ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI KHOA Y DƯỢC  ĐỖ HƯNG ĐÔNG ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU SỰ ẢNH HƯỞNG CỦA MỘT SỐ YẾU TỐ ĐẾN ĐỘ ỔN ĐỊNH CỦA DUNG DỊCH THUỐC CHỨA VITAMIN C KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH DƯỢC HỌC Hà Nội - 2020 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI KHOA Y DƯỢC  Người thực hiện: ĐỖ HƯNG ĐÔNG NGHIÊN CỨU SỰ ẢNH HƯỞNG CỦA MỘT SỐ YẾU TỐ ĐẾN ĐỘ ỔN ĐỊNH CỦA DUNG DỊCH THUỐC CHỨA VITAMIN C KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC (NGÀNH DƯỢC HỌC) Khóa : QH2015.Y Người hướng dẫn : GS.TS NGUYỄN THANH HẢI ThS NGUYỄN THỊ HUYỀN Hà Nội - 2020 LỜI CẢM ƠN Lời đầu tiên, xin gửi lời cảm ơn sâu sắc kình trọng tới: GS.TS NGUYỄN THANH HẢI Ths NGUYỄN THỊ HUYỀN Là người quan tâm, giúp đỡ, động viên, hướng dẫn tạo điều kiện thuận lợi suốt trình thực khóa luận để tơi hồn thành khóa luận Tôi xin gửi lời cảm ơn trân thành tới tất thầy cô khoa Y – Dược, đại học Quốc Gia Hà Nội nói chung mơn Bào chế Cơng nghiệp dược phẩm nói riêng tận tình giảng dạy, truyền đạt kiến thức kinh nghiệm quý báu cho năm học tập trường Tôi xin gửi lời cảm ơn tới thầy cô ban giám hiệu, phòng ban cán nhân viên khoa Y – Dược, Đại học Quốc Gia Hà Nội giúp đỡ suốt thời gian học tập trường Cuối cùng, tơi xin gửi lời cảm ơn tới gia đình, bạn bè ln bên động viên khích lệ, tạo điều kiện thuận lợi cho học tập ln giúp đỡ tơi suốt q trình thực khóa luận Hà Nội, tháng năm 2020 Sinh viên ĐỖ HƯNG ĐÔNG MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ CHƢƠNG I: TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan Vitamin C 1.1.1 Công thức 1.1.2 Tính chất lý – hóa 1.1.3 Tác dụng dƣợc lý, công dụng, liều dùng dạng bào chế Vitamin C 1.1.4 Các phƣơng pháp định lƣợng Vitamin C 1.1.5 Các yếu tố ảnh hƣởng đến độ ổn định dung dịch Vitamin C 1.2 Khí hịa tan 12 1.2.1 Khí Oxy (O2 ) 12 1.2.2 Khí Cacbonic (CO2 ) 16 1.3 Tổng quan số công trình nghiên cứu 17 1.3.1 Các nghiên cứu nƣớc: 17 1.3.2 Các nghiên cứu nƣớc ngoài: 17 CHƢƠNG II: ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 19 2.1 Nguyên liệu, thiết bị 19 2.1.1 Nguyên liệu 19 2.1.2 Các thiết bị sử dụng nghiên cứu 19 2.2 Phƣơng pháp nghiên cứu 19 2.2.1 Phƣơng pháp loại khí oxy dung mơi pha chế dung dịch Vitamin C 10% 19 2.2.2 Phƣơng pháp khảo sát ảnh hƣởng yếu tố đến độ ổn định dung dịch Vitamin C 22 CHƢƠNG III: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 25 3.1 Kết xây dựng phƣơng pháp định lƣợng Vitamin C HPLC 25 3.1.1 Tính thích hợp hệ thống 25 3.1.2 Độ đặc hiệu 25 3.1.3 Độ tuyến tính 27 3.2 Kết đánh giá ảnh hƣởng chất chống oxy hóa đến độ ổn định dung dịch Vitamin C 28 3.3 Kết khảo sát phƣơng pháp loại oxy hịa tan dung mơi 31 3.4 Kết khảo sát ảnh hƣởng oxy hòa tan đến độ ổn định dung dịch Vitamin C 10% 34 3.5 Bàn luận 37 3.5.1 Sự ảnh hƣởng chất chống oxy hóa khác đến độ ổn định dung dịch Vitamin C 37 3.5.2 Sự ảnh hƣởng biện pháp giảm oxy hòa tan đến độ ổn định dung dịch Vitamin C 38 CHƢƠNG IV: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 40 DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT AA Acid Ascorbic DO Nồng độ oxy hòa tan (Dissolved Oxygen) HPLC Sắc ký lỏng hiệu cao (High-Performance Liquid Chromatography) DĐVN Dƣợc điển Việt Nam TCNSX Tiêu chuẩn nhà sản xuất EP Dƣợc điển Châu Âu (European Pharmacopoeia) DANH MỤC CÁC BẢNG ảng 1: Một số dạng bào chế tên biệt dƣợc Vitamin C ảng 2: Nồng độ bão hòa oxy nƣớc theo nhiệt độ 13 ảng 1: Các nguyên liệu sử dụng nghiên cứu 19 ảng 2: C ng thức dung dịch Vitamin C 10% 21 ảng 1: Khảo sát tính tƣơng thích hệ thống sắc ký (n=6) 25 ảng 2: Kết khảo sát tính đặc hiệu 26 ảng 3: Diện tích pic dãy dung Vitamin C dịch chuẩn 27 ảng 3.4: Cảm quan độ hấp thụ dung dịch Vitamin C sử dụng chất chống oxy hóa khác 29 ảng 5: Hàm lƣợng Vitamin C mẫu sử dụng chất chống oxy hóa khác 30 ảng 6: Nồng độ oxy hòa tan mẫu 32 ảng 7: Độ hấp thụ mẫu vitamin C sử dụng dung m i loại oxy 35 ảng 8: Hàm lƣợng Vitamin C mẫu sử dụng dung m i loại khí oxy hồ tan 35 DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ VÀ ĐỒ THỊ H nh 1: Độ hòa tan oxy nitơ nƣớc cất đƣợc bão hịa khơng khí áp suất 790 mm Hg 12 H nh 1: Sơ đồ pha chế dung dịch Vitamin C 10 % 22 H nh 1: Đồ thị khảo sát độ tuyến tính phƣơng pháp HPLC bƣớc sóng 254nm 27 Hình 3.2: Biểu đồ hàm lƣợng Vitamin C mẫu sử dụng chất chống oxy hóa khác nhau………….…………………………………………….… 31 Hình 3.3: Đồ thị biểu diễn nồng độ oxy hịa tan mẫu…………….….33 Hình 3.4: Biểu đồ thể hàm lƣợng Vitamin C mẫu sử dụng dung mơi loại khí oxy hồ tan…………………………………………………… 36 ĐẶT VẤN ĐỀ Vitamin C loại vitamin thiết yếu cho thể ngƣời Có tác dụng nhƣ chất chống oxy hóa, kiểm sốt huyết áp, chống viêm tái tạo collagen, giúp thúc đẩy hệ miễn dịch thể Vì nên hữu ích việc đẩy lùi bệnh nhiễm trùng nhƣ nhiễm trùng đƣờng tiết niệu, bệnh nƣớu, mụn trứng cá, bệnh suy giảm miễn dịch ngƣời (HIV) [13,20,22] Ngày nay, Vitamin C đƣợc bào chế nhiều dạng thuốc khác nhƣ viên nén, viên sủi, viên ngậm, viên nang, kem bôi dạng thuốc tiêm… [13,14] Ngồi ra, cịn đƣợc phối hợp chế phẩm với dƣợc chất khác để tăng tác dụng thuốc.Tuy nhiên, Vitamin C chất dễ bị oxy hóa oxy kh ng khí, đặc biệt có diện yếu tố nhƣ ánh sáng, vết kim loại (Fe Cu), độ ẩm… Oxy nguyên tố hoá học hoạt động mạnh, tham gia vào tất q trình oxy hố - khử chất có nhiều khơng khí Do đó, oxy hồ tan nƣớc bảo quản điều kiện thƣờng, trở thành loại tạp chất nƣớc cất, ảnh hƣởng đến độ ổn định chất, đặc biệt chất dễ bị oxy hóa dung dịch Vì vậy, dạng dung dịch, độ ổn định Vitamin C bị ảnh hƣởng nhiều nồng độ oxy hịa tan nƣớc Do đó, để góp phần cải thiện độ ổn định dung dịch Vitamin C, thực đề tài: “Nghiên cứu ảnh hưởng số yếu tố đến độ ổn định dung dịch thuốc chứa Vitamin C” Với mục tiêu: Đánh giá ảnh hƣởng số chất chống oxy hóa đến độ ổn định dung dịch Vitamin C 10% Đánh giá ảnh hƣởng nồng độ oxy hoà tan đến độ ổn định dung dịch Vitamin C 10% CHƢƠNG I: TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan Vitamin C 1.1.1 Công thức Tên thƣờng gọi: Vitamin C; Acid ascorbic [13] Công thức cấu tạo: Tên khoa học: γ – lacton acid 2,3 – dehydro – L – gulonic Công thức phân tử: C6H8O6 Khối lƣợng phân tử: 176,14 g/mol [3,13] 1.1.2 Tính chất lý – hóa 1.1.2.1 Lý tính Vitamin C dạng tinh thể không màu hay bột kết tinh trắng gần nhƣ trắng, bị biến màu tiếp xúc với khơng khí ẩm [13] Dễ tan nƣớc, tan ethanol 96%, thực tế không tan chloroform, ether, benzen [13] Điểm nóng chảy: 190 đến 192 oC (374 đến 378 oF) [3] Góc quay cực dung dịch Vitamin C 10% từ +20,5 đến +21,5o [13] Khả hấp thụ tử ngoại (do có nhóm endiol nên Vitamin C có khả hấp thụ ánh sáng vùng tử ngoại): Vitamin C dung dịch HCl 0,01N hấp thụ bƣớc sóng max = 243 nm với A11cm%  545 ~ 585 Vitamin C nƣớc hấp thụ bƣớc sóng max = 265 với A11cm%  580 [3,13] 1.1.2.2 Hóa tính Do phân tử Vitamin C có chứa nhóm chức lacton; nhóm hydroxyl nhóm endiol nên có tính khử tính acid dù cơng thức cấu tạo khơng có nhóm –COOH Vitamin C dễ bị oxi hóa bị phân hủy thành CO2 nƣớc 192 oC [3] Tính acid: ảng 3.7: Độ hấp thụ mẫu vitamin C sử dụng dung m i loại oxy hoà tan Độ hấp thụ (A) Thời điểm (giờ) Mẫu Mẫu Mẫu Mẫu 10 0,019 ± 0,0004 0,024 ± 0,0006 0,043 ± 0,0003 0,061 ± 0,0004 0,015 ± 0,0005 0,019 ± 0,0004 0,024 ± 0,0005 0,035 ± 0,0007 0,015 ± 0,0003 0,029 ± 0,0006 0,037 ± 0,0004 0,052 ± 0,0003 0,016 ± 0,0007 0,019 ± 0,0002 0,021 ± 0,0003 0,029 ± 0,0005 ảng 3.8: Hàm lƣợng Vitamin C mẫu sử dụng dung m i loại khí oxy hồ tan Hàm lƣợng (%) Thời gian (giờ) Mẫu Mẫu Mẫu Mẫu 10 101,08 ± 0,27 100,95 ± 0,12 100,29 ± 0,34 100,86 ± 0,25 100,42 ± 0,14 100,48 ± 0,37 99,54 ± 0,18 100,68 ± 0,21 98,16 ± 0,38 99,27 ± 0,25 97,95 ± 0,42 99,33 ± 0,31 95,02 ± 0, 16 98,84 ± 0,30 96,31 ± 0,19 98,43 ± 0,12 35 120 100 80 60 40 giờ 20 Mẫu Mẫu Mẫu Mẫu 10 Hình 3.4: Biểu đồ thể hàm lƣợng Vitamin C mẫu sử dụng dung m i loại khí oxy hoà tan Nhận xét: Khi tăng thời gian bảo quản tủ sấy 95 ºC, hàm lƣợng Vitamin C mẫu giảm tƣơng ứng với tăng độ hấp thụ Kết phù hợp với quan sát cảm quan cho thấy có tăng mức độ đậm màu mẫu kéo dài thời gian bảo quản Kết thu đƣợc có tƣơng quan với kết đo nồng độ oxy hòa tan mẫu bảng 3.6 hình 3.3 Trong đó: Mẫu 7: dung m i nƣớc cất khơng loại oxy hịa tan (có nồng độ oxy hịa tan lớn nhất), có giảm hàm lƣợng mạnh tăng độ hấp thụ cao Mẫu 9: dung m i nƣớc cất đƣợc siêu âm 20 phút (có nồng độ oxy hịa tan lớn, sau nƣớc cất khơng loại oxy hịa tan), có giảm hàm lƣợng tăng độ hấp thụ lớn, đứng sau mẫu Mẫu (dung m i nƣớc cất đun s i 20 phút) mẫu 10 (dung m i nƣớc cất đƣợc sục khí N2 20 phút) có nồng độ oxy hịa tan thấp, có giảm hàm lƣợng tăng độ hấp thụ gần nhƣ tƣơng đƣơng Điều cho thấy dung dịch Vitamin C 10% pha dung m i nƣớc cất đun s i nƣớc cất sục khí N2 th có độ ổn định tốt pha nƣớc cất siêu âm nƣớc cất kh ng đƣợc loại khí oxy hịa tan 36 Đun s i dung m i trƣớc pha khơng loại đƣợc oxy hồ tan mà cịn loại đƣợc CO2 số khí khác Do vậy, sử dụng nƣớc cất cất nƣớc cất đƣợc đun s i, bịt kín để nguội trƣớc pha dung dịch vitamin C biện pháp hiệu Tuy nhiên, sử dụng phƣơng pháp tốn nhiều thời gian để pha chế dung dịch vitamin C nên phƣơng pháp kh ng đƣợc lựa chọn để giảm nồng độ oxy hoà tan Phƣơng pháp dùng khí N2 để giảm nồng độ oxy hồ tan nƣớc cất, cho mẫu dung dịch vitamin C ổn định màu sắc mà phƣơng pháp dễ thực hiện, thời gian pha chế nhanh Do chúng t i để xuất sử dụng nƣớc cất có sục khí N2 để loại oxy hịa tan tiến hành pha chế dung dịch Vitamin C 3.5 Bàn luận 3.5.1 Sự ảnh hƣởng chất chống oxy hóa khác đến độ ổn định dung dịch Vitamin C Dung dịch Vitamin C dễ bị oxy hóa điều kiện thƣờng nên việc sử dụng thêm chất chống oxy hóa để tăng độ ổn định cho dung dịch điều cần thiết Tuy nhiên, việc lựa chọn chất chống oxy hóa cần phụ thuộc vào yếu tố nhƣ độ pH, chất dƣợc chất dung dịch để lựa chọn cách phù hợp Trong nghiên cứu này, khảo sát chất chống oxy hóa Natri bisulfit, Natri metabisulfit Rongalit, chất có khả chống oxy hóa tối ƣu vùng pH định Cụ thể muối metabisulfit tác dụng tốt dung dịch có pH thấp, muối bisulfit tác dụng tốt dung dịch có pH trung tính, rongalit tác dụng tốt pH cao từ – 11 [11] Dung dịch Vitamin C bền m i trƣờng có pH từ đến 6,5 [13] nên Natri metabisulfit chất chống oxy hóa phù hợp Lý thuyết hồn tồn phù hợp với thực nghiệm, dung dịch Vitamin C 10% ổn định dung mơi có thêm chất chống oxy hóa Natri metabisulfit [5] Bản chất q trình oxy hóa phản ứng chuỗi đƣợc khởi đầu với lƣợng oxy nhỏ dƣới xúc tác ion kim loại, sử dụng chất chống oxy hóa kh ng th i th chƣa thể ngăn chặn hồn tồn q trình oxy hóa dƣợc chất Để tăng cƣờng hiệu chống oxy hóa, thƣờng thêm chất hiệp đồng chống oxy hóa phối hợp với chất chống oxy hóa khác dung dịch [5] Các chất hiệp đồng chống oxy hóa có tác dụng khóa vết ion 37 kim loại nặng dƣới dạng phức, làm tác dụng xúc tác ion kim loại phản ứng oxy hóa dƣợc chất Thƣờng dùng muối dinatri acid ethylendiamin tetra-acetic (dinatri edetat) [12] Một số acid dicarboxylic nhƣ acid citric, acid tartric đƣợc dùng với vai trò tƣơng tự nhƣ dinatri edetat [5, 11] Trong nghiên cứu chúng t i, để đơn giản hóa đánh giá ảnh hƣởng trực tiếp chất chống oxy hóa đến độ ổn định dung dịch Vitamin C nên không sử dụng chất hiệp đồng chống oxy hóa Tuy nhiên đƣa vào dung dịch thành phẩm, cần thiết phải đƣa thêm chất hiệp đồng chống oxy hóa để tăng độ ổn định Theo tham khảo số tài liệu, chất hiệp đồng chống oxy hóa thƣờng dùng dung dịch thuốc tiêm Vitamin C Natri EDTA [12] 3.5.2 Sự ảnh hƣởng biện pháp giảm oxy hòa tan đến độ ổn định dung dịch Vitamin C Có nhiều phƣơng pháp để xác định hàm lƣợng oxy hồ tan nƣớc có nhiều cách để làm giảm nồng độ oxy hoà tan nƣớc Các phƣơng pháp sử dụng là: siêu âm; sục khí N2; đun s i dung m i khoảng thời gian 20 phút Trong hai biện pháp hiệu sục khí N2 đun s i nƣớc Khi sục khí N2 vào nƣớc cất, áp suất riêng phần khí oxy hịa tan giảm, dẫn đến nồng độ khí oxy hịa tan nƣớc giảm Khi đun s i nƣớc cất, oxy hoà tan giảm nhiều Điều phù hợp với lý thuyết: độ tan chất khí nƣớc tỷ lệ thuận với áp suất riêng phần tỷ lệ nghịch với nhiệt độ theo định luật Henry [8] Có cơng trình nghiên cứu ảnh hƣởng oxy hoà tan glutathion [27] nhƣng chƣa có nghiên cứu để đánh giá vai trị oxy hồ tan đến độ ổn định dung dịch vitamin C Kết cho thấy có tƣơng quan nồng độ oxy hòa tan nƣớc với độ ổn định dung dịch Vitamin C màu sắc hàm lƣợng Khi nồng độ oxy hòa tan giảm th độ ổn định dung dịch Vitamin C tăng lên, điều hồn tồn phù hợp với lý thuyết oxy hóa chất dung dịch có mặt oxy hòa tan nƣớc Phƣơng pháp đun s i nƣớc cất cho nồng độ oxy hoà tan thấp độ ổn định màu sắc dung dịch thuốc tiêm vitamin C cao nhƣng triển khai sản xuất thực tế khơng khả thi tốn nhiệt đun s i nƣớc thời gian đợi nƣớc nguội Do vậy, sục khí N2 vào nƣớc cất trƣớc pha dung dịch Vitamin C vừa giảm oxy 38 hoà tan nƣớc, đồng thời để tăng độ ổn định dung dịch Vitamin C 10% dễ triển khai qui mô công nghiệp 39 CHƢƠNG IV: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 4.1 Kết luận Nghiên cứu ảnh hƣởng oxy hòa tan tới độ ổn định dung dịch thuốc chứa Vitamin C, thu đƣợc kết nhƣ sau: Đánh giá đƣợc ảnh hƣởng số chất chống oxy hóa đến độ ổn định dung dịch Vitamin C 10% Cụ thể, dung dịch Vitamin C sử dụng chất chống oxy hóa Natri metabisulfit đem lại độ ổn định cao cho dƣợc chất Đánh giá đƣợc ảnh hƣởng nồng độ oxy hoà tan đến độ ổn định dung dịch Vitamin C 10% Kết cho thấy dung m i đƣợc loại oxy hịa tan phƣơng pháp sục khí N2 cho hiệu cao nhất, nồng độ oxy hòa tan dung môi giảm thấp độ ổn định dung dịch Vitamin C cao 4.2 Kiến nghị Tiếp tục nghiên cứu phƣơng pháp khác để giảm nồng độ oxy hịa tan dung mơi Trên sở nghiên cứu ảnh hƣởng oxy hòa tan tới độ ổn định dung dịch thuốc chứa Vitamin C, tiếp tục nghiên cứu ảnh hƣởng oxy hòa tan tới độ ổn định thuốc tiêm chứa Vitamin C 40 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Dƣơng Thị Hồng Ánh (2010), "Biện pháp làm tăng độ ổn định thuốc tiêm Vitamin C", Tạp chí nghiên cứu dƣợc thông tin thuốc,Trƣờng Đại học Dƣợc Hà Nội, Số Nguyễn Thị Hậu (2009), "Ảnh hưởng khí oxy khí carbonic dung mơi đến độ ổn định thuốc tiêm Vitamin C 10%", Trƣờng Đại học Dƣợc Hà Nội Trần Đức Hậu (2007), Hóa Dược, Bộ Y Tế, NXB Y Học, Tập 1, tr.(245249) Lê Thị Thanh Hƣơng (2008), Hóa Lý, Đại học Công nghiệp Tp.HCM, Tập 2, tr.(82-84) Võ Xuân Minh (2006), Kỹ thuật bào chế sinh dược học dạng thuốc, Nhà xuất Y học, Bộ Y Tế, Tập 1, tr.(103-163) Hồng Nhâm (2002), Hóa học vơ cơ, NXB Giáo Dục, Tập 2, tr.(1228;111-114;162-163) Hoàng Nhâm (2002), Hóa học vơ cơ, NXB Giáo Dục, Tập 2, tr.( 112121) Hồng Nhâm (2002), Hóa học vơ cơ, Tập 1, tr.(137-157) Lê Thành Phƣớc (1998), Phức chất gốc tự y dược, Trƣờng Đại học Dƣợc Hà Nội 10 Huỳnh Ngọc Mai Phƣơng (2006), Hóa học môi trường 11 Bộ Y Tế (2002), Kỹ thuật bào chế sinh dược học dạng thuốc, NXB Y Học,Tập 1, tr.(103-162) 12 Bộ Y Tế (2005), Kiểm nghiệm dược phẩm, NXB Y Học, tr.(68-104) 13 Bộ Y Tế (2017), Dược Điển Việt Nam V, tr.(23-26) 14 Bộ Y Tế (2017), Dược Thư Quốc Gia Việt Nam 15 Bộ mơn hóa phân tích (2004), Hóa phân tích, Trƣờng Đại học Dƣợc Hà Nội, Tập 1,tr.(29-46; 205-223) 16 Nguyễn Đức Vận (2006), Hóa học vơ cơ, NXB Khoa học kỹ thuật, Tập 1, tr.(316-321) Tiếng Anh 17 Arrigoni Oreste, and De Tullio Mario C (2002), "Ascorbic acid: much more than just an antioxidant" Biochimica et Biophysica Acta (BBA)General Subjects, Vol 1569(1-3), p 1-9 18 Englard Sasha, and Seifter Sam (1986), "The biochemical functions of ascorbic acid" Annual review of nutrition, Vol 6(1), p 365-406 19 Gruenwald Joerg, Graubaum Hans-Joachim, Busch Regina, and Bentley Christine (2006), "Safety and tolerance of Ester-C® compared with regular ascorbic acid" Advances in therapy, Vol 23(1), p 171 20 HARAKEH STEVE, and JARIWALLA RAXIT J (1997), "NF-κBindependent suppression of HIV expression by ascorbic acid" AIDS research and human retroviruses, Vol 13(3), p 235-239 21 Kennedy John F, Rivera Zenaida S, Lloyd Linda L, Warner Frank P, and Jumel Kornelia (1992), "L-Ascorbic acid stability in aseptically processed orange juice in TetraBrik cartons and the effect of oxygen" Food chemistry, Vol 45(5), p 327-331 22 Meister Alton (1992), "On the antioxidant effects of ascorbic acid and glutathione" Biochemical pharmacology, Vol 44(10), p 1905-1915 23 Mitmesser Susan H, Ye Qian, Evans Mal, and Combs Maile (2016), "Determination of plasma and leukocyte vitamin C concentrations in a randomized, double-blind, placebo-controlled trial with Ester-C®" SpringerPlus, Vol 5(1), p 1-11 24 Murad S, Grove D, Lindberg KA, Reynolds G, Sivarajah A, and Pinnell SR (1981), "Regulation of collagen synthesis by ascorbic acid" Proceedings of the National Academy of Sciences, Vol 78(5), p 28792882 25 Özkan Mehmet, Kırca Ayşegül, and Cemeroǧlu ekir (2004), "Effects of hydrogen peroxide on the stability of ascorbic acid during storage in various fruit juices" Food chemistry, Vol 88(4), p 591-597 26 27 28 Robertson GL, and Samaniego CML (1986), "Effect of initial dissolved oxygen levels on the degradation of ascorbic acid and the browning of lemon juice during storage" Journal of Food Science, Vol 51(1), p 184187 Touitou E, Alkabes M, Memoli A, and Alhaique F (1996), "Glutathione stabilizes ascorbic acid in aqueous solution" International journal of pharmaceutics, Vol 133(1-2), p 85-88 Zhan Xiancheng, Yin Gongkuan, and Ma Baozhong (1998), "Improved stability of 25% vitamin C parenteral formulation" International journal of pharmaceutics, Vol 173(1-2), p 43-49 PHỤ LỤC PHỤ LỤC : HÌNH ẢNH SẮC KÝ ĐỒ TRONG PHƢƠNG PHÁP ĐỊNH LƢỢNG BẰNG HPLC Hình 1: Mẫu dung dịch Vitamin C 10% với chất chống oxy hóa Natri metabisulfit thời điểm giờ; giờ; giờ; nhiệt độ 95 oC Hình 2: Mẫu dung dịch Vitamin C 10% với chất chống oxy hóa Natri bisulfit thời điểm giờ; giờ; giờ; nhiệt độ 95 oC Hình 3: Mẫu dung dịch Vitamin C 10% với chất chống oxy hóa Rongalit thời điểm giờ; giờ; nhiệt độ 95 oC Hình 4: Hình ảnh mẫu dung dịch Vitamin C 10% đƣợc sử dụng chất chống oxy hóa khác thời điểm nhiệt độ 95 oC Hình 5: Hình ảnh mẫu dung dịch Vitamin C 10% đƣợc pha chế mẫu dung m i loại khí hịa tan thời điểm nhiệt độ 95 oC ... Vitamin C, th? ?c đề tài: ? ?Nghiên c? ??u ảnh hưởng số yếu tố đến độ ổn định dung dịch thu? ?c chứa Vitamin C? ?? Với m? ?c tiêu: Đánh giá ảnh hƣởng số chất chống oxy hóa đến độ ổn định dung dịch Vitamin C 10%... H? ?C QU? ?C GIA HÀ NỘI KHOA Y DƯ? ?C  Người th? ?c hiện: ĐỖ HƯNG ĐÔNG NGHIÊN C? ??U SỰ ẢNH HƯỞNG C? ??A MỘT SỐ YẾU TỐ ĐẾN ĐỘ ỔN ĐỊNH C? ??A DUNG DỊCH THU? ?C CHỨA VITAMIN C KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI H? ?C. .. Nghiên c? ??u ảnh hƣởng oxy hòa tan tới độ ổn định dung dịch thu? ?c chứa Vitamin C, thu đƣ? ?c kết nhƣ sau: Đánh giá đƣ? ?c ảnh hƣởng số chất chống oxy hóa đến độ ổn định dung dịch Vitamin C 10% C? ?? thể, dung