LỜI CÁM ƠN Trên thực tế khơng có thành công mà không gắn liền với hỗ trợ, giúp đỡ dù hay nhiều, dù trực tiếp hay gián tiếp Trong suốt thời gian từ bắt đầu học tập giảng đường đại học đến nay, em nhận nhiều quan tâm, giúp đỡ q Thầy Cơ, gia đình bạn bè Để hình thành đồ án tốt nghiệp này, lời em xin chân thành cảm ơn đến lãnh đạo Trường Đại học Nha Trang, Thầy Cô Khoa Công Nghệ Thực phẩm, Thầy Cơ Bộ mơn Kỹ thuật Hóa Học, Cán quản lí phịng thí nghiệm tận tình giúp đỡ em trình làm đồ án Đặc biệt em xin gởi lời cám ơn chân thành đến người hướng dẫn em tận tình thời gian qua tạo điều kiện tốt cho em trình định hướng nội dung nghiên cứu, tìm tài liệu, gởi mẫu phân tích tư vấn nhiệt tình TS Trần Thị Hồng Qun Trong q trình làm đồ án, kiến thức cịn hạn hẹp, có sai sót mong Thầy Cơ người thông cảm em xin nhận ý kiến đóng góp từ người, để đồ án tốt nghiệp em hoàn thiện Sau em xin gởi lời cám ơn chân thành tới gia đình, bạn bè động viên cổ vũ đóng góp ý kiến trình học tập, nghiên cứu trình làm đồ án tốt nghiệp Em xin chân thành cảm ơn Nha Trang, ngày 17 tháng 07 năm 2019 Sinh Viên Bùi Thị Thanh Thúy MỤC LỤC LỜI CÁM ƠN .1 DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC HÌNH ẢNH MỞ ĐẦU Lí chọn đề tài Mục tiêu đề tài .9 Nội dung nghiên cứu 10 Phương pháp nghiên cứu 10 Đối tượng nghiên cứu 10 Tính cấp thiết đề tài 10 Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài 11 7.1 Ý nghĩa khoa học .11 7.2 Ý nghĩa thực tiễn 11 A TỔNG QUAN .12 Tổng quan hydroxyapatite .12 1.1 Công thức cấu tạo hydroxyapatite 12 1.2 Tính chất hydroxyapatite 13 1.2.1 Tính chất vật lý .13 1.2.2 Tính chất hóa học 13 1.2.3 Tính chất sinh học 14 1.3 Nguồn thu nhận hydroxyapatite 14 1.3.1 Nguồn thu nhận tự nhiên 14 1.3.2 Nguồn tổng hợp từ chất vô 15 1.4 Các phương pháp thu nhận hydroxyapatite .16 1.4.1 Phương pháp phản ứng pha rắn 16 1.4.2 Phương pháp hóa .16 1.4.3 Phương pháp thủy phân 17 1.4.4 Phương pháp solgel 17 1.4.5 Phương pháp thủy nhiệt 18 1.4.6 Phương pháp kết tủa .18 1.4.7 Phương pháp nhiệt phân .19 1.5 Ứng dụng hydroxyapatite 20 1.5.1 Ứng dụng dạng bột .20 1.5.2 Ứng dụng dạng màng 20 1.5.3 Ứng dụng dạng xốp .21 1.5.4 Ứng dụng dạng composite 22 Tổng quan cá rô phi vảy cá rô phi 22 2.1 Đặc điểm hình thái phân bố cá rô phi 22 2.1.1 Danh pháp .22 2.1.2 Phân bố 22 2.1.3 Đặc điểm hình thái 22 Tổng quan phương pháp nghiên cứu đặc tính hydroxyapatite 23 3.1 Phương pháp hiển vi điện tử quét (scanning electron microscopy, SEM) .23 3.1.1 Mục đích .23 3.1.2 Nguyên lí hoạt động nguyên tắc tạo ảnh 24 3.2 Phương pháp kính hiển vi điện tử truyền qua (transmission electron microscopy, TEM) 24 3.2.1 Mục đích .24 3.2.2 Nguyên lí hoạt động nguyên tắc tạo ảnh 24 3.3 Phương pháp nhiễu xạ tia X (Xray diffraction, XRD) 25 3.3.1 Mục đích .25 3.3.2 Nguyên lí hoạt động nguyên tắc tạo ảnh phương pháp nhiễu xạ tia X (XRD) 25 3.4 Phương pháp phổ hồng ngoại (fourier transformation infrared spectrophotometer, FTIR) .26 3.4.1 Mục đích .26 3.4.2 Nguyên lí hoạt động nguyên tắc tạo ảnh phương pháp FTIR 26 3.5 Phương pháp phân tích nhiệt trọng lượng TGA 27 B ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 28 2.1 Đối tượng nghiên cứu 28 2.2 Dụng cụ, thiết bị hóa chất 28 2.2.1 Dụng cụ 28 2.2.2 Thiết bị 28 2.2.3 Hóa chất 28 2.3 Phương pháp nghiên cứu 29 2.3.3 Xác định hàm lượng khoáng phương pháp nung 29 2.4 Quy trình thu nhận hydroxyapatite từ vảy cá rô phi .29 2.4.1 Tiền xử lí nguyên liệu 29 2.4.2 Thu nhận hydroxyapatite 30 C KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 32 Đánh giá hydroxyapatite qua nhiệt độ nung khác .32 2.1 Hiệu suất thu hồi hydroxyapatite nhiệt độ nung khác phương pháp nung 32 2.2 Hiển vi điện tử quét (SEM) hydroxyapatite nhiệt độ nung khác 32 Kết chụp kính hiển vi điện tử quét (SEM) 33 Kết chụp hiển vi điện tử truyền qua (TEM) 34 Kết phân tích phổ hồng ngoại (FTIR) 34 Kết phân tích nhiễu xạ tia X (XRD) 35 Kết phân tích nhiệt trọng lượng (TGA) .36 Kết xác định độ tan hydroxyapatite dung dịch có pH từ 17 37 Kết luận .38 Kiến nghị .39 E TÀI LIỆU THAM KHẢO 40 DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT HA -Hydroxyapatite SEM -Scanning electron microscope TEM -Transmission electron microscopy XRD -X–ray diffraction EDS/EDX Electron dispersive scaning FTIR -Fourier transformation spectrophotometer TGA -Thermal gravimetric analysis TCP Tricalcium phosphate βTCP βTricalcium phosphate ĐTNC -Đối tượng nghiên cứu infrared DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Một số muối calcium phosphate (CaP) 15 DANH MỤC HÌNH ẢNH Hình 1.1 Cơng thức cấu tạo hydroxyapatite 12 Hình 1.2 Các dạng tồn tinh thể HA 13 Hình 1.3 Quy trình tổng hợp HA từ chất vơ 15 Hình 1.4.Quy trình tổng hợp HA phương pháp phản ứng pha rắn 16 Hình 1.5 Quy trình tổng hợp HA phương pháp phản ứng hóa 17 Hình 1.6 Quy trình tổng hợp HA phương pháp solgel 18 Hình 1.7 Quy trình thu nhận HA phương pháp thủy nhiệt 18 Hình 1.8 Quy trình thu nhận HA phương pháp kết tủa 19 Hình 1.9 Quy trình thu nhận HA phương pháp nhiệt phân 20 Hình 1.10 Cá rô phi 23 Hình 1.11 Thiết bị hiển vi điện tử quét SEM 24 Hình 1.12 Ngun lí hoạt động phương pháp nhiễu xạ tia X 26 Hình 2.1 Bảo quản vảy cá (đã loại bỏ protein) sau sấy bình hút ẩm 30 Hình 2.2 Mẫu vảy cá xử lý đưa vào tủ nung 31 Hình 3.1 Vảy cá sau nung (đã nghiền) 3h với tốc độ gia nhiệt 5oC/phút 32 Hình 3.2 Ảnh chụp SEM HA thu nhận từ vảy cá 34 Hình 3.3 Phổ FTIR vảy cá 35 Hình 3.4 Kết phân tích TGA HA tổng hợp phương pháp siêu âm 37 MỞ ĐẦU Lí chọn đề tài Ở nước ta, cá rô phi (Oreochromis niloticus) loài cá tăng trưởng nhanh, khỏe mạnh mà từ lâu trở thành nguồn cung cấp protein chủ yếu nhiều nước phát triển gần có nhu cầu cao nước phát triển Tại Việt Nam, cá rô phi coi sản phẩm chủ lực, diện tích cá rơ phi đồng sông Cửu Long tăng khoảng 13.00015.000 để sản lượng đạt 120.000150.000 tấn, 2/3 chủ yếu dành cho xuất Sản phẩm xuất cá rô phi chủ yếu dạng phi lê Nên hàng năm, lượng xuất phi lê cá rô phi tăng tương đương với lượng chất thải sinh học (vảy cá, xương cá, nội tạng,…) chúng thải môi trường tăng, làm ảnh hưởng đến mơi trường bên ngồi Việc nghiên cứu tận dụng phế liệu để thu nhận sản phẩm có giá trị gia tăng việc làm có ý nghĩa khoa học thực tiễn cao Do đó, đồ án tốt nghiệp sử dụng vảy cá rô phi làm đối tượng nghiên cứu Trong vảy cá rơ phi ngồi lượng nhỏ collagen, protein, lipid,… có chứa lượng lớn hydroxyapatite Ca10(PO4)6(OH)2 Theo FDA (cục quản lí thực phẩm) cho phép sử dụng hydroxyapatite sản xuất thuốc thực phẩm chức năng; hay chế tạo giả, để sữa chữa khuyết điểm răng; chế tạo mắt giả; chế tạo chi tiết ghép xương sữa chữa khuyến tật xương Như vậy, việc sử dụng nguyên liệu tự nhiên để sản xuất hydroxyapatite trình kinh tế tiềm sinh lợi, tạo triển vọng ứng dụng hydroxyapatite vào lĩnh vực khác như: y học, sinh học, Vì lý nên chọn đề tài: “Nghiên cứu số đặc tính hình thái, cấu trúc hố lý của hydroxyapatite thu nhận từ vảy cá rô phi (Oreochromis niloticus)” Mục tiêu đề tài – Thu nhận hydroxyapatite – Xác đinh số đặc tính dựa phương pháp SEM, TEM, XRD, FTIR, TGA tính chất hóa lý hydroxyapatite Nội dung nghiên cứu – Thu nhận HA từ vảy cá rơ phi (Oreochromis niloticus) – Nghiên cứu đặc tính phương pháp SEM, TEM, XRD, FTIR, TGA – Nghiên cứu độ tan HA môi trường có pH khác Phương pháp nghiên cứu  Thu nhận hydroxyapatite từ vảy cá rô phi (Oreochromis niloticus) phương pháp nung nhiệt độ khác  Xác định đặc tính mẫu HA phương pháp SEM, TEM, XRD, FTIR, TGA  Đánh giá độ tan HA môi trường pH khác phương pháp chuẩn độ Đối tượng nghiên cứu Vảy cá rô phi (Oreochromis niloticus) thu mua sau trình phi lê siêu thị Lotte Mart Nha Trang, phường Phương Sơn, thành phố Nha Trang Sau đó, vảy cá rửa phơi khơ bảo quản nhiệt độ phịng bình hút ẩm cho nghiên cứu sau Tính cấp thiết của đề tài Tại Việt Nam, có nhiều cơng ty sản xuất thủy hải sản nhiều công ty chế biến thủy sản cho sản phẩm cá điển phi lê cá Tra, cá Basa,… thị trường nước quốc gia ưa chuộng Tuy nhiên, trình phi lê cá thải chất thải sinh học dẫn đến bị lãng phí gây ô nhiễm môi trường, có nhiều lợi ích kinh tế biết cách xử lý ứng dụng Do đó, việc tận dụng phế thải sinh học để làm nguồn nguyên liệu thu nhận sản phẩm có giá trị gia tăng cao hydroxyapatite việc làm có ý nghĩa cấp thiết Ngoài ra, hydroxyapatite sử dụng làm thuốc trám răng, xương giả, giả,… Nhất 10 B ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tượng nghiên cứu Nghiên cứu sử dụng phế phẩm vảy cá rô phi (Oreochromis niloticus ), thu mua sau trình phi lê siêu thị Lotte Mart Nha Trang, phường Phương Sơn, thành phố Nha Trang Vảy cá sau thu nhận rửa sạch, phơi khơ Sau bảo quản nhiệt độ phòng 2.2 Dụng cụ, thiết bị hóa chất 2.2.1 Dụng cụ – Bình định mức 100 ml – Chén nung, ống nghiệm – Đũa thủy tinh – Đĩa pettri 40 x 12 mm – Cốc thủy tinh 250 ml dụng cụ khác 2.2.2 Thiết bị – Cân phân tích điện tử – Tủ sấy UNB 400 – Tủ nung – Bình hút ẩm – Máy khuấy từ 2.2.3 Hóa chất – NaOH – HA thương mại – Methanol, chloroform, NaCl – CuSO4 khan – KNaC4H6O6.4H2O khan – EDTA – NaH2PO4, C6H8O7 – HCl, KCl 28 – Murexid 2.3 Phương pháp nghiên cứu 2.3.3 Xác định hàm lượng khoáng phương pháp nung 2.3.3.1 Nguyên tắc Nung cháy hoàn toàn chất hữu Phần cịn lại đem cân tính hàm lượnng khống tồn phần ngun liệu [41] 2.3.3.2 Cách tiến hành Ban đầu, ta sấy cốc nhiệt độ không đổi Cân 1g mẫu HA (thu nhận từ vảy cá rô phi) cho vào chén sứ để nung Nung nhiệt độ thích hợp đến trọng lượng khơng đổi Nung đến mẫu hóa tro, tức loại bỏ hợp chất hữu có vảy Sau đó, cho vào tủ sấy khoảng 30 phút Rồi cho vào bình hút ẩm 10 phút Cuối cân lượng mẫu lại sau nung [41] 2.3.3.3 Kết xác định hàm lượng khoáng 𝑀1 − 𝑀2 X= 𝑀1 −𝑀 x100 (%) Trong đó: X : Hàm lượng khống (%); M1: Khối lượng chén nung mẫu (g); M2: Khối lượng chén nung mẫu sau nung (g); M: Khối lượng chén nung (g) 2.4 Quy trình thu nhận hydroxyapatite từ vảy cá rơ phi 2.4.1 Tiền xử lí ngun liệu 2.4.1.1 Mục đích Loại bỏ protein tạp chất khác vảy cá rô phi để thu mẫu vảy sạch, sẵn có, để phục vụ cho trình thu nhận hydroxyapatite 2.4.1.2 Tiến hành – Vảy cá đem rửa sau phơi khơ, bảo quản nhiệt độ phòng – Khử lipid, protein, hợp chất hữu khác NaOH 29 Quá trình khử protein từ phế liệu thủy sản thực với nhiều hóa chất NaOH, Na2CO3, NaHCO3, KOH,…Tuy nhiên NaOH sử dụng nhiều từ 110%, nghiên cứu sử dụng NaOH 5% (w/v) Để tăng cường trình tách protein hợp chất hữu cơ, cần kết hợp khuấy đảo nhiều Vảy cá sau xử lí, cho vào cốc 250ml Sau cho 100ml dung dịch NaOH 5% (w/v) vào cốc chứa vảy cá Lượng NaOH 5% cho vào đến ngập tràn vảy cá Sau kết hợp khuấy từ, đun nóng 70oC khoảng 5h – Rửa vảy cá loại bỏ protein hợp chất hữu khác nước cất Sau xử lí kiềm 5h, ta tiến hành rửa nước cất nhiều lần đến pH=7 – Sấy mẫu vảy cá loại protein  Bảo quản mẫu bình hút ẩm Hình 2.1 Bảo quản vảy cá (đã loại bỏ protein) sau sấy bình hút ẩm 2.4.2 Thu nhận hydroxyapatite 2.4.2.1 Mục đích – Thu nhận hydroxyapatite 2.4.2.2 Tiến hành Sử dụng tủ nung, tiến hành nung nhiệt độ khác (600, 700, 750, 800, 900, 1000oC) 3h với tốc độ gia nhiệt 5oC/phút 30 Hình 2.2 Mẫu vảy cá xử lý đưa vào tủ nung 31 C KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN Đánh giá hydroxyapatite qua nhiệt độ nung khác 2.1 Hiệu suất thu hồi hydroxyapatite nhiệt độ nung khác phương pháp nung Xương cá sau nung nhiệt độ 600, 700, 750, 800, 900, 1000oC thu HA Sự thay đổi HA thể (Bảng 3.2) Ở 600oC HA có màu xám, chứng tỏ lượng tạp chất hữu cơ, vảy cá nên HA không tinh khiết Điều thể nghiên Muhammad A cộng (2013), cho thấy nung nhiệt độ 500oC600oC hợp chất hữu chưa bị đốt cháy hồn tồn, cịn chứa nhiều protein, collagen,… nên mẫu HA có màu xám nhạt [14] Ở 700750oC HA có màu trắng, loại hết hợp chất hữu cơ, cảm quan thấy độ tinh khiết cao Dựa đánh giá cảm quan hiệu suất thu hồi HA qua nhiệt độ khác nhau, nhận thấy vảy cá nung 750oC 3h với tốc độ gia nhiệt 5oC/phút (Hình 3.1) có tính khả quan mẫu khác 700oC Hình 3.1 Vảy cá sau nung (đã nghiền) 3h với tốc độ gia nhiệt 5oC/phút 2.2 Hiển vi điện tử quét (SEM) của hydroxyapatite nhiệt độ nung khác 32 Mẫu HA đem chụp SEM để xác định hình dạng, kích thước nhiệt độ khác Quan sát SEM, nhiệt độ tổng hợp ảnh hưởng đến kích thước hạt HA Khi tăng nhiệt độ từ 6001000oC, kích thước hạt HA tăng dần Khi nung 600oC, tinh thể hạt chưa xác định rõ, kích thước khơng đều, số hạt HA chưa tách rời khỏi Khi nung từ 700750oC, hạt HA có dạng hình cầu, kích thước hạt dao động khoảng 60100nm, hạt HA bắt đầu tách rời khỏi Khi nung khoảng 8001000oC, HA có dạng hình cầu rõ rệt, có kích thước lớn, dần kết dính với Do đó, khoảng nhiệt độ để thu nhận HA từ vảy cá rơ phi thích hợp dao động từ 700750oC, khoảng nhiệt độ này, hạt có kích thước nhỏ hình dạng xác định rõ Kết chụp kính hiển vi điện tử quét (SEM) Phân tích SEM, phương pháp đơn giản, cho biết hình dạng, kích thước hạt cách nhanh chóng Dựa vào kết SEM, hạt HA thu từ vảy cá rô phi có dạng hình cầu, kích thước dao động khoảng 60100nm; hạt tách rời khỏi (Hình 3.5) Đối với ảnh chụp SEM mẫu HA tổng hợp thương mại (Hình 3.6), hạt HA có hình cầu, kích thước hạt dao động khoảng 5090nm thước đo 500nm hạt tách rời khỏi Mặc khác, nghiên cứu Weeraphat PonOn cộng (2016) (Hình 3.7), thu nhận hạt HA từ vảy cá nước ngọt, kích thước hạt thu dao động khoảng 50100nm, hạt hình cầu dần tách rời khỏi [20] 33 Hình 3.2 Ảnh chụp SEM HA thu nhận từ vảy cá Từ kết luận, mẫu HA thu từ vảy cá rơ phi có kích thước gần giống với HA thương mại (Sigma Aldrich, Mỹ) Kết chụp hiển vi điện tử truyền qua (TEM) Phân tích ảnh chụp TEM cho thấy kích thước hạt hình dạng cấu trúc bên vật liệu (Hình 3.8) Với mẫu HA thu nhận từ vảy cá rơ phi ảnh chụp TEM cho thấy kích thước hạt dao động khoảng 60100nm ( gần giống kích thước hạt xác định phương pháp SEM) Hạt HA thu từ vảy cá rơ phi có cấu trúc Từ được, HA thu nhận từ vảy cá rơ phi với HA thương mại (Sigma Aldrich) có tính tương đồng cao Kết phân tích phổ hồng ngoại (FTIR) Phổ FTIR cho thấy diện ion photphat (PO43−), hydroxyl (OH−) carbonate (CO32−) HA thu nhận từ vảy cá rô phi Tại vị trí có số sóng thuộc khoảng 20002400cm1, vùng hấp thụ CO2, bên cạnh vùng có số sóng thuộc khoảng 1400−1600cm−1, với tín hiệu yếu đặc trưng cho dao động giãn bất đối xứng nhóm CO32− Sự xuất peak CO32− CO2 khơng khí chuyển thành ion CO32− trình loại protein lipid dung dịch kiềm Ở mẫu HA thương mại có tín hiệu CO32− Khi so sánh vởi phổ FTIR HA ta thấy tín hiệu thu gần giống Chứng tỏ có độ tinh khiết tương đối cao 34 Hình 3.3 Phổ FTIR vảy cá (Labeo rohita) Kết phân tích nhiễu xạ tia X (XRD) Quan sát phổ XRD HA từ vảy cá rô phi (Hình 3.14 a) thấy có tín hiệu đặc trưng tinh thể HA theo nghiên cứu Yung Mo Sung cộng (năm 2003) (Hình 3.13) vị trí 002, 210, 211, 112, 300, 202, 310, 321, 410, 004 Khi so sánh phổ XRD HA từ vảy cá rô phi với HA thương mại (Sigma Aldrich, Mỹ) (Hình 3.14) nhận tương đồng cao, xuất tín hiệu đặc trưng 002, 210, 211, 112, 300, 202, 310, 321, 410, 004 Điều chứng tỏ nghiên cứu tổng hợp thành công tinh thể HA từ vảy cá rô phi Tuy nhiên, bên cạnh đó, xuất số tín hiệu liên quan đến βTCP vị trí 125, 0210, 0410 Do đó, mẫu HA thu nhận từ vảy cá rơ phi chưa đơn pha có lẫn βTCP với lượng thấp Như vậy, theo nghiên cứu 35 trước công bố 8001200oC, HA dễ bị phân hủy thành dạng, nghiên cứu 750oC bắt đầu có xuất βTCP Do đó, mẫu HA thu nhận từ vảy cá rơ phi có độ tinh khiết tương đối, chưa hồn tồn đơn pha có lẫn βTCP với lượng thấp  Xác định kích thước trung bình của tinh thể HA thu nhận từ vảy cá rơ phi phương trình Scherrer (Mục 3.3.4.1) + Trong phổ XRD HA thu nhận từ vảy vá rơ phi (Hình 3.14 a), vị trí 2 =31,768; Kích thước trung bình tinh thể thu 0,060nm + Dựa vào cơng thức làm tương tự HA thương mại (Hình 3.14 b), vị trí 2=31,691; ta suy kích thước tinh thể trung bình mà HA (Sigma Aldrich) thu 0,03nm  Xác định cấu trúc của HA thu nhận từ vảy cá rơ phi Có thể thấy HA thu nhận từ vảy cá rơ phi có kích thước đơn vị với a=b= 9,384Ao (9,44) c= 6,88Ao Kết tương tự nghiên cứu XRD có cấu trúc lục phương với kích thước đơn vị a=b=9,43Ao, c=6,88Ao Một số nghiên cứu trước cấu trúc mạng tinh thể HA gồm ion Ca2+, PO43 OH xếp theo dạng hình lục phương kích thước tế bào Cấu trúc ô đơn vị HA hiển thị đây: Kết phân tích nhiệt trọng lượng (TGA) Dựa kết phân tích nhiệt HA thu nhận từ vảy cá rô phi cho thấy xuất hai điểm uốn Tại điểm uốn có nhiệt độ 300oC bay nước trình gia nhiệt Tại điểm uốn có nhiệt độ 500oC, loại bỏ phần hợp chất hữu có mẫu Từ khoảng nhiệt độ 600800oC khơng có thay đổi khối lượng Kết thu gần giống với tài liệu HA thường đối bền với Mặc khác, so sánh nghiên cứu với kết nghiên cứu trước tổng hợp HA phương pháp siêu âm Trong khoảng nhiệt độ 2, giảm đến 5% khối lượng q trình nước Sau giảm nhẹ khoảng nhiệt độ 36 Nhưng nghiên cứu này, so sánh mẫu HA (thu nhận từ vảy cá rô phi) với HA thương mại (Sigma Aldrich), kết thu khoảng nhiệt độ mà HA không thay đổi khối lượng hạn chế so với HA thương mại (Sigma Aldrich) Hình 3.4 Kết phân tích TGA HA tổng hợp phương pháp siêu âm [44] Kết xác định độ tan của hydroxyapatite dung dịch có pH từ 17 Khi cho bột HA (thu nhận từ vảy cá rơ phi) vào dung dịch có pH từ 17, kết quan sát bảng sau (Bảng 3.5): Cảm quan cho HA vào dung dịch có pH khác từ 17 Ở dung dịch có pH=1 pH=2, HA tan hồn tồn, nên dùng phương pháp chuẩn độ để chuẩn độ Ca2+ Các dung dịch có pH từ 37, đục, khơng tan, cho murexid vào chuyển sang màu tím Có thể ảnh hưởng mơi trường pH dung dịch, nên cho murexid vào chuyển màu, khoảng giới hạn chuyển màu murexid [40]: 37 pH < Chỉ thị có màu đỏ tím < pH < 11 Chỉ thị có màu tím pH > 11 Chỉ thị có màu xanh tím Tiến hành chuẩn độ EDTA với thuốc thử murexid dung dịch có pH=17, thu sau (Bảng 3.6): Tại pH=1 pH=2, HA (thu nhận từ vảy cá rơ phi) tan, nên dùng phương pháp chuẩn độ để xác định nồng độ Ca2+ Tại pH= 3-7, HA đục tan không tốt dẫn đến việc sử dụng phương pháp chuẩn độ không đủ nhạy để xác định nồng độ Ca2+ Vì độ tan thấp Dựa kết phân tích trên, tiến hành xác định độ tan HA (thu nhận từ vảy cá rô phi), HA thương mại (Aldrich Sigma) môi trường có pH=1 pH=2 Từ kết cho thấy HA (thu nhận từ vảy cá rô phi) HA thương mại (Sigma Aldrich) có độ tan gần tương tự môi trường pH=1 Từ kết cho thấy HA (thu nhận từ vảy cá rơ phi) có độ tan so với HA thương mại (Sigma Aldrich) có mơi trường pH D KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận  Đã thu nhận hydroxyapatite từ vảy cá rô phi phương pháp nung với độ tinh khiết cao xác định số đặc tính hình thái, cấu trúc hoá lý HA dựa phương pháp SEM, TEM, XRD, FTIR, TGA  Đã xác định độ tan HA mơi trường có pH khác tương ứng với pH=1 pH=2 Ở pH=37 cảm quan cho thấy HA không tan phương pháp chuẩn độ ko đủ độ nhạy để xác định xác độ tan HA 38 Kiến nghị  Khảo sát khả thêm hấp phụ hydroxyapatite thu nhận từ vảy cá rô phi với số kim loại nặng khác như: Cu(II), Pb(II), 39 E TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng việt Huỳnh Ngọc Nê, Nguyễn Việt Bách (2014), “Tổng hợp bột HA từ vỏ sị thử nghiệm hoạt tính hấp phụ với ion Cu(II)” Luận văn chuyên đề tốt nghiệp, Đại học Cần Thơ Vũ Duy Hiển, Đào Quốc Hương (2012), “Nghiên cứu chế tao gốm xốp HA từ khung xốp tự nhiên mai mực phản ứng thủy nhiệt” Viện hóa học, viện khoa học cơng nghệ Việt Nam Đào Quốc Hương, Dương Thùy Linh (2012), “ Nghiên cứu ảnh hưởng dung môi ethanol đến hình thành calcium hydroxyapatite từ calcium nitrate” Viện hóa học, viện khoa học cơng nghệ Việt Nam Đào Quốc Hương, Phạm Thị Sao (2010), “Nghiên cứu chế tạo gốm xốp HA từ đá vôi phương pháp phản ứng thủy nhiệt” Tạp chí khoa học cơng nghệ, T.49, S2 Lê Hồ Khánh Hỷ công (2018), “Một số đặc tính canxyhidroxyapatite chiết xuất từ xương cá ngừ vằn Katsuwonus pelamis” Tạp chí khoa học công nghệ biển, T18, Số 4A Nguyễn Văn Hường (2011), “Khảo sát trình tách số đặc trưng HA từ xương động vật” Luận văn thạc sĩ 41 Giáo trình phân tích thực phẩm trường Đại học Nha Trang 42 Giáo trình hóa phân tích trường Đại học Nha Trang 43 Tiêu chuẩn Việt Nam lipid protein có thực phẩm, dược phẩm, QCVN 11-4:2012/BYT Tài liệu tiếng anh Mehdi SadatShojai, MohammadTaghi Khorasani, Ehsan DinpanahKhoshdargi, Ahmad Jamshidi (2013), “Synthesis methods for nanosized hydroxyapatite in diverse structures” 40 Yadong Chai, Motohiro Tagaya (2018), “Simple preparation of hydroxyapatite nanostructures derived from fish scales” Materials Letters, P 156-159 Ayachandran Venkatesan, Zhong Ji Qian, BoMi Ryu, Noel Vinay Thomas and SeKwonKim (2011), “ A comparative study of thermal calcination and an alkaline hydrolysis method in the isolation of hydroxyapatite from Thunnus obesus bone” Biomedical materials 10 K Sockalingam, M Yahya and H Abdullah (2015), “Prepation of HA from Tilapia scales” Advanced materials research, P.33-34 11 Muhammad Akram, Rashid Ahmed, Imran Shakir, Wan Aini Wan Ibrahim, Rafaqat Hussain (2013), “Extracting hydroxyapatite and its precursors from natural resources” Journal of Materials Science 12 Tran Thi Hoang Quyen, Luu Bich Han, Hoang Ngoc Cuong, Nguyen Cong Tuan, Phan Van Vang (2018), “Preparation of nanosize hydroxyapatite from enzymetreated bones of Tilapia (Oreochromis niloticus)” 13 Nguyen Le Ba Quang, Nguyen Van Hoa, Pham Viet Nam, Pham Anh Dat (2018), “Preparation and properties of nanohydroxyapatite from fish bones” 14 Weeraphat Pon-On (2013), “Hydroxyapatite from fish scale for potential use as bone scaffold or regenerative material”, Journal of Crystal Tài liệu internet 23 https://www.chromspheres.com/nano-hydroxyapatite-powder/ 24 https://sofsera.co.jp/english/tech1_e.html 25 http://electronicstructure.wikidot.com/cation-substitutions-inhydroxyapatite?fbclid=IwAR2E7xhIWc_1PKEDPilR0GaNZG0mxwez_i8xDhXiN d0lxz2o7MkWM3Zt0go 26 http://luanvan.co/luan-van/nghien-cuu-cac-yeu-to-anh-huong-den-bothydroxyapatit-ca10po46oh2-kich-thuoc-nano-dieu-che-tu-canxi-hydroxit-caoh2268/ 27 https://vi.wikipedia.org/wiki/C%C3%A1_r%C3%B4_phi_%C4%91en 41 28 https://123doc.org/document/3008206-dung-cu-quang-pho-va-phuong-phapquang-pho-kinh-hien-vi-dien-tu-quet-sem.htm 29 https://hackaday.io/project/21831-3d-printed-scanning-electronmicroscope?fbclid=IwAR3GGvDqsLbyVpv2LhM4M7dsyDufGTk_3nNZLHIPazn 4ZxO8PWRj1naxIIo 30.http://mientayvn.com/Cao%20hoc%20quang%20dien%20tu/Semina%20tren%2 0lop/Phat_xa_dien_tu/Cac_ung_dung_cua_phat_xa_dien_tu_1.pdf 31.http://www.nanoscience.gatech.edu/zlwang/research/tem.html?fbclid=IwAR23R Gbf8YfDWPoun11Rg-1S_eClSPSsn8r6-zGBhVIhm4lJ9pAgcwX9PDg 32 https://myscope.training/legacy/tem/introduction/ 33 https://issuu.com/daykemquynhonofficial/docs/bxtxnxtxxrdhqtxxrftqudvcs 34 http://fce.iuh.edu.vn/wp-content/uploads/2017/04/Seminar-XRD_26_1_2016full.pdf 35 https://issuu.com/daykemquynhonofficial/docs/cpppnxdcthchclhd/16 36 https://www.slideshare.net/8s0nc1/phng-php-phn-tch-hay-truy-cap-vao-trangwwwmientayvncom-de-tai-them-nhieu-tai-lieu-khac 37 http://dulieu.tailieuhoctap.vn/books/khoa-hoc-ky-thuat/nhiet-dienlanh/file_goc_779291.pdf?fbclid=IwAR02IXC1c9ZwpTa30KJDoXozZnXcsRzz0X Ln6KM5VA0FdsgtZrSgiBBWNJc 38 https://nptel.ac.in/courses/115103030/module4/lec23/3.html 39 https://www.cmc-concrete.com/thermal-analysis 40.http://luanvan.net.vn/luan-van/do-an-phuong-phap-chuan-do-complexon-va-ungdung-72453/ 42 ... TGA tính chất hóa lý hydroxyapatite Nội dung nghiên cứu – Thu nhận HA từ vảy cá rô phi (Oreochromis niloticus) – Nghiên cứu đặc tính phương pháp SEM, TEM, XRD, FTIR, TGA – Nghiên cứu độ tan HA... Mẫu vảy cá xử lý đưa vào tủ nung 31 Hình 3.1 Vảy cá sau nung (đã nghiền) 3h với tốc độ gia nhiệt 5oC/phút 32 Hình 3.2 Ảnh chụp SEM HA thu nhận từ vảy cá 34 Hình 3.3 Phổ FTIR vảy cá. .. nước ngọt, kích thước hạt thu dao động khoảng 50100nm, hạt hình cầu dần tách rời khỏi [20] 33 Hình 3.2 Ảnh chụp SEM HA thu nhận từ vảy cá Từ kết luận, mẫu HA thu từ vảy cá rô phi có kích thước gần