B GIÁO D C VÀ ĐÀO T O TRƯ NG Đ I H C NƠNG LÂM THÀNH PH H CHÍ MINH KHÓA LU N T T NGHI P PHÂN L P, Đ NH DANH, TH KHÁNG SINH Đ VÀ TH Đ C L C TRÊN CHU T B CH THÍ NGHI M Đ I V I VI KHU N SALMONELLA TRONG PHÂN BỊ T I XÍ NGHI P CHĂN NI BÒ AN PHÚ C CHI H tên sinh viên : TÔ TH THÙY TRANG Ngành : Thú Y Niên khóa : 2003 – 2008 Tháng 09/2008 PHÂN L P, Đ NH DANH, TH KHÁNG SINH Đ VÀ TH Đ C L C TRÊN CHU T B CH THÍ NGHI M Đ I V I VI KHU N SALMONELLA TRONG PHÂN BỊ T I XÍ NGHI P CHĂN NI BỊ AN PHÚ C CHI Tác gi TÔ TH THÙY TRANG Khóa lu n đư c đ trình đ đáp ng yêu c u c p b ng Bác s ngành Thú Y Giáo viên hư ng d n TS LÊ ANH PH NG BSTY LÊ TH HÀ Tháng 09/2008 i L I C M ƠN Chân thành bi t ơn Ban Giám Hi u trư ng ñ i h c Nơng Lâm TP H Chí Minh Ban Ch Nhi m khoa Chăn Ni Thú Y tồn th th y t n tình gi ng d y tơi su t năm ñ i h c Đ c bi t, tơi kính l i c m ơn TS Lê Anh Ph ng BSTY Lê Th Hà ñã t n tình hư ng d n h t lịng giúp đ tơi hồn thành đ tài C m ơn t t c b n l p Thú Y 29 đ ng hành tơi năm qua Tơ Th Thùy Trang ii TĨM T T LU N VĂN Đ tài “Phân l p, ñ nh danh, th kháng sinh ñ th ñ c l c chu t b ch thí nghi m ñ i v i vi khu!n Salmonella phân bị t i xí nghi p chăn ni bị An Phú " C Chi” ñã ñư c th c hi n t# tháng 02/08 ñ n tháng 06/08, t i phịng Vi sinh, khoa Chăn Ni Thú Y trư ng ñ i h c Nông Lâm TP HCM Qua phân l p 204 m u phân bị tươi, có 108 m u phân tiêu ch y 96 m u phân bình thư ng cho k t qu : T$ l nhi%m Salmonella phân bò tiêu ch y (10,19 %) cao phân bị bình thư ng (1,04 %) Bị " đ tu&i ≤ tháng có t$ l nhi%m Salmonella (11,76 %) cao so v i ñ tu&i tháng (2,94 %) Huy t h c: 100 % s ch ng Salmonella phân l p đư c ngưng k t dương tính v i kháng huy t ña giá OMA 25 % s ch ng Salmonella xác ñ nh ñư c Salmonella Enteritidis, 33 % s ch ng Salmonella xác ñ nh ñư c Salmonella Typhi, 42 % s ch ng Salmonella chưa xác ñ nh ñư c c th serovar K t qu kháng sinh ñ : norfloxacin có hi u qu t t nh t ñ i v i ch ng Salmonella phân l p đư c " bị (t$ l đ kháng c a Salmonella ñ i v i norfloxacin %), gentamycin neomycin có hi u qu th p đ i v i Salmonella (t$ l ñ kháng l n lư t 50 % 58,33 %) K t qu li u gây ch t 50 % s chu t thí nghi m (LD50) " ch ng OMA ch ng O9 10-1,7, ch ng H g,m 10-1 T$ l tái phân l p vi khu!n Salmonella t# chu t ch t sau ñư c tiêm Salmonella 100 % iii M CL C Trang Trang t a i L i c m ơn ii Tóm t(t lu n văn iii M c l c iv Danh sách ch) vi t t(t vii Danh sách b ng viii Danh sách bi u ñ ix Danh sách hình ix Danh sách sơ ñ ix Chương M Đ U 1.1 Đ*T V+N Đ, 1.2 M-C ĐÍCH 1.3 YÊU C.U .2 Chương T NG QUAN 2.1 L/CH S0 PHÁT HI1N SALMONELLA 2.2 PHÂN LO2I VÀ CÁCH G3I TÊN 2.3 Đ*C ĐI4M VI KHU5N SALMONELLA 2.3.1 Đ c m hình thái 2.3.2 Đ c m ni c y .5 2.3.3 Đ c tính sinh hóa 2.3.4 C u trúc kháng nguyên ñ c t 2.3.5 S c ñ kháng 10 2.4 S6 PHÂN B7 VÀ LÂY NHI8M 10 2.5 B1NH DO SALMONELLA (THƯƠNG HÀN) 11 2.5.1 Salmonella gây b nh bò 11 2.5.2 Salmonella v n ñ ng ñ c th c ph!m " ngư i 16 2.6 CÁC NGHIÊN C;U TRONG NƯNG KH?O SÁT 19 3.3 V@T LI1U 19 3.3.1 Thi t b d ng c 19 3.3.2 Các môi trư ng 19 3.3.3 Các hóa ch t 20 3.3.4 Đĩa gi y t!m kháng sinh 20 3.3.5 Kháng huy t 20 3.3.6 Đ ng v t thí nghi m 20 3.4 NBI DUNG NGHIÊN C;U VÀ CHC TIÊU THEO DÕI 20 3.5 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN C;U 21 3.5.1 Cách l y m u .21 3.5.2 Phân l p, ñ nh danh, th kháng sinh ñ Salmonella 22 3.5.3 Phương pháp ñ nh type kháng nguyên (ph n ng ngưng k t nhanh phi n kính) 22 3.5.4 Th c hi n kháng sinh ñ 23 3.5.5 Phương pháp tiêm chu t thí nghi m đ xác đ nh ñ c l c c a vi khu!n Salmonella, tính li u gây ch t 50 % (LD50) 24 3.5.6 Quy trình tái phân l p vi khu!n Salmonella 25 3.6 PHƯƠNG PHÁP X0 LÝ S7 LI1U .25 Chương K T QU VÀ TH O LU N 26 4.1 KDT QU? PHÂN L@P VÀ Đ/NH DANH SALMONELLA TE MFU PHÂN BÒ 26 4.1.1 T$ l nhi%m Salmonella phân bò 26 4.1.2 K t qu phân l p xác ñ nh Salmonella t# m u phân bò d a vào ph n ng sinh hóa 27 4.1.3 T$ l nhi%m Salmonella phân bị " mGi đ tu&i 28 4.1.4 TH l nhi%m Salmonella phân bị " mGi đ tu&i theo tính ch t phân 30 4.1.5 T$ l nhi%m Salmonella phân bò theo hư ng khai thác 31 4.1.6 T$ l nhi%m Salmonella phân bò " mGi hư ng khai thác theo tính ch t phân 32 4.1.7 T$ l nhi%m Salmonella phân bị " mGi nhóm gi ng bị .33 v 4.1.8 K t qu th ngưng k t v i kháng huy t ña giá OMA 34 4.1.9 K t qu th ngưng k t v i kháng huy t ñơn giá O9 H g,m 35 4.2 KDT QU? TH6C HI1N KHÁNG SINH ĐI 36 4.3 KDT QU? TH0 ĐBC L6C SALMONELLA TRÊN CHUBT B2CH THÍ NGHI1M 38 4.4 KDT QU? PHÂN L@P L2I VI KHU5N SALMONELLA 39 Chương K T LU N VÀ Đ NGH 40 5.1 KDT LU@N 40 5.2 Đ, NGH/ 40 TÀI LI U THAM KH O 42 PH L C .44 vi DANH SÁCH CÁC CH! VI T T T BWP : Buffered Pepton Water XLD : Xylose Lysine Deoxycholate BGA : Brilliant Green Agar SS : Salmonella Shigella KIA : Kligler Iron Agar LT : Heat – Labile ST : Heat - Stable cGMP : cyclo Guanosine - monophotphate cAMP : cyclo Adenosine - monophotphate LD50 : Lethal Dose 50 HF : Holstein Friesian Ctv : c ng tác viên vii DANH SÁCH CÁC B NG Trang B ng 2.1: Các ph n ng sinh hóa phân bi t loài ph loài Salmonella B ng 2.2: Phân bi t gi)a kháng nguyên O, H Vi B ng 2.3: C u trúc kháng nguyên serovar c a Salmonella quan tr ng thư ng gây b nh cho ñ ng v t B ng 2.4: Các serovar c a Salmonella liên quan ñ n ng ñ c th c ph!m 17 B ng 3.1: B ng phân b l y m u phân bò 21 B ng 3.2: B trí thí nghi m xác đ nh li u gây ch t 50 % 24 B ng 4.1: TH l nhi%m Salmonella phân bò .26 B ng 4.2: K t qu xác ñ nh Salmonella d a vào ph n ng sinh hóa 27 B ng 4.3: TH l nhi%m Salmonella phân bị " mGi đ tu&i 29 B ng 4.4: TH l nhi%m Salmonella phân bị " mGi đ tu&i theo tính ch t phân 30 B ng 4.5: T$ l nhi%m Salmonella phân bò theo hư ng khai thác .31 B ng 4.6: T$ l nhi%m Salmonella phân bò " mGi hư ng khai thác theo tính ch t phân 32 B ng 4.7: T$ l nhi%m Salmonella phân bị " mGi nhóm gi ng bò 33 B ng 4.8: K t qu th ngưng k t v i kháng huy t ña giá OMA .34 B ng 4.9: K t qu th ngưng k t v i kháng huy t ñơn giá O9 H g,m 35 B ng 4.10: K t qu th kháng sinh ñ v i ch ng phân l p Salmonella 36 B ng 4.11: K t qu li u gây ch t 50 % (LD50) chu t b ch .38 B ng 4.12: K t qu phân l p l i vi khu!n Salmonella 39 viii DANH SÁCH CÁC BI"U Đ Trang Bi u ñ 4.1: T$ l nhi%m Salmonella phân bò 26 Bi u ñ 4.2: T$ l nhi%m Salmonella phân bị " mGi đ tu&i .29 Bi u ñ 4.3: T$ l nhi%m Salmonella phân bị tiêu ch y bình thư ng " ñ tu&i 30 Bi u ñ 4.4: T$ l nhi%m Salmonella phân bò theo hư ng khai thác 31 Bi u ñ 4.5: T$ l nhi%m Salmonella phân bị tiêu ch y bình thư ng " hư ng bò khai thác th t s)a 32 Bi u ñ 4.6: T$ l nhi%m Salmonella phân bị " mGi nhóm gi ng bị 33 DANH SÁCH CÁC HÌNH Hình 2.1: C u t o t bào vi khu!n Salmonella Hình 2.2: Hình thái Salmonella dư i kính hi n vi (nhu m Gram) Hình 2.4: Bê ch t b nh thương hàn 12 Hình 2.5: Ru t non b sung huy t 13 Hình 2.6: Th n b xu t huy t .13 Hình 2.7: Ru t non ch y nư c vàng, niêm m c ru t sung huy t, xu t huy t 13 Hình 4.1: Khu!n l c Salmonella mơi trư ng XLD 28 Hình 4.2: Ph n ng IMVC (- + - +) .28 Hình 4.3: K t qu th ngưng k t v i kháng huy t ña giá OMA 34 Hình 4.4: K t qu th kháng sinh ñ c a Salmonella 37 DANH SÁCH CÁC SƠ Đ Sơ ñ 2.1: Ngu n g c lây nhi%m vi sinh v t th c ph!m .16 Sơ ñ 3.1: Phân l p, ñ nh danh, th kháng sinh ñ Salmonella 22 Sơ ñ 3.2: Quy trình tái phân l p vi khu!n Salmonella .25 ix TÀI LI U THAM KH O TÀI LI U TI NG VI T C Le Bas, Tr n Th H nh, Nguy%n Ti n Thành, Nguy%n Bình Minh, L Bily, A Labbé, M Denis, P Pravalo, 2007 Phân tích d ch t h c vi khu!n Salmonella enterica " th t l n trình gi t m& " Vi t Nam b ng phương pháp ñ nh typ huy t n di trư ng xung T p chí Khoa h c k thu t thú y, t p XIV, s 6: 33 – 44 B môn Vi Sinh Truy n Nhi%m, khoa Chăn Nuôi Thú Y, 2006 Giáo trình th c hành vi sinh Trư ng đ i h c Nơng Lâm TP H Chí Minh, trang 61 Tơ Minh Châu Tr n Th Bích Liên, 1999 Bài gi ng vi khu n n m gây b nh thú y Trư ng ñ i h c Nơng Lâm, TP H Chí Minh, trang 42 - 45 Phùng Qu c Chư ng, 2005 K t qu ki m tra tính m n c m ñ i v i m t s thu c kháng sinh c a Salmonella phân l p ñư c t# v t ni t i Daklak T p chí khoa h c k thu t thú y, t p XII, s 1: 47 – 53 Huỳnh Văn Đi m, 2005 Phân l p ñ nh danh vi khu n Salmonella phân, th t bò heo t i m t s t nh mi n tây Nam B Lu n văn t t nghi p khoa Chăn Nuôi Thú Y trư ng Đ i h c Nơng Lâm TP H Chí Minh, Vi t Nam Đinh Th Tuy t H nh, 2006 Phân l p, ñ nh danh th kháng sinh ñ ñ i v i Salmonella phân heo t i tr i chăn nuôi công nghi p Lu n văn t t nghi p khoa Chăn Nuôi Thú Y trư ng Đ i h c Nơng Lâm TP H Chí Minh, Vi t Nam Tr n Th H nh, Nguy%n Văn S u, Nguy%n Quang Tuyên, 2005 K t qu xác đ nh m t s đ c tính sinh hóa y u t gây b nh c a Salmonella phân l p t# bê nghé tiêu ch y m t s t$nh mi n núi phía B(c T p chí khoa h c k thu t thú y, t p XII, s 1: 33 – 40 Ph m S Lăng Phan Đ ch Lân, 2000 B nh thư ng g p bò s a Vi t nam k thu t phòng tr Nhà xu t b n Nông Nghi p Hà N i, 44 – 50 Dương Thanh Liêm, 2007 Giáo trình đ c ch t h c Trư ng đ i h c Nơng Lâm, TP H Chí Minh, trang 135 10 Ph m H ng Ngân, 2008 Phân l p, xác ñ nh serotype m t s y u t gây b nh c a Salmonella t bê dư i tháng tu i T p chí khoa h c k thu t thú y, t p XV, s 2: 39 – 44 11 Tr n Thanh Phong, 1996 B nh truy n nhi m vi trùng heo Trư ng đ i h c Nơng Lâm, TP H Chí Minh, trang 42 12 Lê Anh Ph ng, 2004 Bài gi ng t p hu n vi trùng h c ñư ng ru t t i cơng ty Nafovany Long Thành Trư ng đ i h c Nơng Lâm TP H Chí Minh, trang 35 13 Nguy%n Vĩnh Phư c, 1987 Vi sinh h c Nhà xu t b n Nông Nghi p, Hà N i, trang 15 14 Nguy%n Vĩnh Phư c, 1978 Giáo trình b nh truy n nhi m gia súc Nhà xu t b n Nông Nghi p, Hà N i, trang 46 15 Lê Văn T o, 2004 Nh ng b nh truy n nhi m thư ng g p phòng tr Nhà xu t b n lao ñ ng xã h i, 71 – 75 bò, bò s a cách 16 Nguy%n Ng c Tuân, 2007 Giáo trình v sinh th t Trư ng ñ i h c Nơng Lâm, TP H Chí Minh, trang 138 TÀI LI U TI NG NƯ C NGOÀI 17 Michel Y Popoff Léon Le Minor, 1997 Antigenic formulas of the Salmonella serovars, page 11 18 Quinn P.J, Carter M E, Markey B K, Carter G R, 1998 Clinical Veterinary microbiology TÀI LI U TC INTERNET http://anova.com.vn/contents/article.asp?detail=16&id=303&ucat=43 Truy c p ngày 15/07/2008 http://homepages.uel.ac.uk/u0220158/ Truy c p ngày 20/07/2008 http://www.thanhnien.com.vn/suckhoe/2008/8/6/254639.tno Truy c p ngày 25/06/2008 http://www.ou.edu.vn/vietnam/files/tapsankhoahoc/2006/PDF/so %2003 %20(9)/tskh3/(9)_page77.pdf Truy c p ngày 08/08/2008 43 PH L C CÔNG TH C PHA CH CÁC LO I MÔI TRƯ NG MÔI TRƯ NG TI N TĂNG SINH BPW (Buffered Pepton Water) Thành ph;n Pepton 10 g Sodiumchloride 5g Disodium phosphate 3,5 g Potassium dihydrogen phosphate 1,5 g pH 7,2 ± 0,2 Cách pha ch Cân 20g môi trư ng cho vào 1000 ml nư c c t Hòa tan hòa tồn mơi trư ng Phân ml vào mGi ng nghi m đ y nút bơng l i, sau ti t trùng b ng autoclave " 121oC 15 phút MÔI TRƯ NG TĂNG SINH RVS (Rappaport Vassiliadis Soya pepton broth) Thành ph;n Soya pepton 4,5 g Sodium chloride 7,2 g Potassium dihydrogen phosphate 1,26 g Dipotassium dihydrogen phosphate 0,18 g Magnessium chloride anhydrous 13,58 g Malachite green 0,036 g pH 5,2 ± 0,2 Cách pha ch Cân 26,76 g môi trư ng cho vào 1000 ml nư c c t Hịa tan hồn tồn mơi trư ng Phân 10 ml vào mGi ng nghi m đ y nút bơng l i, sau ti t trùng b ng autoclave " 121oC 15 phút 44 MÔI TRƯ NG CHUYÊN BI T XLD (Xylose Lysine Deoxycholate agar) Thành ph;n Yeast Extract 3g L – Lysine HCL 5g Xylose 3,75 g Lactose 7,5 g Sodium deoxycholate 1g Sodium chloride 5g Sodium thiosufate 6,8 g Ferric amonium citrate 0,8 g Phenol red 0,08 g Agar 12,5 g pH 7,4 ± 0,2 Cách pha ch Cân 53 g môi trư ng cho vào 1000 ml nư c c t vơ trùng, hịa tan đ u mơi trư ng Ti t trùng b ng cách ñun cách th y 45 phút, ñ ngu i kho ng 50oC, rót đĩa petri (kho ng 15 ml / đĩa) MÔI TRƯ NG Đ NH DANH VI KHU N 4.1 KIA (Kligler Iron Agar) Thành ph;n Beef extract 3g Yeast extract 3g Pepton 15 g Proteose pepton 5g Lactose 10 g Dextrose 1g Ferrous sulphate 0,2 g Sodium chloride 5g Sodium thiosuphate 0,3 g Agar 15 g 45 Phenol red 0,024 g pH 7,4 ± 0,2 Cách pha ch Cân 57,5 g môi trư ng vào 1000 ml nư c c t Hịa tan hồn tồn mơi trư ng Phân ml vào mGi ng nghi m, ñ y nút l i Ti t trùng b ng autoclave 121oC 15 phút Đ t nghiêng ng nghi m cho chi u dài ph n ñáy ph n nghiêng có kích thư c b ng 4.2 LDC (Lysine Decarboxylase) Thành ph;n Pepton 5g Yeast extract 3g Dextrose 1g L – Lysine 5g Bromocresol purple 0,02 g Cách pha ch Cân 14 g môi trư ng cho vào 1000 ml nư c c t Hòa tan hồn tồn mơi trư ng Phân ml mơi trư ng vào mGi ng nghi m ñ y nút l i Ti t trùng b ng autoclave " 121oC 15 phút 4.3 Indol Thành ph;n Tryptone 20 g Disodium phosphate 2g Dextrose 1g Potassium nitrate 1g Agar 1g pH 7,2 Cách pha ch Cân 25g môi trư ng vào 1000 ml nư c c t Hòa tan hồn tồn mơi trư ng Phân ml vào mGi ng nghi m đ y nút bơng l i Ti t trùng b ng autoclave 121oC 15 phút 46 4.4 MR – VP Thành ph;n Bufferred pepton 7g Dextrose 5g Dipotassium phosphate 5g pH 6,9 Cách pha ch Cân 17 g môi trư ng vào 1000 ml nư c c t Hịa tan hồn tồn mơi trư ng Phân ml vào mGi ng nghi m đ y nút bơng l i Ti t trùng b ng autoclave 121oC 15 phút 4.5 Simmol citrate Thành ph;n Magnesium sulphate 0,2 g Amonium dihydrogen phosphate 1g Dipotassium phosphate 1g Sodium citrate 2g Sodium chloride 5g Bromothymol blue 0,08 g Agar 15 g pH 6,9 ± 0,2 Cách pha ch Cân 24,28 g môi trư ng vào 1000 ml nư c c t Hịa tan hồn tồn mơi trư ng Phân ml vào mGi ng nghi m đ y nút bơng l i Ti t trùng b ng autoclave 121oC 15 phút Đ ph n nghiêng c a môi trư ng t i đáy ng nghi m MƠI TRƯ NG GI! GI NG VI KHU N TSA (Tryptone Soya Agar) Thành ph;n Tryptone 15 g Soya pepton 5g Sodium chloride 5g Agar 15 g 47 pH 7,3 ± 0,2 Cách pha ch Cân 40 g môi trư ng vào 1000 ml nư c c t Hịa tan hồn tồn mơi trư ng Phân ml vào mGi ng nghi m đ y nút bơng l i Ti t trùng b ng autoclave 121oC 15 phút Đ ph n nghiêng c a mơi trư ng t i đáy ng nghi m MÔI TRƯ NG TH KHÁNG SINH Đ MHA (Mueller Hinton Agar) Thành ph;n Beef extract 300 g Casein amino acid 17,5 g Starch 1,5 g Agar 17 g pH 7,4 Cách pha ch Cân 38 g môi trư ng cho vào 1000 ml nư c c t Hịa tan hồn tồn mơi trư ng Ti t trùng b ng autoclave 121oC 15 phút, ñ nhi t ñ gi m xu ng 50oC, ñ& vào ñĩa petri, kho ng 18 ml / ñĩa THU C TH 7.1 Thu-c th' Kovac’s Thành ph;n Paradimethyl aminobenzadehyde 5g Iso – amyl alcohol 75 ml Acid chlohyride ñ c 25 ml Cách pha ch Cho paradimethyl aminobezandehyde vào c n ñ vào nư c m 50 – 60oC, l(c đ u cho tan hồn tồn, đ i ngu i, cho t# t# HCL ñ c vào B o qu n thu c th " nhi t ñ l nh kho ng 4oC 7.2 Thu-c th' Methyl Red Thành ph;n Methyl red 0,1 g Ethanol (95 %) 300 ml 48 Nư c c t v#a ñ 500 ml 7.3 Thu-c th' VP α - Naphthol 10 % c n KOH 10 % 49 Ph> l>c 1: Phân nhóm serovar c a Salmonella theo c u trúc kháng nguyên Nhóm Tên vi khu!n A Kháng nguyên H Kháng nguyên O pha pha S Paratyphi A 1, 2, 12 A _ S Paratyphi B 1, 4, 5, 12 B 1, S Abortus ovis 4, 12 C 1, S.Abortus bovis 1, 4, 12, 27 B e, n, x S California 4, 12 g, m, t _ S Typhimurium 1, 4, 5, 12 I 1, S Africana 4, 12 r(i) 1, w S Indiana 1, 4, 12 z 1, S Cholerae suis 6, C 1, 6, C 1, S Typhi suis 6, C 1,5 S Paratyphi 6, 7, Vi C 1, C2 S Newport 6, e, h 1, C3 S Virgina d _ S Kentucky ( 20 ) i 26 S Typhi 9, 12, Vi d 26 S Enteritidis 19, 12 i, v 1, S Panama 1, 9, 12 _ _ S Pullorum ( ), 9, 12 _ _ S Anatum 3, 10 e, h 1,6 S London 3, y 1,5 S Newengton 3, 15 e, h 1, S Binza 3, 15 z, 10 1, S Mieapolis ( ), 15, 34 e, h 1, S Illinois ( ), 15, 34 z, 10 1, B C S Cholerae suis var C D E1 E2 E3 Kunzendorf 50 Nhóm Tên vi khu!n Kháng nguyên H Kháng nguyên O pha pha S Inloese 1, 3, 19 d 26 S Cheemeberg 1, 3, 19 z e, n, z, 15 S Senftenberg 1, 3, 19 g, s, t _ F S Rubislaw 11 e, n, x G S Poona 13, 22 z 1, S Horscem ( ), 6, 14, 24 1, v e, n, x S Carraw 6, 14, 24 y 1, S Brazil 16 a 1,5 S Hull 16 b 1, S Camel 17 1, v e, n, x S Cattle 28 a e, n, x S Chicago 28 r 1, N S Landaw 30 i 1, P S Adelaide 35 f, g _ E4 H I J M (trích d n b"i Văn Thiên B o, 2004) 51 Ph> l>c 2: Đư ng kính vịng vơ khu!n chu!n theo phương pháp Kirby – Bauer STT Tên kháng Đư ng kính vịng vơ khu!n sinh Đ kháng Trung gian Nh y c m Norfloxacin ≤ 12 13 - 16 ≥ 17 Colistin ≤8 - 10 ≥ 11 Tetracyclin ≤ 14 15 - 18 ≥ 19 Cefalexin ≤ 14 15 - 17 ≥ 18 Bactrim ≤ 10 11 - 15 ≥ 16 Streptomycin ≤ 11 12 - 14 ≥ 15 Doxycyclin ≤ 12 13 - 15 ≥ 16 Gentamycin ≤ 12 13 -14 ≥ 15 Neomycin ≤ 12 13 - 16 ≥ 17 (Ngu n: b môn Vi Sinh Truy n Nhi%m, khoa Chăn Ni Thú Y, trư ng đ i h c Nông Lâm , Tp HCM, 2006) 52 Ph> l>c 3: K t qu li u gây ch t 50 % chu t b ch c a ch ng 12 (OMA) N ng ñ S chu t S chu t pha loãng ch t s ng canh khu!n 10-1 -2 10 -3 10 -4 10 -5 10 -6 10 -1,7 Ghi chú: LD50: 10 SCD: s ch t d n SSD: s s ng d n S ch t d n S s ng d n SCD/ SCD+SSD T$ l ch t (%) 0 0 11 14 4/4 1/3 0 0 100 33,33 0 0 Ph> l>c 4: K t qu li u gây ch t LD50 chu t b ch c a ch ng (O9) N ng ñ S chu t pha loãng ch t canh khu!n 10-1 -2 10 -3 10 10-4 10-5 -6 10 -1,7 Ghi chú: LD50: 10 S chu t s ng S ch t d n S s ng d n SCD/ SCD+SSD T$ l ch t (%) 2 3 0 11 14 4/6 3/7 2/7 0 66,67 42,86 28,57 0 Ph> l>c 5: K t qu li u gây ch t 50% chu t b ch c a ch ng (Hg,m) N ng đ S chu t pha lỗng ch t canh khu!n 10-1 -2 10 -3 10 -4 10 -5 10 10-6 -1 Ghi chú: LD50: 10 S chu t s ng S ch t d n S s ng d n SCD/ SCD+SSD T$ l ch t (%) 2 3 3 0 0 10 13 16 2/4 1/5 0 0 50 20 0 0 53 Ph> l>c 6: Th i gian gây ch t chu t (gi ) Ch ng (OMA) N ng ñ Ch ng (O9) Ch ng (Hg,m) pha loãng 0- canh 12 24 48 72 12 24 48 72 12 24 48 72 10-1 0 0 0 0 10-2 0 0 0 0 10-3 0 0 1 0 0 10-4 0 0 0 0 0 0 10-5 0 0 0 0 0 0 10-6 0 0 0 0 0 0 TSC 1 0 1 >12- >24- >48- 0- >12- >24- >48- 0- >12- >24- >48- khu!n Ghi chú: TSC: t&ng s ch t 54 X' lý k t qu7 bJng trBc nghi,m chi - Square So sánh tE l, nhi