Đánh giá tác động của chế phẩm viên nén từ nhân hạt neem lên ngài gạo BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP. HCM BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC ***000*** Lê Thị Diệp Phụng
ĐÁNH GIÁ TÁC ĐỘNG CỦA CHẾ PHẨM VIÊN NÉN TỪ NHÂN HẠT NEEM (Azadirachta Indica A. Juss)
LÊN NGÀI GẠO (Corcyra Cephalonica St.) Luận văn kỹ sƣ Chuyên ngành: Công nghệ sinh học Tp. Hồ Chí Minh Tháng 9/ 2006 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP. HCM BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC ***000***
ĐÁNH GIÁ TÁC ĐỘNG CỦA CHẾ PHẨM VIÊN NÉN TỪ NHÂN HẠT NEEM (Azadirachta Indica A. Juss)
LÊN NGÀI GẠO (Corcyra Cephalonica St.) Giáo
Viên Hƣớng dẫn: Sinh
viên thực Hiện: Th.s Lê Thị Thanh Phƣợng Lê Thị Diệp Phụng Tp. Hồ Chí Minh Tháng 9/ 2006 MINISTRY OF EDUCATION AND TRAINING NONG LAM UNIVERSITY, HCMC DEPARMENT OF BIOTECHNOLOGY ***000*** TO APPRECIATE THE EFFECT OF PRODUCTION FROM
NEEM KERNEL (Azadirachta Indica A. Juss) ON RICE MOTH ( Corcyra Cephalonica St.) Graduation thesis Major: Biotechnology Professor Student MSc Lê Thị Thanh Phƣợng Lê Thị Diệp Phụng Term: 2002 - 2006 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC *************** KHÓA LUẬN TỐT
NGHIỆP ĐÁNH GIÁ TÁC ĐỘNG CỦA
CHẾ PHẨM VIÊN NÉN TỪ NHÂN HẠT NEEM (Azadirachta Indica A. Juss)
LÊN NGÀI GẠO (Corcyra Cephalonica St.) Ngành học: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Niên khóa: 2002 – 2006 Sinh
viên thực hiện: LÊ THỊ DIỆP PHỤNG Thành phố Hồ Chí Minh Tháng 8/ 2006BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC *************** KHÓA LUẬN TỐT
NGHIỆP ĐÁNH GIÁ TÁC ĐỘNG CỦA
CHẾ PHẨM VIÊN NÉN TỪ NHÂN HẠT NEEM (Azadirachta Indica A. Juss)
LÊN NGÀI GẠO (Corcyra Cephalonica St.) Giáo
viên hƣớng dẫn: Sinh
viên thực hiện: Th.S. LÊ THỊ THANH PHƢỢNG LÊ THỊ DIỆP PHỤNG Thành phố Hồ Chí Minh Tháng 8/ 2006 LỜI CÁM ƠN ! Trƣớc tiên, tôi xin chân thành cảm ơn Ban Giám Hiệu nhà trƣờng, cùng quý Thầy cô thuộc khoa Công Nghệ Sinh Học, Trƣờng Đại Học Nông Lâm Thành Phố Hồ Chí Minh, đã truyền đạt cho tôi những kiến thức, kinh nghiệm, chuyên môn quý báu trong suốt thời gian học tập tại trƣờng. Xin gửi lời biết ơn sâu sắc đến cô Lê Thị Thanh Phƣợng,
Viện Sinh Học Nhiệt Đới đã tận tình hƣớng dẫn, giúp đỡ, tạo mọi điều kiện cũng nhƣ
đóng góp những ý kiến quý báu để tôi hoàn thành luận văn này. Xin cảm ơn ban giám đốc, toàn thể các thầy cô, anh chị, phòng ban trong
Viện Sinh Học Nhiệt Đới đã tận tình hƣớng dẫn, chỉ bảo, giúp đỡ tôi rất nhiều trong thời gian thực tập tại Viện. Xin cảm ơn tất cả các bạn bè đã
động viên giúp đỡ tôi trong những năm tháng học tập tại trƣờng. Cuối cùng, xin gửi lời cám ơn và biết ơn sâu sắc đến các bậc sinh thành, những ngƣời đã nuôi dạy tôi
nên ngƣời, các anh, chị và các em trong
gia đình đã luôn
động viên, chia sẻ, giúp đỡ tôi trong suốt quá trình học tập. Chân thành cám ơn Sinh
viên Lê Thị Diệp Phụng TÓM TẮT Đề tài “ Nghiên cứu tạo
chế phẩm viên nén từ nhân hạt neem (Azadirachta Indica A. Juss) để phòng trừ
ngài gạo (Corcyra Cephalonica St.)” đƣợc thực hiện tại
Viện Sinh Học Nhiệt Đới, Thủ Đức, TP Hồ Chí Minh, thời gian
từ tháng 2 tới tháng 7/2006. Trong đó 4
chế phẩm (ký hiệu là NV1, NV2, NV3, NV4) đƣợc tạo
từ dầu
neem 10 % phối hợp với dịch chiết bánh dầu ở bốn nồng độ 5 – 10 – 15 – 20 %, trên
nền bột talc có kết hợp thêm dầu thông và chất bảo quản BHT (butylhydroxi toluene), đƣợc thử nghiệm hiệu lực đối với
ngài gạo. Thí nghiệm đƣợc bố trí theo kiểu hoàn toàn ngẫu nhiên, 3 lần lặp lại trong điều kiện phòng thí nghiệm. Số liệu đƣợc xử lý theo phƣơng pháp phân tích biến lƣợng ANOVA và phân nhóm xếp hạng các nghiệm thức bằng trắc nghiệm Duncan. Trị số LD50 đƣợc tính theo phƣơng pháp phân tích probit. Kết quả thu đƣợc nhƣ sau: + Kết quả phân tích bằng sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) cho hàm lƣợng azadirachtin, nimbin và salannin tƣơng ứng là 930,69 ppm; 262,58 ppm và 1027,48 ppm trong dầu
neem và 7703,61 ppm; 841,09 ppm và 3214,56 ppm trong dịch chiết bánh dầu. + Kết quả thử nghiệm bƣớc đầu trên
ngài gạo (Corcyra cephalonica St.) cho thấy các
chế phẩm đều có khả năng ức
chế ngài gạo theo nhiều phƣơng thức và mức độ khác nhau * Gây chết:
giá trị LC50
của các
chế phẩm ở thời điểm 7 ngày sau xử lý đƣợc xác định là 0,8948; 0,3503; 0,1948 và 0,1881 g/ dm3, tƣơng ứng với NV1, NV2, NV3 và NV4. * Ức
chế sinh sản:
Chế phẩm NV3 và NV4 có hiệu lực ức
chế sức sinh sản
của ngài gạo (thông qua giảm số lƣợng trứng và tỉ lệ trứng nở) mạnh hơn nhiều so với
chế phẩm NV2 và NV1. Các nghiệm thức xử lý
chế phẩm đều khác biệt có ý nghĩa so với đối chứng. * Ngoài ra, các
chế phẩm cũng gây biến dạng thành trùng và làm giảm có ý nghĩa trọng lƣợng nhộng, qua đó góp phần hạn
chế sự phát triển
của ngài gạo theo thời gian. MỤC LỤC CHƢƠNG TRANG Trang tựa Lời cảm ơn . iii Tóm tắt . . iv Mục lục………… v
Danh sách các bảng . viii
Danh sách các hình và biểu đồ ix 1. ĐẶT VẤN ĐỀ . 1 2. TỔNG QUAN 3 2.1. Phân loại và đặc điểm thực vật học . 3 2.1.1. Phân loại . 3 2.1.2. Đặc điểm thực vật học . 4 2.2. Đặc tính sinh thái, kỹ thuật trồng,
nhân giống và lai tạo . 5 2.2.1. Đặc tính sinh thái . 5 2.2.2. Kỹ thuật
nhân giống . 5 2.2.2.1.
Nhân giống
tự nhiên . 5 2.2.2.2.
Nhân giống
nhân tạo 5 2.2.2.3.
Nhân giống vô tính . 6 2.2.3. Chọn lọc và lai tạo . 6 2.2.4. Kỹ thuật trồng rừng
neem ở nƣớc ta 7 2.3. Các hoạt chất sinh học chính chiết xuất
từ neem . 7 2.3.1. Azadirachtin . 8 2.3.2. Salannin 8 2.3.3. Nimbin . 9 2.3.4. Nimbidin 9 2.4.
Giá trị
của cây
neem 10 2.4.1. Dùng làm thuốc bảo vệ thực vật và phân bón 10 2.4.2. Dùng làm dƣợc liệu 10 2.4.3. Bảo vệ môi trƣờng . 11 2.4.4. Những công dụng khác
của neem 11 2.5. Tình hình cây
neem tại Việt Nam 11 2.5.1. Tình hình trồng trọt 11 2.5.2. Tình hình nghiên cứu ứng dụng các hoạt chất sinh học trong cây
neem 12 2.6. Tình hình kho ngũ cốc trên thế giới và Việt Nam. Các nhóm côn trùng gây hại. Các phƣơng pháp bảo quản hiện nay . 14 2.6.1. Tình hình kho ngũ cốc . 14 2.6.1.1. Trên thế giới . 14 2.6.1.2. Tại Việt Nam 14 2.6.2. Các côn trùng gây hại kho nông sản và hậu quả 15 2.6.3. Sơ lƣợc về
ngài gạo (Corcyra cephalonica St.) . 16 2.6.3.1.
Ngài gạo (Corcyra cephalonica St.) 16 2.6.3.2. Phân loại và hình thái . 16 2.6.3.3.
Tác hại
của ngài gạo . 16 2.6.4. Các phƣơng pháp bảo quản kho nông sản hiện nay . 18 2.6.4.1. Các phƣơng pháp chung . 18 2.6.4.2. Bảo quản nông sản bằng phƣơng pháp hóa học . 19 2.6.4.3. Một số loại thuốc kiểm soát côn trùng kho hiện nay 19 2.7. Phƣơng pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) 20 2.7.1. Nguyên
tắc . 20 2.7.2. Những yếu tố ảnh hƣởng 20 2.7.3. Ứng dụng 21 2.7.3. Các bộ phận chính
của máy HPLC 21 2.8. Sơ lƣợc về một số chất phụ
gia và bảo quản . 21 2.8.1. Các chất chống oxy hóa giúp tăng cƣờng bảo quản 20 2.8.2. Các chất hấp phụ 22 2.8.2.1 Talc 22 3. NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU . 24 3.1. Nội dung nghiên cứu 24 3.2. Phƣơng pháp nghiên cứu . 24 3.2.1. Kỹ thuật ép dầu
từ nhân hạt neem và chiết xuất hoạt chất sinh học
từ bánh dầu
neem 24 3.2.2.Định lƣợng các hoạt chất chính trong dầu
neem và dịch chiết
từ bánh dầu
neem 26 3.2.3. Tạo
chế phẩm dạng
viên nén với hoạt chất chính là dầu
neem và dịch chiết bánh dầu . 27 3.2.4. Phƣơng pháp
nhân nuôi
ngài gạo trong phòng thí nghiệm 28 3.2.5. Thử nghiệm sinh học:
đánh giá một số
tác động cơ bản
của 4
chế phẩm đối với
ngài gạo . 29 3.2.5.1. Vật liệu . 29 3.2.5.2. Phƣơng pháp tiến hành . 29 3.2.6. Phƣơng pháp
đánh giá kết quả . 30 3.2.7. Phƣơng pháp bố trí thí nghiệm . 30 3.2.8. Phƣơng pháp xử lý số liệu 30 4. KẾT QUẢ THẢO LUẬN . 32 4.1. Hiệu suất thu
nhận dầu
neem bằng phƣơng pháp ép nguội . 32 4.2. Kết quả định lƣợng một số hoạt chất chính trong
chế phẩm neem . 32 4.3. Tạo
chế phẩm viên nén 33 4.3.1. Chất hấp phụ 33 4.3.2. Hoạt chất chính 34 4.4. Thử nghiệm
chế phẩm . 35 4.4.1.
Tác động gây chết
của các
chế phẩm đối với
ngài gạo 35 4.4.2.
Động thái gây chết
của các
chế phẩm đối với
ngài gạo . 40 4.4.3.
Tác động ức
chế sinh trƣởng và phát triển . 44 4.4.3.1.
Tác động ức
chế vũ hóa
của các
chế phẩm đối với
ngài gạo . 45 4.4.3.2.
Tác đông gây biến dạng sâu, nhộng, thành trùng . 46 4.4.4.
Tác động ức
chế sinh sản
của các
chế phẩm đối với
ngài gao . 48 5. KẾT LUẬN ĐỀ NGHỊ 51 6. TÀI LIỆU THAM KHẢO . 52 7. PHỤ LỤC [...]... sau xử lý
chế phẩm 37 Hình 4.2:
Tác động gây biến dạng
của chế phẩm neem 47 Biểu đồ 4.1:
Động thái gây chết
của các
chế phẩm ở liều xử lý 0,5 g/ dm3 40 Biếu đồ 4.2:
Động thái gây chết
của các
chế phẩm ở liều xử lý 1,0 g/ dm3 41 Biểu đồ 4.3:
Động thái gây chết
của các
chế phẩm ở liều xử lý 1,5 g/ dm3 42 Biểu đồ 4.4:
Động thái gây chết
của các
chế phẩm ở liều... Hình 2.2: Các bộ phận chính
của cây
neem 13 Hình 2.3:
Ngài gạo 17 Hình 2.4: Vòng đời
ngài gạo 17 Hình 2.5:
Tác hại
của ngài gạo 18 Hình 3.1: Quy trình ép dầu và chiết xuất hoạt chất
từ nhân hạt neem 25 Hình 3.2: Một số máy móc trang thiết bị 27 Hình 3.3: Quá trình tạo
chế phẩm viên nén 28 Hình 3.4: Phƣơng pháp
nhân nuôi
ngài gạo trong phòng thí nghiệm... 3.2.1 Kỹ thuật ép dầu
từ nhân hạt neem và chiết xuất hoạt chất sinh học
từ bánh dầu
neem Hạt neem thu tại tỉnh Ninh Thuận đƣợc rửa cồn 98o sau đó sấy khô ở nhiệt độ 45 – 50oC Sau đó sử dụng máy tách vỏ để thu
nhân hạt Nhân hạt neem đƣợc ép dầu bằng máy ép chuyên dụng hiệu Komet
của Đức (công suất 10 kg hạt/ giờ) Ƣu điểm
của máy là giữ nhiệt độ trong quá trình ép chỉ
từ 35 – 40oC Dầu
neem sau khi ép đƣợc... riêng Nghiên cứu nhằm nâng cao khả năng xông hơi
của các hoạt chất neem, đảm bảo hiệu quả lâu bền
của sản
phẩm và sự tiện lợi, an toàn trong khâu xử lý là một trong những mục tiêu chính
của đề tài này 1.2 Giới Hạn Đề Tài Do hạn
chế về thời gian, đề tài chỉ tập trung nghiên cứu
chế tạo và
đánh giá hiệu lực
của chế phẩm xông hơi
từ nhân hạt neem đối với
ngài gạo ở điều kiện phòng thí nghiệm 1.3 Địa Điểm... (ppm)
của một số hoạt chất trong dầu
neem và dịch chiết bánh dầu 32 Bảng 4.2: Tỷ lệ (%) ấu trùng chết sau 3 ngày 34 Bảng 4.3: Tỷ lệ chết (%)
của ấu trùng sau 3 ngày xử lý
chế phẩm 35 Bảng 4.4: Độc tính
của các
chế phẩm đối với
ngài gạo (giá trị LD50 ở thời điểm 3 ngày sau xử lý) 37 Bảng 4.5: Tỷ lệ chết (%)
của ấu trùng sau 7 ngày xử lý 38 Bảng 4.6: Độc tính
của các
chế phẩm. .. Kỹ thuật
nhân giống (Schmutterer, 1996) 2.2.2.1
Nhân giống
tự nhiên
Neem có thể mọc
tự nhiên
từ hạt hoặc
từ rễ Chim, dơi
đóng vai trò quan trọng trong phát tán
hạt qua việc ăn trái tƣơi sau đó khạc ra
hạt rơi vãi khắp nơi, khỉ và những loài chim lớn ăn trái
neem sau đó thải ra phân có lẫn
hạt neem 2.2.2.2
Nhân giống
nhân tạo Có nhiều phƣơng pháp trong
nhân giống
nhân tạo: - Gieo
hạt trực tiếp
Hạt giống...
gạo với hoạt chất chính trích
từ hạt neem trồng tại Việt Nam, bao gồm các giai đoạn nghiên cứu nhƣ sau: * Hoàn thiện kỹ thuật ép dầu
hạt neem và chiết xuất hoạt chất trong bánh dầu
neem bằng ethanol * Định lƣợng ba hoạt chất chính trong dầu
neem và dịch chiết
từ bánh dầu: azadirachtin, salannin, nimbin * Tạo
chế phẩm dạng
viên nén và thử nghiệm
chế phẩm trên
ngài gạo trong điều kiện phòng thí nghiệm... nghiệm
tác động của dầu
neem đối với bọ hà phá hại khoai lang, kết quả cho thấy dầu
neem có khả năng xua đuổi và làm giảm mức độ kí sinh và sinh sản
của bọ hà – cylas fomycarius F (Nguyễn Thị Quỳnh và ctv, 2001; Nguyễn Phƣơng Thảo và ctv, 2001) Bên cạnh đó,
Viện cũng đã nghiên cứu và hoàn thiện quy trình
nhân giống cây
neem invitro Một số nghiên cứu về hiệu lực
của các dịch chiết
nhân hạt neem đối với ngài. .. 2
hạt cứng Cây
neem trồng đƣợc 3 - 5 năm bắt đầu ra hoa kết quả Tuy nhiên, năng suất quả cao và ổn định lúc cây khoảng 10 năm tuổi,
từ 30 - 50 kg quả/ cây Thời gian
từ lúc nở hoa tới lúc quả chín khoảng 10 - 12 tuần, trong đó
từ lúc quả còn xanh tới lúc quả chín khoảng 4 – 8 tuần
Hạt neem bao gồm vỏ và
nhân hạt Vỏ
hạt cứng, thông thƣờng có 1 - 2
nhân hạt bao bọc bởi lớp vỏ lụa màu nâu Chiều dài hạt. .. hoạt tính kháng virus mạnh giống nhƣ nimbin 2.4
Giá trị
của cây
neem 2.4.1 Dùng làm thuốc bảo vệ thực vật và phân bón Các hoạt chất sinh học phân bố khắp các bộ phận
của cây
neem Tùy điều kiện và mục đích sử dụng có thể tạo ra các sản
phẩm phục vụ nông nghiệp nhƣ sau: * Dịch chiết
nhân hạt neem: Ngâm 50 g
nhân hạt neem đã nghiền nát trong 1 lít nƣớc
Hạt chuẩn bị lấy dịch chiết không
nên để quá 8 - . ĐÁNH GIÁ TÁC ĐỘNG CỦA CHẾ PHẨM VIÊN NÉN TỪ NHÂN HẠT NEEM (Azadirachta Indica A. Juss) LÊN NGÀI GẠO (Corcyra Cephalonica St.) Giáo. KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐÁNH GIÁ TÁC ĐỘNG CỦA CHẾ PHẨM VIÊN NÉN TỪ NHÂN HẠT NEEM (Azadirachta Indica A. Juss) LÊN NGÀI GẠO (Corcyra Cephalonica St.)