BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ Chuyên ngành: Bảo vệ thực vật Mã ngành: 62620112 NGUYỄN PHÚ DŨNG NGHIÊN CỨU ĐẶC TÍNH SINH HỌC CỦA VIRUS LÙN LÚA CỎ (Rice Grassy Stunt Virus) VÀ KHẢ NĂNG TRUYỀN BỆNH QUA RẦY NÂU (Nilaparvata lugens Stal) Cần Thơ, 2021 CƠNG TRÌNH ĐƯỢC HOÀN THÀNH TẠI TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ Người hướng dẫn chính: PGS.TS PHẠM VĂN DƯ Luận án bảo vệ trước hội đồng chấm luận án tiến sĩ cấp trường Họp tại: ……………………………………………………………………… ……, ………………………….……………………………… Trường Đại học Cần Thơ Vào lúc: ……giờ …., ngày … tháng … năm 202 Phản biện 1: Phản biện 2: Phản biện 3: Xác nhận Chủ tịch Hội đồng Có thể tìm hiểu luận án thư viện: Trung tâm Học liệu, Trường Đại học Cần Thơ Thư viện Quốc gia Việt Nam DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH ĐÃ CƠNG BỐ Nguyễn Phú Dũng, Phạm Văn Dư, Nguyễn Văn Huỳnh, 2016 Nghiên cứu đặc tính truyền viruslùn lúa cỏ (Rice Grassy Stunt Virus, RGSV) rầy nâu (Nilaparvata lugens Stal) Tạp chí khoa học Trường Đại học Cần Thơ Số chuyên đề: Nông nghiệp 2016 (3): 136-144 (ISSN 1859-2333) Nguyễn Phú Dũng, Phạm Văn Dư, Nguyễn Văn Huỳnh, 2016 Ảnh hưởng mật số tuổi ấu trùng lên khả truyền bệnh lùn lúa cỏ (Rice Grassy Stunt Virus, RGSV) rầy nâu (Nilaparvata lugens Stal) Tạp chí khoa học Trường Đại học Cần Thơ Số chuyên đề: Nông nghiệp 2016 (3): 145-152 (ISSN 1859-2333) Chương 1: GIỚI THIỆU 1.1 Tính cấp thiết luận án Virus lùn lúa cỏ hại lúa (Rice Grassy Stunt Virus, RGSV) truyền tuần hoàn, lan truyền rầy nâu (Nilaparvata lugens Stal.) phân loại thành viên chi Tenuivirus (Hibino, 1986; Murphy et al., 1995) Virus RGSV xuất gây hại nặng miền Nam Đông Nam Châu Á, Trung Quốc, Nhật Bản Đài Loan (Hibino, 1996) Tỷ lệ nhiễm RGSV cao kết hợp với bệnh Lùn Xoắn Lá (LXL) virus Rice Ragged Stunt Virus (RRSV) ghi nhận vùng Đồng sông Cửu Long (ĐBSCL) suốt từ năm 2000 đến 2007 (Du et al., 2005; Huan and Heong, 2000) Theo Cục Bảo vệ thực vật (2012) cho đến ngày 20/4/2012, có 1.931 lúa bị nhiễm bệnh vàng lùn, lùn xoắn (VL, LXL) Đến năm 2014, tổng diện tích lúa bị nhiễm bệnh vàng lùn lùn xoắn 3.040 ha, tăng 3.000 so với năm 2013, bệnh xuất chủ yếu tỉnh Đồng Tháp, Vĩnh Long, Cần Thơ, Bến Tre, Vũng Tàu Long An (Cục Bảo vệ thực vật, 2017) Theo Bộ Nông nghiệp phát triển nông thôn (2018) sau 10 năm khống chế, năm 2017 bệnh VL, LXL hại lúa bùng phát gây hại trở lại tỉnh phía Nam với diện tích nhiễm bệnh 16.360 Theo Phạm Văn Dư (2006) việc nghiên cứu nguồn gen kháng để sử dụng công tác lai tạo, cần phải lọc giống có triển vọng, kháng chống chịu tốt rầy nâu, virus RGSV RRSV để phục vụ kịp thời cho sản xuất ĐBSCL Vì nay, hầu hết giống lúa triển vọng, ngắn ngày, suất cao sản xuất bị nhiễm rầy nâu, virus RGSV RRSV Các nghiên cứu mối tương quan sinh học virus RGSV, RRSV côn trùng vectơ truyền bệnh nước thực vài nơi bước đầu mang tính chất tương đối chưa có kết thống chung Cụ thể, theo Hồ Văn Chiến ctv (2012), thời gian ủ bệnh RGSV thể rầy nâu lúa 9,29 ngày 19,78 ngày Thời gian tối thiểu để rầy nâu chích hút truyền virus RGSV thành công 90 phút, thời gian ủ virus đến 14 ngày thời gian truyền virus RGSV tối thiểu 30 phút (Lê CNm Loan ctv., 2009) Theo Hibino (1996), Cabunagan Cabauatan (2006) cho rầy nâu cần thời gian ủ virus thể từ – 25 ngày (trung bình 10 – 11 ngày) kể từ sau bắt đầu cho chích hút lúa bệnh ngày Mặt khác, nguồn giống gieo sạ không kháng dịch bệnh này, tùy theo loại giống nhiễm nặng, nhẹ khác với biện pháp canh tác, ảnh hưởng lịch thời vụ địa phương, nên dịch bệnh VL, LXL có nguy tiềm Nn đe dọa nghiêm trọng cho sản xuất lúa đến vụ sau lâu dài Vì đề tài " Nghiên cứu đặc tính sinh học virus Lùn lúa cỏ (Rice Grassy Stunt Virus) khả truyền bệnh qua rầy nâu (Nilaparvata lugens Stal)" cần tiến hành để góp phần làm sở khoa học cho cơng tác chNn đốn, phát quản lý bệnh hại tốt 1.2 Mục tiêu yêu cầu nghiên cứu - Xác định đặc tính sinh học virus RGSV gây bệnh Lùn lúa cỏ lúa ĐBSCL - Xác định mối quan hệ sinh học RGSV rầy nâu (Nilaparvata lugens - Khả chống chịu số dòng/giống lúa ĐBSCL RGSV Stal) 1.3 Ý nghĩa khoa học luận án Luận án có ý nghĩa khoa học cao nghiên cứu đặc tính sinh học virus RGSV gây bệnh lúa ĐBSCL, xác định mối quan hệ sinh học RGSV rầy nâu (Nilaparvata lugens Stal) lúa góp phần làm sở khoa học cho công tác chNn đoán, phát quản lý bệnh hại tốt ĐBSCL Ngồi ra, đề tài cịn hướng đến xác định khả chống chịu số dòng/giống lúa ĐBSCL RGSV việc sản xuất 1.4 Những đóng góp luận án Các kết luận án cung cấp thông tin quan trọng phương pháp thu thập, xác định đặc tính sinh học virus RGSV gây bệnh lúa ĐBSCL Kết cho thấy mối quan hệ sinh học RGSV rầy nâu (Nilaparvata lugens Stal) lúa góp phần làm sở khoa học cho cơng tác chNn đốn, phát quản lý bệnh hại tốt ĐBSCL Quan trọng hơn, đề tài đánh giá khả chống chịu số dòng/giống lúa ĐBSCL RGSV việc sản xuất Chương 3: PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 3.1 Thời gian địa điểm thực luận án 3.1.1 Thời gian thực nội dung Luận án thực từ tháng 11 năm 2014 đến tháng 11 năm 2018 3.1.2 Địa điểm thực Luận án thực nhà lưới, phịng thí nghiệm Bộ môn Khoa Học Cây Trồng, Đại Học An Giang 3.3 Phương pháp thực 3.3.1 Nội dung 1: Đánh giá đặc điểm Virus RGSV ĐBSCL - Xác định số nguồn mang virus lây lan bệnh Điều tra, thu thập mẫu lúa chét cỏ dại có cư trú rầy nâu tỉnh Long An, An Giang Hậu Giang Giám định cỏ dại hình thái theo Koo SJ et al (2005), tính tần suất xuất tạo nguồn mẫu cỏ dại nhiễm virus cách cho rầy nâu truyền virus RGSV 24 điều kiện nhà lưới Ghi nhận tỷ lệ mang virus RGSV mẫu lúa chét cỏ dại kiểm tra (test) ELISA đánh giá mắt thường - Phân tích di truyền mẫu phân lập RGSV ĐBSCL Mẫu bệnh mang virus RGSV An Giang năm 2012 (AG RGSV 2012) thu thập giải trình tự gen nhằm tạo tiền đề sở đánh giá đa dạng di truyền mẫu đại diện ĐBSCL năm sau Các mẫu bệnh mang virus RGSV năm 2018 thu thập tỉnh Long An, Vĩnh Long, An Giang, Kiên Giang, Hậu Giang Sóc Trăng (đã test ELISA để xác định mang virus RGSV) trước đem phân tích di truyền mẫu Sử dụng phương pháp phân lập xác định cấu trúc virus thực theo qui trình KIT tách chiết RNA thực vật (HITM-221 RNA Plant Extraction Kit) Viện nghiên cứu phát triển công nghệ sinh học, Đại học Cần Thơ 3.3.2 Nội dung 2: Xác định mối quan hệ sinh học virus RGSV rầy nâu (Nilaparvata lugens Stal) - Xác định thời gian ủ virus RGSV thể rầy nâu lúa Sử dụng phương pháp chủng bệnh ống nghiệm điều kiện nhà lưới Cho 01 lúa ngày tuổi giống OM1490 vào ống nghiệm Sử dụng 120 ống nghiệm (16x160 mm) cho thí nghiệm Cho rầy nâu tuổi lấy virus nguồn bệnh (đã test ELISA mang virus RGSV) ngày Cho 01 rầy mang virus vào ống nghiệm chích hút mạ khỏe (sạch bệnh) 24 Ngày (sau chủng 24 giờ), lấy mạ khỏi ống nghiệm thay mạ khỏe Cứ tiếp tục cho ngày rầy chết (thường khoảng 20 ngày) - Xác định khoảng thời gian cần thiết để rầy nâu hút virus RGSV từ lúa bệnh Thí nghiệm bố trí hồn tồn ngẫu nhiên, lần lặp lại điều kiện nhà lưới Cho 01 lúa ngày tuổi giống OM1490 vào ống nghiệm Sử dụng 80 ống nghiệm 16x160 mm cho nghiệm thức thí nghiệm Cho rầy nâu tuổi lấy virus RGSV bệnh nghiệm thức trong: (1) 30 phút, (2) giờ, (3) giờ, (4) giờ, (5) ngày (6) ngày Sau đó, rầy giữ mạ khỏe giống OM1490 suốt thời gian ủ bệnh thể rầy nâu hoàn tất Rầy mang virus RGSV chủng cho mạ ống nghiệm suốt 24 - Xác định khoảng thời gian cần thiết cho rầy nâu truyền virus RGSV Thí nghiệm bố trí sau xác định thời gian ủ lấy virus tối thích thí nghiệm Thí nghiệm bố trí hồn tồn ngẫu nhiên, lần lặp lại điều kiện nhà lưới Cho 01 lúa ngày tuổi giống OM1490 vào ống nghiệm (16x160 mm) Sử dụng 80 ống nghiệm 16x160 mm cho nghiệm thức thí nghiệm Rầy nâu mang virus RGSV (đã lấy ủ bệnh hoàn tất) chủng mạ khỏe giống OM1490 ống nghiệm nghiệm thức: (1) 15 phút, (2) 30 phút, (3) giờ, (4) giờ, (5) (6) 24 Ở thí nghiệm (thời gian rầy nâu lấy, ủ truyền virus), mạ chủng cấy bể chứa đất 20 cây/hàng giữ nhà lưới triệu chứng bệnh xuất Sau 01 tháng tất mạ rầy chủng ống nghiệm kiểm tra ELISA để xác định diện RGSV Ký hiệu nhãn (mẫu rầy lúa chủng ống nghiệm) riêng thí nghiệm (các mẫu riêng cấy riêng chậu bể chứa đất tương ứng) - Xác định mật số tối hảo rầy nâu/cây lúa truyền RGSV Thí nghiệm bố trí theo thể thức khối hồn toàn ngẫu nhiên với lần lặp lại điều kiện nhà lưới Cây mạ ngày tuổi chủng riêng lẻ với số lượng rầy nâu mang virus RGSV/ống nghiệm tương ứng với nghiệm thức (T1), (T2), (T3), (T4), (T5) rầy/ống nghiệm suốt 24 (T6) Đối chứng (Rầy không mang virus) Sau chủng, rầy nâu lấy khỏi ống nghiệm lúa chủng cấy lên chậu (đường kính 0,3m) đặt cạnh với 20 chậu/nghiệm thức cây/chậu khay nước, chờ triệu chứng bệnh thể kiểm tra ELISA để xác định diện RGSV - Xác định khả truyền RGSV rầy nâu lấy virus giai đoạn ấu trùng tuổi 1, 2, 3, trưởng thành nhà lưới ĐHAG Thí nghiệm bố trí theo thể thức khối hoàn toàn ngẫu nhiên với lần lặp lại điều kiện nhà lưới Cây mạ ngày tuổi chủng riêng lẻ với ấu trùng rầy nâu tuổi 1, 2, 3, trưởng thành mang virus chủng ống nghiệm suốt 24 Cây mạ chủng cấy chậu với 20 chậu/nghiệm thức cây/chậu khay nước đặt điều kiện nhà lưới chờ đến triệu chứng bệnh xuất Sau 01 tháng tất chủng, mẫu rầy nâu ghi nhận, đánh dấu riêng cho nghiệm thức kiểm tra ELISA để xác định rầy nâu mang RGSV có liên quan đến mạ chủng - Ảnh hưởng virus RGSV đến giai đoạn sinh trưởng lúa điều kiện nhà lưới ĐHAG Thí nghiệm bố trí theo kiểu khối hoàn toàn ngẫu nhiên lần lặp lại nhà lưới Cho rầy mang virus RGSV(đã lấy ủ virus hoàn tất) truyền bệnh 24 lúa khoẻ bệnh (3 con/cây lúa) giai đoạn sinh trưởng khác (Giai đoạn mạ, Đẻ nhánh – Làm Đòng Trổ) giống OM1490 với cây/chậu 10 chậu/nghiệm thức Sau chủng 24 giờ, chậu (đã phóng thích rầy khỏi chậu cây) chủng giữ nhà lưới triệu chứng bệnh xuất kiểm tra ELISA để xác định diện RGSV - Xác định ảnh hưởng đặc điểm sinh học (màu sắc, giới tính dạng hình) rầy nâu truyền virus RGSV lúa Thí nghiệm bố trí theo thể thức khối hồn tồn ngẫu nhiên, lần lặp lại (20 rầy/20 cây/lần lặp lại) điều kiện nhà lưới với nghiệm thức (màu sắc, giới tính dạng hình) rầy mang virus RGSV (đã lấy ủ virus hoàn tất); với nghiệm thức đối chứng (màu sắc, giới tính dạng hình) khơng mang virus (khơng cho lấy virus) Cho 01 lúa ngày tuổi giống OM1490 vào ống nghiệm (16x160 mm) Cho rầy (màu sắc, giới tính dạng hình) mang virus RGSV chích hút lúa NSKG bệnh 24 ống nghiệm Ngày (sau chủng 24 giờ), lấy rầy chủng khỏi ống nghiệm mạ chủng cấy bể chứa đất 20 cây/hàng giữ nhà lưới triệu chứng bệnh xuất kiểm tra ELISA để xác định diện RGSV - Khả truyền bệnh RGSV lúa cá thể tập thể rầy nâu Thí nghiệm bố trí theo thể thức khối hồn toàn ngẫu nhiên, lần lặp lại điều kiện nhà lưới với nghiệm thức chủng bệnh cá thể tập thể rầy mang virus RGSV (đã lấy ủ virus hoàn tất); với nghiệm thức đối chứng chủng bệnh cá thể tập thể rầy không mang virus (không cho lấy virus) Cho 01 lúa ngày tuổi giống OM1490 vào ống nghiệm (16x160 mm) Chủng bệnh cá thể cách cho rầy mang RGSV chích hút lúa NSKG bệnh 24 ống nghiệm Chủng bệnh tập thể cách cho rầy mang RGSV chích hút lúa NSKG bệnh 24 ống nghiệm Ngày (sau chủng 24 giờ), lấy rầy chủng khỏi ống nghiệm mạ chủng cấy bể chứa đất 20 cây/hàng giữ nhà lưới triệu chứng bệnh xuất kiểm tra ELISA để xác định diện RGSV 3.3.3 Nội dung 3: Thanh lọc số dòng/giống kháng RGSV điều kiện nhà lưới dùng cho lai tạo sản xuất Lựa chọn 19 giống lúa từ Viện, Trường 19 dòng/giống lúa sở sản xuất hộ nông dân nghiên cứu lai tạo địa phương đánh giá tính kháng với rầy nâu Tiếp tục sử dụng giống lúa qua phương pháp lọc, đánh giá số dòng/giống chống chịu bệnh virus RGSV nhà lưới theo Azzam et al (2000) Thí nghiệm bố trí theo thể thức hoàn toàn ngẫu nhiên, lần lặp lại điều kiện nhà lưới ChuNn bị lúa giai đoạn mạ ngày tuổi chậu (20 dòng/giống, cây/chậu) Đặt chậu lúa vào lồng chủng bệnh sẳn sàng để chủng bệnh Cho rầy mang virus RGSV truyền bệnh giốngdòng/giống trắc nghiệm lồng suốt 24 Sau chủng bệnh loại bỏ rầy nâu mang mầm bệnh, chuyển chậu lúa vào nhà lưới, chờ triệu chứng bệnh xuất (2 – tuần) kiểm tra ELISA để xác định diện RGSV 3.4 Xử lý số liệu Số liệu nhập liệu, trình bày biểu đồ chương trình Microsoft Office Excel phân tích thống kê SAS Kết khảo sát đa dạng di truyền RGSV phân tích theo phương pháp Maximum Parsinomy phần mềm Bioedit Mega 6.0 Chương 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 4.1 Đánh giá đặc điểm Virus RGSV ĐBSCL * Xác định số nguồn mang virus lây lan bệnh Virus RGSV có tỉ lệ (%) diện phổ biến virus RRSV RGSV phối hợp với RRSV mẫu lúa chét tỉnh đại diện ĐBSCL (Long An, An Giang Hậu Giang) (Bảng 4.1) Kết chứng tỏ virus có khả lưu tồn lan truyền từ nguồn lúa chét địa phương rầy nâu mang virus truyền bệnh Bảng 4.1 Tỉ lệ (%) diện virus lúa chét số tỉnh đại diện ĐBSCL Dạng mẫu/địa Số mẫu Tỉ lệ (%) diện phương RGSV RRSV RGSV+RRSV Long An 25 28 (7) 12 (3) An Giang 31 35,5 (11) 16,1 (5) 3,2 (1) Hậu Giang 19 31,6 (6) 10,5 (2) Ghi chú: Số liệu ngoặc đơn số lượng mẫu bị nhiễm bệnh test ELISA Kết nghiên cứu khảo sát xác định lồi cỏ dại (Bảng 4.2), phổ biến cỏ lồng vực (Echinochloa crus – galli (L.) Beauv.), cỏ đuôi phụng (Leptochloa chinensis (L.) Nees.), cỏ chác (Fimbristylis miliacea (L.) Vahl) cỏ cháo (Cyperus difformis L.) Các loại cỏ khác xuất với mức độ trung bình Kết test ELISA mẫu cỏ sau 14 ngày chủng virus cho thấy có cỏ lồng vực (Echinochloa crus – galli (L.) Beauv.), cỏ đuôi phụng (Leptochloa chinensis (L.) Nees.) mang virus RGSV Các mẫu cỏ Cỏ chác, Cháo, Lác hến, Xà Rau mác bao không mang virus Bảng 4.2 Thành phần mức độ phổ biến loài cỏ dại thu thập số tỉnh đại diện ĐBSCL S Tên Tên Tần suất Tỉ lệ (%) TT tiếng Việt khoa học xuất nhiễm RGSV Cỏ lồng vực Echinochloa crus – galli ++++ 33,3 (4/12) (L.) Beauv Cỏ đuôi phụng Leptochloa chinensis (L.) ++++ 16,7 (2/12) Nees Cỏ chác Fimbristylis miliacea (L.) ++++ (0/12) Vahl Cỏ cháo Cyperus difformis L ++++ (0/12) Lác hến Scirpus grossus Linn f +++ (0/12) Cỏ xà Sphenoclea zeylanica ++ (0/12) Gaertn Rau mác bao Monochoria vaginalis ++ (0/12) (Burm f.) Presl Ghi chú: - Tần suất xuất ≤ 10%: +; 10–30%: ++; 30–50%: +++; ≥ 50%: ++++ - Số liệu ngoặc đơn số lượng mẫu bị nhiễm bệnh/tổng mẫu chủng RGSV * Phân tích di truyền mẫu phân lập RGSV ĐBSCL Vẽ phát sinh chủng loài mẫu AG RGSV 2012 so sánh với mẫu RGSV thu thập trước năm 2012 qua phân tích trình tự gen dựa vào giống mức độ nucleotides (Nu) amino acid (aa) Kết Hình 4.1 cho thấy, trình tự gen mẫu RGSV phân tích chia thành nhóm riêng biệt Tuy nhiên, xem xét mối quan hệ di truyền cho thấy có đa dạng di truyền mẫu phân lập ĐBSCL, riêng mẫu AG RGSV 2012 có khác biệt so với mẫu phân lập RGSV nhóm cịn lại (Hình 4.1) Khi so sánh trình tự gen phát sinh chủng lồi 20 dịng virus RGSV (6 dịng virus RGSV dùng thí nghiệm HG RGSV 2018, VL RGSV 2018, KG RGSV 2018, AG RGSV 2018, ST RGSV 2018 LA RGSV 2018) 14 dòng virus RGSV (Ta et al., 2013) với trình tự gene có sẵn ngân hàng liệu gen NCBI cho thấy chia thành nhóm riêng biệt, có độ tương đồng cao từ 97,42% đến 98,98% (Hình 4.2 Bảng 4.3) Kết hợp kết phân tích chủng RGSV thu thập, phân lập năm 2012 2018 ĐBSCL chứng tỏ có đa dạng (chia thành nhóm cho thấy có chung nguồn gốc) mối quan hệ di truyền chặt chẽ (độ tương đồng cao từ 97,42% đến 98,98%) chủng RGSV so sánh Cây phát sinh chủng loài thể virus phân lập vùng ĐBSCL có mối quan hệ gần gộp nhóm (có số boostrap 100% lặp lại 1000 lần) Kết tương đồng với nghiên cứu Nguyễn Trung Nam ctv (2007), Nguyễn Ngọc Sơn ctv (2008) kết luận chủng RGSV chủng virus phổ biến gây hại lúa tỉnh ĐBSCL, có chung nguồn gốc chủng virus có mức độ sai khác di truyền thấp 4.2 Xác định mối quan hệ sinh học virus RGSV rầy nâu (Nilaparvata lugens Stal) * Xác định thời gian ủ virus RGSV thể rầy nâu lúa Thời gian ủ virus trung bình 4,9±1,6 ngày/rầy nâu, 18,8±0,8 ngày/cây lúa Tỷ lệ (%) lúa nhiễm bệnh thể thấp với 10,4% ngày thứ cao vào ngày thứ 15 với 45,6% (Hình 4.3A & 4.3B) Ling (1977) báo cáo giai đoạn ủ bệnh trung bình ngày (biến đổi từ – 28 ngày); Lê CNm Loan ctv (2009) với thời gian ủ virus khoảng – 14 ngày giống lúa TN1 18,7 ngày (Cabunagan et al.,2010) 50,0 A % B Thời gian (ngày) ủ bệnh 30,0 45,6 26,6 35,0 25,0 29,3 23,2 22,7 20,0 13,3 16,7 11,6 25,4 23,3 27,1 22,7 21,0 21,6 11,7 14,5 20,7 16,9 21,3 20,0 17,6 16,1 10,4 5,0 17,9 16,9 22,8 22,8 19,8 19,6 19,4 17,9 17,9 22,9 17,6 15,7 16,7 17,4 Ngày Ngày chủng 15,0 chủng S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 S11 S12 S13 S14 S15 S16 S17 S18 bệnh S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 S11 S12 S13 S14 S15 S16 S17 S18 bệnh Ghi chú: S1, S2,…S18: Số ngày chủng bệnh liên tục (từ ngày thứ đến ngày thứ 18) Hình 4.3 Tỷ lệ (%) lúa nhiễm RGSV (A) Thời gian (ngày) ủ bệnh lúa (B) qua ngày chủng bệnh liên tục Thời gian rầy nâu truyền bệnh liên tục trung bình 1,9±1,8 ngày Tuổi thọ trung bình rầy truyền bệnh 9,9±5,2 ngày Rầy nâu cần phải có khoảng thời 10 gian nghỉ (không truyền bệnh liên tục) để nhân mật số mầm bệnh với biến động từ – 13 ngày trung bình 4,2±2,6 ngày Thời gian truyền bệnh suốt 18 ngày liên tục chủng bệnh có trung bình 3,1±0,6 ngày, biến động từ – 13 ngày (Bảng 4.4) Theo Ling (1972) cho tuổi thọ trung bình rầy nâu truyền bệnh 15,4 ngày ngắn rầy nâu không truyền bệnh (17,5 ngày) Ở rầy nâu mang virus RGSV có tuổi thọ trung bình khả sinh sản thấp so với rầy nâu không mang virus RGSV (Hirao et al., 1987, Ling 1977) Tỷ lệ rầy nâu truyền bệnh cao ngày thứ 15 với 18,3% thấp 18 ngày với 5,8% trung bình 11,4±3,6%, khả truyền bệnh cá thể rầy thử nghiệm khác (Hình 4.4) Bảng 4.4 Khả truyền bệnh rầy nâu Thời gian (ngày) Truyền truyền bệnh liên tục Thấp Cao 11 Trung bình1 1,9±1,8 Ghi chú: 1: Độ lệch chu n 20,0 Thời gian nghỉ 13 4,2±2,6 Tuổi thọ 18 9,9±5,2 Truyền bệnh suốt 18 ngày chủng bệnh 13 3,1±0,6 % 18,3 15,8 15,0 15,0 13,3 14,2 14,2 13,3 13,3 12,5 10,8 10,0 10,0 10,0 9,2 7,5 5,0 S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 7,5 7,5 Ngày chủng S9 S10 S11 S12 S13 S14 S15 S16 S17 S18 bệnh 6,7 5,8 Ghi chú: S1, S2,…S18: Số ngày chủng bệnh liên tục (từ ngày thứ đến ngày thứ 18) Hình 4.4 Tỷ lệ (%) rầy nâu truyền virus RGSV ngày chủng bệnh liên tục * Xác định khoảng thời gian cần thiết để rầy nâu lấy truyền RGSV Thời gian để rầy nâu lấy virus RGSV tối thiểu 30 phút, tối thích ngày (Hình 4.5A) triệu chứng bệnh thể sau tối thiểu tuần truyền bệnh (Bảng 4.5) Kết phù hợp với nghiên cứu Hibino (1979, 1986 1989) thời gian rầy nâu chích hút đủ để gây bệnh 30 phút đến giờ; Lê CNm Loan ctv 11 (2009) cần tối thiểu từ 90 phút đến 30 phút Phạm Văn Dư ctv (2010) với triệu chứng bệnh xuất 15 – 20 ngày sau rầy nâu bay đến chích hút Bảng 4.5 Thời gian thể bệnh Rầy nâu lấy virus Tối Tối thiểu thích 30 phút 18 20 15 20 20 30 22 25 ngày 20 25 ngày 21 30 Ghi chú: 1: Độ lệch chu n Nghiệm thức Nghiệm thức Trung bình1 19,0±1,4 18,0±2,7 24,8±4,1 24,3±1,5 21,9±2,3 25,9±3,1 Tối thiểu 21 20 17 18 22 15 15 phút 30 phút giờ 24 A Tỷ lệ (%) B Tỷ lệ (%) 18 Rầy nâu truyền virus Tối Trung thích bình1 30 25,5±6,4 24 22,0±1,3 25 21,3±2,7 30 25,1±4,8 26 23,3±2,3 30 23,2±4,8 40 a a BPH 12 30 b OM 1490 a 20 ab bc bc c b Rầy nâu OM 1490 b bc ab bc bc b b 30 hours hours hours minutes bc 10 c days days Nghiệm thức 15 phút 30 phút giờ 24 Nghiệm thức Hình 4.5 Tỷ lệ (%) lấy (A) truyền (B) virus RGSV rầy nâu (BPH) thời gian khác Thời gian rầy truyền virus tối thiểu (thấp nhất) 15 phút, tối thích (cao nhất) 24 (Hình 4.5B Bảng 4.5) Kết chứng tỏ thời gian truyền bệnh tối thiểu 15 phút sớm so với nghiên cứu Lê CNm Loan ctv (2009) với 30 phút rầy nâu truyền bệnh tỷ lệ nhiễm bệnh cao rầy nâu truyền bệnh 150 phút Tương tự, Hibino (1996), Cabunagan Cabauatan (2006) có báo cáo rầy nâu sau lấy virus từ bệnh phải hoàn tất khoảng thời gian cần thiết ủ virus thể có khả truyền bệnh từ vài phút đến 25 giờ, tối thiểu từ – 15 phút 12 * Xác định mật số tối hảo rầy nâu/cây lúa truyền RGSV điều kiện nhà lưới ĐHAG Tốc độ gia tăng chiều cao sinh chồi lúa chịu ảnh hưởng mật số rầy nâu mang virus cao (Bảng 4.6 Bảng 4.7) Nguyễn Văn Dũng (2013) ghi nhận lúa tuổi lớn bị nhiễm bệnh lùn lúa cỏ tỷ lệ giảm chiều cao ngược lại, đặc biệt lúa 40 50 ngày tuổi khơng cịn ghi nhận giảm chiều cao sau 30 ngày truyền bệnh Điều có ý nghĩa quan trọng rầy nâu di trú mang mầm bệnh công với mật số cao ảnh hưởng đến sinh trưởng lúa Bảng 4.6 Ảnh hưởng mật số rầy nâu truyền virus RGSV đến chiều cao lúa Nghiệm thức rầy/cây lúa (T1) rầy/cây lúa (T2) rầy/cây lúa (T3) rầy/cây lúa (T4) rầy/cây lúa (T5) Đối chứng (T6) Ý nghĩa 15 NSKC 42,46a 43,20a 43,51a 44,24a 44,97a 0,00b ** Tỷ lệ (%) giảm chiều cao lúa 20 NSKC 25 NSKC 30 NSKC 30,52b 16,31 c 18,78c ab 30,73 16,95 c 20,30c ab 30,94 17,60 c 21,81c 33,12ab 23,50 b 27,62b a 35,30 29,41 a 33,43a c 0,00 0,00 d 0,00d ** ** ** 7,8 10,6 21 13 CV(%) Trong cột, số có chữ theo sau giống không khác biệt ý nghĩa thống kê theo phép thử Duncan Dấu **: Khác biệt có ý nghĩa mức 1% NSKC: Ngày sau chủng Bảng 4.7 Ảnh hưởng mật số rầy nâu truyền virus RGSV đến tỷ lệ (%) giảm số chồi lúa Nghiệm thức rầy/cây lúa (T1) rầy/cây lúa (T2) rầy/cây lúa (T3) rầy/cây lúa (T4) rầy/cây lúa (T5) Đối chứng (T6) Ý nghĩa 15 NSKC 58,54d 59,75cd 60,96bc 62,03ab 63,10a 0,00e ** Tỷ lệ (%) giảm số chồi lúa 20 NSKC 25 NSKC 30 NSKC b c 42,47 40,83 36,90b 43,08b 42,98bc 40,45ab b ab 43,69 45,12 44,00a a ab 58,83 46,57 43,62ab a a 60,58 48,02 43,24ab c d 0,00 0,00 0,00c ** ** ** 12,6 6,5 7,1 12 CV(%) Trong cột, số có chữ theo sau giống khơng khác biệt ý nghĩa thống kê theo phép thử Duncan Dấu **: Khác biệt có ý nghĩa mức 1% NSKC: Ngày sau chủng 13 Tỷ lệ bệnh tăng dần chủng với mật số rầy nâu truyền virus RGSV suốt giai đoạn 15 – 30 NSKC (Bảng 4.8), cụ thể mật số chủng rầy/cây lúa có tỷ lệ bệnh 2,5 – 22,5%, chủng rầy/cây lúa với 7,13 – 29,38% 12,5 – 48,75% chủng với mật số 3, rầy/cây lúa Ảnh hưởng mật độ rầy đến tỷ lệ xuất bệnh khác nhau, mật độ rầy cao tỷ lệ bệnh xuất cao (Hồ Thị Châu ctv., 2012) Theo Lê CNm Loan ctv (2009) ghi nhận chủng với mật số rầy/cây lúa tỷ lệ bệnh dao động từ 27,6 – 44,5% Khi lây nhiễm RGSV quần thể rầy nâu (7 – rầy/cây lúa) tỷ lệ bệnh 30,42% (Hồ Văn Chiến ctv., 2012) Kết thể tương quan chặt tỷ lệ bệnh xuất mật số rầy nâu thời điểm sau chủng bệnh (Hình 4.6) Bảng 4.8 Ảnh hưởng mật số rầy nâu truyền virus RGSV đến tỷ lệ bệnh Nghiệm thức rầy/cây lúa (T1) rầy/cây lúa (T2) rầy/cây lúa (T3) rầy/cây lúa (T4) rầy/cây lúa (T5) Đối chứng (T6) Ý nghĩa Tỷ lệ bệnh (%) thời điểm quan sát 15 NSKC 20 NSKC 25 NSKC 30 NSKC 2,50c 13,75d 15,00d 22,50d bc c c 7,13 22,00 25,63 29,38c 12,50ab 33,75b 36,25b 36,25b a ab b 15,63 39,38 41,25 41,25b a a a 20,00 45,00 48,75 48,75a c e e 0,00 0,00 0,00 0,00e ** ** ** ** 15,5 17,7 13,8 14,5 CV(%) Trong cột, số có chữ theo sau giống khơng khác biệt ý nghĩa thống kê theo phép thử Duncan Dấu **: Khác biệt có ý nghĩa mức 1% NSKC: Ngày sau chủng 60 y = 6,37x + 16,315 R² = 0,99 40 y = 8,312x + 8,44 R² = 0,98 y = 7,988x + 6,812 R² = 0,98 20 y = 4,35x - 1,498 R² = 0,94 0 Mật số rầy/cây6lúa Hình 4.6 Mối tương quan mật số rầy nâu truyền virus RGSV đến tỷ lệ bệnh 14 Thời gian thể bệnh tối thiểu 15 ngày, tối đa 30 ngày phù hợp với ghi nhận Cabauatan (1983) cho triệu chứng thể bệnh giống TN1 từ – 14 ngày sau chủng, bệnh nhảy chồi chết từ – tuần sau chủng Theo Chen and Chiu (1989) báo cáo thời gian trung bình thể bệnh từ 20 – 25 ngày sau chủng Ngồi ra, có xu hướng giảm dần thời gian thể bệnh với trung bình từ 18,39 – 21,81 ngày nghiệm thức tỷ lệ nghịch với mật số rầy nâu chủng tăng dần mật số lúa (Hình 4.7) Kết chứng tỏ thời gian lúa thể triệu chứng bệnh ngắn mật số rầy nâu truyền bệnh lùn lúa cỏ lúa cao Như vậy, điều kiện dịch bệnh cần phải quản lý rầy nâu mật số từ – rầy/cây lúa với tỷ lệ gây bệnh từ 12,5 – 13,75% giai đoạn 15 – 20 ngày tuổi tốt mật số từ – rầy/cây lúa với tỷ lệ gây bệnh từ 15,63 – 45% 25 21,81 21,05 18,75 20 18,59 18,39 15 10 T1 T2 T3 T4 T5 Nghiệm thức Ghi chú: T1: rầy/cây lúa T2: rầy/ lúa T3: rầy/ lúa T4: rầy/ lúa & T5: rầy/ lúa Hình 4.7 Thời gian thể bệnh mật số rầy/cây lúa sau chủng bệnh * Xác định khả truyền RGSV rầy nâu lấy virus giai đoạn ấu trùng tuổi 1, 2, 3, trưởng thành nhà lưới ĐHAG Chiều cao lúa chịu ảnh hưởng ấu trùng rầy nâu tuổi 1, truyền virus cao rầy nâu tuổi trưởng thành 25 – 30 ngày sau chủng, không ảnh hưởng đến sinh chồi lúa (Bảng 4.9 4.10) Phạm Văn Dư ctv (2010) xác định triệu chứng bệnh xuất ảnh hưởng đến sinh trưởng lúa kể từ 15 – 20 ngày sau rầy nâu bay đến chích hút 15 Bảng 4.9 Ảnh hưởng ấu trùng rầy nâu rầy nâu trưởng thành truyền RGSV đến chiều cao lúa Chiều cao (cm) lúa thời điểm quan sát Nghiệm thức 15 NSKC 20 NSKC 25 NSKC 30 NSKC c b c Rầy nâu tuổi (NT1) 24,23 29,05 35,61 44,84c Rầy nâu tuổi (NT2) 26,55b 33,11c 42,69c 23,98c bc ab b Rầy nâu tuổi (NT3) 25,61 31,05 39,61 49,19b a a a Rầy nâu tuổi (NT4) 34,74 47,46 56,12a 27,63 ab a a Rầy nâu trưởng thành (NT5) 26,86 34,14 48,54 57,65a Ý nghĩa ** * ** ** CV(%) 14,8 19,9 15,7 15,3 Trong cột, số có chữ theo sau giống khơng khác biệt ý nghĩa thống kê theo phép thử Duncan Dấu **: Khác biệt có ý nghĩa mức 1%; *: Khác biệt có ý nghĩa mức 5% NSKC: Ngày sau chủng Bảng 4.10 Ảnh hưởng ấu trùng rầy nâu rầy nâu trưởng thành truyền RGSV đến sinh chồi lúa Số chồi lúa thời điểm quan sát Nghiệm thức 15 NSKC 20 NSKC 25 NSKC 30 NSKC Rầy nâu tuổi (NT1) 1,20 1,47 2,20 2,70 Rầy nâu tuổi (NT2) 1,05 1,38 1,75 2,50 Rầy nâu tuổi (NT3) 1,13 1,42 1,98 2,60 Rầy nâu tuổi (NT4) 1,15 1,43 2,30 2,80 Rầy nâu trưởng thành (NT5) 1,14 1,42 2,14 2,70 ns ns ns Ý nghĩa ns CV(%) 8,5 12,6 13,8 14,5 ns: khơng khác biệt có ý nghĩa thống kê NSKC: Ngày sau chủng Ấu trùng rầy nâu tuổi trưởng thành cho khả truyền bệnh lùn lúa cỏ lúa với tỷ lệ bệnh thấp ấu trùng rầy nâu tuổi 1, (Hình 4.8) Ngồi ra, tỷ lệ nhiễm virus RGSV ấu trùng rầy nâu tuổi 1, từ 35,66 – 41,7% cao so với ấu trùng rầy nâu tuổi (26,81%) trưởng thành (21,14%) suốt thời gian từ 15 – 30 NSKC (Hình 4.9) Kết chứng tỏ rầy non có khả mang truyền virus RGSV suốt vòng đời cao rầy trưởng thành, Chen (1984) ghi nhận “Rầy non có khả truyền bệnh cao có giai đoạn ủ virus ngắn rầy trưởng thành”; rầy non rầy trưởng thành truyền bệnh (Viện bảo vệ thực vật, 2012) Khơng có chênh lệch lớn thời gian thể bệnh chịu ảnh hưởng ấu trùng rầy nâu tuổi 1, 2, 3, trưởng thành truyền bệnh với tối thiểu 19 ngày, tối đa 25 ngày trung bình biến động từ 21 – 22 ngày sau chủng bệnh Kết tương đồng với Chen and Chiu (1989) xác định trung bình thể bệnh từ 20 – 25 ngày 16 sau chủng kể từ 20 ngày đồng sau rầy di trú mang mầm bệnh đến chích hút truyền bệnh (Phạm Văn Dư ctv., 2010) 30 a a a Tỉ lệ bệnh (%) b a 20 b c c c c 25 ngày 30 ngày NT1 NT2 NT3 NT4 NT5 10 Ngày sau chủng 15 ngày 20 ngày Ghi chú: NT1: Rầy nâu tuổi 1; NT2: Rầy nâu tuổi 2; NT3: Rầy nâu tuổi 3; NT4: Rầy nâu tuổi 4; NT5: Rầy nâu trưởng thành Hình 4.8 Khả truyền RGSV ấu trùng rầy nâu tuổi 1, 2, 3, trưởng thành 50.00 a a Tỷ lệ (%) nhiễm virus 40.00 ab ab 30.00 b 20.00 10.00 0.00 NT1 NT2 NT3 NT4 NT5 Nghiệm thức Hình 4.9 Tỷ lệ (%) nhiễm virus ấu trùng rầy nâu tuổi 1, 2, 3, trưởng thành 17 * Ảnh hưởng virus RGSV đến giai đoạn sinh trưởng (Mạ, Đẻ Nhánh – Làm Đòng Trổ) lúa điều kiện nhà lưới ĐHAG Cây lúa tuổi lớn bị nhiễm bệnh lùn lúa cỏ tỷ lệ giảm sinh trưởng (chiều cao số chồi) ngược lại suốt 15 – 30 NSKC Cụ thể, giai đoạn Mạ (10 – 20 NSG) nghiệm thức có chiều cao số chồi lúa giảm cao tương ứng 6,24 – 47,88% 7,42 – 62,81% so với đối chứng; giai đoạn Đẻ nhánh – Làm Đòng (30 – 40 NSG) với 2,12 – 10,01% 1,44 – 22,69%; giai đoạn Trổ (50 – 60 NSG) với 0,3 – 11,05% 1,04 – 3,52% Kết ghi nhận Hồ Thị Châu ctv (2012) cho giai đoạn từ sau 40, 50 ngày tuổi trở đi, lúa mẫn cảm với bệnh, khơng cịn ghi nhận giảm chiều cao bị thiệt hại Theo nghiên cứu Nguyễn Như Cường (2010) Nguyễn Văn Dũng (2013) ghi nhận lúa tuổi lớn bị nhiễm bệnh lùn lúa cỏ tỷ lệ giảm chiều cao ngược lại Cây lúa non (giai đoạn Mạ) dễ mẫn cảm với virus RGSV tỷ lệ giảm suất lúa cao so với giai đoạn Đẻ nhánh – Làm Đòng Trổ Cụ thể, Lúa giai đoạn Mạ nghiệm thức có tỷ lệ bệnh từ – 36% suất lúa giảm cao với 15,17 – 31,7% so với đối chứng Giai đoạn Đẻ nhánh – Làm Đòng (30 – 40 NSG) với tỷ lệ nhiễm bệnh – 8% suất lúa giảm 4,24 – 15,85% Ở giai đoạn Trổ (50 – 60 NSG) với tỷ lệ nhiễm thấp – 5,4% suất lúa giảm 1,11 – 4,59% Theo Nguyễn Như Cường (2010), Hồ Thị Châu ctv (2012) Nguyễn Văn Dũng (2013) cho giai đoạn sinh trưởng lúa bị nhiễm bệnh, mức độ mẫn cảm giảm dần lúa độ tuổi lớn an toàn với bệnh bị nhiễm 40 ngày sau sạ Bộ môn Bệnh cây, Viện lúa ĐBSCL (2012) cho lúa bị nhiễm bệnh trể, tỷ lệ bệnh thấp thiệt hại giảm Điều có ý nghĩa quan trọng rầy nâu di trú mang mầm bệnh công lúa giai đoạn non (dưới 20 ngày tuổi) gây ảnh hưởng nặng đến suất lúa (Phạm Văn Dư ctv., 2010) * Xác định khả truyền bệnh Lùn lúa cỏ (RGSV) lúa màu sắc, giới tính dạng hình rầy nâu Khơng có khác biệt tỷ lệ (%) truyền virus chịu ảnh hưởng dạng hình (Bảng 4.11), màu sắc (Bảng 4.12) giới tính rầy nâu (Bảng 4.13) Kết phù hợp với nghiên cứu Ling (1970); Chen and Chiu (1989) cho rằng, với rầy nâu Nilaparvata lugens, tỷ lệ truyền bệnh không khác biệt rõ ràng dạng hình rầy nâu (cánh dài cánh ngắn); màu sắc rầy (màu nâu màu đen đậm) giới tính rầy nâu (đực cái) 18 Bảng 4.11 Tỷ lệ (%) truyền virus RGSV dạng hình rầy màu nâu đen đậm Tỷ lệ (%) truyền virus RGSV Nghiệm thức 15 NSKC 20 NSKC 25 NSKC 30 NSKC Rầy màu đen mang virus 6,41a 20,30a 29,25a 32,67a a a a Rầy màu nâu mang virus 5,92 21,71 31,20 34,86a Rầy màu đen không mang virus 0,00b 0,00b 0,00b 0,00b b b b Rầy màu nâu không mang virus 0,00 0,00 0,00 0,00b ** ** ** ** Ý nghĩa 14,1 28,7 22,8 25,3 CV(%) Trong cột, số có chữ theo sau giống khơng khác biệt ý nghĩa thống kê theo phép thử Duncan Dấu **: Khác biệt có ý nghĩa 1% NSKC: Ngày sau chủng Bảng 4.12 Tỷ lệ (%) truyền virus RGSV giới tính rầy đực rầy Nghiệm thức Rầy đực mang virus Rầy mang virus Rầy đực không mang virus Rầy không mang virus Ý nghĩa CV(%) Tỷ lệ (%) truyền virus RGSV 15 NSKC 20 NSKC 25 NSKC 30 NSKC 5,41a 16,24a 22,04a 25,46a a a a 5,12 17,37 23,60 26,18a b b b 0,00 0,00 0,00 0,00b b b b 0,00 0,00 0,00b 0,00 ** ** ** ** 12,9 28,7 24,7 24,8 Trong cột, số có chữ theo sau giống khơng khác biệt ý nghĩa thống kê theo phép thử Duncan Dấu **: Khác biệt có ý nghĩa 1% NSKC: Ngày sau chủng Bảng 4.13 Tỷ lệ (%) truyền virus RGSV lúa rầy cánh dài rầy cánh ngắn Nghiệm thức Rầy cánh dài mang virus Rầy cánh ngắn mang virus Rầy cánh dài không mang virus Rầy cánh ngắn không mang virus Ý nghĩa CV(%) Tỷ lệ (%) truyền virus RGSV 15 NSKC 20 NSKC 25 NSKC 30 NSKC 5,91a 18,74a 24,53a 27,96a a a a 6,02 20,00 26,31 29,97a 0,00b 0,00b 0,00b 0,00b b b b 0,00 0,00 0,00 0,00b ** ** ** ** 12,5 30,2 27,6 28,2 Trong cột, số có chữ theo sau giống khơng khác biệt ý nghĩa thống kê theo phép thử Duncan Dấu **: Khác biệt có ý nghĩa 1% NSKC: Ngày sau chủng 19 Khơng có chênh lệch lớn thời gian thể bệnh chịu ảnh hưởng màu sắc, giới tính dạng hình rầy nâu với trung bình biến động từ 18 – 20 NSKC (Bảng 4.14) Theo Cabauatan (1983) thời gian lấy virus đạt 24 làm tăng phần trăm rầy nhiễm virus thời gian ủ bệnh từ – 28 ngày (trung bình 10 – 11 ngày) Kết tương đồng với ghi nhận Phạm Văn Dư ctv (2010) cho rằng, lúa thể triệu chứng bệnh đồng kể từ 20 ngày sau rầy di trú mang mầm bệnh đến chích hút truyền bệnh Bảng 4.14 Thời gian thể bệnh sau chủng màu sắc, giới tính dạng hình rầy nâu Màu sắc rầy Giá trị Trung bình1 Thấp Cao Giới tính rầy Màu nâu Màu đen Rầy đực Rầy 18,71±4,24 12 25 18,94±3,94 13 27 18,25±4,12 13 24 20,55±3,22 14 25 Dạng hình rầy Cánh ngắn Cánh dài 19,06±4,42 13 27 18,58±4,66 12 28 : Độ lệch chu n * Khả truyền virus RGSV cá thể tập thể rầy nâu Có khác biệt tỷ lệ truyền virus chủng bệnh cá thể (Z1) 8,75 – 29,38% thấp khác biệt so với chủng tập thể (Z2) 33,53 – 65,16% suốt 15 – 30 NSKC (Bảng 4.15) Kết tương đồng với nghiên cứu Hồ Văn Chiến ctv (2012) báo cáo việc lây nhiễm quần thể rầy nâu (7 – rầy/cây lúa) tỷ lệ bệnh lùn lúa cỏ 30,42% Kết thể tương quan chặt tỷ lệ bệnh xuất mật số rầy nâu thời điểm sau chủng bệnh (Hình 4.10) Theo Hồ Thị Châu ctv (2012) tỷ lệ bệnh xuất khơng đồng có xu tỷ lệ thuận với mật độ rầy bệnh Bảng 4.15 Tỉ lệ (%) truyền bệnh chủng bệnh cá thể tập thể rầy nâu Nghiệm thức Chủng Cá thể rầy mang virus Chủng Tập thể mang virus Chủng Cá thể không mang virus Chủng Tập thể không mang virus Ý nghĩa CV(%) Tỷ lệ (%) truyền virus RGSV 15 NSKC 20 NSKC 25 NSKC 8,75b 23,75b 25,63b a a 33,53 60,13 62,66a c c 0,00 0,00 0,00c c c 0,00 0,00 0,00c ** ** ** 27,9 15,3 14,3 30 NSKC 29,38b 65,16a 0,00c 0,00c ** 18,2 Trong cột, số có chữ theo sau giống khơng khác biệt ý nghĩa thống kê theo phép thử Duncan Dấu **: Khác biệt có ý nghĩa 1% NSKC: Ngày sau chủng 20 Ngồi ra, có chênh lệch trung bình thời gian thể bệnh chịu ảnh hưởng chủng bệnh cá thể với 20 ngày chủng bệnh tập thể rầy nâu với 16 ngày (Bảng 4.16) Kết chứng tỏ mật số rầy nâu rầy mang RGSV truyền bệnh lúa làm rút ngắn thời gian ủ bệnh cao so với mật số 01 rầy nâu mang RGSV truyền bệnh lúa Ngoài ra, theo trích dẫn từ Hồ Thị Châu ctv (2012) cho thời gian ủ bệnh lúa virus RGSV trung bình 10 – 20 ngày Kết tương đồng với ghi nhận Phạm Văn Dư ctv (2010) cho rằng, lúa thể triệu chứng bệnh đồng kể từ 20 ngày sau rầy di trú mang mầm bệnh đến chích hút truyền bệnh 80 Z2 60 Z2 Z2 y = 9,742x + 31,015 R² = 0,73 40 Z2 Z1 Z1 20 Z1 Z1 y = 6,377x + 5,935 R² = 0,83 0 15NSKC Ghi chú: Z1: Chủng bệnh cá thể 20NSKC 25NSKC Ngày sau5 30NSKC chủng Z2: Chủng bệnh tập thể Hình 4.10 Mối tương quan chủng bệnh cá thể tập thể rầy nâu truyền virus RGSV đến tỷ lệ bệnh Bảng 4.16 Thời gian thể bệnh sau chủng bệnh cá thể tập thể Giá trị Cá thể Trung bình 20,39±2,11 Thấp 18,07 Cao 22,5 : Độ lệch chu n 21 Tập thể 16,11±2,43 13,13 18,62 4.3 Thanh lọc số dòng/giống kháng RGSV điều kiện nhà lưới dùng cho lai tạo sản xuất Nhóm giống nhiễm Viện, Trường tuyển chọn (Bảng 4.17) gồm OM 6936, OM 1490, OM 2395, OM 10029, OM 8928, OM 3748, OM 5953, OM 7347 VND 95-20, đặc biệt giống OM 3748 cho tỉ lệ nhiễm bệnh cao với 95% Bảng 4.17 Tỷ lệ (%) nhiễm bệnh giống lúa Viện, Trường Nghiệm thức Tỷ lệ (%) bệnh ngày sau chủng (NSKC) 15 NSKC 20 NSKC 25 NSKC 30 NSKC OM 6904 20,0bcd 20,0cde 20,0d 20,0d abc a-d a-d OM 8923 45,0 45,0 45,0 45,0cd OM 6922 5,0abc 10,0de 21,7cd 21,7d a ab ab 70,0 71,7 71,7abc OM 6936 70,0 bcd a-d a-d OM 4498 30,0 48,3 50,0 55,0a-d bcd ab abc OM 1490 30,0 60,0 65,0 70,0abc abc a-d a-d OM 2517 5,0 5,0 5,0 50,0bcd cd cde a 20,0 80,0 90,0ab VND 95-20 0,0 OM 4900 10,0cd 45,0a-d 45,0a-d 45,0cd abc cde d 10 OM 6561 5,0 15,0 15,0 15,0d cd cde cd 11 OM 6377 15,0 20,0 25,0 35,0cd cd de bcd 0,0 30,0 75,0abc 12 OM 2395 0,0 abc cde bcd 13 OM 10041 5,0 15,0 30,0 40,0cd 14 OM 10029 35,0a-d 65,0ab 65,0abc 70,0abc bcd abc a-d 15 OM 10383 30,0 50,0 50,0 55,0a-d abc ab ab 65,0 70,0 75,0abc 16 OM 8928 40,0 abc ab a 17 OM 3748 40,0 65,0 75,0 95,0a bcd bcd a-d 18 OM 5953 25,0 40,0 45,0 75,0abc 19 OM 7347 55,0ab 80,0a 85,0a 90,0ab ** ** ** ** Mức ý nghĩa CV (%) 20,4 18,2 22,1 18,3 Trong cột, số có chữ theo sau giống khơng khác biệt ý nghĩa thống kê theo phép thử Duncan Dấu **: Khác biệt có ý nghĩa mức 1% NSKC: Ngày sau chủng Nhóm giống nơng dân tuyển chọn (Bảng 4.18) gồm TC 2, TC 8, TC 9, NV đặc biệt NV cho tỉ lệ nhiễm bệnh cao với 90% Nhóm giống chống chịu gồm OM 6904 (20%), OM 6922 (21,7%), OM 6561 (15%), TC (25%), TC (25%), NV (30%) đặc biệt giống TC NV tỉ lệ bệnh thấp với 10% 22 Bảng 4.18 Tỷ lệ (%) nhiễm bệnh nhóm giống lúa CM, TC NV Tỷ lệ (%) bệnh ngày sau chủng (NSKC) Nghiệm thức 15 NSKC 20 NSKC 25 NSKC 30NSKC CM 35,0b 35,0c-f 35,0cde 35,0def CM 25,0bc 35,0c-f 35,0cde 35,0def bc def cde CM 30,0 30,0 30,0 30,0def CM 11 35,0b 35,0c-f 35,0cde 35,0def bc ef e 10,0 10,0 25,0ef TC 10,0 a ab ab TC 75,0 75,0 75,0 75,0abc TC 25,0bc 25,0def 25,0de 25,0ef bc ef e TC 10,0 10,0 10,0 10,0f TC 80,0a 80,0a 80,0ab 80,0ab b b-e abc 45,0 65,0 65,0a-d 10 TC 5,0 11 TC 13 5,0b 41,7b-e 51,7bcd 51,7b-e b ef e 12 NV 5,0 15,0 15,0 30,0def 13 NV 0,0bc 10,0ef 10,0e 35,0def bc c-f cde 14 NV 0,0 33,3 38,3 40,0c-f bc ef e 0,0 11,7 40,0c-f 15 NV 0,0 16 NV 11,7bc 51,7a-d 51,7bcd 61,7a-e bc ef cde 17 NV6 10,0 10,0 35,0 40,0c-f 18 NV7 0,0bc 5,0b-e 10,0e 10,0f b abc a 19 NV 35,0 68,3 90,0 90,0a Mức ý nghĩa ** ** ** ** CV (%) 20,3 17,3 16,7 18,5 Trong cột, số có chữ theo sau giống khơng khác biệt ý nghĩa thống kê theo phép thử Duncan Dấu **: Khác biệt có ý nghĩa mức 1% Chương 5: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 5.1 Kết luận Virus RGSV có tỉ lệ (%) diện phổ biến virus Lùn xoắn (Rice Ragged Stunt Visus, RRSV) RGSV phối hợp với RRSV mẫu lúa chét tỉnh đại diện ĐBSCL (Long An, An Giang Hậu Giang) Kết tương tự lồi cỏ dại gồm lồng vực phụng xem nguồn lưu tồn lan truyền virus RGSV Các chủng RGSV thu thập phân tích di truyền năm 2012 2018 ĐBSCL chứng tỏ có đa dạng (chia thành nhóm cho thấy có chung nguồn gốc) mối quan hệ di truyền chặt chẽ (độ tương đồng cao từ 97,42% đến 98,98%) chủng RGSV so sánh Cây phát sinh chủng loài thể virus phân lập vùng ĐBSCL có mối quan hệ gần gộp nhóm (có số boostrap 100% lặp lại 1000 lần) 23 Thời gian ủ virus trung bình 4,9±1,6 ngày/rầy nâu, 18,8±0,8 ngày/cây lúa Tỷ lệ (%) lúa nhiễm bệnh thể thấp với 10,4% ngày thứ cao vào ngày thứ 15 với 45,6% Thời gian rầy nâu truyền bệnh liên tục trung bình 1,9±1,8 ngày Tuổi thọ trung bình rầy truyền bệnh 9,9±5,2 ngày Thời gian để rầy nâu lấy virus RGSV tối thiểu 30 phút, tối thích ngày thời gian rầy truyền virus tối thiểu 15 phút, tối thích 24 Tốc độ gia tăng chiều cao sinh chồi lúa chịu ảnh hưởng mật số rầy nâu mang virus cao Quản lý rầy nâu mật số từ – rầy/cây lúa với tỷ lệ gây bệnh từ 12,5 – 13,75% giai đoạn 15 – 20 ngày tuổi tốt mật số từ – rầy/cây lúa với tỷ lệ gây bệnh từ 15,63 – 48,75% Chiều cao lúa chịu ảnh hưởng ấu trùng rầy nâu tuổi 1, truyền virus cao rầy nâu tuổi trưởng thành 25 – 30 ngày sau chủng, không ảnh hưởng đến sinh chồi lúa Rầy non có khả mang truyền virus RGSV cao rầy trưởng thành Tỷ lệ (%) giảm chiều cao sinh chồi lúa chịu ảnh hưởng lớn nhiễm RGSV giai đoạn Mạ Đẻ nhánh giai đoạn Trổ Cây lúa non (giai đoạn Mạ) dễ mẫn cảm với virus RGSV tỷ lệ giảm suất lúa cao so với giai đoạn Đẻ nhánh – Trổ Khơng có khác biệt tỷ lệ (%) truyền thời gian ủ virus chịu ảnh hưởng dạng hình, màu sắc giới tính rầy nâu Có khác biệt tỷ lệ truyền virus thời gian ủ virus chủng bệnh cá thể tập thể rầy nâu Nhóm giống nhiễm Viện, Trường tuyển chọn gồm OM 6936, OM 1490, OM 2395, OM 10029, OM 8928, OM 3748, OM 5953, OM 7347 VND 95-20, đặc biệt giống OM 3748 cho tỉ lệ nhiễm bệnh cao với 95% Nhóm giống nông dân tuyển chọn gồm TC 2, TC 8, TC 9, NV đặc biệt NV cho tỉ lệ nhiễm bệnh cao với 90% Nhóm giống chống chịu gồm OM 6904 (20%), OM 6922 (21,7%), OM 6561 (15%), TC (25%), TC (25%), NV (30%) đặc biệt giống TC NV tỉ lệ bệnh thấp với 10% 5.2 Đề xuất Tiếp tục phân tích đặc điểm di truyền giải mã tồn trình tự gen mã hóa cho protein mẫu mang virus tại, từ đánh giá khác biệt quan hệ rầy nâu bệnh lùn lúa cỏ so với nghiên cứu trước Trong điều kiện dịch bệnh cần quản lý chặt lứa tuổi, mật số rầy di trú ruộng mang virus RGSV 10% phòng ngừa lúa nhiễm bệnh từ giai đoạn Mạ - Đẻ nhánh (đặc biệt lúa 15 ngày tuổi) Tiếp tục lọc số dòng/giống kháng RGSV điều kiện nhà lưới dùng cho lai tạo sản xuất 24 ... dịch bệnh VL, LXL có nguy tiềm Nn đe dọa nghiêm trọng cho sản xuất lúa đến vụ sau lâu dài Vì đề tài " Nghiên cứu đặc tính sinh học virus Lùn lúa cỏ (Rice Grassy Stunt Virus) khả truyền bệnh qua rầy. .. Dư, Nguyễn Văn Huỳnh, 2016 Nghiên cứu đặc tính truyền viruslùn lúa cỏ (Rice Grassy Stunt Virus, RGSV) rầy nâu (Nilaparvata lugens Stal) Tạp chí khoa học Trường Đại học Cần Thơ Số chuyên đề: Nông... có ý nghĩa khoa học cao nghiên cứu đặc tính sinh học virus RGSV gây bệnh lúa ĐBSCL, xác định mối quan hệ sinh học RGSV rầy nâu (Nilaparvata lugens Stal) lúa góp phần làm sở khoa học cho cơng tác