DAI HOC QUOC GIÀ HA NOI TRirÒNG DAI HOC KHOA HOC TU NHIÉN NGmÈN Ciru DÀC TINH MOT SÒ LECTIN CO TÀC DUNG PHÀT HIEN CÀC VI KHUAN GAY NmÈM DOC THlTC PHÀM MA SO: QGTD 07 05 CHÙ TRÌ DE TÀI: PGS TS Bùi Phutfng Thuan CÀC CÀN BÒ THAM GIÀ: GS TS Pham Vati Tv, PGS TS Ngò Tir Thành, PGS TS Nguyén Vàn Mùi, PGS TS Trinh Hong Thài, TS Nguyén Quang Huy, ThS Le Quy Thuong, ThS Nguyén Thj Thanh Nga TRUNG TAM Tnór-^G lil^ THIJ V Ì E N DI / %^ HA NOI - 2009 LOI CAM ON Chting tói xin chàn thành càm dn Ban Giàm dịc Dai hgc Q'c già Ha Nói, Ban Khoa hgc- Gong nghe Phòng tài vu, Ban Giàm hieu, Phdng Khoa hgc Gong nghe trUdng Dai hgc Khoa hgc Tvf nhién Ha Noi, Ban Ghù nhiem khoa Sinh hgc càc dóng nghiep dà tao mgi diéu kien thuan Idi tan tình giùp dd nhi_t góp y cho chùng tói qua trình thxic hien de tài TAF THE TÀC GIÀ l-BAO CAO T O M TÀT a TÈN DE TÀI: Nghién cun dac tinh mot sd lectin ed tàc dung phat hien càc vi khudn gay nhilm dòc thuc pham; Ma sd: QTTD 07 05 b CHII TRÌ DE TÀI: PGS TS Bùi Phuang Thuan e CÀC CÀN BÒ THAM GIÀ: GS TS Pham Vàn Ty, PGS TS Ngó Tu Thành, PGS TS Nguyln Vàn Mùi, PGS TS Trinh Hong Thài, TS Nguyén Quang Huy, ThS Le Quy Thudng, ThS Nguyln Thi Thanh Nga d MUC TIÈU VÀ NOI DUNG NGHIÉN CÙU: Muc tièu cùa de tài: Xàc dinh càc dàc tinh phan tu boa sinh cùa càc che pham lectin tir nguòn tài nguyén Viét nam ed tuong tàc dac hieu vdi vi khudn gay bénh, trén ca sd tao nén bò sinh pham chuyén dung phàt hien càc vi khudn gay dóc thuc phdm Nói dung nghién cihi cùa de tài: 1- Hoàn ihién càc phuang phàp tinh che lectin nhdm nàng cao dò sach cùa càc che phdm 2- Hồn chinh bị sinh phdm (kit) lectin chun phàt hién vi khudn gay bénh nhièm thuc pham 3- Nghién cuu càc dac tinh phàn tu (khdi lugng, thành phàn, cau t r u c ) cùa càc che phdm lectin 4- Nghién cuu càc dac tinh hóa sinh miln dich cùa càc che pham (tuong tàc giùa lectin vi khuan, tinh dac hieu vói càc loai saccharide, ành hudng kich thich hay klm barn cùa càc tàc nhàn ) 5- Nghién cuu càc dilu kièn tdi un cho bieu hien boat dò lectin vige bào quàn bò sinh phdm càc lectin e CÀC KÈT QUA DAT DUOC: Kèt qua khoa hoc: - Nhùng ddng góp cùa di tài: Dà tién hành khào sàt boat tinh lectin (qua phàn ùng gay ngung két té bào bịng càu) cùa han 200 lồi thuc vat Viet nam (thuc vàt mot màm thuc vàt hai màm, mot so loài nàm ) Trong dd, 54/102 (53%) so loài thuc vàt mot màm 39/ 68 (57 %) so loài thuc vat hai màm co chua lectin Dà phàn lap nghién cuu dac tinh cua càc vi khuàn co thuc pham su dung chùng càc nghién cuu phàn loai nhd lectin Da xàc dinh dugc càc lectin dac hiéu vói càc vi khuàn gay dóc thirc phdm nghién cihi xày dung càc khoà dinh loai chùng Càc lectin dàc hiéu dugc phàt hién co sd de tao bò sinh pham chuyén dung phàt hien càc \"i khuàn gay dòc thuc phàm Càc phuang phàp tinh sach khàc da dugc két hgp cài tién de thu nhàn càc che phàm voi dò tinh khiét \'à hoat lue cao ,t? -6''"-»^ ^uu ve dàc tinh hoà sinh- inién dich cùa càc che phàm lectin dà dugc tién hành de xàc dinh diéu kién tòi un cho \iéc tàch tinh che, bào quàn su dung chùng - Lectin tu Thuy tién dugc tinh che bang càch két hgp sdc ky Irao dói ion trén cót DE -52 cót Igc gel Sephadex G-75, co khdi lugng phàn tu khoàng 14 kDa, ben vdi nhiét, co pH tói thich 7.4, dac hiéu vói a-D-mannose N-acetyl glucosamine, gay ngung két dàc hiéu Staph epidermidis - Lectin hat Dàu ma dugc tinh che bang càch két hgp tua phàn doan bang pH voi sàc ky trao dòi ion trén cgt CM-Sephadex co khịi lugng phàn tir khồng 33 kDa dò tinh sach gap 10.4 làn: ben vói nhiét ed thè bao quan ó 4'^C tịi thiéu thàng, co pH tòi thich 3.5; dac hiéu vdi a-D-galactose gay ngung két chgn Igc E coli - Lectin Tu càu dò dugc tinh che bang phuang phàp sàc ky trao dịi ion trén cót DE - 52 Celulose, co dò tinh sach tàng gap 3.4 khòi lugng 26 kDa, boat dò cao òn dinh vùng pH kiém (8.0- 9.0) khà ben nhiét, bi aD-mannose dàn xuàt a- D- mannosamine gay ùc che khòng bi ành hudng cùa ion Ca"\ co khà nàng nhàn biét dàc hiéu Sahnonellaparat\phi A Mot so che phàm lectin khàc dà dugc thu nhàn nghién ciru: lectin Lịc vùng BTingtìia acutagula L (dàc hieu vdi Salmonella), lectin Dao bién Canavalia maritima (dac hieu vói Shigella), lectin Bàn roi Dira trén càc che phàm lectin thu dugc dà xày dung bò sinh phàm (Kit) lectin chuyén phàt hién càc vi khudn gay dòc thuc pham nghién ciai quy tiinh su dung kèm theo -Sd bào, bào cào khoa hgc dà dugc cóng bó: góm cịng irlnh - bào bang tiéng Anh trén "VNU foiirnal of Science Naturai Sciences and Technology 24 No 2S {lOOSf Bui Phuong Thuan Pham Thi Huong Salmonella and Shigella typing by lectins pp 384- 388 Mai Dam Linh Nsuven Thi Gianni Bui Phuonu Thuan Kieu Huu Anh Isolation and identitlcation of contaminated Salmonella in foods pp 367-371 - bào cào tai Hai Ughi Kìioa hoc lồu qc Uhi ihir IV 'Hồ sinh Sinh hoc phàn tir phijc vii uóng, sinh y hoc cóng nghiép thiccphàni " 15- 7/ 10/ 2008 Ha noi: Bùi Phuong Thuan Diéu tra phàt hién \ nghién cùu su dung lectin dinh loai vi khuàn tr 1^7-20 Pham Khành Phuong Dàng Thi Oanh Bùi Phuang Thuan Diéu tra lectin thuc vàt mot màm ùng dung \ o phàn biét Salmonella paratyphi A \ l'ihrio cholerae tr 8588 Mai Thi Dàm Linh Vù Thi Thào Bùi Phuong Thuan Nghién cùu phàt hién Shigella nhiém thuc phàm tai dia bàn thành phò Ha noi tr 338- 341 Bùi Phuong Thuàn Ho Thi Thàm Nghién cùu mot so dàc tinh cua lectin linh sach tu cà) tu càu Ilaemanlhus miiliifìorus tr 897- 900 - I bào cào tai hlịi nghi Khoa hgc Qc tè: Bui Phuons Thuan Le Ou\' Thuon" Screenin^ and usiniz monocot lectins in food borne bactcria t\ping Orai presentation on "The 2'" Inlernalional Conference ofi Science and Technoloi::v for Sustainahle Developmen! of ihe (jreater Mekong Suh-re^ioff Session Vili: Biochemistr\ 2-3 Ocl/08 in Hanoi, (submision in press) 2009 Két qua icng dung - Càc san phdm cóng nghe Mot bị lectin tinh khiét vdi càc dàc tinh phàn tu xàc dinh ed khà nàng phàt hién dàc hieu mot sd vi khudn gay bénh nhilm thuc phdm - Khà nàng ung dung thuc té cùa càc két qua Bó sinh phdm càc lectin tinh khiét dùng di phàt hién vi khudn gay bénh ed the cung cap truc tiép cho càc phdng thi nghiém, càc co sd kiém dich- y té kèm theo mot quy trình xàc dinh don giàn, cho két qua nhanh vdi già thàp han so vdi già càc vàt liéu nhàp ngoai cho càc phuang phàp thudng dùng hién Két qua duo tao ' Sd cir nhàn dugc tao khuòn khd di tài: 05 -H Nguyln Hùng Thanh (2007), Pham Thi Huong (2008), Dàng Thi Oanh (2008), Ho Thi Thàm (2008), Nguyén Quy Linh (2009) - Sd thac si dugc tao khuòn khò de tài: 02 + Le Quy Thudng (2007), Pham Khành Phuong (2008) - Sd tién si dugc tao khuòn khd di tài: 01 NCS dang làm luan àn TS theo hudng nghién cuu cùa di tài: -h Mai Thi Dàm Linh (2008- 2011 ) - Dói mai/ bị sung cho nói dung càc giào trình, chun di: Dà bò sung mot sd dàn liéu vi tinh che nghién cùn dac linh cùa càc nhdm chat ed boat tinh sinh hgc vào chuang trình càc "Càc phuang phàp ca bàn cóng nghe sinh hgc" "Co sd hoà sinh cùa san xuàt thuc phdm " 4, Két qua ve tàng cuùng tiém lue cho dan vi: - Ddng gdp cho viec tàng cudng trang thiét bi: bò sung thém mot sd dung cu, vat liéu nghién cuu nhd cho don vi f TÌNH HÌNH KINH PHI CÙA DE TÀI: 300 000 000, 00 (ba tram trieu dóng chàn) Thdi gian thuc hién: 24 thàng (tir 19/6/2007 dén 19/6/2009) KHOA QUÀN LY (Ky ghi rị hg tén) CHU TRÌ DE TÀI (Ky ghi rò ho tén) f1i'.^ Cf!!) NIKLM KHOA it!S TS, [f/i'^ui iann /^A^ ^^^- ^S- Bùi Phuang Thn TRNGJÌAJ HOC KHOA HOC TV NHIÉN P M Ó H l f u TRUÓWU OUTLINE REPORT a SUBJECT TITLE: Characterizing lectins capable of detecting food-poisoning bacteria Code registered: QGTD 07-05 Duration: 24 months (from June 19/ 2007) b SUBJECT MANAGER: Dr Assoc Pro Bui Phuong Thuan e SUBJECT PARTICIPANTS: Dr Prf Pham Vàn Ty Dr Assoc Prf Ngo Tu Thanh, Dr Assoc Prf Nguyén Van Mui, Dr Assoc Prf Trinh Hong Thai Dr Nguyén Quang Huy, MSc Le Quy Thuong, MSc Nguyén Thi Thanh Nga d OBJECTIVE AND TOPICS OF STUDY: - Objective Investigating and screening the lectins having specific interactions with food poinsoning bacteria from naturai resources in Vietnam On ihis basis, finding out the detection, Identification and the prevention mesures against them - Topies: 1- Complete the choice of most suitable purifying techniques in order to increase the purity of lectin preparations 2- Complete the purified lectin kits used for detection of food- poinsoning bacteria which are present in food 3- Study the molecular characteristics of purified lectins (their mass, composition, structure ) 4- Study the biochemical- immunological characteristics of purified lectins (the lectin- bacteria interations the saccharide specificity of lectins the action of activators and inhibilors ) 5- Study the optimum conditions for the expression of lectin activity and for the conservation of lectin kits e RESULTS L Scientific result ' Having investigated lectin resourses in Vietnam by testing the hemagglutinating activity of more than 200 Vietnam plant species The majority of them expresses lectin activity including 54/102 (53%) monocot and 39/68 (57%) dicot samples - Having isolated and characterized various harmful bacteria founded in the food and usmg them for the typing by lectins study - Using lectins for typing food- poinsoning bacteria based on lectinmicro-organisms interactions Having delermined specific lectins and combined them as classification keys for investigated bactcria nameh Staph\locc)ccus - Purifying the selected lectins showing the specific interactions with the bacteria, namely lectins from Narcissus tazetta var chinensis, Haemonthiis multiflorus, Pueraria phaseoloides, Barringtonia acutagula L., Canavalia maritima - Studying some characteristics of these lectins: Mr sugar specificity influence of pH, temperature important for the expression of lectin activity and for the conservation of lectin kits -These lectins are used for setting up a kit for food- poinsoning bacteria detection 2- Publication -H articles in English on 'VNU Journal of Science, Naturai Sciences and Technology 24, No 2S (2008)'': Bui Phuong Thuan, Pham Thi Huong Salmonella and Shigella typing by lectins pp 384- 388 Mai Dam Linh, Nguyén Thi Giang, Bui Phuong Thuan, Kieu Huu Anh Isolation and Identification of contaminated Salmonella in foods, pp 367-371 + reports and orai presentation on ^'Proceedings o/the 4" National Scientific Conference on Biochemistry and Molecular Biology for Agriculture, Biolog}\ Medicine and Food Industry ", October 15- 17, 2008, Hanoi: Bùi Phuong Thuàn Diéu tra phàt hién nghién cuu su dung lectin dinh loai vi khuàn tr 17-20 Pham Khành Phuong Dàng Thi Oanh Bùi Phuong Thuàn Diéu tra lectin thuc vàt mot màm ùng dung vào phàn biét Salmonella paratyphi A l'ihrio cholerae, tr 85-88 Mai Thi Dàm Linh, Vù Thi Thao Bùi Phuong Thuàn Nghién cùu phàt hién Shigella nhiém thuc phàm tal dia bàn thành phò Ha noi tr 338- 341 Bùi Phuong Thuàn Ho Thi Thàm Nghién cùu mot so dac tinh cua lectin tinh sach tu cà\' tu càu dò Haemanlhus multifloni.s tr 897- 900 + orai presentation on "The 2'" International Conference on Science and Tedino log}' for Sustainahle Development of the Greater Mekong Sub-region'\ Session Vili: Biochemistry 2-3 Oct/08 in Hanoi: Bui Phuong Thuan Le Quy Thuong Screening and using monocot lectins in food borne bacteria t\ping Orai presentation on (submision in press) 2009 -4 reports and orai presentation on the International and National Science Congresses Namely: 3- Education: -Bachelor's Degree: 05 - Master\s Degree: 02 -Doctor's Dcoree: 01 MUC LUC Trang Càc chù viét tàt Mdddu Tòng quan tài liéu l.L Càc vi khuàn gay ngị dóc thuc pham 1.2 Càc phuang phàp phàt hién vi khudn 1.3 Dai cuong vi lectin Nguyén liéu phuang phàp 2.L Nguyén liéu 2.2 Phuang phàp nghién cuu Két qua bàn luan I 13 14 30 31 3.L Khào sàt boat tinh lectin cùa mot sd loài thuc vàt Viét nam 42 3.2 Tinh dàc hiéu dudng cùa càc dich chiét lectin 56 3.3 Phàn lap nghién cùn dàc tinh cùa càc vi khudn co thuc phdm 59 3.4 Dilu tra nguón lectin co khà nàng nhàn biét càc vi khudn gay ngó dóc thuc pham 63 3.5 Tàch tinh che mot sd lectin dàc hiéu 3.5.L Tàch chiét tinh che lectin thuy tién 78 3.5.2 Tàch chiét tinh che lectin Dàu ma 86 3.5.3 Tàch chiét linh che lectin Tu cau 96 3.5.4 Tàch chiét linh che càc lectin khàc 102 3.6 Xày dung bó sinh phdm (Kit) lectin chuyén phàt hién vi khuàn gay bénh nhilm thuc phdm 104 Két luan 106 Tài liéu iham khào 108 Phu lue CÀCCHtrviÈTTÀT Con A: Lectin tu Dàu rira Canavalia ensiformis DCT: Dich chiét thó Fuc: Fucose HAA: Hoat dị gay ngung két hdng cdu (boat dò lectin; Gal: Galactose GalN: Galactosamine GalNAc: N-acetyl- galactosamine Glc: Glucose GlcN: Glucosamine GlcNAc: N-acetyl- glucosamine Man: Mannose ManN: Mannosamine ManNAc: N-acetyl- mannosamine TH: Tan huyét WGA Lectin tu mam lùa mi (Wheat germ agglutinin) LÒI MO DAU Ve sinh an toàn thuc phdm (VSATTP) giù vi tri quan trong bào ve sue kh cịng ddng Ngồi day cdn van di lién quan dén su phàt trien vi kinh té vàn hồ xà bịi cùa dat nude, vói muc dich nàng cao ddi sdng cùa nhàn dàn dàm bào tinh mang sue khoè cùa ngudi tiéu dùng " Ngó dóc thuc phdm" mot tình trang bénh ly xày àn hay ng phài càc thóc àn bi ị nhiém, chùa càc chat dóc hai ddi vdi sue khoé cùa ngudi Ngò dòc thuc phdm nhùng nàm gdn day dugc ghi nhàn xày thudng xuyén gay nhilu bue xùc cho tồn xà bịi Bịi vay vàn di an toàn thuc pham dà dang dugc quan tàm d khàp noi trén thè gidi, dàc biét Viét Nam noi ma hàng nàm ed rat nhilu vu nhilm dòc thuc phàm xày di lai nhilu bau qua nghiém trgng Cd nhilu nguyén nhàn khàc gay càc trng hgp ngó dịc thuc phdm nhu: ve sinh y tékém phàt trien, mói trudng bi ó nhilm nhung phàn Idn càc trudng hgp ed ngudn gdc tu vi sinh vat Thuc phdm co thè nguón mang nhùng vi sinh vat co hai gay nhùng càn bénh nguy hiem Tò chùc Y té thè gidi (WHO) dà dinh nghìa nhùng bénh thuc phdm gay ''nhùng bénh ma thudng ed khà nàng lày nhilm ed tinh dóc tu nhién, gay bai càc tàc nhàn di vào co the ngudi thóng qua qua trình tiéu hồ thuc àn" Hàng nàm ed khồng 76 triéu ca ngị dóc thuc pham trén tồn cau, vói han 500.000 ngudi nhàp vién ed khồng 6.500 trudng hgp tu vong Ị Viét Nam tình hình VSATTP dang d mùc bào dóng hét sue nhay càm d hau hét càc tinh thành cà nude Theo WHO, hàng nàm d Viét Nam ed trén triéu truòng hgp nhiém dòc tu thuc phdm làm tiéu tón han 200 trieu USD Bai vay, an toàn dà trd thành mot chi tiéu chat lugng bàt buóc dói vói thuc phdm, nhu càu kiém tra giàm sàt ve sinh an toàn thuc phdm rat Idn Dén nhilu loai vi khudn thù pham gay nhiém dóc thuc phàm dà dugc phàl hién Co nhicu phuang phàp phàt hién càc vi khudn này, nhu càc loai chat dóc chùng tao ra, nhung da so deu phùc lap, dòi boi càc trang thiét ca bi nhiém rat cao Hién ta chua co quy dinh ve Listeria monocytogenes tiéu chuàn an toàn ve sinh thuc phàm, nhung day lồi dang dupc quan tàm de kiém sồt thịi gian tói Càc vi khuan gay ngị dịc thuc pham khàc Vibrio cholerae, Clostridium botulinum, Campylobacterspp, Pseudomonas aeruginosa thù pham gay dòc thyc phàm nhiéu truòng hpp Càc phuang phàp phàt hién vi khuan gay nhiém càc loai chat dòc chùng tao hién da so déu phùc tap tón (Munoz-Crego et al, 1999; Wyalt, 1998) Càc phuang phàp truyen thóng (dua trén phàn làp, ni cày, xét nghiém hồ sinh de xàc dinh kiéu huyét ) dòi hòi nhiéu thòi gian (tu vài ngày dén hàng tuàn), còng sue, ky thuàt, kinh nghiém, nhung két qua thu dupc khóng phài lue cung rị ràng de giùp phàn biet càc chùng gay bénh Càc phuang phàp nhanh (rapid methods) dya trén càc tién bó khoa hpc- cóng nghé mói xuàt hién gàn day dà góp phàn giài quyét càc tón tai Càc xét nghiém mién dich (dua trén tuong tàc dàc hiéu khàng nguyén- khàng thè) loai ELISA, LA, RPLA duac phàt trién ùng dung phó bién dói vói thuc pham (Feng, P., 1997), nhung lai càn dén khàng thè dac hiéu- mot viéc dòi hòi ky thuàt chi phf tón Viéc ijng dung sinh hpc phàn tu xét nghiém vi sinh (sù dung ky thuàt lai phàn tu, PCR ) dà khàc phuc dupc nhupc diém ve thòi gian cho két qua nhanh, dò nhay cao, vay dupc sù dung ròng rài Càc xél nghiém lai phàn lù thuong dua trén gen ma hoà rRNA, ky thuàt PCR sù dung càc càp mói (primer) de nhàn bàn cùa mot (hoàc mot vài) gen muc tiéu dàc trung cho vi sinh vai gay bénh Mói day, khn khị De tài nghién cùu khoa hpc phàt trién còng nghé càp Nhà nuóc KC.04 30, PGS TS Tran Linh Thc (DHQG TR Ho Chf Minh) dà phàt irìén thành cịng mot bị Kit PCR dùng quy trình xét nghiém mot so vi khuan gay ngò dòc thuc phàm (Tran Linh Thuóc, 1996) Tuy nhién, càc ky thuàt dịi hịi trang thiét bi hién dai, trình dị ky tht cùa ngi sùdung, kinh phf khà lón Trong diéu kién thyc lé cùa Viét nam hién nay, viéc lìm mot ky thuàt don giàn, de sù dung chi phf thàp co y nghla thuc tién lón Viéc sù dung lectin co trién vpng giùp giài quyét vàn de Leclin mot nhóm protein rat lón da dang, co ị thyc vài, virus, vi khuàn, dóng vàt Do co khà nàng lién két vói duòng càc hpp chat chùa duòng (thành phàn cà'u tao cùa bé màt té bào), lectin dóng vai trị quan trpng nhàn biét làc dung nhu mot tfn hiéu sinh hpc tuang tàc té bào- té bào hay té bào- mói trng (Kilpairìck, 2000; van Damme, 1998) Chùng dà dupc ùng dung nhiéu ITnh \'uc (hóa sinh hpc huyét hpc, té bào hpc, mièn dich hpc, y dupc hoc, vi sinh vài hoc .) (van Damme et al, 1998; Etsler et al, 1986; Slifkin et 1994) Nhu càc lectin gay ngung két d:\c hiéu hịng càu nhóm màu duoc dùng hut hoc de làm thuóc thù phàn biét nhóm màu co thè thay thè huyét màu Khà nàng kich thfch phàn bào cùa lectin dupc sù dung co hiéu qua y hpc mién dich hpc de nghién cùu càc qua trình bién dịi sinh hồ cùa té bào tu trang thài nghi sang trang thài boat dpng (co tàc dung phàn chia té bào tfch cuc gay dàp ùng mién dich), nhu de nghién cùu su bà't thuong cùa càc nhiém sàc thè càc bénh ly khàc a ngi Trong dó, mot so lectin lai co khà nàng ùc che su phàn chia te bào, nhu kìm hàm su phàt trién di càn cùa té bào ung thu Lectin dugc sù dung nhu mot cóng cu hùu hiéu de nghién cùu càu trùc màng té bào nhùng bién dói trén bé mat màng té bào qua trình biét hồ bénh ly Lectin mot cịng cu chàn dồn co hiéu qua (dya vào khà nàng tàc dung dàc hiéu mot so vi sinh vàt té bào) dupc két bop vói càc xét nghiém thịng thuong khàc de nàng cao già tri chàn doàn bénh (Bui Phuong Thuan et al., 2000; van Damme et al, 1998; Munoz-Crego et al, 1999) Lectin tu dàu làng lù dàu thàn dị dà dupc sù dung de chàn dồn ung thu biéu mò té bào gan co ài lue manh vói AFP (Kumada et al, 1999), hay bénh nhàn nhièm vi khuan gay viém loét ung thu da day, hành tà tràng Helicobacter pylori dà dupc chan dồn nhị sù dung lectin (Khin et al, 2000) Dàc biét, bé màt cùa vi khuàn mang càc góc dng, lectin co thè két hpp vói càc vi tri lién két tiém nàng này, thém vào dó tfnh dàc hiéu khién chùng tra thành còng cu hùu fch viéc nhan dang vi khuàn (Calderon (?;