Bộ giáo dục và đào tạo tr-ờng đại học nông nghiệp hà nội tiêu quang an nghiên cứu một số đặc điểm bệnh lí của lợn mắc hội chứng rối loạn hô hấp và sinh sản (prrs), Sử dụng kỹ thuật hóa mô miễn dịch để Phát HIệN VIRUS Luận án tiến sỹ nông nghiệp hà nội - 2012 Bộ giáo dục và đào tạo tr-ờng đại học nông nghiệp hà nội tiêu quang an nghiên cứu một số đặc điểm bệnh lí của lợn mắc hội chứng rối loạn hô hấp và sinh sản (prrs), Sử dụng kỹ thuật hóa mô miễn dịch để Phát HIệN VIRUS Chuyên ngành : Bệnh lí học và chữa bệnh vật nuôi Mã số : 62.62.50.01 Luận án tiến sỹ nông nghiệp Ng-ời h-ớng dẫn khoa học 1. GS.TS. đậu Ngọc Hào 2. Pgs. ts. nguyễn hữu nam hà nội - 2012      H. Tá Tiêu Quang An Lời Cảm Ơn Tôi xin cảm ơn Ban Giám hiệu, Viện ào tạo Sau ại học, Khoa Thú Y tr-ờng Đại học Nông nghiệp Hà Nội đã tạo cho tôi những điều kiện thuận lợi nhất để tôi hoàn thành ch-ơng trình học tập và nghiên cứu của mình. Tôi xin chân thành cảm ơn tập thể các thầy, cô giáo ở bộ môn Bệnh lý Khoa Thú Y Tr-ờng Đại học Nông nghiệp Hà Nội, những ng-ời đã tận tình giúp đỡ tôi thực hiện thành công từng thí nghiệm của đề tài nghiên cứu. Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến GS.TS. Đậu Ngọc Hào là thầy h-ớng dẫn và luôn định h-ớng giúp tôi thực hiện đề tài một cách khoa học và chặt chẽ nhất. Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến PGS.TS. Nguyễn Hữu Nam là thầy h-ớng dẫn trực tiếp, luôn tận tụy giúp tôi thực hiện từng b-ớc nhỏ nhất từ khi bắt đầu, đến lúc hoàn thành đề tài. Tôi xin chân thành cảm ơn TS. Nguyễn Thị Lan Bộ môn bệnh lý khoa Thú Y đã cung cấp tài liệu và cho tôi những đóng góp quí báu trong quá trình thực hiện đề tài. Cuối cùng xin đ-ợc bày tỏ lòng biết ơn vô hạn đến những ng-ời thân trong gia đình, bạn bè và đồng nghiệp luôn giúp đỡ, động viên tôi để tôi hoàn thành luận án này. Hà Nội, ngày 02 tháng 12 năm 2012 Tỏc gi lun ỏn Tiêu Quang An  bp : Base pair CMI : Cell Mediated Immunity CPE : Cytopathogenic Effect cs : C DMEM : Dulbessco Modifiel Eagle Medium DMSO : Dimethyl Sulfoxide DTL  EAV : Equine Ateritis Virus EDTA : Ethidium Tetra Acetat ELISA : Enzyme - linked immunosorbent assay FBS : Fetal Bovin Serum GP5 : Glycoprotein 5 HE : Haematoxilin  Eosin HMDTB  IFA : Indirect fluorescent antibody test IHC : Immuno Histochemistry IL : Interleukin IPMA : Immunoperoxidase monolayer assay KT  KTTH  LDEV : Lactate Dehydrogenase elevating virus MDS : Mystery dissease syndrome MOI : Multiplisity Of Infection NK : Natural Killer NSP : Nonstructural Protein OIE : Office International des Epizooties ORFs : Open Reading Frame PAM : Porcine Alveolar Macrophage PBS : Photphat Buffer Salin PCR : Polymerase Chain Reaction PRRS : Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome PRRSV : Porcine Reproductive and Respiratory and Syndrome Virus RT-PCR : Reverse Transcriptase - Polymerase Chain Reaction sGOT : Serum Glutamic Oxaloacetic Transaminase sGPT : Serum Glutamic Pyruvic Transaminase SHF : Simian Hemorrhagic Fever Virus SIRS : Swine Infertiliti and Respiratory Syndrome SN : Serum Neutralize SRRS : Swine Respiratory Reproductive Syndrome TCID 50 : 50% Tissue Culture Infective Dose TNF- : Tumor Necrosis Factor - alpha   1 :  5   5  5 1 5  8  11  12  13  13  13  14  14  16  16  17  17  18  19  20  21  21  22  26  26  26  30  30  30  Nam. 32   34 2.3.1. Các nghií  34  35  38 :   40  40  40  40 í   40  41  PRRSV 41  41  41  41  42  42  42  42  43 -145 43 -PCR 44  46  49  51  51  51 ng 3:  53   53  -2010. 53 3.1.  57 3.1.3.   64    67  67  69  73 3.2.4.  . 74  77 í   84  98 3.3  106  106  109  112  113   115 -PCR 116  -145 117  120   124  --145. 125 :  127   [...]... định virus để phân biệt v i các bệnh truyền nhiễm khác g n như còn thiếu, không ch trong nư c mà cả trên phạm vi thế gi i Trư c thực tế đó chúng tôi tiến hành thực hiện đề tài Nghiên cứu một số đặc điểm bệnh lí của lợn mắc hội chứng rối loạn hô hấp và sinh sản (PRRS), sử dụng kỹ thuật hóa mô miễn dịch để phát hiện virus 3 MỤC TIÊU CỦA ĐỀ TÀI: * + Nghiên cứu có hệ thống đặc điểm bệnh lí của lợn mắc. .. trong mô bào lợn bệnh Ý NGHĨA KHOA HỌC VÀ THỰC TIỄN CỦA ĐỀ TÀI: * + Đây là nghiên cứu khá đ y đủ về một số đặc điểm bệnh lí của hội chứng rối loạn hô hấp và sinh sản thể lợn (PRRS) Những biến đ i đại thể, vi các cơ của quan lợn bệnh, những thay đ i về ch tiêu huyết học, tình trạng suy đa tạng của lợn mắc PRRS… + Áp dụng phương pháp hóa mô miễn dịch (IHC) chẩn đoán và xác định được vị trí khu trú của virus. .. PRRS và xác định được sự khu trú của virus trong mô bào lợn bệnh 5 Chương 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1 MỘT SỐ HIỂU BIẾT VỀ HỘI CHỨNG RỐI LOẠN HÔ HẤP VÀ SINH SẢN Ở LỢN (PRRS) 1.1 M m bệnh 1.1.1 Nguồn gốc và phân loại Nguyên nhân gây hội chứng rối loạn hô hấp và sinh sản lợn là do virus thuộc họ Arteriviridae, tên gọi của họ này được coi là bắt nguồn từ một loài virus trong họ Equine Ateritis virus (virus. .. 3.24 Kết quả nghiên cứu bệnh tích vi thể gan, lách và thận của lợn mắc PRRS 102 Bảng 3.2 Bệnh tích vi thể tim, hạch ruột và ruột của lợn mắc PRRS 103 Bảng 3.26 Kết quả khảo sát một số ch tiêu hệ hồng c u của lợn bệnh 106 Bảng 3.27 Kết quả khảo sát ch tiêu bạch c u của lợn bệnh 109 Bảng 3.28 Kết quả nghiên cứu biến động bạch c u của lợn mắc PRRS 111 Bảng 3.29 Kết quả nghiên cứu về ch tiêu... ĐÓNG GÓP MỚI CỦA ĐỀ TÀI: + Đây là nghiên cứu bư c đ u có hệ thống về triệu chứng lâm sàng, về những biến đ i đại thể, vi thể các cơ quan của lợn mắc PRRS, từ đó có thể phân biệt v i các bệnh ph i khác lợn + Đây là nghiên cứu bư c đ u và đã công bố những kết quả về sự thay đ i một số ch tiêu huyết học, tình trạng suy đa tạng của lợn mắc PRRS + Sử dụng thành công kỹ thuật hóa mô miễn dịch (IHC) để chẩn đoán... triệu chứng lâm sàng, biến đ i bệnh lí đại thể, vi thể, sự thay đ i ch tiêu huyết học khi lợn mắc PRRS nhằm phân biệt v i các bệnh ph i khác lợn + Nghiên cứu sự bội nhiễm của một số vi khuẩn kế phát, gây bệnh tích cho lợn trong các dịch PRRS; giúp cho công tác phòng chống dịch chính xác và hiệu quả + Áp dụng phương pháp hóa mô miễn dịch (Immunohistochemistry IHC) để chẩn đoán và xác định sự khu trú của. .. nhiều mô bào lợn bệnh, điều đó có nghĩa rất l n trong nghiên cứu phân lập PRRSV và nghiên cứu cơ chế sinh bệnh của virus + Kết quả nghiên cứu của luận án là tài liệu tham chiếu cho các nghiên cứu chuyên sâu khác + Kết quả nghiên cứu là cơ s khoa học để các nhà chuyên môn hoạch định phương pháp phòng trị bệnh hiệu quả + Luận án là tài liệu tham khảo có nghiên cứu khoa học nghĩa phục vụ cho giảng dạy và. .. vùng dịch PRRS 67 Bảng 3.8 Kết quả đo thân nhiệt lợn mắc PRRS 70 Bảng 3.9 Tỷ lệ nhiễm PRRSV trên đàn nái sinh sản 73 Bảng 3.10 Ảnh hư ng của PRRS sau khi khỏi bệnh đến sự sinh sản của đàn lợn nái 74 Bảng 3.11 Bệnh tích đại thể ph i và hạch ph i lợn mắc PRRS 77 Bảng 3.12 Bệnh tích đại thể một số cơ quan của lợn mắc PRRS 79 Bảng 3.13 Kết quả phân lập vi khuẩn kế phát trên lợn trong... bàn nghiên cứu 55 Tỷ lệ lợn mắc PRRS theo cơ cấu đàn được khảo sát trong địa bàn nghiên cứu 57 Bảng 3.4 T ng hợp tỷ lệ lợn chết do mắc PRRS trong địa bàn nghiên cứu 59 Bảng 3 Tỷ lệ lợn chết do mắc PRRS theo cơ cấu đàn được khảo sát trong địa bàn nghiên cứu 61 Bảng 3.6 Kết quả nghiên cứu ảnh hư ng của qui mô chăn nuôi đến dịch bệnh PRRS 65 Bảng 3.7 Triệu chứng của lợn. .. việc ghép các bệnh thứ phát khi lợn mắc PRRS lại rất ph biến, càng làm cho công tác chẩn đoán gặp nhiều khó khăn Đã có những nghiên cứu về PRRS; tập trung vào các vấn đề dịch tễ học, virus gây bệnh, đặc biệt là vai trò của các vi khuẩn thứ phát trong dịch PRRS Tuy nhiên những nghiên cứu về bệnh lí lâm sàng, giải phẫu bệnh học, các ch tiêu huyết học của lợn mắc PRRS và những nghiên cứu về các phương pháp . nghiên cứu một số đặc điểm bệnh lí của lợn mắc hội chứng rối loạn hô hấp và sinh sản (prrs), Sử dụng kỹ thuật hóa mô miễn dịch để Phát HIệN VIRUS. và đào tạo tr-ờng đại học nông nghiệp hà nội tiêu quang an nghiên cứu một số đặc điểm bệnh lí của lợn mắc hội chứng rối loạn hô hấp và sinh