Chương Trực khuẩn Gram âm, hiếu khí, yếm khí tùy nghi Enterobacteriaceae Pasteurellaceae ENTEROBACTERIACEAE • • • • • • Trực Gram âm, không bào tử Di động Oxidase âm, catalase dương Lên men đường sinh Yếm khí tùy nghi Sống đường ruột động vật (đất, nước) Dễ phát triển môi trường thông thường Họ trực khuẩn đường ruột (tt) • • • • • Nhóm lớn Phản ứng sinh hóa phân biệt giống, lồi Phổ biến đường ruột động vật 28 giống 120 loài khác 20-25 loài gây triệu chứng lâm sàng động vật, người (Salmonella, E.coli, Klebsiella, Proteus) • “Coliform”: Vi khuẩn có khuẩn lạc lên men lactose / MCK (E.coli, Enterobacter aerogenes Klebsiella • Lay lan : tiêu hóa, vật dụng nhiễm, nội sinh (vài trường hợp) Escherichia Hình thái • Ni cấy Nhiệt độ: 37 C ( 40 C) pH: 7,-7,2 Dễ phát triển / môi trường thông thường Môi trường EMB MCK Thạch máu TSI (triple sugar iron agar ): A/A (vàng/ vàng) H2S : âm, có sinh Sinh hóa: IMVIC : ++ EMB MCK Kết phản ứng sinh Indol E.coli (tt) • Cấu trúc kháng nguyên Kháng nguyên O (thân): chữ số :1,2,3… Kháng nguyên K (bề mặt, giáp mô):80 loại chữ với số : K4 Kháng nguyên H (tiên mao): chữ với số :H2 O111:K4:H2 KHÁNG NGUYÊN PILI CỦA E.COLI K88 : F K99 : F5 HEO 989 P: F6 K99: F41 F5 F41 BÒ K99 : F5 F 41 Cừu Độc tố E.COLI • Enterotoxin : ST (heat- stable) : STa, STb LT (heat- labile) : LT-I, LT-II LT: kích thích adenylcyclase- vịng AMP- tiết CL- ức chế hấp thu Na + • Shiga-like toxin (verotoxin) : tác động tế bào vero Gây phù đầu heo, tiêu chảy bê thỏ phá hủy nhung mao biểu mơ ruột TÍNH CHẤT LT VÀ ST Tính chất Bản chất phân tử ST Peptide, nhỏ LT Protein, lớn Ổ định nhiệt 30 phút 121ºC/ 15 phút 60º C/ cAMP Khơng có cGMP có khơng Bị Đa số Heo Đa số Đa số E.coli (tt) • Colibacillosis : tiêu chảy, viêm ruột, nhiễm trùng huyết, • Trâu, bò: bê tuần tiêu chảy, nước, viêm vú (độc tố đường ruột) • Heo: Tiêu chảy (heo vài ngày tuổi, viêm dày ruột xuất huyết bệnh phù đầu (heo 1,2 tuần sau cai sữa) – verotoxin • Gà, gà tây: Máu- đường hơ hấp, viêm túi khí • Dê, cừu: giống bê, heo • Chó mèo: đường tiết niệu E.coli (tt) • Miễn dịch: nhiều serotype (dựa kháng ngun pili) • Vác xin phịng • Kháng sinh E.Coli (chẩn đốn) • Phân lập vi khuẩn mẫu ( phân, mơ bệnh, hạch, túi khí…) cấy mơi trường chọn lọc Khuẩn lạc tím / EMB Thử TSI, IMVC Thử kháng huyết – định danh Salmonella • Tên nhà khoa học ( Salmon) • Hình thái giống E.coli đa số có tiên mao (Sal Gallinarum , Sal Pullorum), khơng giáp mơ Ni cấy Hiếu khí, yếm khí nghi Nhiệt độ 370 C ( 400 C) pH: 7,0-7,2 • Mơi trường chọn lọc BGA : Khuẩn lạc màu trắng môi trường màu đỏ Thạch máu: không dung huyết MCK: khuẩn lạc không màu TSI: K/A : đỏ/vàng, gas H2S: dương IMVIC: -+-+ Salmonella • Kháng nguyên độc tố Kháng nguyên O: chia nhiều nhóm (A,B,C ) Một nhóm : nhiều serovar ( 2-4 tiểu phần kn O giống nhau) Kháng nguyên H: pha Pha 1: đặc hiệu lồi (a,b,c ) Pha 2: khơng đặc hiệu (1,2,3…) Công thức kháng nguyên C1 6,7 c 1,5 Kháng nguyên Vi • Độc tố: nội độc tố • Miễn dịch: dịch thể Vắc xin phịng Gây bệnh : phó thương hàn heo (Sal Choleraesuis) Gây bệnh cho người, gà, trâu bị, chó mèo… ( sốt, tiêu chảy ) Chẩn đoán Thức ăn vật liệu khác 25 g mẫu + 225 ml đệm pepton ủ 37 0C ± 10C (18-24 g) 0,1ml 1ml 10ml rappaport 10ml buffered peptone water 420 C ± 0C /18-24 g 370C ± 10 C/ 18-24 g BGA, XLD 370 C/ 18-24 g Khuẩn lạc NA 370C/ 18-24 g Sinh hóa Nhóm huyết (A,B,C Mẫu nước 50 ml nước + 50 ml TTB + vài giọt iodine Ủ 42 C/ 18-24 BGA …… Mẫu phân gm phân + 10 ml TTB + giọt iodine , ủ 420 C / 18-24 g BGA , ủ 370 C/ 18-24 Sinh hóa (TSI, urease, indol, lysin…) ủ 370C/ 18-24 Xác định nhóm huyết học (A,B,C…) ... Colibacillosis : tiêu ch? ?y, viêm ruột, nhiễm trùng huyết, • Trâu, bị: bê tuần tiêu ch? ?y, nước, viêm vú (độc tố đường ruột) • Heo: Tiêu ch? ?y (heo vài ng? ?y tuổi, viêm d? ?y ruột xuất huyết bệnh phù đầu (heo... (vàng/ vàng) H2S : âm, có sinh Sinh hóa: IMVIC : ++ EMB MCK Kết phản ứng sinh Indol E.coli (tt) • Cấu trúc kháng nguyên Kháng nguyên O (thân): chữ số :1,2,3… Kháng nguyên K (bề mặt, giáp mô):80... LT-II LT: kích thích adenylcyclase- vịng AMP- tiết CL- ức chế hấp thu Na + • Shiga-like toxin (verotoxin) : tác động tế bào vero G? ?y phù đầu heo, tiêu ch? ?y bê thỏ phá h? ?y nhung mao biểu mô ruột