Đang tải... (xem toàn văn)
Bài viết trình bày kết quả so sánh đáp ứng miễn dịch của hai loại vacxin cúm gia cầm trên gà ác tại tỉnh Tiền Giang cho thấy, vacxin H5N1 Re-6 có khả năng tạo đáp ứng miễn dịch nhanh và thời gian miễn dịch kéo dài hơn so với Navet-Vifluvac.
KHOA HỌC KỸ THUẬT THÚ Y TẬP XXV SỐ - 2018 SO SÁNH ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH ĐỐI VỚI HAI LOẠI VACXIN CÚM GIA CẦM TRÊN GÀ ÁC TẠI TỈNH TIỀN GIANG Trần Ngọc Bích1, Nguyễn Lê Minh Phú2, Nguyễn Văn Khanh3, Thái Quốc Hiếu4 TÓM TẮT Kết khảo sát đáp ứng miễn dịch hai loại vacxin cúm A H5N1 gà ác (Gallus gallus domesticus brisson) tỉnh Tiền Giang phản ứng ức chế ngưng kết hồng cầu (HI) cho thấy: Kháng thể thụ động virus cúm gia cầm gà ác nghiệm thức (vacxin H5N1 Re-6) 60% gà ngày tuổi 40% 14 ngày tuổi; nghiệm thức (Navet-Vifluvac) tỷ lệ 65% gà ngày tuổi 50% 14 ngày tuổi Tỷ lệ bảo hộ sau tháng tiêm phòng vacxin cúm gia cầm gà ác: Ở nghiệm thức (vacxin H5N1 Re-6) 16% gà 30 ngày tuổi 65% 60 ngày tuổi, 85% 90 ngày tuổi, 85% 120 ngày tuổi, 75% 150 ngày tuổi 65% 180 ngày tuổi; Ở nghiệm thức (vacxin Navet-Vifluvac) tỷ lệ 25% gà 30 ngày tuổi 85% 60 ngày tuổi, 95% 90 ngày tuổi, 85 % 120 ngày tuổi, 80% 150 ngày tuổi 55% 180 ngày tuổi Kết so sánh đáp ứng miễn dịch hai loại vacxin cúm gia cầm gà ác tỉnh Tiền Giang cho thấy, vacxin H5N1 Re-6 có khả tạo đáp ứng miễn dịch nhanh thời gian miễn dịch kéo dài so với Navet-Vifluvac Từ khóa: H5N1, virus cúm gia cầm, vacxin, đáp ứng miễn dịch, gà ác, tỉnh Tiền Giang Survey on immune response of black chicken vaccinated by H5N1 Re-6 and Navet-Vifluvac vaccines in Tien Giang province Tran Ngoc Bich, Nguyen Le Minh Phu, Nguyen Van Khanh, Thai Quoc Hieu SUMMARY A study on immune response of black chicken (Gallus gallus domesticus brisson) vaccinated by H5N1 Re-6 and Navet-Vifluvac vaccines in Tien Giang province was conducted through Hemagglutination Inhibition test using experimental black chicken serum samples The studied result showed that the protective rate of passive antibodies in one-day old chicken in the treatment (H5N1 Re-6 vaccine) and the treatment (Navet-Vifluvac) was 60% and 65% respectively The protective rate of passive antibodies of the chickens at 14 days old chicken in the treatment and treatment was 40% and 50% respectively The protective rate of the black chickens after one month vaccinating H5N1 Re-6 vaccine Đại học Cần Thơ Trung tâm dạy nghề Chợ Gạo - Tiền Giang Đại học Nông Lâm Tp HCM Chi cục Chăn nuôi Thú y Tiền Giang KHOA HỌC KỸ THUẬT THÚ Y TẬP XXV SỐ - 2018 in the treatment for the chickens at 30 days old, 60 days old, 90 days old , 120 days old, 150 days old and 180 days old was 16%, 65%, 85%, 85%, 75% and 65% respectively Similarly in the treatment 2, after one month vaccinating Navet-Vifluvac vaccine, the protective rate of the chickens at 30 days old, 60 days old, 90 days old, 120 days old, 150 days old and 180 days old was 25%, 85%, 95%, 85%, 80% and 55% respectively The studied results showed that the ability of chickens in creating immune response after vaccinating H5N1 Re-6 vaccine was faster and higher than that of Navet-Vifluvac vaccine Keywords: H5N1, Avian influenza virus, vaccine, immune response, black chicken, Tien Giang province I ĐẶT VẤN ĐỀ Cúm gia cầm bệnh truyền nhiễm cấp tính gia cầm virus cúm thuộc chi fluenzavirus type A, họ Orthomyxoviridae gây Họ Orthomyxoviridae bao gồm nhóm virus, nhóm virus cúm type A gây bệnh phổ biến quan trọng cho nhiều loài gia cầm nhiều lồi động vật có vú khác Dịch cúm gia cầm xuất từ cuối tháng 12/2003 trại gà giống cơng ty CP đóng xã Thủy Xn Tiên, huyện Chương Mỹ, tỉnh Hà Tây Cùng thời gian này, dịch xảy hai tỉnh Tiền Giang Long An, sau đó, dịch lan tất huyện hai tỉnh này, đồng thời lây lan nhanh sang tỉnh An Giang, Vĩnh Long, Bến Tre, Đồng Tháp Cần Thơ (Văn Đăng Kỳ, 2008) Gà ác hay gọi là ơ cốt kê, ơ kê, có tên khác là gà đen, gà chân chì, gà ngũ trảo (Gallus gallus domesticus brisson) giống gà quý thuộc họ trĩ với đặc điểm đặc trưng toàn thân chân màu đen có thịt bổ dưỡng, thường chế biến thành ăn gà ác tần bổ dưỡng Nét đặc trưng gà ác thịt đen, xương đen lông trắng Tỉnh Tiền Giang tỉnh có đàn gia cầm lớn vùng đồng sông Cửu Long với tổng đàn gia cầm dao động khoảng 6,5 đến 7,5 triệu con, gà chiếm 80% (Cục Thống kê Tiền Giang, 2016) Ngoài vịt giống gà nuôi, giống gà ác đối tượng nuôi quan tâm Tiền Giang Năm 2014, tổng đàn gà ác tỉnh khoảng triệu con, tập trung chủ yếu huyện Chợ Gạo, vùng đất có điều kiện tự nhiên, thổ nhưỡng phù hợp cho việc sinh trưởng phát triển gà ác (Lê Minh Khánh, Sở NNPTNT Tiền Giang) Việc sử dụng vacxin cúm A H5N1 để tiêm phòng cho đàn gia cầm góp phần quan trọng vào cơng tác phòng, chống dịch cúm Vacxin H5N1 Re-6 (Trung Quốc) Navet-Vifluvac (Công ty Navetco - Việt Nam) Cục Thú y khuyến cáo sử dụng tỉnh đồng sông Cửu Long từ năm 2014 Để so sánh đáp ứng miễn dịch khả bảo hộ vacxin NavetVifluvac H5N1 Re-6 gà ác (gà Ri) điều kiện chăn nuôi tỉnh Tiền Giang, tiến hành thực đề tài “So sánh đáp ứng miễn dịch loại vacxin cúm gia cầm gà ác tỉnh Tiền Giang” II VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Số gà dùng thí nghiệm 500 gà ác ngày tuổi xuất phát từ đàn bố mẹ tiêm phòng quy trình Thời gian ni từ ngày tuổi đến 180 ngày tuổi Thức ăn sử dụng thí nghiệm thức ăn hỗn hợp cơng ty Emivest, dùng loại thích hợp theo lứa tuổi gà Thí nghiệm bố trí theo thể thức hồn tồn ngẫu nhiên với hai nghiệm thức để so sánh khả đáp ứng miễn dịch gà ác với loại vacxin KHOA HỌC KỸ THUẬT THÚ Y TẬP XXV SỐ - 2018 Nghiệm thức 1: sử dụng vacxin cúm gia cầm H5N1 Re-6 (vacxin A) với quy trình tiêm phòng lần, liều 0,3 ml/con lúc 15 ngày tuổi cầm Navet-Vifluvac (vacxin B) với quy trình lần, liều 0,5 ml/con lúc 15 ngày tuổi Đây quy trình tiêm phòng cúm gia cầm H5N1 cơng ty sản xuất vacxin khuyến cáo sử dụng Nghiệm thức 2: sử dụng vacxin cúm gia Bảng Bố trí lấy mẫu huyết gà ác trước sau tiêm phòng vacxin Thời điểm lấy mẫu (ngày tuổi) Nghiệm thức Trước tiêm phòng Sau tiêm phòng 14 30 60 90 120 150 180 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 Tổng 40 40 40 40 40 40 40 40 Chỉ tiêu theo dõi: Hiệu giá kháng thể đàn gà ác Tiêu chí đánh giá: Hiệu giá HI≥1/16 (4log2) coi hiệu giá bảo hộ cá thể gia cầm, đàn gia cầm bảo hộ đàn có ≥70% số cá thể có hiệu giá HI≥1/16 (4log2) (Cục Thú y, 2005) Mẫu huyết lấy lúc 14 ngày tuổi với 80 mẫu để kiểm tra kháng thể thụ động từ gà mẹ truyền nghiệm thức Gà tiêm phòng mũi vacxin cúm H5N1 vào lúc 15 ngày tuổi lấy máu vào thời điểm 30, 60, 90, 120, 150 180 ngày tuổi với tổng số mẫu 240 mẫu Các mẫu máu chắt lấy huyết để kiểm tra khả đáp ứng miễn dịch gà ác sau tiêm phòng vacxin cúm A/H5N1 Dụng cụ lấy mẫu huyết thanh: ống tiêm vô trùng loại 3ml, bông, cồn 700, găng tay, trang, kính bảo hộ chống đơng (Alsever`s solution), PBS, nước muối sinh lý Quy trình phát kháng thể cúm gia cầm: phản ứng ức chế ngưng kết hồng cầu - Hemagglutination Inhibition - HI (Cục Thú y, 2009) Xử lý số liệu Số liệu thô tổng hợp xử lý phần mềm Excel, sau xử lý thống kê phần mềm Minitab 13 Dùng trắc nghiệm χ2 (chi- square) để so sánh tỷ lệ bảo hộ tỷ lệ dương tính Hiệu giá kháng thể trung bình hình học đối log2 trung bình mã hóa GMT tính kể từ mẫu có hiệu giá ≥ log2 (Cục Thú y, 2005) GMT = X1*4 + X2*5 +X3*6 + X4*7 + X5*8 + X6*9 X Cách lấy huyết thanh: máu thu thập từ tim, mỗi 0,5 ml máu lúc gà từ đến 14 ngày tuổi từ tĩnh mạch cánh lúc gà 30, 60, 90, 120, 150 180 ngày tuổi, sau tách huyết để xét nghiệm kháng thể Trong đó: X1 số mẫu có hiệu giá 4log2 Nguyên liệu dùng xét nghiệm: Kháng nguyên cúm gia cầm vô hoạt H5N1 (Veterinary Laboratories Agency, Weybridge, United Kingdom), hồng cầu gà 0,5%, dung dịch X5 số mẫu có hiệu giá 8log2 X2 số mẫu có hiệu giá 5log2 X3 số mẫu có hiệu giá 6log2 X4 số mẫu có hiệu giá 7log2 X6 số mẫu có hiệu giá 9log2 X tổng số mẫu khảo sát KHOA HỌC KỸ THUẬT THÚ Y TẬP XXV SỐ - 2018 III KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN hai thời điểm ngày tuổi 14 ngày tuổi Toàn mẫu huyết xét nghiệm phản ứng ngăn trở ngưng kết hồng cầu (HI) Đây phương pháp xét nghiệm có độ tin cậy cao sử dụng phổ biến Việt Nam để xác định hiệu giá kháng thể gia cầm tiêm phòng (Cục Thú y, 2005) 3.1 Kháng thể thụ động gà ác hai nghiệm thức trước tiêm phòng Để đánh giá hàm lượng kháng thể thụ động chống virus cúm gia cầm H5N1 từ gà mẹ truyền sang gà trước tổ chức tiêm phòng, chúng tơi tiến hành lấy huyết gà Kết trình bày qua bảng Bảng Hiệu giá kháng thể gà ác lúc 14 ngày tuổi HGKT HI Nghiệm thức Ngày tuổi Số mẫu huyết < 1/8 1/8 1/16 1/32 1/64 GMT (log2) Số mẫu ≥ 1/16 Tỷ lệ bảo hộ (%) 1 20 3 2,85 12 60 20 4 3,2 13 65 14 20 10 0 1,6 40 14 20 8 2,2 10 50 Ghi chú: HGKT: Hiệu giá kháng thể, GMT: Hiệu giá kháng thể trung bình Nghiệm thức 1: sử dụng vacxin cúm gia cầm H5N1 Re-6 với quy trình tiêm phòng lần, liều 0,3 ml/ lúc 15 ngày tuổi Nghiệm thức 2: sử dụng vacxin cúm gia cầm Navet-Vifluvac với quy trình lần, liều 0,5 ml/con lúc 15 ngày tuổi Theo Công văn số 487/TY-DT ngày 1/4/2009 Cục Thú y, phương pháp ngăn trở ngưng kết hồng cầu (HI), hiệu giá HI ≥1/16 (4log 2) coi hiệu giá bảo hộ cá thể gia cầm; đàn gia cầm bảo hộ đàn có ≥ 70% số cá thể có hiệu giá HI ≥1/16 (4log 2) Kết từ bảng cho thấy, gà ác đưa vào nghiệm thức có tỷ lệ bảo hộ bình quân 60% ngày tuổi thứ 40% ngày tuổi thứ 14 Như vậy, gà ác có kháng thể kháng virus cúm thụ động từ gà ác mẹ truyền sang, kháng thể thụ động giảm dần theo thời gian Điều phù hợp với nhận định Simon M Shane (1997), kháng thể thụ động bảo hộ đàn gia cầm tiếp xúc với số mầm bệnh sau nở tới tuần tuổi Các kháng thể từ gia cầm mẹ truyền lưu hành máu tăng từ ngày thứ đến ngày thứ lòng đỏ trứng hấp thu 3.2 Đáp ứng miễn dịch gà ác sau tiêm phòng với hai loại vacxin cúm gia cầm H5N1 Theo quy trình tiêm phòng nhà sản xuất, chúng tơi tiến hành tiêm phòng loại vacxin cúm gia cầm đàn gà ác lúc 15 ngày tuổi hai nghiệm thức Sau tiến hành lấy máu xét nghiệm để xác định hiệu giá kháng thể kháng virus cúm gia cầm lúc gà ác 30, 60, 90, 120, 150 180 ngày tuổi Kết trình bày qua bảng biểu đồ Qua bảng biểu đồ 1, nhận thấy: 30 ngày tuổi, sau 15 ngày tiêm phòng vacxin cúm gia cầm, số mẫu phát kháng thể >1/16 nghiệm thức 5/20 (25%) với GMT 1,55log2, cao so với nghiệm thức 3/20 (15%) với GMT 0,9log2 Tuy nhiên khác biệt hai nghiệm thức khơng có ý nghĩa thống kê (p>0,05) Số mẫu phát kháng thể >1/16 sau 15 ngày gà ác tiêm phòng vacxin cúm gia cầm KHOA HỌC KỸ THUẬT THÚ Y TẬP XXV SỐ - 2018 Bảng Hiệu giá kháng thể gà ác lúc 30, 60, 90, 150 180 ngày tuổi HGKT HI Nghiệm thức Ngày tuổi Số mẫu huyết 0,05) Theo Tô Long Thành (2007), tuổi, liều tiêm, đường cấp thuốc, chất bổ trợ loại vacxin ảnh hưởng đến khả đáp ứng miễn dịch, mà cụ thể loại vacxin cúm gia cầm H5N1 công ty khác Ở 90 ngày tuổi, số mẫu bảo hộ hiệu giá kháng thể trung bình (GMT) nghiệm KHOA HỌC KỸ THUẬT THÚ Y TẬP XXV SỐ - 2018 thức tăng, nhiên nghiệm thức 17/20 (85%) với GMT 5,85log2, thấp so với nghiệm thức 19/20 (95%) với GMT 5,15 log2 Tuy nhiên khác biệt hai nghiệm thức khơng có ý nghĩa thống kê (p>0,05) Kết cho thấy, khả tạo kháng thể gà ác sau tiêm phòng vacxin A ổn định thời gian dài từ 60 đến 90 ngày tuổi; đó, khả tạo kháng thể gà ác sau tiêm phòng vacxin B từ 65% gà 60 ngày tuổi tăng vọt lên 95% gà 90 ngày tuổi Với tỷ lệ bảo hộ (>70%), đàn gà hai nghiệm thức bảo hộ virus cúm Cả hai loại vacxin thí nghiệm cho tỷ lệ bảo hộ không khác biệt gà ác thời điểm nghiên cứu Sau 120 ngày tuổi, nhận thấy tỷ lệ bảo hộ hiệu giá kháng thể trung bình (GMT) bắt đầu giảm dần đến giai đoạn 180 ngày tuổi tỷ lệ bảo hộ nghiệm thức mức 70%, cụ thể nghiệm thức 13/20 (65%) với GMT 4,15 log2, nghiệm thức 11/20 (55%) với GMT 3,05 log2 Như vậy, thời điểm này, đàn gà hai nghiệm thức có tỷ lệ bảo hộ thấp (