1 Bộ giáo dục đào tạo Trờng Đại học vinh Nguyễn Thị Hằng Phân lập xác định cấu trúc số hợp chất từ dây chân chim nói (Desmos cochinchinensis var fulvescens Ban) ë Hµ TÜnh Ln Văn thạc sĩ hoá học Vinh - 2009 Mở đầu Lý chọn đề tài Việt Nam nằm vùng trung tâm Đông Nam hàng năm có lợng ma nhiệt độ trung bình tơng đối cao Với khÝ hËu nhiƯt ®íi giã mïa nãng, Èm ®· cho rừng Việt Nam hệ thực vật đa dạng phong phú Theo số liệu thống kê gần hệ thực vật Việt Nam có 10.000 loài [7], có khoảng 3.200 loài đợc sử dụng y học dân tộc 600 loài cho tinh dầu [4] Đây nguồn tài nguyên thiên nhiên quý báu đất nớc có tác dụng lớn đời sống sức khỏe ngời Từ trớc đến giới hợp chất thiên nhiên có hoạt tính sinh học đóng vai trò quan trọng đời sống ngời Các hợp chất thiên nhiên có hoạt tính sinh học đựơc dùng làm nguyên liệu cho công nghiệp dợc phẩm làm thuốc chữa bệnh, công nghiệp thực phẩm, hơng liệu mỹ phẩm Thảo Thảo dợc nguồn nguyên liệu trực tiếp chất dẫn đờng để tìm kiếm loại biệt dợc Theo số liệu thống kê cho thấy có khoảng 60% loại thuốc đợc lu hành ®ang giai ®o¹n thư nghiƯm cã ngn gèc tõ hợp chất thiên nhiên [5] Họ Na (Annonaceae) l hä lín nhÊt cđa bé Méc lan (Magnoliales) Chi ®iển h×nh cđa hä nà y Annona Mét sè lồ i đợc trồng l m cảnh, đặc biệt l Polythia longifoliapendula (lá bó sát thân) Các lo i thân gỗ dùng l m củi Một số lo i có qủa lớn, nhiều thịt ăn đợc bao gồm c¸c lồ i cđa chi Annona (na, na Nam Mü, mÃng cầu xiêm) hay chi Asimina (đu đủ Mỹ) chi Rollinia Bên cạnh đó, số lo i nh Ho ng lan (Cananga odorata) chứa tinh dầu thơm v đợc sử dụng sản xuất nớc hoa hay đồ gia vị Vỏ cây, v rễ số lo i đợc sử dụng y học dân gian ch÷a bƯnh nhiƠm trïng, bƯnh ho, bƯnh gan, bƯnh vàng da gan, bệnh tiêu chảy Thảo Các nghiên cứu d ợc lý đà tìm thấy khả kháng nấm, kháng khuẩn v đặc biệt l khả sử dơng hãa häc trÞ liƯu cđa mét sè nh phần hóa học v vỏ Mặc dù họ Na (Annonaceae) có giá trị kinh tế cao nh có hoạt tính sinh học quý đợc sử dụng rộng rÃi dân gian, song việc nghiên cứu thành phần hoá học cha đợc tiến hành nhiều Việt Nam Chính chọn đề tài: Phân lập xác định cấu trúc số hợp chất từ dây chân chim núi (Desmos cochinchinensis var fulvescens Ban) Hà Tĩnh từ góp phần xác định thành phần hoá học hợp chất tìm nguồn nguyên liệu cho ngành hoá dợc Nhiệm vụ nghiên cứu Trong luận văn này, có nhiệm vụ: - Chiết chọn lọc với dung môi thích hợp để thu đợc hỗn hợp hợp chất từ d©y ch©n chim nói (Desmos cochinchinensis var fulvescens Ban) - Phân lập xác định cấu trúc hợp chất từ dây chân chim núi 3 Đối tợng nghiên cứu Đối tợng nghiên cứu dịch chiết dây chân chim núi (Desmos cochinchinensis var fulvescens Ban) thc hä Na (Annonaceae) ë ViƯt Nam Ch¬ng Tæng quan 1.1 Hä Na (Annonaceae) 1.1.1.Thùc vËt häc Họ Na (Annonaceae) đợc gọi l họ MÃng cầu, mét hä thùc vËt cã hoa bao gåm c¸c loại thân gỗ, bụi hay dây leo Đây l hä lín nhÊt cđa bé Méc lan (Magnoliales), với khoảng 2.300 đến 2.500 lo i 120-130 chi Chi điển hình họ n y l Annona (na, mÃng cầu xiêm Thảo) Họ n y sinh trởng chủ u ë vïng nhiƯt ®íi, cËn nhiƯt ®íi chØ cã mét Ýt lồ i sinh sèng ë vïng «n đới ( Asimini Thảo) Theo Leboeuf cộng cã kho¶ng 900 lồ i ë Trung v Nam Mỹ, 450 lo i Châu Phi Madagascar, 950 loài Châu Australia [2] Các lo i thuộc họ Na (Annonaceae) có đơn, mọc so le (mọc cách), có cuống v mép nhẵn Lá mọc th nh hai h ng dọc theo thân Vết sẹo nơi đính thờng nhìn thấy rõ mạch dẫn C nh th ờng dạng ziczăc Chúng bẹ Hoa đối xứng xuyên tâm (hoa đều) v th ờng l lỡng tính phần lớn lo i đ i hoa nèi víi ë gèc hoa Hoa cã c¸nh cã m u n©u hay v ng, nhiỊu nhị hoa mọc th nh hình xoắn ốc Hoa có nhiều nhụy hoa, nhụy có bầu nhụy dạng ngăn chứa hay nhiều tiểu noÃn Có hoa mọc trực tiếp c nh lớn thân Qủa l nang, bế qủa hay đa qủa Việt Nam, theo Nguyễn Tiến Bân [1, 2] đà xác định họ Na có 26 chi, 201 lo i 1.1.2 Thnh phần hoá học [1nh phần hoá học [17] Trong thập kỉ trớc đây, 18 loài họ Na (Chi Annona (8 loµi): Annona cherimola, A glabra, A montana, A muricata, A reticulata, A squamosa, A artemoya (A cherimola x squamosa), A purpurea; chi Artabotrys (2 loµi): Artabotrys hexaptalus, A uncinatus; chi Cananga (1 loµi): Cananga odorata; chi Fissistigma (2 loµi): Fissistigma glaucescens, F oldhamii; chi Goniothalamus (1 loµi): Goniothalamus amuyon; chi Polyalthia (2 loµi): Polyalthia longifolia, P longifolia “Pendula” ; chi Rollinia (1 loµi): Rollinia mucosa vµ chi Uvaria (1 loài): Uvariarufa) đà đợc nghiên cứu kĩ lỡng Các nhà khoa học đà xác định cấu tạo hoá học thử tác dụng sinh học chúng (về tim mạch, độc tính hoạt tính dợc lý khác) Một số hợp chất có tiềm ứng dụng lớn để sản xuất thuốc chữa bệnh Mặc dù họ Na (Annonaceae) đà đợc khảo sát lần Stehous năm 1855, nhng thập kỉ trớc đợc tiến hành nghiên cứu, đến năm 1970, họ Na (Annonaceae) bắt đầu đợc nghiên cứu kỹ Trong đó, phần lớn đề tài nghiên cứu alkaloit nhng họ Na (Annonaceae) chứa lợng lớn nonalkaloidal (không phải alkaloit) có nhiều hoạt tính kháng tế bào ung th chữa bệnh tim mạch quan trọng Các chất alkaloit cña hä Na (Annonaceae) bao gåm kauran, lignan, acetogenin, steroit hợp chất thơm 1.1.2.1 Các hợp chất diterpenoit kauran Bộ khung hợp chất diterpenoit kauran gồm 20 cacbon Một số hợp chất đợc tách gồm 19 cacbon đợc gọi tên nor-kauran diterpenoit Trong nghiên cứu Wu cộng đà tách đợc 37 hợp chất kauran từ họ khác bao gåm: A cherimola, A glabra, A squamosa vµ R mucosa vµ chÊt sè chóng lµ chÊt phát Cấu trúc tìm thấy hợp chất đợc nêu bảng Bảng 1.1: Các hợp chất diterpenoit kauran TT 10 11 12 13 14 15 17 18 19 20 21 22 23 Hỵp chÊt axit ent-kaur-16-en-19-oic ent-kaur-16-en-19-ol axit 17-acetoxy-16α-hydrokauran-19-oic axit 17-hydroxy-16α-hydroent-kauran-19-oic axit 16α,17-dihydroxy-entkauran-19-oic 16α-hydro-ent-kauran-17-ol19-al axit 16α-hydroxy-ent-kauran19-oic axit 16α–methoxy-methoxy-entkauran-19-oic methyl-16α-hydro-19-al-entkauran-17-oat annoglabasin C * annoglabasin D * annoglabasin F * este 16α-hydro-ent-kauran17,19-dimethyl axit 16α-hydro-19-acetoxyent-kauran-17-oic axit 16α-hydro-ent-kauran-17oic axit 16α-hydro-19-al-entkauran-17-oic annoglabasin E * axit 16α-hydro-ent-kauran17,19-dioic axit 16α-hydro-19-nor-entkauran-4α-ol-17-oic axit 17-hydroxy-16β-hydroent-kauran-19-oic axit 17-acetoxy-16β-hydrokauran-19-oic axit 16β-hydro-ent-kauran-17oic R1 R2 R3 C=C C=C COOH CH2OH Loµi A squamosa A glabra A squamosa CH2OAc H COOH A cherimola CH2OH H COOH A cherimola A squamosa CH2OH OH COOH A cherimola A glabra A squamosa CH2OH H CHO A cherimola COOH A glabra A squamosa CH3 CH3 COOCH3 OH OCH3 H COOH A glabra CHO A glabra COOCH3 COOCH3 COOCH3 OAc OAc OAc COOH CHO OH A glabra A glabra A glabra COOCH3 H COOCH3 A glabra A cherimola A glabra R mucosa COOH H CH2OAc COOH H CH3 A glabra COOH H CHO A glabra COOH H CH2OH A glabra COOH H COOH R mucosa COOH H OH A glabra H CH2OH COOH A cherimola A squamosa H CH2OAc COOH A squamosa H COOH CH3 A glabra 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 axit 19-formyl-ent-kauran-17oic 16β-hydro-ent-kauran-17-ol19-al axit 4α-hydroxy-19-nor-entkauran-17-oic methyl-16β-acetoxy-19-al-entkauran-17-oat axit 16β,17-diacetoxy-entkauran-19-oic axit 16β–methoxy-methoxy-17hydroxy-ent-kauran-19-oic ent-kauran-16β,17,19-triol axit 16β,17-dihydroxy-entkauran-19-oic methyl-16β,17-dihydroxy-entkauran-19-oat 16β,17-dihydroxy-ent-kauran19-al axit 16β-hydroxy-17-acetoxyent-kauran-19-oic 16β-hydroxy-17-acetoxy-entkauran-19-al * 16β-hydroxy-17,19-diacetoxyent-kauran 19-nor-ent-kauran-4α,16β,17triol * H COOH CHO A squamosa H CH2OH CHO A cherimola H COOH OH A squamosa Oac COOCH3 CHO A glabra Oac CH2OAc COOH A glabra COOH R mucosa OCH3 CH2OH OH CH2OH CH2OH A squamosa OH CH2OH COOH A squamosa OH CH2OH COOCH3 A squamosa OH CH2OH CHO A squamosa OH CH2OAc COOH A glabra OH CH2OAc CHO A glabra OH CH2OAc CH2OAc A cherimola OH CH2OH OH A squamosa * ChÊt míi 12 13 11 20 16 R1 CH2OH 14 10 R2 15 18 R3 19 CH2OH 16, ent-kaur-15-en-17,19-diol A glabra 1.1.2.2 Các hợp chất lignan Có chất lignan (38-47) họ Na (Annonaceae) đợc Yang cộng sự; Wu cộng công bố Các lignan đợc tìm thấy loài A montana, A cherimola R mucosa gåm: (+)-Syringaresinol (38), (+)-epi-syringaresinol (39), (+)diasyringaresinol (40) vµ liriodendrin (41) thu đợc từ loài A cherimola, (-)syringaresinol (42) đợc tách từ loài A montana yangambin (43), magnolin (44), eudesmin (45), membrin (46) đợc tách từ R mucosa Trong số chúng, 38, 39, 40 42 chất đồng phân lập thể 39, 40 chất míi 6' O H CH3O 2'' 3'' RO 5'' 2' 3' OMe OH O OMe OMe H 1'' 4'' 1' OMe 5' OR 4' H H O CH3O O 6'' HO OMe OMe 38, R=H 42, R=Glc 39 OMe OMe OH OH O O OMe OMe H H H CH3O CH3O O O HO H HO 40 OMe OMe 41 R1 OMe O R2 H R3 H O CH3O 43, R1=R2=R3=OCH3 44, R1=H, R2=R3=OCH3 45, R1=R3=H, R2=OCH3 46, R1=R2=R3=H OMe 1.1.2.3 Các hợp chất acetogenin Một dÃy hợp chất acetogenin (47-103) đà đợc tách từ chi họ Na (Annonaceae) Annona Rollinia, có 24 chất Phần lớn acetogenin gồm hai vòng tetrahydrofuran, , -unsaturated--lacton epoxit mạch với nhóm chức nh methoxy-OH, =O, C=C diol kề mạch dµi threo erythro trans threo trans Me (CH2)9 O (CH2)4 O OH Me OH OH OH 48 (CH2)5 O O threo erythro trans threo trans (CH2)5 O Me (CH2)10 O OH Me OH R1 O O 49, R1=H 54, R1=OH threo threo threo trans trans (CH2)5 O Me OH (CH2)10 O Me OH 50 O O erythro threo trans threo trans (CH2)5 O Me (CH2)8 O OH Me OH 51 O O erythro threo erythro trans threo trans OH Me (CH2)4 OH (CH2)5 O O Me OH OH O O 55 trans threo erythro Me (CH2)5 (CH2)10 O O OH threo trans Me OH OH O 56 cis erythro Me threo threo O trans cis hc trans* (CH2)9 O OH O 57, *=cis 58, *=tr OH 0ans OH (CH2)7 Me O O 57 Bảng 1.2: Các hợp chÊt acetogenin TT 47 48 Hỵp chÊt 10-hydroxyasimicin annoglaucin 49 50 51 52 53 desacetyluvaricin isodesacetyluvaricin neoannonin rollimusin* rolliniastatin-1 54 rolliniastatin-2 (bullatacin) 55 rollitacin Loµi R mucosa R mucosa A artemoya R mucosa A artemoya A artemoya R mucosa R mucosa A reticulata A artemoya R mucosa R mucosa Loµi A artemoya A artemoya A artemoya A artemoya A montana R mucosa R mucosa A reticulata A montana A montana A reticulata R mucosa 87 88 Hỵp chÊt artemoin A* artemoin B* artemoin C* artemoin D* diepoxymontin* epomusenin A* epomusenin B* annomonicin annonacin annonacin-10-on annoreticuin* annoreticuin-9on* corossolin corossolon isoannonacin isoannonacin-10on isoannoreticuin* R mucosa 89 isomurisolenin* A reticulata A cherimola A reticulata A squamosa A artemoya 56 squamocin 57 (20,23-cis)-cisbullatalicinon* (20,23-cis)-trans- TT 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 A reticulata A muricata A muricata A montana A montana A reticulata O 10 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 bullatalicinon* 12,15-cis-squamostatinA* 12,15-cis-squamostatinD* aromin-A bullatanocin bullatacinon 90 longifolicin A muricata 91 muricatetrocin A A muricata A artemoya A cherimola A artemoya A reticulata A artemoya R mucosa R mucosa A artemoya A artemoya 92 93 94 95 96 97 98 99 100 muricatetrocin B muricin A* muricin B* muricin C* muricin D* muricin E* muricin F* muricin G* murisolinon A muricata A muricata A muricata A muricata A muricata A muricata A muricata A muricata A reticulata A artemoya A artemoya A artemoya R mucosa 101 102 103 rolliacocin* solamin squamon R mucosa A reticulata A reticulata R mucosa A artemoya bullatalicin bullatalicinon c-12,15-cis-bulatalicin c-12,15-cis-bulatanocin c-12,15-transbulatanocin Squamostatin A Squamostatin D sylvaticin * ChÊt míi 1.1.2.4 C¸c hợp chất styrylpyron Các hợp chất styrylpyron tìm thấy chi Goniothalamus họ Na (Annonaceae) Các hợp chất styrylpyron đợc tách từ loài G amuyon gồm có: goniodiol-7-monoacetat (104), goniodiol-8-monoacetat (105), goniotriol (106), goniothalamin (107) Trong sè chúng, 104 105 chất 3' 4' 2' 5' O 6' OH OAc 1' HO O O H H 104 AcO O 105 OH O HO O O H H HO 106 O 107 1.1.2.5 Các hợp chất flavonoit Các hợp chất flavonoit chất phổ biến thực vật bậc cao Wu cộng đà tìm thấy chất flavonoit tất chúng dẫn xuÊt cña glycosit: quercetin3-O-rhamnosit (108), kaempferol-3-O- rhamnosit (109), isorhamnetin-3-Orhamnosit (110), tanarixetin-3-O- rhamnosit (111) thu đợc từ A purpurea ... cứu thành phần hoá học cha đợc tiến hành nhiều Việt Nam Chính chọn đề tài: Phân lập xác định cấu trúc số hợp chất từ dây chân chim núi (Desmos cochinchinensis var fulvescens Ban) Hà Tĩnh từ góp... hợp chất từ d©y ch©n chim nói (Desmos cochinchinensis var fulvescens Ban) - Phân lập xác định cấu trúc hợp chất từ dây chân chim núi 3 Đối tợng nghiên cứu Đối tợng nghiên cứu dịch chiết dây chân. .. thích hợp để thu đợc hỗn hợp hợp chất dùng cho nghiên cứu đợc nêu phần thực nghiệm 2.2 Phơng pháp phân tích, phân tách hỗn hợp phân lập hợp chất Để phân tích phân tách nh phân lập hợp chất, sử