dung dịch cao phân tử hes

... CứU 3.1. Đối tượng , vật liệu , địa điểm và thời gian nghiên cứu   3.1.1. Đối tượng nghiên cứu              Gồm một số tổ hợp lai F 1­­­  , quần thể F 2   3.1.2. Vật liệu nghiên cứu   * Thí nghiệm trong phòng:  Thiết bị :+ Máy PCR , máy chạy điện di ,  máy chụp ảnh điện  di ,  máy li tâm , máy votex ,  tủ lạnh , lò vi sóng .            + Các loại ống effendof , các loại pipet và đầu tiếp đi kèm .   Thành phần cho phản ứng  PCR            + Cặp mồi phát hiện gen bất dục đực tms2 theo M.T.Lopez  và cộng sự (2003)có trình tự là :               RM11_F:5’­TCTCCTCTTCCCCCGATC­3’             RM11_R:5’­ATAGCGGGCGAGCTTAG­3’  Hóa chất chạy PCR : dNTD , MgCl 2  , Taq ADN polymerase ,  PCR mastermix , nước cất   Hóa chất dùng để chiết tách ADN hệ gen :   Để chọn tạo lúa lai hai dòng thành công thì dòng TGMS  phải nhiều và phong phú,từ đó mới tạo ra được tổ hợp cho  ưu thế lai cao. Hiện nay các dòng TGMS đang được sử  dụng như:103S,T1S­96,64S,287S,36S 2 ,Kim 76S,Pair 64S  và 25S.  Các nhà khoa học đã tìm được 6 gen TGMS(tms1, tms2,  tms3, tms4, tms5, tms6).Mỗi gen này có ngưỡng chuyển  hóa hữu dục và bất dục khác nhau,trong đó,gen tms2 có  ngưỡng chuyển hóa hữu dục ổn định.Nhà chọn tạo giống  đã sử dụng các gen TGMS này lai chuyển vào các  dòng,giống lúa triển vọng để tạo dòng TGMS tốt,có khả  năng phối hợp cao, tạo ra nhiều tổ hợp lai mới cho ưu thế  lai cao như TH3­3,Việt Lai 20,TH3­4,… Thành phần Nồng dộ dung dịch mẹ Nồng độ dung dịch làm việc Hỗn hợp 50ml  dung dịch TE làm  việc Tris­HCl(pH=8) ... TE 3.2.2. Phương pháp nghiên cứu  *   Xác định khả năng chứa gen bất dục đực mẫn cảm với  nhiệt độ tms2 bằng phương pháp PCR : +) Chiết tách ADN tổng số của dòng mẹ TGMS,các tổ hợp phân ly  F 2   theo quy trình cải tiến của Bộ môn Công nghệ sinh học.   Bước 1:Thu ngắt mẫu lá khỏe,dài khoảng 2cm bỏ vào ống  eppendorf có dung tích 1,5ml,đánh dấu tên giống rồi bỏ vào đá  lạnh.    Bước 2:Cối,chày sứ dùng để nghiền mẫu đã được hấp khử  trùng và đặt trong đá lạnh.Các mẫu lá được cắt nhỏ khoảng  0,5cm rồi bỏ vào cối.    Bước 3:Nhỏ 400 µl dung dịch đệm chiết suất ADN vào cối rồi  nghiền nhỏ mẫu lá  cho đến khi dung dịch chuyển sang màu  xanh đen.     Bước 4:Bổ sung thêm 400 µl dung dịch chiết suất AND vào pha  trộn lẫn sau đó hút 400 µl vào ống eppendorf đã được đánh dấu.    Bước 5: Cho 700 µl hỗn hợp Phenol : Chlorofom :  Isoamylalcohol ( 25:24:1 ) 3.2. Nội dung và phương pháp nghiên cứu  * Nội dung nghiên cứu  +) Theo dõi đặc điểm nông sinh học :   Các chỉ tiêu nông sinh học : + Thời gian từ cấy đến bắt đầu trổ(10% số bông thoát khỏi lá  đòng). + Thời gian trổ từ khi bắt đầu trỗ(10% số bông thoát khỏi lá  đòng) đến khi kết thúc trổ (85% thoát khỏi lá đòng) . + Thời gian tự cấy đến chín(85% số hạt chắc màu vàng) + Tổng thời gian sinh trưởng từ gieo đến khi thu hoạch . + Chiều cao cây (cm) cuối cùng : đo từ mặt đất đến mút đầu bông  dài nhất không kể râu . + Chiều dài lá đòng : đo từ gối lá đến đầu mút lá , đo vào giai  đoạn chín sáp.  + Chiều rộng lá đòng.  + Góc độ lá đòng . + Chiều dài bông : đo từ cổ bông đến hết bông vào thời kì  chín  chắc . PHầN ... di phát hiện sản phẩm PCR trên gel agarose 1 % Thành phần Nồng độ dung dịch mẹ Nồng độ dung dịch làm việc Hỗn hợp 10ml  dung dịch chiết  tách Tris­HCl(pH=8) 1M 50mM 0,5ml EDTA(pH=8) 0,5M 0,25mM...

... thơm, nhưng độ chính xác không cao; chỉ thị phân tử nhưng độ chính xác không cao; chỉ thị phân tử BADH2 đã phân biệt chính xác 100% các giống lúa BADH2 đã phân biệt chính xác 100% các giống ... cho thấy chỉ thị phân tử BADH2 có độ tin cậy và chính xác rất cao phân tử BADH2 có độ tin cậy và chính xác rất cao trong việc phân biệt các giống lúa mang gen thơm trong việc phân biệt các giống ... BADH2 Kết quả sử dụng chỉ thị phân tử L05 và BADH2 trong Kết quả sử dụng chỉ thị phân tử L05 và BADH2 trong phân loại các giống mang gen thơm và không mang phân loại các giống mang gen thơm...

... khi phân tích. Ứng dụng chỉ thị phân tử AND xác định gene phục vụ chọn tạo giống lúa thơm Thu và chuyển phần dung dịch phía trên sang ống 1,5 ml mới. Thêm vào ống 300 µl dung dịch ... thị phân tử BADH2 có độ tin cậy và chính xác rất cao trong việc phân biệt các giống lúa mang gen thơm fgr (lúa thơm) và không mang gen thơm fgr (lúa không thơm). Ứng dụng chỉ thị phân ... bằng hệ thống chụp và phân tích hình ảnh Gel Doc 2000. Ứng dụng chỉ thị phân tử AND xác định gene phục vụ chọn tạo giống lúa thơm Kết quả sử dụng chỉ thị phân tử BADH2 để xác định...

... REFERENCES In Vietnamese Bùi Chí Bửu và Nguyễn Thị Lang. 2005. Nghiên cứu và ứng dụng marker phân tử để phát hiện gen kháng rầy nâu trên cây lúa (Oryza sativa L.). Hội nghị khoa học toàn quốc ... 800bp, respectively. This indicated that these varieties could carry BPH resistance gene which was heterozygous at this locus. 5. SUGGESTIONS From these results, the following recommendations ... and 398bp. APPROVAL SUPERVISOR STUDENT Dr. TRAN NHAN DUNG NGUYEN NG.QUYNH ANH Can Tho, November 25, 2010 PRESIDENT OF EXAMINATION COMMITTEE ...

... tính chất ion cao sẽ làm cho dung dịch đệm trở nên năng động rất nhiều. Do đó nồng độ Mg 2+ cao hay thấp đều tạo ra những ảnh hƣởng rất lớn. Nồng độ Mg 2+ cao sẽ làm cho phân tử DNA mạch ... về nhiệt độ bắt cặp của mồi. Dung dịch đệm Môi trƣờng đệm KCl đã và đang đƣợc áp dụng là một dung dịch đệm rất hữu hiệu cho kỹ thuật PCR. Ngoài ra còn có dung dịch điệm NaCl dùng cho việc khuếch ... sulphate cho những sản phẩm PCR có trọng lƣợng phân tử thấp (Holm và ctv, 1991). pH của dung dịch đệm cũng đƣợc xem xét kỹ trong kỹ thuật PCR. Hầu hết các dung môi phản ứng đƣợc đệm trong môi trƣờng...

... qua phần tử tứ giác với hàm dạng tuyến tính. Đây là một phần tử thông dụng trong PP-PTHHMR vì việc tính toán dựa trên phần tử này không quá phức tạp và chính xác hơn so với phần tử tam giác ... (36) ( act J là tích phân J thực; aux J là tích phân J bổ trợ; M ñược gọi là tích phân tương tác và M W ñược gọi là năng lượng tương tác) Từ mối quan hệ của tích phân J và hệ số mật ñộ ... PHẦN TỬ HỮU HẠN MỞ RỘNG (PP-PTHHMR) Ý tưởng cơ bản của PP-PTHHMR là mở rộng không gian hữu hạn phần tử bằng cách cộng thêm những hàm mở rộng. Khảo sát một ñiểm x thuộc miền phần tử, xấp...

... PCR Thành phần Nồng dộ dung dịch mẹ Nồng độ dung dịch làm việc Hỗn hợp 50ml  dung dịch TE  làm việc Tris­HCl(pH=8) 1M 10mM 0,5ml EDTA(pH=8) 0,5M 1mM 0,1ml H 2 O 49,4ml Thành phần dung dịch đệm TE • Hóa ... Nghiên cứu ứng dụng chỉ thị phân tử DNA để chọn lọc gen tms2 tạo ra các dòng  TGMS mới” Người hướng dẫn : 1.PGS.TS.Phan Hữu Tôn                                   2.KS.Tống Văn Hải                     Bộ môn : Công nghệ sinh học ứng dụng                     Khoa CNSH­Trường ĐHNN­Hà Nội Người thực hiện : SV.Nguyễn Thị Hồng Hạnh Lớp                    :06­02 CNSH   3.2.2. Phương pháp nghiên cứu  *   Xác định khả năng chứa gen bất dục đực mẫn cảm với  nhiệt độ tms2 bằng phương pháp PCR : +) Chiết tách ADN tổng số của dòng mẹ TGMS,các tổ hợp phân ly  F 2   theo quy trình cải tiến của Bộ môn Công nghệ sinh học.   Bước 1:Thu ngắt mẫu lá khỏe,dài khoảng 2cm bỏ vào ống  eppendorf có dung tích 1,5ml,đánh dấu tên giống rồi bỏ vào đá  lạnh.    Bước 2:Cối,chày sứ dùng để nghiền mẫu đã được hấp khử  trùng và đặt trong đá lạnh.Các mẫu lá được cắt nhỏ khoảng  0,5cm rồi bỏ vào cối.    Bước 3:Nhỏ 400 µl dung dịch đệm chiết suất ADN vào cối rồi  nghiền nhỏ mẫu lá  cho đến khi dung dịch chuyển sang màu  xanh đen.     Bước 4:Bổ sung thêm 400 µl dung dịch chiết suất AND vào pha  trộn lẫn sau đó hút 400 µl vào ống eppendorf đã được đánh dấu.    Bước 5: Cho 700 µl hỗn hợp Phenol : Chlorofom :  Isoamylalcohol ( 25:24:1 ) STT ... Thành phần Nồng độ dung dịch mẹ Nồng độ dung dịch làm việc Hỗn hợp 10ml  dung dịch chiết  tách Tris­HCl(pH=8) 1M 50mM 0,5ml EDTA(pH=8) 0,5M 0,25mM...

... 28.10% Cao 7 10101 31.30% Cao 20 10248 30.90% Cao 8 10111 30.40% Cao 21 10259 29.70% Cao 9 10115 31.80% Cao 22 10279 23.30% TB 10 10119 35.10% Cao 23 10715 35.90% Cao 11 10120 36.60% Cao 24 10716 ... 31.10% Cao 2 10059 17.50% Thấp 15 10175 35.40% Cao 3 10063 35.60% Cao 16 10243 30.60% Cao 4 10067 7.90% Rất thấp 17 10244 31.32% Cao 5 10069 26.40% Cao 18 10246 28.70% Cao 6 10091 38.80% Cao 19 ... tới khi thành dịch màu xanh lá cây. Bổ sung 400µl dịch chiết vào cối rồi chuyển sang ống eppendorf. Thêm 700 µl dung dịch phenol: chloroform: Isoamyalcohol (25:24:1), ly tâm và thu dịch nổi. Tủa...

... không thơm cho thấy: + Các chỉ thị phân tử RG28, RM342 không phân biệt được các giống lúa mang gen thơm và không mang gen thơm. + Chỉ thị phân tử L05 có thể phân biệt được giữa các giống lúa ... lúa. Ứng dụng chỉ thị phân tử AND xác định gene phục vụ chọn tạo giống lúa thơm Thu và chuyển phần dung dịch phía trên sang ống 1,5 ml mới. Thêm vào ống 300 µl dung dịch Isopropanol, ... thị phân tử BADH2 có độ tin cậy và chính xác rất cao trong việc phân biệt các giống lúa mang gen thơm fgr (lúa thơm) và không mang gen thơm fgr (lúa không thơm). Ứng dụng chỉ thị phân...

... các văc-xin với nhau. - Loại phản ứng miễn dịch và hiện tượng chuyển hướng miễn dịch: đối với các tác nhân gây bệnh ngoại bào, đáp ứng miễn dịch dịch thể là thích hợp (loại đáp ứng này được ... đáp ứng miễn dịch tế bào qua CD8 được kích thích. Tuy nhiên phương BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI II Nguyễn Thị Thanh Hương TIỂU LUẬN: Môn miễn dịch học phân tử Vấn đề:Vacxin. Lớp: ... ra loại đáp ứng miễn dịch mong muốn. Thí dụ, chất nhôm phosphate và các oligonucleotide chứa CpG demethyl hóa đưa vào vắc-xin khiến đáp ứng miễn dịch phát triển theo hướng dịch thể (tạo kháng...

... các văc-xin với nhau. - Loại phản ứng miễn dịch và hiện tượng chuyển hướng miễn dịch: đối với các tác nhân gây bệnh ngoại bào, đáp ứng miễn dịch dịch thể là thích hợp (loại đáp ứng này được ... lympho Th1). Ngược lại, đáp ứng miễn dịch tế BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI II Nguyễn Thị Thanh Hương TIỂU LUẬN: Môn miễn dịch học phân tử Vấn đề:Vacxin. Lớp: Sinh học thực ... chất (đáp ứng miễn dịch không thích hợp) hoặc về mặt lượng (không có đáp ứng miễn dịch) . Nguyên nhân gây kém hiệu quả về lượng: - Các "lỗ hổng" trong kho tàng miễn dịch: trên lý thuyết,...