Đang tải... (xem toàn văn)
Khảo sát sự ra hoa trong ống nghiệm ở cây lan sò và cây bắt ruồi
KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Dischidia pectinoides Pearson) (Drosera burmannii Vahl) 2007 Thành phố Hồ Chí Minh Tháng 08/2007 Dischidia pectinoides (Drosera burmannii Vahl) Thành phố Hồ Chí Minh Tháng 08/2007 ii : - - - TS. - , L . - n. iii NGUYỄN THỊ NGỌC TÚ, Đại học Nông Lâm Tp. Hồ Chí Minh. Tháng 08/2007 KHẢO SÁT SỰ RA HOA TRONG ỐNG NGHIỆM Ở CÂY LAN SÒ (Dischidia pectinoides Pearson) và CÂY BẮT RUỒI (Drosera burmannii Vahl)” Hội đồng hƣớng dẫn: TS. Trần Thị Dung Đề tài đƣợc thực hiện từ tháng 03/2007 đến tháng 08/2007 tại Bộ môn Công nghệ sinh học Trƣờng Đại học Nông Lâm Tp.HCM. Cây lan sò và cây bắt ruồi in vitro đƣợc nuôi cấy trong môi trƣờng cảm ứng ra hoa với các yếu tố cảm ứng đƣợc sử dụng là GA3, BA, cƣờng độ ánh sáng và sự gia tăng nồng độ KH2PO4, giảm nồng độ NH4NO3. Những kết quả thu đƣợc: Đối với cây lan sò - Môi trƣờng thích hợp nhất để cây lan sò ra hoa trong ống nghiệm (đạt tỉ lệ 44,4%) là môi trƣờng MS có bổ sung GA3 1,5mg/l. Cây ra nụ sau 78 ngày nuôi cấy và ra hoa sau 95,5 ngày, trung bình đạt 7 hoa/cây. - Môi trƣờng có bổ sung BA hoặc thay đổi cƣờng độ ánh sáng không có ảnh hƣởng nhiều trên sự ra hoa của cây lan sò in vitro. Đối với cây bắt ruồi - Việc thay đổi nồng độ KH2PO4 và NH4NO3 không có ảnh hƣởng tốt trên sự ra hoa của cây bắt ruồi in vitro. Cây chỉ ra nụ nhƣng tỉ lệ không cao hơn so với đối chứng. Tất cả các nụ đều không nở thành hoa. iv ABSTRACT NGUYEN THI NGOC TU, Nong Lam University, HCM city, August, 2007. “The study of flowering in vitro in Dischidia pectinoides Pearson and Drosera burmannii Vahl.” Supervisor: Tran Thi Dung, Ph.D The subject was studied from 3/2007 to 8/2007 at the Department of Biotechnology at Nong Lam University. Dischidia pectinoides and Drosera burmannii in vitro were cultured in basic medium Murashige and Skoog (MS) and the supplement with different plant growth regulator such as: GA3, BA; the change of the intensity of light, KH2PO4, NH4NO3. Results: In Dischidia pectinoides The best medium for flower induction is MS medium supplemented with 1.5mg/l GA3. The plants has formed flower buds after 78 days and bloomed after 95.5 days. There are 7 flowers in plant. The effect of MS medium supplemented with BA or changed the intensity of light isn’t clearly. In Drosera burmannii The change of KH2PO4 and NH4NO3 concentrations didn’t effect in fowering in vitro in Drosera burmannii. The plants was formed flower buds, but ratio isn’t higher when compared with control treatment. All of flower buds didn’t bloom. v CHƢƠNG TRANG Trang tựa . i Lời cảm tạ ii Tóm tắt iii Mục lục v Danh sách các bảng . viii Danh sách các hình x Chƣơng 1: MỞ ĐẦU 1 1.1. Đặt vấn đề . 1 1.2. Mục đích yêu cầu 2 1.2.1. Mục đích 2 1.2.2. Yêu cầu 2 Chƣơng 2:TỔNG QUAN TÀI LIỆU . 3 2.1. Giới thiệu về đối tƣợng nghiên cứu 3 2.2.1. Giới thiệu khái quát về cây lan sò . 3 2.1.2. Giới thiệu khái quát về cây bắt ruồi . 5 2.2. Các yếu tố ảnh hƣởng lên sự ra hoa ngoài tự nhiên 6 2.2.1. Độ tuổi cây . 7 2.2.2. Môi trƣờng . 7 2.2.2.1. Tình trạng dinh dƣỡng . 7 2.2.2.2. Nhiệt độ . 8 2.2.2.3. Quang kỳ 8 2.2.2.4. Hiện tƣợng xuân hóa (hay sự thọ hàn) . 13 2.3. Các yếu tố ảnh hƣởng lên sự ra hoa in vitro . 15 2.3.1. Độ tuổi cây . 16 vi 2.3.2. Dinh dƣỡng 16 2.3.2.1. Nồng độ đƣờng 16 2.3.2.2. Hàm lƣợng photpho và nitơ 17 2.3.3. Các chất điều hòa sinh trƣởng . 18 2.3.3.1. Cytokinins 18 2.3.3.2. Auxins . 19 2.3.3.3. Gibberellins . 19 2.3.4. Các yếu tố khác . 20 2.4. Sự phát triển hoa in vitro . 22 2.5. Các nghiên cứu ra hoa in vitro 23 2.5.1. Trên thế giới 23 2.5.2. Trong nƣớc 24 Chƣơng 3: NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 26 3.1 Thời gian và địa điểm nghiên cứu 26 3.2 Nội dung 26 3.3 Bố trí thí nghiệm 26 3.3.1 Nội dung 1: Khảo sát sự ra hoa in vitro của cây lan sò 27 Thí nghiệm 1: Ảnh hƣởng của cƣờng độ ánh sáng đến sự tạo sò và ra hoa in vitro của cây lan sò. . 26 Thí nghiệm 2: Ảnh hƣởng của nồng độ GA3 đến sự ra hoa in vitro của cây lan sò trên môi trƣờng có và không có bổ sung nƣớc dừa . 27 Thí nghiệm 3: Ảnh hƣởng của nồng độ BA đến sự tạo sò và ra hoa in vitro của cây lan sò. 28 3.3.2 Nội dung 2: Khảo sát sự ra hoa in vitro của cây bắt ruồi 28 Thí nghiệm 1: Ảnh hƣởng của nồng độ KH2PO4 đến sự ra hoa in vitro của cây bắt ruồi. 28 Thí nghiệm 2: Ảnh hƣởng của nồng độ NH4NO3 đến sự ra hoa in vitro của cây bắt ruồi 29 3.4. Chỉ tiêu theo dõi 29 vii 3.4.1 Theo dõi khả năng tạo chồi và sinh trƣởng . 29 3.4.2 Theo dõi sự ra hoa 29 3.5 Phƣơng pháp tiến hành . 30 3.5.1 Môi trƣờng nuôi cấy . 30 3.5.2 Chuẩn bị mẫu cấy . 30 3.5.3 Điều kiện nuôi cấy 30 3.5.4 Xử lý số liệu . 30 Chƣơng 4: KẾT QUẢ THẢO LUẬN 31 Chƣơng 5: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 51 5.1. Kết luận . 51 5.2. Đề nghị 51 TÀI LIỆU THAM KHẢO 52 PHỤ LỤC 1 PHỤ LỤC 2 viii : Các nghiệm thức thí nghiệm ảnh hƣởng của cƣờng độ ánh sáng đến sự tạo sò và ra hoa trên cây lan sò trong ống nghiệm 26 : Các nghiệm thức thí nghiệm ảnh hƣởng của nồng độ GA3 đến sự ra hoa in vitro ở cây lan sò trên môi trƣờng có và không có bổ sung nƣớc dừa 27 : Các nghiệm thức thí nghiệm ảnh hƣởng của nồng độ BA đến sự tạo sò và ra hoa in vitro trên cây lan sò 28 : Các nghiệm thức thí nghiệm ảnh hƣởng của nồng độ KH2PO4 đến sự ra hoa in vitro trên cây bắt ruồi . 28 : Các nghiệm thức thí nghiệm ảnh hƣởng của nồng độ NH4NO3 đến sự ra hoa in vitro trên cây bắt ruồi. . 29 . Ảnh hƣởng của cƣờng độ ánh sáng đến sự gia tăng số chồi của cây lan sò in vitro . 31 . Ảnh hƣởng của cƣờng độ ánh sáng đến sự gia tăng lá của cây lan sò in vitro 32 . Ảnh hƣởng của nồng độ GA3 đến số chồi của cây lan sò in vitro trên môi trƣờng có và không có bổ sung nƣớc dừa. . 34 4. Ảnh hƣởng của nồng độ GA3 đến sự sinh trƣởng lá của cây lan sò in vitro trên môi trƣờng có và không có bổ sung nƣớc dừa . . 36 . Ảnh hƣởng của nồng độ GA3 đến sự ra hoa in vitro của cây lan sò trên môi trƣờng có và không có bổ sung nƣớc dừa 37 . Ảnh hƣởng của nồng độ BA đến sự gia tăng số chồi của cây lan sò in vitro . 42 . Ảnh hƣởng của nồng độ BA đến sự gia tăng số lá của cây lan sò in vitro . 42 8. Ảnh hƣởng của nồng độ KH2PO4 đến sự sinh trƣởng chiều cao ix của cây bắt ruồi in vitro 45 . Ảnh hƣởng của nồng độ KH2PO4 đến sự ra hoa in vitro của cây bắt ruồi 46 . Ảnh hƣởng của nồng độ NH4NO3 đến sự sinh trƣởng chiều cao của cây bắt ruồi in vitro 47 . Ảnh hƣởng của nồng độ NH4NO3 đến sự ra hoa của cây bắt ruồi in vitro 48 [...]... tiền hoa Sự tƣợng hoa Sự chuyển tiếp ra hoa cần khoảng 2-3 ngày để dẫn tới sự tƣợng hoa, tức sự sinh cơ quan hoa (quan sát đƣợc dƣới kính hiển vi) Sự phát triển của các sơ khởi hoa nói chung xảy ra nhanh chóng, làm chồi phồng lên thành nụ hoa (dễ thấy dƣới kính lúp, qua lát cắt dọc) Sự tăng trƣởng và nở hoa Khi sự tƣợng hoa hoàn thành, nụ hoa có thể tiếp tục tăng trƣởng và nở (trƣờng hợp các cây nhất... đóa hoa lan đầu tiên nở trong ống nghiệm ở loài lan Dendrobium Mild Yumi [17] Lê Hồng Thủy Tiên và ctv (2006) điều khiển ra hoa thành công cây dừa cạn (Catharanthus roseus) trong điều kiện in vitro Theo thí nghiệm này, môi trƣờng thích hợp nhất cho sự ra hoa của cây dừa cạn trong ống nghiệm là môi trƣờng MS bổ sung 0,05 mg/l TDZ và 0,1 mg/l NAA Tỉ lệ ra hoa là 100% Cây ra nụ sau 58 ngày nuôi cấy và. .. lan sò và cây bắt ruồi ra hoa trong ống nghiệm 1.2.2 Yêu cầu Theo dõi sự sinh trƣởng và phát triển của cây lan sò và cây bắt ruồi in vitro: - Trong môi trƣờng nuôi cấy có sự thay đổi nồng độ chất dinh dƣỡng và nồng độ chất kích thích sinh trƣởng - Trong các điều kiện ánh sáng khác nhau 3 Chƣơng 2 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 GIỚI THIỆU VỀ ĐỐI TƢỢNG NGHIÊN CỨU 2.2.1 Giới thiệu khái quát về cây lan sò Nguồn... tuổi của cây mẹ có khả năng ảnh hƣởng lên sự ra hoa in vitro ở cây rau diếp xoăn Tƣơng tự, ở cây hoa hồng, G Y Wang+ và cộng sự cũng nhận thấy cây mẹ hoa hồng còn trẻ và khỏe mạnh sẽ làm tăng sức sống và sự đồng đều của mẫu cấy trƣớc khi đƣa vào môi trƣờng cảm ứng tạo hoa Hơn nữa, thời gian của giai đoạn tiền nuôi cấy cũng ảnh hƣởng mạnh tới khả năng tạo hoa của cây hoa hồng sau khi đƣợc đƣa vào môi... trên và đƣợc sự đồng ý của Bộ môn Công nghệ sinh học trƣờng Đại học Nông Lâm, dƣới sự hƣớng dẫn của TS.TRẦN THỊ DUNG, chúng tôi tiến hành đề tài nghiên cứu: KHẢO SÁT SỰ RA HOA TRONG ỐNG NGHIỆM Ở CÂY LAN SÕ (Dischidia pectinoides Pearson) VÀ CÂY BẮT RUỒI (Drosera burmannii Vahl) 1.2 MỤC ĐÍCH YÊU CẦU 1.2.1 Mục đích Khảo sát ảnh hƣởng của các yếu tố môi trƣờng và điều kiện nuôi cấy thích hợp để cây lan sò. .. Chẳng hạn ở cây nhân sâm, hoa tạo ra trong điều kiện in vitro có kích thƣớc nhỏ hơn so với hoa trong điều kiện tự nhiên mặc dù hoa vẫn có đầy đủ các cơ quan hoa) [23]; ở cây hoa hồng, đôi lúc hoa bị đột biến, cánh hoa không đều, đài hoa chƣa chuẩn hoặc có khi chƣa ra đƣợc màu giống với hoa trồng trong môi trƣờng thiên nhiên [26]; ở cây Gentiana triflora Pall var axillarflora, tuy màu sắc hoa có sáng... đoạn phát triển của hoa lan sò in vitro 39 Hình 4.2: Hoa lan sò in vitro 40 Hình 4.3: Những biểu hiện bất thƣờng của hoa lan sò in vitro 41 Hình 4.4: Ảnh hƣởng của BA trên sự tạo chồi và gia tăng số lá của cây lan sò in vitro 44 Hình 4.5: Các giai đoạn phát triển của hoa bắt ruồi in vitro 49 Hình 4.6: Cấu tạo hoa và các cơ quan bên trong của nụ hoa bắt ruồi in vitro 50... Jumin và Nito, 1996; Jumin và Ahmad 1999) Cytokinin cần thiết cho sự sinh trƣởng và phát triển của nụ hoa đƣợc báo cáo ở cả cây một lá mầm (Mohanram và Batra, 1970; Zhong và ctv, 1992) và hai lá mầm (Rastogi và Sawhney, 1987; Narasimhulu và Reddy, 1984) Cytokinin có thể cảm ứng tạo hoa khi sử dụng đơn lẻ (Duan và Yazawa, 1995; Jumin và Nito, 1996; Nadgauda và ctv, 1997; Jumin và Ahmad, 1999) Ở một... (Margana và Touraud, 1968; C Nitsch, 1967, 1972) Trong một vài trƣờng hợp ngƣời ta thấy rằng sucrose có thể thay thế hoàn toàn sự kích thích ngày dài ở các cây in vitro (Lona, 1948; Baldev, 1959, 1962; Deltour, 1967) Zeatin có thể thay thế kích thích ngày ngắn cho sự nở hoa của cây Wolffia microscopica (Margara và ctv, 1965) [9] 2.4 SỰ PHÁT TRIỂN HOA IN VITRO Sự khởi đầu ra hoa ở cây xảy ra thƣờng... mg/l NAA Tỉ lệ ra hoa là 100% Cây ra nụ sau 58 ngày nuôi cấy và 68 ngày thì hoa nở, trung bình có 4 hoa/ cây [4] Nguyễn Thị Mỹ Duyên và ctv (2007) đã tiến hành thí nghiệm nở hoa trong ống nghiệm trên hai giống lan Dendrobium mini và Giả Hạc và đã đạt đƣợc thành công đáng kể khi hai loại hoa lan này đã lần lƣợt ra hoa trong ống nghiệm [13] . sò và cây bắt ruồi ra hoa trong ống nghiệm. 1.2.2. u Theo dõi sự sinh trƣởng và phát triển của cây lan sò và cây bắt ruồi in vitro: - Trong môi. Chí Minh. Tháng 08/2007 KHẢO SÁT SỰ RA HOA TRONG ỐNG NGHIỆM Ở CÂY LAN SÒ (Dischidia pectinoides Pearson) và CÂY BẮT RUỒI (Drosera burmannii Vahl)” Hội