NGHIÊN CỨU ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH ĐỐI VỚI PROTEIN TÁI TỔHỢP MBP-VT2eB TRÊN THỎ

80 767 1
NGHIÊN CỨU ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH ĐỐI VỚI PROTEIN TÁI TỔHỢP MBP-VT2eB TRÊN THỎ

Đang tải... (xem toàn văn)

Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống

Thông tin tài liệu

TÓM TẮT “NGHIÊN CỨU ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH ĐỐI VỚI PROTEIN TÁI TỔ HỢP MBP- VT2eB TRÊN THỎ”.

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC ****0O0**** KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP NNGGHHIIÊÊNN CCỨỨUU ĐĐÁÁPP ỨỨNNGG MMIIỄỄNN DDỊỊCCHH ĐĐỐỐII VVỚỚII PPRROOTTEEIINN TTÁÁII TTỔỔ HHỢỢPP MMBBPP--VVTT22eeBB TTRRÊÊNN TTHHỎỎ Ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Niên khóa : 2001 – 2005 Sinh viên thực hiện : PHAN LÊ MAI Thành phố Hồ Chí Minh Tháng 8-2005 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC ****0O0**** KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP NNGGHHIIÊÊNN CCỨỨUU ĐĐÁÁPP ỨỨNNGG MMIIỄỄNN DDỊỊCCHH ĐĐỐỐII VVỚỚII PPRROOTTEEIINN TTÁÁII TTỔỔ HHỢỢPP MMBBPP--VVTT22eeBB TTRRÊÊNN TTHHỎỎ Giáo Viên Hướng Dẫn: Sinh Viên Thực Hiện: TSKH NGUYỂN NGỌC HẢI PHAN LÊ MAI PGS.TSKH NGUYỄN LÊ TRANG Thành phố Hồ Chí Minh Tháng 8-2005 iii LỜI CẢM ƠN Con ln nhớ ơn ba mẹ sinh thành, dưỡng dục và tạo mọi điều kiện cho con tự hồn thiện mình, cảm ơn sự quan tâm, động vịên của mọi người trong gia đình. Em xin chân thành cảm ơn Ban Giám Hiệu trường Đại học Nơng Lâm TP. Hồ Chí Minh, Ban Chủ nhiệm bộ mơn Cơng Nghệ Sinh Học, cùng tất cả q Thầy Cơ đã truyền đạt kiến thức cho em trong suốt q trình học tại trường. Em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến TS khoa học Nguyễn Ngọc Hải, người Thầy đã dạy bảo em rất nhiều và tạo mọi điều kiện thuận lợi cho em hồn thành khố luận. Con xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến PGS-TS khoa học Nguyễn Lê Trang, người Thầy, người bác đã dạy bảo con rất nhiều và tạo mọi điều kiện thuận lợi giúp con hồn thành khố luận. Em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến Thạc sỹ Nguyễn Kim Dung, người Thầy đã dạy bảo em rất nhiều và tạo mọi điều kiện thuận lợi cho em hồn thành khố luận. Em xin chân thành cảm ơn chị Nguyễn Thị Nguyệt Thu, chị Đỗ Thị Châm, chị Lạc Ngọc Thêm, chị Võ Thị Mỹ Dun, chị Dương Ngọc Diễm, chị Dỗn Thị Sim, Thầy Lưu Đức Lợi, anh Nguyễn Văn Thương đã tận tình giúp đỡ chỉ bảo em trong suốt thời gian thực tập khố luận tốt nghiệp. Cảm ơn các bạn bè thân u của lớp DH01SH đã san sẻ cùng tơi những vui buồn trong thời gian học cũng như hết lòng hỗ trợ, giúp đỡ tơi trong thời gian thực tập. iv TÓM TẮT PHAN LÊ MAI, Đại học Nông Lâm TP. Hồ Chí Minh. Tháng 8/2005. “NGHIÊN CỨU ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH ĐỐI VỚI PROTEIN TÁI TỔ HỢP MBP-VT2eB TRÊN THỎ”. Hội đồng hướng dẫn: TS khoa học Nguyễn Ngọc Hải PGS-TS khoa học Nguyễn Lê Trang Độc tố verotoxin VT2eB do E. coli tiết ra là tác nhân chính gây ra bệnh phù đầu và tiêu chảy trên heo con, gây thiệt hại rất lớn cho ngành chăn nuôi heo của nước ta. Do vậy các nghiên cứu nhằm tạo ra vaccin phòng bệnh phù đầu trên heo đang nhận được sự quan tâm rất lớn, mở ra nhiều triển vọng cho ngành chăn nuôi heo nước ta. Hiện nay, TS Nguyễn Ngọc Hải và các cộng sự đã thành công trong việc tạo ra được chủng E. coli mang gen mã hoá cho protein tái tổ hợp MBP-VT2eB và tinh sạch được protein này. Từ thực tế đó, chúng tôi thực hiện đề tài: “Nghiên cứu đáp ứng miễn dịch đối với protein tái tổ hợp MBP-VT2eB trên thỏ” nhằm xác định khả năng ứng dụng protein này trong nghiên cứu bệnh phù đầu do E. coli gây ra trên heo . Chúng tôi sử dụng phản ứng kết tủa khuếch tán trên thạch (kỹ thuật Ouchterlony) để đánh giá sự xuất hiện của kháng thể và phản ứng trung hoà độc tố VT2e trên môi trường tế bào vero để đánh giá hiệu giá kháng thể trung hoà độc tố verotoxin. Những kết quả đạt được sau 7 tháng nghiên cứu: - Cả hai quy trình gây miễn dịch dài ngày và ngắn ngày đều tạo kháng thể kháng MBP-VT2eB có hiệu quả. - Protein MBP-VT2eB có khả năng kích ứng đáp ứng miễn dịch trên thỏ tạo kháng thể trung hoà độc tố VT2e trên môi trường tế bào vero. - Kháng thể kháng protein tái tổ hợp MBP-VT2eB có khả năng trung hoà độc tố VT2e (gây bệnh phù đầu trên heo). v MỤC LỤC Trang LỜI CẢM ƠN . iii TÓM TẮT iv MỤC LỤC .v DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT . viii DANH MỤC CÁC HÌNH xi DANH MỤC CÁC BẢNG xii DANH MỤC CÁC SƠ ĐỒ xiii DANH MỤC CÁC BIỂU ĐỒ xiv PHẦN 1: MỞ ĐẦU .1 1.1. Mở đầu 1 1.2. Mục tiêu và yêu cầu .1 1.2.1. Mục tiêu .1 1.2.2. Yêu cầu 2 PHẦN 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3 2.1. Kháng nguyên .3 2.2. Kháng thể 3 2.2.1. Chuỗi nhẹ (L) 4 2.2.2. Chuỗi nặng (H) 4 2.3. Đáp ứng miễn dịch .5 2.3.1. Đáp ứng miễn dịch khi tiếp xúc kháng nguyên lần đầu 6 2.3.2. Đáp ứng miễn dịch khi tiếp xúc lại kháng nguyên những lần tiếp theo 6 2.3.3. Các yếu tố ảnh hưởng đến đáp ứng miễn dịch 7 2.4. Cơ chế miễn dịch dịch thể .10 2.5. Protein tái tổ hợp MBP-VT2eB 15 2.6. Phản ứng kết tủa khuếch tán kép trên thạch (Double diffusion in two dimensions) (Kỹ thuật Ouchterlony) .15 2.6.1. Sự kết hợp giữa kháng nguyên – kháng thể 15 2.6.2. Phản ứng kết tủa theo kỹ thuật khuếch tán kép trên thạch (Double diffusion in two dimensions) (Kỹ thuật Ouchterlony) 17 vi 2.7. Phản ứng trung hoà độc tố VT2e trên môi trường tế bào vero .18 2.7.1. Sơ lược về tế bào vero .18 2.7.2. Độc tố VT2e 19 2.7.3. Nguyên tắc của phản ứng trung hoà độc tố trên môi trường tế bào vero 20 PHẦN 3: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP TIẾN HÀNH .21 3.1. Thời gian và địa điểm 21 3.2. Nội dung nghiên cứu 21 3.3. Vật liệu và hoá chất 21 3.3.1. Thú thí nghiệm .21 3.3.2. Vật liệu và hoá chất 21 3.3.3. Môi trường 22 3.3.4. Thiết bị và dụng cụ 22 3.4. Phương pháp nghiên cứu .22 3.4.1. Bố trí thí nghiệm .22 3.4.2. Chuẩn bị dịch tiêm .24 3.4.3. Thu nhận kháng huyết thanh 24 3.4.4. Xử lý kháng huyết thanh 24 3.4.4.1. Tách kháng thể với ammonium sulfate bão hoà 100%S 24 3.4.4.2. Hòa tan kháng thể .25 3.5. Đánh giá .27 3.5.1. Định tính: phản ứng kết tủa khuếch tán kép trên thạch (kỹ thuật Ouchterlony) .27 3.5.2. Định lượng: phản ứng trung hoà độc tố VT2e trên môi trường tế bào vero 28 3.5.2.1. Xác định liều TCID50 (Tissue Culture Infectious Dose 50) .28 3.5.2.2. Thử phản ứng trung hoà độc tố 31 vii 3.6. Chỉ tiêu theo dõi 33 3.7. Đánh giá kết quả và xử lý số liệu .33 PHẦN 4 : KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN .34 4.1. Xác định kháng thể đặc hiệu với protein tái tổ hợp MBP-VT2eB bằng kỹ thuật Ouchterlony 34 4.1.1. Xác định quy trình thực hiện phản ứng 34 4.1.2. Đánh giá kết quả gây miễn dịch theo các quy trình ngắn ngày và dài ngày 35 4.1.2.1. Quy trình ngắn ngày 35 4.1.2.2. Quy trình dài ngày .36 4.1.3. Nhận xét .38 4.2. Xác định liều TCID50 41 4.3. Phản ứng trung hoà độc tố VT2e trên môi trường tế bào vero 42 4.3.1. Kiểm tra độ an toàn của kháng huyết thanh đối với tế bào vero 42 4.3.1.1. Kháng huyết thanh có bổ sung NaN3 và tế bào vero .43 4.3.1.2. Kháng huyết thanh có bổ sung NaN3 và có bất hoạt .43 4.3.1.3. Thí nghiệm đánh giá tác động của NaN3 44 4.3.1.4. Kháng huyết thanh không bổ sung NaN3 và có bất hoạt .44 4.3.2. Phản ứng trung hoà độc tố VT2e trên môi trường tế bào vero 46 4.3.2.1. Quy trình dài ngày .47 4.3.2.2. Quy trình ngắn ngày 50 PHẦN 5: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ .53 PHẦN 6: TÀI LIỆU THAM KHẢO 54 PHỤ LỤC 56 viii DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Ag ATCC DAG DMEM TCID50 EDTA FBS Gb4 Ig IL2 IL4 IL5 IL6 IP3 LB MAF MBP MHC class II antigens MIF MWCBs PCR Antigen American Type Culture Collection Diacylglycerol Dulbeccos Minimal Essential Medium Tissue culture infectious dose 50 Ethyllene diamine tetra acetic acid Fetal Bovine Serum Globotetraosyl ceramide Immunoglobulin Interleukin 2 Interleukin 4 Interleukin 5 Interleukin 6 Inositol triphosphate Lubria – Bertani Macrophage activating factor Maltose binding protein Major histocompatibility complex class II antigens Macrophage inhibitation factor Manufacturer's working cells bank Polymerase chain reaction Kháng nguyên Tổ chức sưu tầm nhân giống Mỹ Huyết thanh bào thai bê Globulin miễn dịch Yếu tố có tác dụng hoạt hoá đại thực bào Các kháng nguyên phù hợp tổ chức chính lớp II Ngân hàng tế bào đang làm việc ix PBS SLT TC TDTH TI TH Vero VT VT2e (SLT-IIv) VT2eB Phosphate buffer stalin Shiga-like toxin Cytotoxic T cell Delayed type hypersensitivity T cell Inducer T cell Helper T cell Vervet Monkey Origin Verotoxin SLT-II variant VT2e subunit B Tế bào lympho T gây độc Tế bào lympho T gây quá mẫn muộn Tế bào lympho T cảm ứng Tế bào lympho T giúp Độc tố Shiga-like toxin IIv Tiểu đơn vị B của VT2e x DANH MỤC CÁC HÌNH TRANG Hình 2.1: Hình 2.2: Hình 2.3: Hình 2.4: Hình 2.5: Hình 2.6: Hình 2.7: Hình 2.8: Hình 3.1: Hình 3.2: Hình 4.1: Hình 4.2: Hình 4.3: Hình 4.4: Hình 4.5: Hình 4.6: Cấu trúc kháng thể 5 Đáp ứng miễn dịch của thú đối với 2 lần tiêm kháng nguyên được phản ảnh qua mức độ kháng thể trong kháng huyết thanh .7 Quá trình biệt hoá và phân chia của tế bào lympho B 11 Các quá trình diễn ra khi kháng nguyên kết hợp với các thụ thể trên bề mặt tế bào lympho B 12 Sự kết hợp giữa tế bào lympho TH và tế bào lympho B 13 Tế bào lympho B xử lý và trình diện kháng nguyên cho tế bào lympho TH 13 Tác động của các interleukin ở các giai đoạn khác nhau trong tiến trình đáp ứng miễn dịch của tế bào lympho B đối với kháng nguyên .14Hiện tượng hai kháng nguyên: đồng nhất (A), không đồng nhất (B), đồng nhất một phần (C) được phát hiện bằng phản ứng kết tủa khuếch tán kép trên thạch 18 Bao thẩm tích 26 Phản ứng kết tủa khuếch tán kép trên thạch (kỹ thuật Ouchterlony) 27 Phản ứng kết tủa khuếch tán kép trên thạch của mẫu thỏ 4 (mũi nhắc lại 1) 34 Phản ứng kết tủa khuếch tán kép trên thạch của mẫu thỏ 2 (mũi nhắc lại 1) 35 Phản ứng kết tủa khuếch tán kép trên thạch của mẫu thỏ 1 (mũi nhắc lại 2) 36 Phản ứng kết tủa khuếch tán kép trên thạch của mẫu thỏ 1 (đối chứng + kháng huyết thanh) 36 Phản ứng kết tủa khuếch tán kép trên thạch của mẫu thỏ 2 (đối chứng + kháng huyết thanh) 36 Phản ứng kết tủa khuếch tán kép trên thạch của mẫu thỏ 4 (mũi nhắc [...]... thích miễn dịch nhiều lần 10 - Khả năng đáp ứng của thú Ngày nay, người ta biết rằng với cùng một loại kháng nguyên, nếu đưa vào các cơ thể khác nhau sẽ cho đáp ứng miễn dịch khác nhau Tính sinh miễn dịch = tính kháng nguyên + khả năng đáp ứng miễn dịch của vật chủ Khả năng đáp ứng miễn dịch của vật chủ phụ thuộc vào tính di truyền 2.4 CƠ CHẾ MIỄN DỊCH DỊCH THỂ[13] Quá trình đáp ứng miễn dịch dịch... cho protein tái tổ hợp MBP-VT2eB và tinh sạch được protein này Từ thực tế đó, được sự chấp nhận của bộ môn Công Nghệ Sinh Học, với sự hướng dẫn của TS khoa học Nguyễn Ngọc Hải, PGS-TS khoa học Nguyễn Lê Trang, chúng tôi thực hiện đề tài: Nghiên cứu đáp ứng miễn dịch đối với protein tái tổ hợp MBP-VT2eB trên thỏ 1.2 MỤC TIÊU VÀ YÊU CẦU 1.2.1 Mục tiêu Đánh giá hiệu quả gây đáp ứng miễn dịch của protein. .. Minh Phòng miễn dịch viện Pasteur Tp Hồ Chí Minh Phòng kiểm định vaccin viện Pasteur Tp Hồ Chí Minh 3.2 NỘI DUNG NGHIÊN CỨU Nghiên cứu đáp ứng miễn dịch đối với protein tái tổ hợp MBP-VT2eB trên thỏ 3.3 VẬT LIỆU VÀ HOÁ CHẤT 3.3.1 Thú thí nghiệm: 5 con thỏ, trọng lượng từ 1,5 – 2 kg 3.3.2 Vật liệu và hoá chất Dung dịch Ammonium Sulfate 100%S Dung dịch Ammonium Sulfate 45%S Dung dịch PBS 1X Dung dịch PBS++... hợp với một loại quy trình gây miễn dịch riêng Với những kháng nguyên yếu thường phải được gây miễn dịch bằng quy trình hết sức nghiêm ngặt và gây miễn dịch nhiều lần thì mới có đáp ứng miễn 9 dịch mạnh Trong khi đó, với những kháng nguyên mạnh có khi chỉ cần gây miễn dịch một lần cũng gây đáp ứng miễn dịch mạnh - Hiệu ứng cộng lực kháng nguyên Nếu cùng một lúc gây miễn dịch nhiều loại kháng nguyên cho... không đủ gây đáp ứng miễn dịch Ngược lại, nếu lượng kháng nguyên nhiều quá sẽ gây ức chế miễn dịch • Quy trình gây miễn dịch cũng ảnh hưởng lớn đến tính sinh miễn dịch của phân tử kháng nguyên Cùng một loại kháng nguyên, gây miễn dịch trên hai lô thú thí nghiệm thuần chủng nhưng ở hai quy trình gây miễn dịch khác nhau thì đáp ứng miễn dịch cũng khác nhau Mỗi loại kháng nguyên thích hợp với một loại... thể kháng protein tái tổ hợp MBP-VT2eB Protein MBP-VT2eB được tạo ra dựa trên tiểu phần B của độc tố VT2e qui định khả năng liên kết với các thụ thể đặc trưng trên tế bào đích Do đó khi tiêm protein tái tổ hợp MBP-VT2e vào thỏ thì cơ thể thỏ sẽ tạo ra một cơ chế đáp ứng miễn dịch dịch thể và sản xuất kháng thể chống lại tiểu phần B của độc tố VT2e Do đó, độc tố này không có khả năng liên kết với các... Đánh giá hiệu quả gây đáp ứng miễn dịch của protein tái tổ hợp MBP-VT2eB trên thỏ nhằm xác định khả năng ứng dụng protein này trong nghiên cứu bệnh phù do E coli gây ra trên heo 2 1.2.2 Yêu cầu Thu nhận kháng thể kháng protein tái tổ hợp MBP-VT2eB Xác định sự hiện diện của kháng thể kháng protein tái tổ hợp MBP-VT2eB Thử khả năng trung hoà độc tố VT2e trên môi trường tế bào vero 3 PHẦN 2 TỔNG QUAN TÀI... 37 Hình 4.7: Phản ứng kết tủa khuếch tán kép trên thạch của mẫu thỏ 5 (mũi nhắc lại 1) 37 Hình 4.8: Phản ứng kết tủa khuếch tán kép trên thạch của mẫu thỏ 3 (mũi nhắc lại 2) 37 Hình 4.9: Phản ứng kết tủa khuếch tán kép trên thạch của mẫu thỏ 3 (đối chứng + kháng huyết thanh) 37 Hình 4.10: Phản ứng kết tủa khuếch tán kép trên thạch của mẫu thỏ 4 (đối chứng + kháng huyết... chủng loài giữa thú được gây miễn dịch và kháng nguyên Trong miễn dịch dịch thể, kháng nguyên càng lạ với cơ thể thú bao nhiêu thì khả năng sinh miễn dịch càng cao bấy nhiêu Ví dụ: Albumin gà sẽ tạo kháng thể cao hơn albumin bò khi cùng tiêm cho dê Trong miễn dịch qua trung gian tế bào chỉ cần sự khác biệt giữa các cá thể cũng gây đáp ứng miễn dịch cao, ví dụ như phản ứng thải bỏ mảnh ghép của chuột... lại trong cột sắc ký, các chất khác sẽ bị rửa trôi theo dung dịch đệm Cho dung dịch đệm có chứa maltose chạy qua cột sắc ký Do ái lực của protein MBP – VT2eB đối với maltosse mạnh hơn đối với amylose nên các protein này gắn trên amylose sẽ chuyển sang gắn trên maltose và được rửa theo dung dịch đệm ra ngoài 2.6 PHẢN ỨNG KẾT TỦA KHUẾCH TÁN KÉP TRÊN THẠCH (Double diffusion in two dimensions) (Kỹ thuật Ouchterlony) . Nghiên cứu đáp ứng miễn dịch đối với protein tái tổ hợp MBP-VT2eB trên thỏ . 1.2. MỤC TIÊU VÀ YÊU CẦU 1.2.1. Mục tiêu Đánh giá hiệu quả gây đáp ứng miễn. cho protein tái tổ hợp MBP-VT2eB và tinh sạch được protein này. Từ thực tế đó, chúng tôi thực hiện đề tài: Nghiên cứu đáp ứng miễn dịch đối với protein tái

Ngày đăng: 29/10/2012, 14:13

Hình ảnh liên quan

Hình 2.1: Cấu trúc kháng thể - NGHIÊN CỨU ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH ĐỐI VỚI PROTEIN TÁI TỔHỢP MBP-VT2eB TRÊN THỎ

Hình 2.1.

Cấu trúc kháng thể Xem tại trang 19 của tài liệu.
Hình 2.2: Đáp ứng miễn dịch của thú đối với 2 lần tiêm kháng nguyên được phản ánh qua mức độ kháng thể trong kháng huyết thanh  - NGHIÊN CỨU ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH ĐỐI VỚI PROTEIN TÁI TỔHỢP MBP-VT2eB TRÊN THỎ

Hình 2.2.

Đáp ứng miễn dịch của thú đối với 2 lần tiêm kháng nguyên được phản ánh qua mức độ kháng thể trong kháng huyết thanh Xem tại trang 21 của tài liệu.
Hình 2.3: Quá trình biệt hóa và phân chia của tế bào lymph oB - NGHIÊN CỨU ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH ĐỐI VỚI PROTEIN TÁI TỔHỢP MBP-VT2eB TRÊN THỎ

Hình 2.3.

Quá trình biệt hóa và phân chia của tế bào lymph oB Xem tại trang 25 của tài liệu.
Hình 2.4: Các quá trình diễn ra khi kháng nguyên kết hợp với các thụ thể trên bề mặt tế bào lympho B  - NGHIÊN CỨU ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH ĐỐI VỚI PROTEIN TÁI TỔHỢP MBP-VT2eB TRÊN THỎ

Hình 2.4.

Các quá trình diễn ra khi kháng nguyên kết hợp với các thụ thể trên bề mặt tế bào lympho B Xem tại trang 26 của tài liệu.
Hình 2.5: Sự kết hợp giữa tế bào lympho TH và tế bào lympho B. - NGHIÊN CỨU ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH ĐỐI VỚI PROTEIN TÁI TỔHỢP MBP-VT2eB TRÊN THỎ

Hình 2.5.

Sự kết hợp giữa tế bào lympho TH và tế bào lympho B Xem tại trang 27 của tài liệu.
Hình 2.7: Tác động của các interleuki nở các giai đoạn khác nhau trong tiến trình đáp ứng miễn dịch của tế bào lympho B đối với kháng nguyên  - NGHIÊN CỨU ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH ĐỐI VỚI PROTEIN TÁI TỔHỢP MBP-VT2eB TRÊN THỎ

Hình 2.7.

Tác động của các interleuki nở các giai đoạn khác nhau trong tiến trình đáp ứng miễn dịch của tế bào lympho B đối với kháng nguyên Xem tại trang 28 của tài liệu.
Hình 2.8: Hiện tượng hai kháng nguyên: đồng nhất (A), không đồng nhất (B), đồng nhất một phần (C) được phát hiện bằng phản ứng kết tủa khuế ch tán kép  - NGHIÊN CỨU ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH ĐỐI VỚI PROTEIN TÁI TỔHỢP MBP-VT2eB TRÊN THỎ

Hình 2.8.

Hiện tượng hai kháng nguyên: đồng nhất (A), không đồng nhất (B), đồng nhất một phần (C) được phát hiện bằng phản ứng kết tủa khuế ch tán kép Xem tại trang 32 của tài liệu.
Hình 3.1: Bao thẩm tích - NGHIÊN CỨU ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH ĐỐI VỚI PROTEIN TÁI TỔHỢP MBP-VT2eB TRÊN THỎ

Hình 3.1.

Bao thẩm tích Xem tại trang 40 của tài liệu.
Hình 3.2: Phản ứng kết tủa khuếch tán kép trên thạch (kỹ thuật Ouchterlony) - NGHIÊN CỨU ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH ĐỐI VỚI PROTEIN TÁI TỔHỢP MBP-VT2eB TRÊN THỎ

Hình 3.2.

Phản ứng kết tủa khuếch tán kép trên thạch (kỹ thuật Ouchterlony) Xem tại trang 41 của tài liệu.
Chỉ xuất hiện đường kết tủa ở hìn hA (sơ đồ pha loãng protein MBP-VT2eB), vị - NGHIÊN CỨU ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH ĐỐI VỚI PROTEIN TÁI TỔHỢP MBP-VT2eB TRÊN THỎ

h.

ỉ xuất hiện đường kết tủa ở hìn hA (sơ đồ pha loãng protein MBP-VT2eB), vị Xem tại trang 49 của tài liệu.
Hình 4.3: Phản ứng kết tủa khuếch tán kép trên thạch của mẫu thỏ 1 (mũi nhắc lại 2) - NGHIÊN CỨU ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH ĐỐI VỚI PROTEIN TÁI TỔHỢP MBP-VT2eB TRÊN THỎ

Hình 4.3.

Phản ứng kết tủa khuếch tán kép trên thạch của mẫu thỏ 1 (mũi nhắc lại 2) Xem tại trang 50 của tài liệu.
Hình 4.4: Phản ứng kết tủa khuếch tán kép trên thạch của mẫu thỏ 1 (đối chứ ng +  - NGHIÊN CỨU ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH ĐỐI VỚI PROTEIN TÁI TỔHỢP MBP-VT2eB TRÊN THỎ

Hình 4.4.

Phản ứng kết tủa khuếch tán kép trên thạch của mẫu thỏ 1 (đối chứ ng + Xem tại trang 50 của tài liệu.
Hình 4.11: Phản ứng kết tủa khuếch tán kép trên thạch của mẫu thỏ 5 (đối chứng + kháng huyết thanh)  - NGHIÊN CỨU ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH ĐỐI VỚI PROTEIN TÁI TỔHỢP MBP-VT2eB TRÊN THỎ

Hình 4.11.

Phản ứng kết tủa khuếch tán kép trên thạch của mẫu thỏ 5 (đối chứng + kháng huyết thanh) Xem tại trang 52 của tài liệu.
Bảng 4.1: Kết quả phản ứng kết tủa khuếch tán kép trên thạch củ a2 quy trình gây miễn dịch  - NGHIÊN CỨU ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH ĐỐI VỚI PROTEIN TÁI TỔHỢP MBP-VT2eB TRÊN THỎ

Bảng 4.1.

Kết quả phản ứng kết tủa khuếch tán kép trên thạch củ a2 quy trình gây miễn dịch Xem tại trang 53 của tài liệu.
Hình 4.12: Kết quả phản ứng kết tủa khuếch tán trong thạch củ a2 quy trình gây miễn dịch  - NGHIÊN CỨU ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH ĐỐI VỚI PROTEIN TÁI TỔHỢP MBP-VT2eB TRÊN THỎ

Hình 4.12.

Kết quả phản ứng kết tủa khuếch tán trong thạch củ a2 quy trình gây miễn dịch Xem tại trang 54 của tài liệu.
Bảng 4.2: Kết quả đo OD620 mẫu nuôi cấy tế bào với dịch độc tố VT2e - NGHIÊN CỨU ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH ĐỐI VỚI PROTEIN TÁI TỔHỢP MBP-VT2eB TRÊN THỎ

Bảng 4.2.

Kết quả đo OD620 mẫu nuôi cấy tế bào với dịch độc tố VT2e Xem tại trang 55 của tài liệu.
Hình thái tế bào khi quan sát dưới kính hiển vi ở thời điểm 24 –48g Thời điểm 24g  - NGHIÊN CỨU ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH ĐỐI VỚI PROTEIN TÁI TỔHỢP MBP-VT2eB TRÊN THỎ

Hình th.

ái tế bào khi quan sát dưới kính hiển vi ở thời điểm 24 –48g Thời điểm 24g Xem tại trang 59 của tài liệu.
các giếng chứa kháng huyết thanh, tế bào có chết nhưng hình thái vẫn chưa rõ ràng. Thời điểm 48g  - NGHIÊN CỨU ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH ĐỐI VỚI PROTEIN TÁI TỔHỢP MBP-VT2eB TRÊN THỎ

c.

ác giếng chứa kháng huyết thanh, tế bào có chết nhưng hình thái vẫn chưa rõ ràng. Thời điểm 48g Xem tại trang 59 của tài liệu.
Bảng 4.4: Kết quả đo OD620 của mẫu thỏ 4 (mũi nhắc lại 3) và thỏ 5 (mũi nhắc lại 4)  - NGHIÊN CỨU ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH ĐỐI VỚI PROTEIN TÁI TỔHỢP MBP-VT2eB TRÊN THỎ

Bảng 4.4.

Kết quả đo OD620 của mẫu thỏ 4 (mũi nhắc lại 3) và thỏ 5 (mũi nhắc lại 4) Xem tại trang 61 của tài liệu.
Bảng 4.5: Kết quả đo OD620 của mẫu thỏ 3 (mũi nhắc lại 4) - NGHIÊN CỨU ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH ĐỐI VỚI PROTEIN TÁI TỔHỢP MBP-VT2eB TRÊN THỎ

Bảng 4.5.

Kết quả đo OD620 của mẫu thỏ 3 (mũi nhắc lại 4) Xem tại trang 62 của tài liệu.
Bảng 4.6: Kết quả đo OD620 của mẫu thỏ 2 - NGHIÊN CỨU ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH ĐỐI VỚI PROTEIN TÁI TỔHỢP MBP-VT2eB TRÊN THỎ

Bảng 4.6.

Kết quả đo OD620 của mẫu thỏ 2 Xem tại trang 64 của tài liệu.
Bảng 4.7: Kết quả phản ứng trung hoà độc tố của hai quy trình gây miễn dịch  - NGHIÊN CỨU ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH ĐỐI VỚI PROTEIN TÁI TỔHỢP MBP-VT2eB TRÊN THỎ

Bảng 4.7.

Kết quả phản ứng trung hoà độc tố của hai quy trình gây miễn dịch Xem tại trang 66 của tài liệu.
Hình 1: Tế bào vero. - NGHIÊN CỨU ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH ĐỐI VỚI PROTEIN TÁI TỔHỢP MBP-VT2eB TRÊN THỎ

Hình 1.

Tế bào vero Xem tại trang 74 của tài liệu.
Hình 2: Tế bào vero chịu tác động của độc tố VT2e - NGHIÊN CỨU ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH ĐỐI VỚI PROTEIN TÁI TỔHỢP MBP-VT2eB TRÊN THỎ

Hình 2.

Tế bào vero chịu tác động của độc tố VT2e Xem tại trang 74 của tài liệu.
Hình 3: Thú thí ngiệm - NGHIÊN CỨU ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH ĐỐI VỚI PROTEIN TÁI TỔHỢP MBP-VT2eB TRÊN THỎ

Hình 3.

Thú thí ngiệm Xem tại trang 75 của tài liệu.
Hình 4: Tiêm protein MBP-VT2eB cho thỏ - NGHIÊN CỨU ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH ĐỐI VỚI PROTEIN TÁI TỔHỢP MBP-VT2eB TRÊN THỎ

Hình 4.

Tiêm protein MBP-VT2eB cho thỏ Xem tại trang 75 của tài liệu.
Hình 5: Lấy máu tĩnh mạch tai thỏ - NGHIÊN CỨU ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH ĐỐI VỚI PROTEIN TÁI TỔHỢP MBP-VT2eB TRÊN THỎ

Hình 5.

Lấy máu tĩnh mạch tai thỏ Xem tại trang 76 của tài liệu.
Hình 6: Tủa kháng thể với ammonium sulfate 100%S   - NGHIÊN CỨU ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH ĐỐI VỚI PROTEIN TÁI TỔHỢP MBP-VT2eB TRÊN THỎ

Hình 6.

Tủa kháng thể với ammonium sulfate 100%S Xem tại trang 76 của tài liệu.
BẢNG SỐ LIỆU OD620 CỦA PHẢN ỨNG CHUẨN ĐỘ ĐỘC TỐ VT2e - NGHIÊN CỨU ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH ĐỐI VỚI PROTEIN TÁI TỔHỢP MBP-VT2eB TRÊN THỎ

620.

CỦA PHẢN ỨNG CHUẨN ĐỘ ĐỘC TỐ VT2e Xem tại trang 77 của tài liệu.

Từ khóa liên quan

Tài liệu cùng người dùng

  • Đang cập nhật ...

Tài liệu liên quan