... ở tôm Penaeus bằng khángthểđơn dòng. Phương pháp khángthểđơndòng
cũng được xem như là 1 công cụ ứng dụng cho những nghiên cứu khác về IHHNV. Khángthểđơn
dòng này có thể phát hiện IHHNV ... tục phát triển khángthể với số lượng
lớn. Sau 2 tuần phát triển, khángthểđơndòng được kiểm tra 1 lần nửa. Kết quả dot blot
cho thấy khángthểđơndòng (ký hiệu MAb-1) có thể phát hiện GP3 ...
WSSV và YHV nhưng không thể hiện bất cứ phản ứng nào. Điều này chứng tỏ khángthể
trên chỉ phản ứng đặc hiệu với duy nhất IHHNV.
Hình 3: Khángthểđơndòng bao quanh các thể vùi của IHHNV ở tế...
... Myeloma
Động vật thí nghiệm
Quần thể tế bào lai
Kháng thểđơndòngkháng
nguyên X
Dòng tế bào lai sinh khángthểđơn dòng
Một tế bào lai sinh kháng thể
khángkháng nguyên X
32
Trường Đại Học ...
“nghiên cứu tạodòng tế bào lai sinh khángthểđơndòngkháng AFP hỗ trợ
chẩn đoán sớm bệnh ung thư tế bào gan ở người”
2. MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU
Tạo được dòng tế bào lai lai sinh khángthểđơndòng (mAb) ... tế bào cơ thể 22
Hình 1.6.Các độc tố trên bị trung hòa bởi khángthể 22
Hình 1.7. Các khángthể đa dòng, mỗi khángthể liên kết với một epitope khác nhau 27
Hình 1.8. Khángthểđơn dòng, liên...
... hiện khángthể mong muốn.
Chọn tế bào từ các giếng có hiệu giá khángthể cao ñể tách dòng.
Tách dòng: Sau khi kiểm tra khả năng tạokhángthể bằng ELISA, ta biết
ñược giếng nào có kháng thể, ... nhiên ñây là khángthể ña dòng do nhiều
dòng tế bào lai tạo thành. ðể có khángthể ñơn dòng ta phải tiến hành tách
dòng như sau:
- Chọn 1 giếng mà dịch nổi có hiệu giá khángthể cao nhất trộn ... chống lại kháng
nguyên khi chúng xâm nhập vào cơ thể.
17
2.1.5.2. Sự kết hợp giữa kháng nguyên và khángthể
Sự kết hợp giữa kháng nguyên và kháng thể.
Khi kháng nguyên với khángthể ñã kích...
... giữa kháng nguyên và khángthể
Sự kết hợp giữa kháng nguyên và kháng thể.
Khi kháng nguyên với khángthể ñã kích thích sinh ra chúng tiếp xúc
thì phản ứng kết hợp kháng nguyên – khángthể sẽ ... một kháng
nguyên, một kháng thể, ñịnh lượng hiệu giá kháng thể, phát hiện kháng
nguyên, khángthể hoặc các yếu tố khác có tham gia trong miễn dịch.
Những phản ứng kháng nguyên – khángthể ... dịch bằng phương pháp ELISA 43
4.2. Lai tạo tế bào lai sản xuất khángthể ñơn dòngkháng P
3
- Al 48
4.3. Tách dòng tế bào lai sinh khángthể ñơn dòngkháng progesteron 51
35
4
2....
... hành đề tài:
“ Nghiên cứu tạokhángthể đa dòngkhángkháng nguyên đặc hiệu trên vỏ bào tử B.
anthracis.”
Mục tiêu của đề tài bao gồm:
Tạokhángthể đa dòngkháng lại 1 protein đặc trưng ... miễn dịch tạokhángthể đa dòngkháng protein BclA tái tổ
hợp trên chuột bạch đã thành công.
+ Thứ hai: Khángthể đa dòngkháng lại protein BclA tái tổ hợp có khả năng bắt cặp với
kháng nguyên ... công kháng
thể đa dòngkháng lại protein BclA tái tổ hợp.
2. Đã tinh sạch được khángthể đa dòngkháng lại protein BclA tái tổ hợp bằng hệ thống cột
sắc ký ái lực HiTrap™ Protein G HP.
3. Kháng...
... gọi là khángthể tự nhiên
(kháng thể không đặc hiệu).
- Khángthể được đưa vào cơ thể gọi là khángthể tập nhiễm (kháng thể
đặc hiệu).
2.3. Khángthểđơndòng
- Các khángthểđơndòng chỉ ... biết một epitope trên một kháng
nguyên.
- Khángthể đa dòng là một tập hợp các khángthể đặc hiệu với các
epitope khác nhau trên một kháng nguyên.
- Khángthểđơndòng được sử dụng rộng rãi ... bằng khángthểđơndòng
5.1. Hạn chế
- Hệ thống miễn dịch của con người nhận diện khángthểđơndòng sản
xuất từ tế bào lá lách ( tế bào lypho B) của chuột như một protein lạ, và
tạo ra các kháng...
... các dòng tế
bào lympho B khác nhau
Đa dòngĐơn dòng
Xuất phát từ một bản sao tế bào B
Hàng loạt biến thể ảnh hưởng
đến hàng loạt phản ứng & độ
chuẩn khángthể
Kháng thểđơndòng có thể ... lách (nguồn tb sản
xuất kháng thể)
Sản xuất khángthểđơn dòng
Kỹ thuật lai
H th ng mi n d chệ ố ễ ị
Chống lại các tác nhân ngoại lai
Định nghĩa: một hệ thống của cơ thể gồm
cơ quan, mô, ... ngoài cơ
thể.
Bước 2: - thư sản xuất nghiệm sản xuất khángthể
Sau vài tuần
tiêm chủng
Xác định khángthể (ELISA)
Lượng thấp
Tăng lên
(kháng nguyên
thô)
Lượng cao
2 tuần
Tăng lên
(kháng...
... hiệu giữa vùng
nhận diện kháng nguyên trên khángthể và cấu
trúc epitope tương ứng.
17
2.2 KHÁNGTHỂĐƠN DÒNG
• Các khángthểđơndòng chỉ nhận biết
một epitope trên một kháng nguyên cho sẵn . ... KHÁNGTHỂ
ĐƠN DÒNG
• Trước đây, việc sản xuất khángthểđơndòng in
vitro rất khó khăn do đời sống ngắn ngủi của các
tương bào. Khángthể chỉ thu được in vivo bằng cách
tiêm một kháng nguyên cụ thể ... nguyên cho sẵn . Theo
định nghĩa, tất cả các khángthểđơndòng cùng
mộtdòng thì giống hệt nhau và được sản xuất bởi
cùng một dòng tương bào.
• Khángthểđơndòng được sử dụng rộng rãi trong sinh
học...
... trường hợp này ta có khángthể đa dòng (polyclonal antibody)
C.I.2 /Kháng thểđơndòng (monoclonal antibody):
Kháng thểđơndòng (monoclonal antibody – mAb ) là khángthể được tạo
thành từ những ... nhận khángthểđơndòng
Page9
C.II.2/ Sản xuất khángthểđơndòng bằng phương pháp in vitro:
Một thuận lợi chính trong việc sử dụng khángthểđơndòng hơn là huyết
thanh miễn dịch đa dòng ...
Tháng 10/2009
Sản xuất và thu nhận khángthểđơndòng
Page3
C/TỔNG QUAN:
C.I/Khái quát về khángthểđơn dòng:
C.I.1 /Kháng thể (antibody) :
Kháng thể là những phân tử
protein được...
... ban đầu, tạo thành dòng tế bào (B), thì
kháng thể do dòng tế bào này tạo ra cũng sẽ có tính đặc hiệu và ái lực KN -
KT cao. Khángthể do dòng tế bào này tạo ra được gọi là khángthểđơndòng
(KTDD). ...
đầu, tạo thành
dòng tế bào (B), thì khángthể do dòng tế bào này tạo ra cũng sẽ có tính đặc
hiệu và ái lực KN - KT cao. Khángthể do dòng tế bào này tạo ra được gọi là
kháng thểđơndòng (KTĐD). ... lớn tế bào hybrid kháng VP28 tự nhiên dòng WS-E4C2. 69
3.2.6. Thu nhận khángthểđơndòng của dòng WS-E4C2 kháng VP28 70
3.2.7. Tóm tắ
t qui trình sản xuất khángthểđơndòngkháng protein vỏ...
... lực. 24
B. Giai đoạn II
: Tạokhángthểkháng độc tố thần kinh alpha 28
1. Gây miễn nhiễm thỏ để tạokhángthểkháng độc tố thần kinh alpha
28
2. Tinh chế khángthể bằng dung dịch Amonium ... Sắc ký lọc
Xác định độc lực
Tạo kháng thể
kháng
độc tố thần kinh alpha
SDS-PAGE gradient
8-18%T
Tinh chế kháng thể
Định tính kháng thể
Định lượng khángthể
Trung hòa độc lực nọc toàn ... tố + KhángthểKháng thể- Độc tố + Thụ quan
Theo cơ chế đó, toàn bộ độc tố được giải phóng nếu lượng khángthể được
tiêm vào đầy đủ cho bệnh nhân. Phức hợp Kháng thể- Độc tố và khángthể thừa...