng khuych tán trên môi trưng thch. - nh tên vi sinh vt bng h thng nh danh Biolog và khóa phân loi ca Klich. III. KÕt qu¶ vµ th¶o luËn 1. Tuyển chọn nhóm vi sinh vật phân giải tinh bột và xenlulô  thc hin ưc mc tiêu ca  tài, nhóm cán b nghiên cu thuc B môn Sinh hc Môi trưng ã kt hp vi B môn N ghiên cu công ngh sinh hc sau thu hoch - Vin Cơ in N ông nghip và Công ngh Sau thu hoch, tuyn chn nhng chng vi sinh vt có kh năng phân gii tinh bt, xenlulô và sinh tng hp protein, s dng trong x lý và nâng cao cht lưng nguyên liu bã thi tinh bt sn thành thc ăn chăn nuôi. Kt qu tuyn chn các chng vi sinh vt ưc th hin  bng 1. Bảng 1. Hoạt tính sinh học của các chủng vi sinh vật được tuyển chọn STT Loài vi sinh vật Hàm lượng protein thô (%chất khô) Hoạt tính sinh học Đường kính vòng phân giải tinh bột (D-d)mm Đường kính vòng phân giải xenlulô (D-d)mm 1 Aspergillus A 01 34 37 - 2 Monascus MA 01 51 31 28 3 Monascus MA 09 46 36 26 4 Aspergillus A 09 30 35 12 5 Bacillus sp 16 25 16 - 6 Streptomyces sp 06 - 32 24 7 Streptomyces sp 12 - 28 16 8 Streptomyces sp 18 - 26 20 9 Lactobacillus sp 02 25 - - 10 Candida sp SHY 06 36 - - 11 Saccharomyces sp SHY 02 54 - - 12 Saccharomyces sp SHY 01 46 - - (-): Không có hot tính S liu trong bng 1 cho thy hot tính sinh hc ca các chng vi sinh vt phân gii tinh bt u có ưng kính vòng phân gii tinh bt ≥ 30mm, các chng vi sinh vt phân gii xenlulô cho ưng kính vòng phân gii xenlulo ≥ 40mm, trong ó chng nm mc vàng Aspergillus 01 và Aspergillus 09 có ưng kính vòng phân gii tinh bt cao nht (≥35mm), chng nm si Monascus MA 01 và Monascus MA 09 có tính cht a hot tính sinh hc: Phân gii tinh bt và phân gii xenlulo (chng Monascus MA 01 có ưng kính vòng phân gii xenlulo là 28 mm, phân gii tinh bt là 31mm; chng Monascus MA 09 có ưng kính vòng phân gii tinh bt là 36mm, phân gii tinh bt là 31mm); hàm lưng protein trong sinh khi ca chng nm men Saccharomyces sp SHY 02 là cao nht (54% cht khô) sau ó là chng nm si Monascus MA1 cho sn lưng t 51% cht khô. Da vào kt qu nghiên cu,  tài ã la chn chng Aspergillus A 01, Monascus MA 01 và Saccharomyces sp SHY 02 làm vt liu phc v cho các nghiên cu tip theo. 2. Phân loại và đánh giá mức độ an toàn của các chủng vi sinh vật tuyển chọn: - Phân loi chng nm men Saccharomyces sp SHY 02: Chng Saccharomyces sp SHY 02 ưc tuyn chn trên môi trưng Hansen trong iu kin nhit  nuôi cy 28±20C. Sau 48-72 gi nuôi cy, khuNn lc tròn có ưng kính 1,5-2 mm, li, màu vàng nht, c, có mùi thơm ca da chín, kt qu ánh giá cho thy chng Saccharomyces sp SHY 02 là thuc nhóm gram (-). Kt qu phân loi chng SHY 02 bng các kit chuNn và h thng nh danh biolog cho thy chng SHY 02 tương ng vi chng Saccharomyces cerevisie. - Phân loi chng Aspergillus A 01: Chng nm mc Aspergillus A 01 ưc nuôi trên môi trưng PDA  nhit  28±2 0C, sau 7 ngày quan sát c im phát trin và hình thái bng mt thưng và kính hin vi. Theo khóa phân loi ca Klich cho thy, chng Aspergillus A 01 có c im phát trin và hình thái hc tương t như chng chuNn A. oryzae (Ahlburg) Cohn , do vy  tài kt lun rng chng Aspergillus A 01 là chng Aspergillus ozyzae, ký hiu chng ó là Aspergillus ozyzae A 01. - Phân loi chng nm si Monascus MA 01:  phân loi chng Monascus MA 01, tin hành so sánh vi chng chuNn M. purpureus JCM 6934 do Vin Công nghip thc phNm cung cp. T các kt qu nghiên cu v c im nuôi cy, c im hình thái và cu trúc vi hc ca chng nm mc, i chiu vi khóa phân loi ca Philippe van Tieghem, tài liu nghiên cu ca Went và so sánh vi chng chuNn M. purpureus JCM 6934,  tài kt lun chng nm mc Monascus MA 01 thuc loài Monascus purpureus và ưc ký hiu là M. purpureus MA 01. Bảng 2. Kết quả xác định tên và mức độ an toàn của chủng các vi sinh vật STT Ký hiệu chủng Tên xác định Mức độ ATSH 1 Saccharomyces sp SHY 02 Saccharomyces cerevisie SHY 02 Cấp độ 1 2 Aspergillus A 01 Aspergillus ozyzae A 01 Cấp độ 1 3 Monascus MA 01 Monascus purpureus MA 01 Cấp độ 2 Kt qu phân loi trong bng 2 cho thy các chng vi sinh vt la chn ưc nh tên n loài và không nm trong danh mc các chng vi sinh vt hn ch s dng ca Cng ng chung châu Âu, có th trin khai và ng dng trong sn xut. IV. KÕt luËn ã tuyn chn và xác nh ưc 01 t hp gm 02 chng nm mc và 01 chng nm men có kh năng phân gii hp cht cacbonhydrat (xenlulô, tinh bt) và sinh tng hp protein s dng trong sn xut ch phNm VSV x lý ph thi CBTBS dng rn làm thc ăn chăn nuôi. Bng các kit chuNn và h thng nh danh biolog và khóa phân loi ca Klich ã phân loi ti loài các chung vi sinh vt s dng trong nghiên cu, kt qu phân loi cho thy các chng vi sinh vt ưc la chn m bo mc  an toàn sinh hc cp  2 theo Cng ng chung châu Âu. TÀI LIỆU THAM KHẢO 1. Lý Kim Bng, Lê Thanh Bình, T Kim Chnh (1985). ng dng vi sinh vt trong vic bo qun thc ăn cho gia súc. Báo cáo khoa hc. 2. Nguyễn Thùy Châu và cs (2003). Hoàn thiện công nghệ sản xuất nấm men Candida utilis từ rỉ đường”. Đề tài nhánh cấp nhà nước KC 07-14. 3. Nguyễn Thùy Châu và cs (2006). Nghiên cứu áp dụng công nghệ vi sinh hin i  sn xut ch phNm axit amn và enzym t ngun ph ph phNm nông nghip và thy hi sn  quy mô bán công nghip. Báo cáo kt qu tng kt  tài, B khoa hc và công ngh. 4. TCVN 6168:2002. Ch phNm vi sinh vt phân gii xenlulô. 5. Guerra B, Stamford TLM, de Medeiros RB, de Freitas CP, Maia SR, Cavalcante ML. Protein enrichment of pineapple waste for animal feeds. Food Nutr. Bull.;8(1):77-80. 1986. Người phản biện: TS. Nguyễn Hồng Sơn . chn các chng vi sinh vt ưc th hin  bng 1. Bảng 1. Hoạt tính sinh học của các chủng vi sinh vật được tuyển chọn STT Loài vi sinh vật Hàm lượng. bt, xenlulô và sinh tng hp protein, s dng trong x lý và nâng cao cht lưng nguyên liu bã thi tinh bt sn thành thc ăn chăn nuôi. Kt qu tuyn