Bài 1: Định tính Paracetamol phương pháp hồng ngoại IR Câu Nêu nguyên tắc định tính IR? TL: Dưới xạ hồng ngoại, vật liệu hấp thu tần số thích hợp, lượng chuyển thành dao động, phần ánh sáng phản xạ lượng truyền qua phân tử lân cận thành nhiệt lượng Tần số hấp thụ tương ứng với tần số dao động chuẩn (đặc trưng cho nhóm nguyên tử có phân tử) Câu Phạm vi phân vùng phổ IR? - Vùng IR gần: 1.100 nm – 2.500 nm - Vùng IR bản: 2.500 nm – 25.000 nm - Vùng IR xa: >25.000 nm -> vi sóng Câu Trình bày kỹ thuật tiến hành định tính IR? TL: Mẫu rắn: Kỹ thuật sandwich: trộn mẫu rắn với dầu parafin thành bùn nhão ép vào mỏng KBr | Kỹ thuật viên nén KBr: trộn mẫu với KBr (1:100) cối đá mã não, Ép thành viên có độ dày 0,1mm máy nén thuỷ lực để loại bọt khí Mẫu lỏng: Mẫu nạp vào cốc đo lớp phim mỏng 0,05 mm Cốc đo KBr làm sổ với vòng đệm nhựa Teflon bền dung môi Mẫu khí: cốc đo KBr dài 10cm có hút chân không gương phản chiếu bên cốc đo để phản xạ nhiều lần ánh sáng IR qua mẫu Câu Những phân tử không hấp thu vùng IR? TL: Phân tử nhỏ, phân tử có cấu trúc đối xứng N2, Cl2, CS2, CCl4,… Câu Cho biết dao động chứa vân hấp thu nhóm chức OH, C=O, C=N, C=C vòng benzen? TL: OH: 3650 – 3200 cm-1, C=N: 2200 cm-1, C=C: 1650 cm-1 , Vùng nhân thơm: 910 - 650 cm-1 Câu Yêu cầu kỹ thuật nén viên? TL: Nén với KBr theo tỉ lệ 1:100 cối mã não, độ dày 0,1mm, ép để loại bỏ khơng khí Câu Cách kiểm tra thang số sóng máy đo IR? TL: Bằng phim polystyren Câu Các yếu tố ảnh hưởng đến phổ IR? TL: Độ ẩm, trình nén, độ tinh khiết mẫu, … Câu Thường đo mẫu vùng có số sóng nào? TL: 4000cm-1 – 400cm-1 Bài 2: Định tính Paracetamol sắc kí lớp mỏng Câu Nêu chế SKLM? TL: Kỹ thuật tách chất cho pha động di chuẩn qua pha tĩnh theo chế hấp phụ, phân bố, trao đổi ion, sàng lọc phân tử hay phối hợp nhiều chế pha tĩnh Đại lượng đặc trưng cho mức độ di chuyển chất phân tích hệ số di chuyển Rf tính tỉ lệ khoảng dịch chuyển chất thử khoảng dịch chuyển dung môi Câu Tại phải bão hồ dung mơi trước triển khai sắc kí? TL: Để đảm bảo hệ dung mơi có nồng độ khơng đổi khí theo cột chiều cao bình sắc kí Tránh tượng mao dẫn nhanh chênh lệch nồng độ đáy bình thân bình Câu Cách hoạt hố mỏng mục đích hoạt hố? TL: Mục đích: Loại hàm ẩm, tăng hoạt độ, hàm lượng nước bề mặt chất hấp phụ làm giảm điểm hoạt động bề mặt hấp phụ dẫn tới làm giảm khả hấp phụ pha tĩnh Cách hoạt hoá: Cho mỏng khô mặt vào tủ sấy sấy 105oC – 110oC 30 phút Bảo quản bình hút ẩm Câu Ứng dụng sắc kí lớp mỏng? Thử tinh khiết, định lượng bán định lượng, định tính Câu Hệ dung mơi khai triển dùng để định tính paracetamol? Methylen clorid-methanol (4:1) Câu Loại mỏng dùng để định tính paracetamol? Silicagel F254 Merck Bài 3: Tách định tính cyclin sắc kí lớp mỏng Câu Hệ dung mơi khai triển? TL: Acetonitril – Methanol – dung dịch acid oxalic 6,3% điều chỉnh pH đến 2,0 amoniac đậm đặc (20:20:60) Câu Trong thực tập có vết chấm nào? TL: - Vết 1: Oxytetracyclin - Vết 2: Tetracyclin - Vết 3: Minocyclin - Vết 4: Hỗn hợp oxytetracyclin, tetracyclin, minocyclin - Vết 5: mẫu thử Câu Sử dụng mỏng để định tính cyclin? Giải thích? - Bản mỏng silica gel F254 Merck (bản thường) có pha tĩnh phân cực, hệ dung môi acetonitril, methanol chất phân cực mạnh Điều dẫn đến pha tĩnh bắt giữ mạnh hệ dung mơi, giải thích cho việc phần mỏng kéo vệt đen dung môi hấp phụ lên bề mặt silica gel, che chất phát huỳnh quang 254nm - Silica gel Merck pha đảo RP-18 gắn thêm mạch 18 carbon nên pha tĩnh không phân cực (pha đảo), nên hệ dung môi chạy tốt sắc ký, không bị bắt giữ silica gel, có cyclin có tính phân cực khác nhiều hấp phụ bề mặt silica gel -> vết tách tốt Bài 4: Định lượng sắt phương pháp đo quang Câu Nêu nguyên tắc định lượng sắt (III) phương pháp đo quang? TL: Fe3+ tác dụng với acid sulfosalycilic tạo phức có màu Trong môi trường acid pH 1,8 – 2,5: phức màu tím hấp thu cực đại 𝜆max = 510 nm Trong môi trường kiềm pH – 11: phức màu vàng có độ hấp thu cực đại 𝜆max = 416 nm Câu Trình bày cách xây dựng đường tuyến tính dung dịch sắt chuẩn? TL: - Chọn bước sóng hấp thu cực đại dung dịch phức, đo độ hấp thu dung dịch chuẩn - Vẽ đường tuyến tính tương quan độ hấp thu A nồng độ sắt C% Câu Nêu cách tính nồng độ Fe3+ dung dịch từ đường tuyến tính? TL: - Dùng phương trình hồi quy tuyến tính - So sánh độ hấp thu mẫu với đường chuẩn Câu Tại phải luôn thực song song với mẫu trắng? TL: Hạn chế sai lệch ảnh hưởng dung môi pH Câu pH ảnh hưởng phương pháp đo UV-Vis? TL: pH làm thay đổi cấu trúc phân tử nên làm thay đổi khả hấp thụ chất tan Bài 5: Định lượng Paracetamol UV-Vis Câu Nguyên tắc định lượng paracetamol UV-Vis? TL: Dựa vào đường biểu diễn Câu Thiết bị đo, phương pháp đo, mẫu trắng cốc đo sử dụng bài? TL: Máy đo UV-1800 SHIMADZU, phương pháp spectrum phương pháp photometric, mẫu trắng NaOH 0,01M, cốc đo thạch anh (có thể đo cốc thuỷ tinh) Câu Nếu sử dụng công thức định luật Lambert-Beer C tính nồng độ gì? TL: Nồng độ mol (mol/L) Câu Lập công thức tính A (1%, 1cm) cơng thức tính so sánh với dung dịch đối chiếu? TL: At Ct At 1% = C  Ct = A Cc  A1cm c c At Ct At Ac = Cc  Ct = Ac C% = Cc  C% = Ct Cbđ Ct Cbđ Câu Chất khảo sát có đỉnh hấp thụ cực đại bước sóng nào? TL: 496,8 nm Câu Máy đo quang UV-Vis thực tập thuộc loại máy chùm tia? Mẫu trắng sử dụng thực tập gì? Đổi mẫu trắng khác không? TL: chùm tia, mẫu trắng NaOH 0,01M, Có thể đổi mẫu trắng không hấp thu vùng 200-400 nm Câu Phạm vi phân vùng UV-VIS? TL: - UV xa: 50 – 200 nm - UV gần: 200 – 400 nm - Khả kiến (Vis): 400 – 800 nm Câu Các yếu tố ảnh hưởng đến độ hấp thụ UV mẫu? TL: Dung môi, pH, chất chất khảo sát, nhiệt độ Câu Ứng dụng phương pháp đo UV-Vis? TL: Kiểm tra độ tinh khiết, xác định cấu trúc, định tính, định lượng, nghiên cứu động học phản ứng, xác định số pKa, xác định khối lượng phân tử, phận phát HPLC Bài 6: Định lượng Nitrit UV-Vis khảo sát động học Câu Nêu nguyên tắc thực tập? TL: Nitrit môi trường acid tạo với acid sulfanilic thành diazoic hấp thu quang phổ tử ngoại : p-NH2-C6H4-SO3H + NaNO2 + 2HCl ↔ [p-N=N-C6H4SO3H]Cl + NaCl + 2H2O Câu Trình bày thứ tự pha chế thuốc thử thực tập Thay đổi có không? Tại sao? TL: Không thay đổi được, cho HCl trước phần nitrit bị oxi hố thành nitrat Câu Trong phần khảo sát động học phản ứng theo thời gian, không đo lập thứ độ hấp thu dung dịch bị ảnh hưởng? TL: Có xác định khơng thời gian phản ứng Câu Nêu mục đích việc sử dụng phương pháp Kinetic? TL: Để xác định thời gian phản ứng hoàn toàn Câu Trong thực hành sử dụng kiểu đo mà sinh viên thực tập? TL: Ba kiểu: Phương pháp đo Kinetic, phương pháp đo quét phổ (Spectrum), phương pháp đo photometric Câu Trong thực tập dùng bước sóng 270 nm để khảo sát động học phản ứng? TL: Vì bước sóng gần với hấp thu nhóm chức N=N Câu Đường biểu diễn độ hấp thu phép đo biến thiên theo thơng số gì? TL: - Phương pháp Kinetic: thời gian - Phương pháp đo quét phổ Spectrum: bước sóng - Phương pháp đo photometry: nồng độ Câu Cốc đo sử dụng để đo định lượng nitrit? Tại dùng cốc đo này? TL: Cốc thạch anh, đo vùng UV (200nm – 400nm), cốc thuỷ tinh hấp thụ UV dùng đo vùng Vis Câu Tại chọn dung dịch chuẩn bình để xác định bước sóng hấp thu cực đại? TL: Nồng độ cao nên phản ứng sinh nhiều sản phẩm, dễ dàng xác định bước sóng hấp thu cực đại Câu 10 Yêu cầu dung dịch gốc NaNO2? TL: Dùng bảo quản tủ lạnh tối đa ngày Bài 7: Định lượng cafein sắc kí lỏng hiệu cao Câu Kiểu rửa giải pha động thực tập thuộc loại đẳng dòng hay gradient? TL: Đẳng dòng Câu Chất lượng dung môi sử dụng để triển khai HPLC thuộc loại nào? Sử dụng dung môi để chiết xuất khơng? Ngược lại, sử dụng dung mơi chiết xuất thông thường để chuẩn bị pha động HPLC hay không? Tại sao? TL: Dung môi triển khai HPLC phải tinh khiết - Dùng để chiết xuất - Không dùng dung môi chiết xuất thông thường để chuẩn bị pha động khơng tinh khiết, lẫn tạp nhiễu Câu Đầu dò thực tập thuộc lại đầu dò nào? Ưu nhược điểm đầu dò này? TL: Đầu dò dãy diod quang PDA (Photo Diod Aray Detector) - Ưu điểm: đo nhiều bước sóng khác nhau, đo nhanh - Nhược điểm: xác Câu Cần ý thơng số sắc kí định lượng đồng thời từ chất trở lên HPLC? TL: Thông số RS Câu Cho biết tên cột sắc kí, kích thước, đường kính hạt pha tĩnh nhồi cột? TL: Cột pha đảo RP-18, kích thước 250 mm x mm, đường kính hạt micromet ... – 400cm-1 Bài 2: Định tính Paracetamol sắc kí lớp mỏng Câu Nêu chế SKLM? TL: Kỹ thuật tách chất cho pha động di chuẩn qua pha tĩnh theo chế hấp phụ, phân bố, trao đổi ion, sàng lọc phân tử hay... thể đổi mẫu trắng không hấp thu vùng 20 0-400 nm Câu Phạm vi phân vùng UV-VIS? TL: - UV xa: 50 – 20 0 nm - UV gần: 20 0 – 400 nm - Khả kiến (Vis): 400 – 800 nm Câu Các yếu tố ảnh hưởng đến độ hấp... p-NH2-C6H4-SO3H + NaNO2 + 2HCl ↔ [p-N=N-C6H4SO3H]Cl + NaCl + 2H2O Câu Trình bày thứ tự pha chế thuốc thử thực tập Thay đổi có khơng? Tại sao? TL: Không thay đổi được, cho HCl trước phần nitrit bị oxi hố