VIỆN KHOA HỌC VÀ CƠNG NGHỆ VIỆT NAM VIỆN HĨA HỌC NGUYỄN THỊ NGA NGHI N CỨU T NG H P VÀ NH GI HO T T NH CHỐNG UNG THƯ, CHỐNG ALZHEIMER CỦA C C H P CHẤT CÓ CẤU TR C LAI CHỨA KHUNG 4AMINOQUINAZOLINE Chuyên ngành : H ọ ữu Mã số : 9.44.01.14 TÓM TẮT LUẬN N TIẾN SĨ HÓA HỌC HỮU CƠ HÀ NỘI – 2020 Cơng trình đượ ồn t àn Viện H K o ọ - Viện Hàn lâm ọ Công ng ệ Việt n m  Người hướng dẫn khoa học: Hướng dẫn 1: PGS TS Vũ Quốc Trung Hướng dẫn 2: TS Lê Nhật Thùy Giang Phản biện 1: Phản biện 2: Phản biện 3: Luận án bảo vệ trước Hội đồng chấm luận án tiến sĩ, Học viện Khoa học Công nghệ - Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam Số 18 - Hoàng Quốc Việt, Cầu Giấy, Hà Nội Vào hồi … ngày tháng năm 2020 A GIỚI THIỆU VỀ LUẬN N Tín ấp t iết, ý ng ĩ k o ọ t ự tiễn ủ đề tài luận án Nhiều hợp chất Quinazoline tiêu biểu đưa vào sản xuất thuốc đích điều trị ung thư theo chế ức chế enzyme Tyrosine Kinases gefitinib (Iressa), erlotinib (Tarceva), lapatinb (Tykerb) vandetanib (Caprelsa) Vấn đề gặp phải hiệu điều trị bệnh ung thư bị giới hạn nhóm nhỏ bệnh nhân không đồng phân tử bên khối u khối u với nhau, khả đáp ứng thuốc kháng thuốc đột biến thụ thể Liệu pháp điều trị kết hợp hai hay nhiều loại thuốc sử dụng thuốc lai ghép từ hai hay nhiều thành phần hoạt tính có chế hoạt động khác có đích tác dụng hướng nghiên cứu đầy triển vọng Vì vậy, nghiên cứu thiết kế tổng hợp hợp chất Quinazoline với mục tiêu ức chế Tyrosine Kinases lai ghép phân tử với hợp phần có hoạt tính ức chế tế bào ung thư theo chế khác AZT triazole nhằm kết hợp tính chất dược lý riêng biệt hợp phần vào phân tử lai nhất, hướng tới mục tiêu ức chế đa chức vấn đề nghiên cứu lý thú, mẻ cần thiết Bên cạnh đó, quinazoline triazole cịn thể hoạt tính ức chế acetylcholinesterase (AChEI) điều trị bệnh Alzheimer Việc lai ghép hợp phần có khả ức chế AChE quinazoline triazole để tạo thành phân tử lai hướng tới mục tiêu tăng cường hoạt tính nhằm tìm kiếm thuốc ức chế cholinesterase an toàn hoạt động đa mục tiêu cần thiết Vì vậy, đề tài “Nghiên cứu tổng hợp đánh giá hoạt tính chống ung thư, chống Alzheimer hợp chất có cấu trúc lai chứa khung 4-aminoquinazoline” hướng nghiên cứu có ý nghĩa khoa học thực tiễn cao Mụ tiêu luận án: - Nghiên cứu tổng hợp xác định cấu trúc số dẫn xuất 4aminoquinazoline chứa nhóm prop-2-yn-1-yloxy vị trí C-6 - Nghiên cứu tổng hợp xác định cấu trúc hợp chất lai chứa khung Quinazoline + Nghiên cứu tổng hợp xác định cấu trúc hợp chất lai dimer quinazoline + Nghiên cứu tổng hợp xác định cấu trúc hợp chất lai 4aminoquinazoline-triazole + Nghiên cứu tổng hợp xác định cấu trúc hợp chất lai 4-aminoquinazoline-triazole-AZT - Nghiên cứu hoạt tính gây độc tế bào ung thư hoạt tính ức chế enzyme acetylcholinesterase hợp chất tổng hợp - Nghiên cứu protein docking dự đoán tính chất dược động học số hợp chất có hoạt tính ức chế enzyme acetylcholinesterase iểm ủ luận án: - Luận án thiết kế tổng hợp thành công 34 hợp chất bao gồm: + dẫn xuất quinazoline có biến đổi vị trí C-4 C-6 130a-d + hợp chất lai có cấu trúc dimer quinazoline 145 Các dẫn xuất dùng để lai hóa với thuốc chất có hoạt tính khác chứa liên nhóm azit –N3 theo phản ứng click để tổng hợp hợp chất lai + 20 hợp chất lai quinazoline phenylazide qua cầu nối triazole 148-151 + hợp chất lai quinazoline AZT qua cầu nối triazole 153-156 - Đã đánh giá hoạt tính gây độc tế bào ung thư hợp chất ba dòng tế bào ung thư người (ung thư biểu mô, ung thư gan, ung thư phổi) hoạt tính ức chế enzyme acetylcholinesterase Kết có 14 hợp chất có khả gây độc tế bào ung thư khảo sát có hợp chất thể hoạt tính gây độc tế bào ung thư mạnh với giá trị IC50 < µM 130a, 145, 148d, 149d; Có hợp chất có khả ức chế enzyme acetylcholinesterase có hợp chất thể hoạt tính ức chế AChE mạnh với giá trị IC50 < 2.1 µM 148a, 149a, 149b - Đã tổng hợp hợp chất lai có giá trị IC50 tốt chất chuẩn đối chứng Ellipticine: 149d (IC50 = 0.94 μM (HepG2),và 145 (IC50 = 1.53 μM (KB) Một số hợp chất lai có khả ức chế enzyme acetylcholinesterase tốt: 148a (IC50 = 2.06 µM), 149a (IC50 = 0.23 µM) 149b (IC50 = 1.10 µM) - Đã dử dụng mơ protein docking mơ hình dự đốn tính chất dược động lực học để giải thích dự đốn hoạt tính ức chế enzyme acetylcholinesterase khả phát triển thành thuốc chống Alzheimer hợp chất 148a, 149a-b, 150a-b Bố ụ ủ luận án: Luận án gồm 137 trang gồm: Mở đầu: trang Chương 1: Tổng quan 23 trang Chương 2: Thực nghiệm 33 trang Chương 3: Kết thảo luận 60 trang Kết luận, điểm mới, danh mục cơng trình, tài liệu tham khảo: 18 trang Phần tài liệu tham khảo có 137 tài liệu lĩnh vực liên quan luận án, cập nhật đến năm 2019 Phần phụ lục gồm 70 trang gồm loại phổ chất tổng hợp P ng p áp ng iên ứu Các chất tổng hợp theo phương pháp tổng hợp hữu đại biết, có cải tiến vận dụng thích hợp vào trường hợp cụ thể Sản phẩm phản ứng làm phương pháp sắc kí cột kết tinh lại Cấu trúc sản phẩm xác định phương pháp phổ đại như: IR, HRMS, ESI-MS, 1H-NMR, 13CNMR, HMBC, HSQC Hoạt tính ức chế tế bào ung thư thăm dò theo phương pháp Mossman ba dòng tế bào ung thư KB, Hep-G2 Lu, hoạt tính ức chế enzyme acetylcholinesterase dựa vào phương pháp đo quang Ellman Docking protein sử dụng phần mềm ICM-Pro Molsoft 3.8-7 B NỘI DUNG CỦA LUẬN N CHƯƠNG T NG QUAN Phần tổng quan 23 trang luận án trình bày nội dung sau: - Quinazoline, dẫn xuất hoạt tính sinh học Một số phương pháp tổng hợp hợp chất khung Quinazoline - Hợp chất lai Quinazoline hoạt tính sinh học Kĩ thuật protein docking dự đốn thơng số dược động học CHƯƠNG THỰC NGHIỆM Thực nghiệm gồm 33 trang, trình bày chi tiết phương pháp nghiên cứu, quy trình tổng hợp, tinh chế, tính chất vật lý sản phẩm nhận như: điểm chảy, hình thái, màu sắc, hiệu suất phản ứng liệu chi tiết phổ IR, HRMS, 1H-NMR, 13C-NMR, HMBC, HSQC, DEPT CHƯƠNG 3: THẢO LUẬN KẾT QUẢ 3.1 Mụ tiêu ủ đề tài Sơ đồ 3.1 Chiến lược tổng hợp đề tài Chiến lược tổng hợp đề tài thiết kế tổng hợp tồn phần thành cơng số dẫn xuất quinazoline theo đường imine hóa thực lai ghép phân tử phản ứng click tạo hợp chất lai quinazoline-triazole, quinazoline-triazole-AZT hợp chất lai dimerquinazoline Các hợp chất lựa chọn để đánh giá hoat tính chống ung thư hoạt tính ức chế enzyme acetylcholinesterase Một số hợp chất có hoạt tính tốt thực docking protein dự đốn tính chất dược động học để tìm kiếm mối quan hệ cấu trúc hoạt tính giải thích tính hướng đích dự đốn khả phát triển thành thuốc đích 3.2 Kết tổng ợp xá địn minoquin zoline ứ n ấu trú số dẫn xuất 4- m t ế prop-2-yn-1-yloxy vị trí C-6 (130) Khi xem xét nghiên cứu tượng quan cấu trúc hoạt tính sinh học hợp chất quinazoline thấy rằng kích thước chất gốc aniline định ức chế chọn lọc enzyme kinase Các nhóm aniline vị trí C-4 khung quinazoline lựa chọn phù hợp để ức chế thụ thể enzym tyrosine kinase Trong nhóm ưa nước vị trí C-6 khung quinazoline làm cải thiện tính chất vật lý có lợi cho tác dụng dược lý thuốc tính tan dung mơi Việc đưa thêm nhóm 3ethynylalinine vào vị trí C-4 nhóm propargyl vào vị trí C-6 tạo dẫn xuất quinazoline có hoạt tính sinh học cao đồng thời có khả lai ghép với hợp phần có hoạt tính khác Các dẫn xuất 6-(prop-2-yn-1-yloxy)quinazolin-4-amine 130 tổng hợp từ nguyên liệu đầu 5-hydroxy-2-nitrobenzaldehyde 124 theo sơ đồ 3.4 sơ đồ 3.5 Sơ đồ 3.4 Tổng hợp hợp chất trung gian 2-nitro-5-(prop-2-yn-1yloxy)benzonitrile 127 Sơ đồ 3.5 Tổng hợp hợp chất 130a-d Hình Cấu trúc hóa học nhiệt độ nóng chảy 130a-d Như vậy, từ nguyên liệu đầu 5-hydroxy-2-nitrobenzaldehyde tổng hợp thành công dẫn xuất quinazoline có biến đổi vị trí C-6 C-4 đồng thời có khả lai ghép với hợp phần có hoạt tính sinh học cao khác 3.3 Kết tổng ợp xá địn ấu trú ủ ợp ất l i dimer quinazoline (145) Xuất phát từ phân tử erlotinib với mục tiêu tạo hợp chất lai dạng dimer có hoạt tính cao thực thiết kế tổng hợp hợp chất có chứa hai khung 4-aminoquinazoline phân tử qua cầu nối nhóm -O-propylene- vị trí C-6 Hợp chất dimer có chứa hai nhóm ankyne nên nguyên liệu để thực phản ứng “click” Hợp chất dimer 6,6'-(propane-1,3-diylbis(oxy))bis(N-(3ethynylphenyl) quinazolin-4-amine) 145 tổng hợp theo sơ đồ 3.8 Dữ liệu phân tích phổ IR, 1H-NMR, 13C-NMR, MS hợp chất 145 thu sau: IR (KBr), νmax: 3290; 2955; 1625; 1575; 1530; 1506; 1484; 1425; 1367; 1231; 1064; 969; 834; 779 cm-1 H-NMR (DMSO-d6, 500 MHz) δ (ppm): δ 9.65 (1H, s), 8.54 (1H, s), 8.02 (1H, s), 7.98 (1H, d, J = Hz), 7.92 (1H, dd, J = Hz, J = Hz), 7.75 (1H, d, J = 9.5 Hz), 7.55 (1H, dd, J = Hz, J = 2.5 Hz), 7.41 (1H, t, J = Hz), 7.23 (1H, d, J = 7.5 Hz), 4.42 (2H, t, J = Hz, OCH2), 4.18 (1H, s, C≡CH), 2.41 (1H, quin, J = Hz, OCH2CH2CH2O) 3.4 Kết tổng ợp xá địn ấu trú ợp ất l i 4-aminoquinazoline-triazole 3.4.1 Kết tổng hợp xá định cấu trúc hợp chất lai 4-aminoquinazoline-triazole (148-151) Hợp phần triazole có nhiều hoạt tính giá trị chống ung thư, kháng khuẩn kháng nấm mạnh, ức chế AChE có cấu trúc đặc biệt dị vịng thơm năm cạnh với nguyên tử nitơ có momen lưỡng cực cao, dễ dàng tham gia trình hình thành liên kết hydro tương tác lưỡng cực với DNA, protein tế bào Sự thay nhóm acetylene vị trí mạch nhánh C-6 phân tử quinazoline ban đầu hạt nhân triazole làm cứng cấu trúc phân tử tạo thành, làm tăng liên kết hydro vòng triazole chuỗi peptide thụ thể EGFR từ cải thiện hoạt động ức chế hợp chất lai thu Với lí trên, luận án sử dụng phản ứng click với xúc tác đồng (I) gắn kết alkynequinazoline quan trọng 130a-d với nitrophenylazide trifluoromethylphenylazide tạo hợp chất lai 4-anilinoquinazolin-triazole 148-151 với hiệu suất 7090% Phản ứng tiến hành điều kiện nhiệt độ phòng quinazoline 130a-d với 1,1 đương lượng azide 123 dung môi THF xúc tác CuI (0,2 đương lượng) DIPEA (12 đương lượng) đến hai ngày theo sơ đồ 3.10 Cấu trúc dự kiến hợp chất lai 148-151 khẳng định kiện phổ IR, MS, H-NMR 13C-NMR chúng Sơ đồ 3.10 Tổng hợp hợp chất lai 148-151 Phản ứng hợp chất 130c dẫn xuất azide cho sản phẩm khác Cụ thể, phản ứng hợp chất 130c 2-nitro-, 3nitro- 3-cyano-4-trifluoromethylphenylazide tạo thành sản phẩm chứa hai vòng triazole 151a,b,d, phản ứng 130c 4nitrophenylazide nhận sản phẩm đóng vịng triazole vị trí C-6 khung quinazoline 151c Mặc dù thay đổi nhiều điều kiện phản ứng khác tăng đương lượng azide, tăng nhiệt độ phản ứng đến nhiệt độ sôi hồi lưu THF, kéo dài thời gian phản ứng sản phẩm nhận hợp chất 151c 3.4.2 Kết tổng hợp xá định cấu trúc hợp chất lai dimer quinazoline – triazole (152) Hợp chất dimer tổng hợp thể họat tính tính ức chế tế bào ung thư điển hình cho lớp chất quinazoline Bằng cách kết hợp hai tính chất dược lý riêng biệt phân tử mở rộng phổ hoạt động thuốc đồng thời giảm khả kháng thuốc bệnh nhân ung thư Do phần thực nghiệm tổng hợp số hợp chất lai chứa hai hợp phần dimer quinazoline 1,2,3-triazole phân tử nhằm tìm kiếm chất có hoạt tính sinh học cao Bên cạnh có nhiều nghiên cứu hai hợp phần quiazoline triazole có hoạt tính ức chế AChE Do việc tạo hợp chất lai quinazoline-triazole với mong muốn tìm kiếm thuốc ức chế cholinesterase an toàn với tác dụng phụ tối thiểu hoạt động đa mục tiêu cần thiết Các hợp chất lai dimer 145 với phenylazide 123 thực theo sơ đồ 3.12 Sơ đồ 3.12 Tổng hợp hợp chất lai 152a-d Cấu trúc hợp chất lai 152d chứng minh phổ IR, NMR, HSQC, HMBC, DEPT Cấu trúc dự kiến hợp chất lai 152a-f khẳng định tương tự kiện phổ IR, 1H-NMR 13C-NMR chúng Như vậy, phản ứng click tổng hợp thành công 20 hợp chất có cấu trúc quinazoline-triazole (148-151) dimer quinazoline-triazole (152) từ nguyên liệu quinazoline (130), dimer (145) phenylazide (123) với có mặt xúc tác CuI Hiệu suất phản ứng đạt khoảng 55-80% 3.5 Kết tổng ợp xá địn ấu trú ợp hất l i 4- aminoquinazoline – triazole-AZT (153-156) Nghiên cứu pha I liều dung nạp tối đa thuốc tiêm tĩnh mạch Zidovudine kết hợp với 5-fluorouracil Leucovorin bệnh nhân ung thư đại trực tràng di cho thấy hoạt động đáng kể AZT điều trị ung thư [25] Do dự kiến việc tổng hợp hợp chất lai quinazoline-triazole-AZT phản ứng click nhắm tới mục tiêu tiềm tạo tác nhân gây độc tế bào có thêm hoạt tính sinh học lý thú khác Trước tiên tiến hành tổng hợp hợp chất lai erlotinib AZT phản ứng click Kết nhận hợp chất 143 với hiệu suất 85% Cấu trúc hợp chất 153 chứng minh phổ 1H NMR, 13C NMR MS Các hợp chất crown ether quinazoline 120a-c nhóm nghiên cứu tổng hợp công bố cho thấy hoạt tính kháng ung thư cao dịng tế bào ung thư biểu mô, ung thư gan ung thư phổi Với mong muốn tìm kiếm hợp chất lai có hoạt tính cao hơn, chúng tơi thực việc lai hóa hợp chất crown ether quinazoline 120a-c với AZT dung mơi THF nhiệt độ phịng với có mặt xúc tác CuI base DIPEA nhận hợp chất lai 154a-c với hiệu suất 80-90% Cấu trúc hợp chất lai 154a-c xác định phổ 1H-NMR, 13C-NMR MS (ESI) chúng Sơ đồ 3.15 Tổng hợp hợp chất quinazoline–triazole–AZT 154a-c Phản ứng click AZT dẫn xuất quinazoline 130a-c nhận hợp chất lai 155a-c (sơ đồ 3.16) Phản ứng hợp chất 130d AZT nhận sản phẩm sản phẩm đóng vịng triazole vị trí C6 khung quinazoline 155d Tương tự trên, phản ứng dimer 145 AZT nhận sản phẩm đóng vịng triazole đầu dimer cho thấy ảnh hưởng hiệu ứng khơng gian kích thước lớn hợp phần AZT thu sản phẩm 156 Như vậy, phản ứng click kết hợp hợp phần quinazoline-triazole-AZT tạo hợp chất lai từ nguyên liệu quinazoline (erlotinib (119), ether vòng) (120), dẫn xuất (130), dimer (145) AZT Hiệu suất phản ứng đạt khoảng 60-90% Hình 3.28 Cấu trúc hóa học nhiệt độ nóng chảy hợp chất 153-156 3.6 K ảo sát Kết t oạt tín ứ ế enzyme etyl ống ung t oạt tín olinester se 3.6 Kết t oạt tín ống ung t Cả bốn dẫn xuất quinazoline chứa nhóm vị trí C-6, C-4 (130a-d) hoạt tính gây độc dịng tế bào ung thư KB HepG2, Lu-1 hai hợp chất có hoạt tính ức chế AChE Trong hợp chất 130d thể hoạt tính gây độc tế bào ung thư mạnh ba dòng tế bào ung thư, mạnh erlotinib với giá trị IC50 từ 7.48 đến 10.06 µM Bảng 3.6 Hoạt tính chống ung thư hợp chất quinazoline hợp chất lai T T Hợp ất IC50 (KB), IC50 (HepG2), IC50 (Lu), µM µM µM 130a 62.03 ±2.65 321.25 4.16 148a 232 ± 2.05 340 >264 148d 3.70 ± 0.8 27.53 ±1.05 15.03±0.9 130b 59.72 ± 2.30 220 ± 0.79 149a 42.69 ± 3.40 >200 149b >200 94.08 ± 1.35 149d 19.24 ±0.48 0.94 ± 1.34 155b 30.96± 1.28 >200 130c >200 142.5 ±1.07 >200 10 130d 7.48± 0.48 9.12 10.06 11 151b 92.32± 1.05 > 204 > 204 12 151d 26.53± 2.18 45.14± 3.48 72.00± 0.78 13 155d 30.45±2.24 53.39±4.23 9.04±0.76 14 145 1.53 11.28 15 152a >128 >128 16 152b >128 >128 17 156 >128 >128 18 154b 124.29±9.68 92.00±5.63 13.40±0.89 19 AZT > 400 > 400 29.94 20 Erlotinib.HCl 49.62 14.17 21 Ellipticine 1.95 2.72 31.15 1.38 Hợp chất lai dạng dimer quinazoline 145 có hoạt tính gây độc tế bào cao erlortinib, đặc biệt khả ức chế cao với dịng tế bào ung thư biểu mơ KB với IC50 = 1.53 µM, cao chất đối chứng ellipticine Hợp chất có nhóm ethynylaniline vị trí C-4 130d dimer 145 có hoạt tính gây độc tế bào mạnh hợp chất có nhóm khác Một số hợp chất lai có hoạt tính tăng lên so với hơp chất chưa lai hóa 148a, 148d, 149d, hợp chất 149d ức chế tế bào ung thư gan tốt nhất, mạnh chất đối chứng với IC50 0.94 µM Các hợp chất 154b 155d có cấu trúc lai quinazoline-tricazole- AZT có hoạt tính tương đối tốt dòng tế bào ung thư, đặc biệt tế bào ung thư phổi tế bào nhỏ Lu với giá trị IC50 = 9-13 µM, cao so với chất đối chứng erlotinib hydrochlorid Hình 3.34 Một số hợp chất 4-aminoquinazoline có hoạt tính tốt 3.6.2 Kết thử hoạt tính chống Alzheimer Các kết thử hoạt tính sinh học chứng minh số hợp chất lai chứa khung quinazoline hợp chất lai quinazoline-triazole chúng có khả ức chế enzyme AChE (IC50 = 0,2-83,9 M) Đây chất tiềm để phát triển thành thuốc điều trị bệnh Alzheimer (AD) Bảng 3.7 Hoạt tính ức chế AChE hợp chất lai quinazolinetriazole TT Hợp ất IC50 (AChE) µM 148a 2.06 ± 0.19 130b 47.73 ± 0.81 149a 0.23 ± 0.15 149b 1.10 ± 0.27 130c 83.90 ± 1.06 150a 37.38 ± 2.01 150b 15.79 ± 0.18 Doneperil 0.12 ± 0.36 Một số chất lai thể hoạt động ức chế mạnh AChE với giá trị IC50 khác Số liệu bảng 3.7 cho thấy hoạt động AChEI tốt thu từ hợp chất 149a (IC50 = 0.23 µM) so với donepezil thuốc tham chiếu (IC50 = 0.12 µM) Hợp chất 149a có benzylamine kết nối với vị trí C-4 khung quinazoline 2-nitrophenyl kết nối với vịng 1,2,3-triazole Việc thay đổi nhóm nitro sang vị trí meta dẫn đến giảm hoạt động AChEI hợp chất 149b với IC50 = 1.10 Tuy nhiên, hợp chất 149c có nhóm nitro vị trí para bị hoạt động AChEI (IC50> 200 µM) Hình 3.38 Cấu trúc hoạt tính ức chết AChE số hợp chất So sánh hoạt tính hợp chất lai 148a-b, 149a-b 150a-b với hợp chất quinazoline 130a-c hoạt động AChEI cho thấy lai ghép làm tăng mạnh hoạt tính kết hợp hợp phần 1,2,3-triazole quinazoline thành phân tử lai 3.6.3 Kết protein docking dự đốn thơng số dược động học Một số chất cho thấy hoạt động ức chế tốt chống lại enzyme AChE, chẳng hạn 148a, 149a-b, 150a-b Để tìm hiểu khả hoạt động chế liên kết hợp chất lai quinazoline-triazole với trung tâm hoạt động enzyme AChE sử dụng mơ hình docking protein Hình 3.37 Tương tác hợp chất 148a, 149a-b 150a-b với vị trí hoạt động AChE người Các hợp chất 148a, 149a 149b cho thấy tương tác mạnh với chuỗi bên thơm Trp86 vùng liên kết choline CAS, hợp chất 150a 150b thiếu tương tác xếp chồng So với 149a 149b, piperazyl 150a 150b liên kết thuận lợi với dư lượng PAS thông qua tương tác xếp chồng với Trp286 Ngoài ra, hệ quinazoline dường bất lực 148a, 150a 150b chúng liên kết với Trp286 nhiều tương tác π liên kết H với Phe295 / Ser293 tương tự donepezil Mặt khác, liên kết H đóng vai trị quan trọng việc ổn định 149a 149b chúng tương tác mạnh với Ser293 Arg296 vị trí PAS thơng qua vịng pyrimidine quinazoline Tất hợp chất cho thấy tương tác π tương tự triazole vòng Tyr341 nitro-benzen với Tyr337 Điểm kết nối ước tính gói ICM cho 148a, 149a 149b từ -24,71 đến -26,07 kCal/mol tương tự tính tốn cho donepezil Trong đó, lực 150a 150b -16,83 -17,02 kCal/mol, cho thấy lực hợp chất AChE thấp so với donepezil ( Hình 3.40) Bảng Dự đốn tính chất dược động học hợp chất lai 148a, 149a,b, 150a,b Cpd 148a Tox Rule2 Solubility3 (mg/ml) Thấp 1.97e-3 Ro5 Caco-2 permeability class4 Cao BBB5 distribution P-gp6 substr ate Cao Cytochrome P4507 N 1A2, 3A4 o 149a Vừa phải 2.27e-03 Vừa phải Vừa phải o 149b Vừa phải 2.25e-03 Vừa phải Vừa phải 150a Thấp 2.26e-02 Cao Cao 150b Thấp 2.24e-02 Cao Cao o N 2C9, 2C19, 3A4 N 2C9, 2C19, 3A4 N 2C9, 3A4 o N 2C9, 3A4 o 1.Quy tắc Lipinski [104]; Quy tắc độc tính in vivo Hughes [105]; Độ hịa tan intrinsic 25 ° C tính theo phương trình ESOL Delaney [106]; Phân loại tính thấm tế bào Caco-2 3Prule [107]: Loại cao Papp ≥ 16 × 106cm / s, Loại vừa phải 0,7 × 10-6 Papp