` ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC -  - HOÀNG THỊ THAO NGHIÊN CỨU QUAN HỆ DI TRUYỀN CỦA MỘT SỐ GIỐNG ĐẬU XANH [Vigna radiata (L.) Wilczek] LUẬN VĂN THẠC SĨ CÔNG NGHỆ SINH HỌC THÁI NGUYÊN – 2010 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC -  - HOÀNG THỊ THAO NGHIÊN CỨU QUAN HỆ DI TRUYỀN CỦA MỘT SỐ GIỐNG ĐẬU XANH [Vigna radiata (L.) Wilczek] Chuyên ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Mã số: 60 42 80 LUẬN VĂN THẠC SĨ CÔNG NGHỆ SINH HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: TS NGUYỄN VŨ THANH THANH THÁI NGUYÊN - 2010 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi Các số liệu, kết nêu luận văn trung thực chưa công bố cơng trình khác Thái Ngun, ngày 26 tháng 10 năm 2010 Tác giả luận văn Hoàng Thị Thao Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên i LỜI CẢM ƠN Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới TS Nguyễn Vũ Thanh Thanh Đại học Khoa học - Đại học Thái Nguyên tận tình hướng dẫn tạo điều kiện giúp đỡ tơi hồn thành luận văn Tơi xin chân thành cảm ơn PGS TS Chu Hoàng Mậu tài trợ phần kinh phí tạo điều kiện để tơi hồn thành kết luận văn Tôi xin chân thành cảm ơn TS Lê Văn Sơn, ThS Đỗ Tiến Phát- Phòng Cơng nghệ tế bào thực vật - Viện Cơng nghệ Sinh học hết lòng giúp đỡ tơi hồn thành luận văn Tơi xin chân thành cảm ơn giúp đỡ kỹ thuật viên phòng thí nghiệm sinh học – Khoa khoa học sống - Trường Đại học Khoa học Đại học Thái Nguyên Bộ môn Sinh học phân tử, Công nghệ gen - Viện Khoa học Sự sống - Đại học Thái Nguyên Qua đây, xin cảm ơn Bộ môn Hệ thống canh tác - Viện nghiên cứu Ngô cung cấp số giống đậu xanh giúp tơi thực luận văn Cuối cùng, xin bày tỏ lời cảm ơn đến gia đình, bạn bè nhiệt tình ủng hộ động viên tơi suốt q trình thực luận văn Cơng trình thực với tài trợ kinh phí dự án TRIG Tác giả xin chân thành cảm ơn giúp đỡ quý báu Tác giả luận văn Hồng Thị Thao Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên ii MỤC LỤC Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Những chữ viết tắt vi Danh mục bảng vii Danh mục hình viii MỞ ĐẦU Chƣơng 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1.CÂY ĐẬU XANH 1.1.1 Nguồn gốc phân loại đậu xanh 1.1.2 Đặc điểm nông sinh học đậu xanh 1.1.3 Tầm quan trọng đậu xanh 1.1.4 Đặc điểm hoá sinh hạt đậu xanh 1.1.4.1 Protein 1.1.4.2 Lipid 1.2 NGHIÊN CỨU QUAN HỆ DI TRUYỀN Ở THỰC VẬT 1.2.1 Một số phương pháp sinh học phân tử phân tích quan hệ di truyền thực vật 1.2.1.1 Kỹ thuật RAPD 1.2.1.2 Kỹ thuật AFLP 12 1.2.1.3 Kỹ thuật RFLP 12 1.2.1.4 Kĩ thuật SSR 13 1.2.1.5 Bản đồ QTL 14 1.2.2 Nghiên cứu quan hệ di truyền thực vật sử dụng kỹ thuật RAPD 14 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên 1.2.3 Nghiên cứu quan hệ di truyền đậu xanh sử dụng kỹ thuật RAPD 19 1.3 NHẬN XÉT CHUNG 21 Chƣơng 2: VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 22 2.1 VẬT LIỆU NGHIÊN CỨU 22 2.1.1 Vật liệu thực vật 22 2.1.2 Hoá chất thiết bị 24 2.1.3 Địa điểm nghiên cứu 24 2.2 PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 24 2.2.1 Phương pháp hoá sinh 24 2.2.1.1 Định lượng lipid tổng số 24 2.2.1.2 Định lượng protein 25 2.2.2 Phương pháp sinh học phân tử 27 2.2.2.1 Phương pháp tách chiết DNA tổng số 27 2.2.2.2 Phương pháp xác định hàm lượng độ tinh DNA tổng số 28 2.2.2.3 Phương pháp RAPD 29 2.2.2.4 Phân tích số liệu RAPD 31 2.2.3 Phương pháp xử lý kết số liệu 31 Chƣơng 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 32 3.1 ĐẶC ĐIỂM HÌNH THÁI, HỐ SINH HẠT CỦA CÁC GIỐNG ĐẬU XANH NGHIÊN CỨU 32 3.1.1 Đặc điểm hình thái khối lượng 1000 hạt 30 giống đậu xanh 32 3.1.2 Hàm lượng protein, lipid 30 giống đậu xanh nghiên cứu 34 3.2 PHÂN TÍCH ĐA HÌNH DNA BẰNG KỸ THUẬT RAPD .38 3.2.1 Kết tách chiết DNA tổng số từ đậu xanh 38 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên 3.2.2 Kết nghiên cứu quan hệ di truyền DNA kĩ thuật RAPD 40 3.2.3 Mối quan hệ di truyền giống đậu xanh dựa phân tích RAPD 57 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 62 KẾT LUẬN 62 ĐỀ NGHỊ 62 CƠNG TRÌNH CƠNG BỐ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN VĂN 63 TÀI LIỆU THAM KHẢO 64 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Mồi RA40 Mồi RA40 khuếch đại phân đoạn với kích thước từ 0,2 - 1,6 kb Biểu đa hình giống đậu xanh nghiên cứu thể băng kích thước 1,6 kb Ở ba kích thước lại (0,2 kb, 1,0 kb, 1,4 kb) khơng biểu đa hình Ảnh điện di thể qua hình 3.12 567 10 11 1213 14 15 16 1718 19 20 M 1,5 kb 1,0 kb 0,75 0,5 kb 0,25 kb Hình 3.13 Ảnh điện di sản phẩm RAPD với mồi RA40 từ mẫu T1 đến mẫu T20 Ký hiệu: M: Marker 1kb 1.T1, 2.T2, 3.T3, 4.T4, 5.T5, 6.T6, 7.T7, 8.T8, 9.T9, 10.T10, 11.T11, 12.T12, 13.T13, 14.T14, 15.T15, 16.T16, 17.T17, 18.T18, 19.T19, 20.T20 3.2.3 Mối quan hệ di truyền giống đậu xanh dựa phân tích RAPD Từ kết phân tích hình ảnh điện di sản phẩm RAPD, thống kê băng điện di (xuất = 1, không xuất = 0) xử lý số liệu phân tích RAPD phần mềm NTSYSpc version 2.0i nhằm xác định khoảng cách di truyền mẫu đậu xanh nghiên cứu thông qua hệ số tương đồng di truyền biểu đồ hình 57 Để xác định quan hệ di truyền, tiến hành xác định giá trị tương quan kiểu hình theo ba phương pháp tính hệ số di truyền giống (phương pháp Jaccard, SM Dice) với bốn kiểu phân nhóm (WPGMA, UPGMA, liên kết hoàn toàn liên kết đơn lẻ) (bảng 3.7) Biểu đồ hình thiết lập dựa giá trị tương quan cao với giá trị r  0,9: tương quan chặt, 0,8 ≤ r < 0,9: tương quan chặt, 0,7 ≤ r < 0,8: tương quan tương đối chặt, r < 0,7: tương quan khơng chặt Bảng 3.7 Giá trị tương quan kiểu hình (r) UPGM WPGMA Liên kết hoàn toàn Liên kết đơn lẻ SM 0.8794 0.8352 0.7439 0.8600 Dice 0.8741 0.8331 0.7737 0.8418 Jaccard 0.8733 0.8228 0.7549 0.8324 Kết bảng 3.7 cho thấy, giá trị tương quan kiểu hình (r) 30 mẫu đậu xanh nghiên cứu cao, phạm từ tương quan tương đối chặt đến tương quan chặt Cụ thể giá trị (r) dao động từ 0,7439 đến 0,8794 Giá trị tương quan kiểu hình (r) lớn 0,8794 tính theo hệ số di truyền SM kiểu phân nhóm UPGMA Vì vậy, sơ đồ hình thiết lập theo hệ số di truyền giống SM kiểu phân nhóm UPGMA (hình 3.14) Kết xác định hệ số đồng dạng di truyền thể bảng 3.8 Hệ số đồng dạng di truyền phản ánh mối quan hệ di truyền giống đậu xanh với Các giống đậu xanh gần mặt di truyền hệ số đồng dạng di truyền chúng lớn ngược lại, giống có hệ số đồng dạng di truyền thấp mối quan hệ di truyền chúng xa 58 Bảng 3.8 Bảng hệ số tương đồng di truyền 30 giống đậu xanh nghiên cứu Giống T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7 T8 T9 0,82 0,85 0,76 0,74 1,00 0,91 0,83 0,79 1,00 0,82 0,80 1,00 0,83 1,00 T6 T7 T8 T9 0,61 0,79 0,82 0,59 0,65 0,80 0,83 0,66 0,67 0,79 0,86 0,65 0,68 0,84 0,85 0,71 0,70 0,74 0,79 0,73 1,00 0,69 0,70 0,81 1,00 0,90 0,72 1,00 0,70 T10 0,80 0,83 0,82 1,00 0,85 0,79 0,71 0,91 0,90 T11 T12 T13 0,82 0,84 0,77 0,79 0,80 0,76 0,71 1,00 0,82 0,86 0,81 0,83 0,83 0,82 0,83 0,81 0,80 0,68 0,70 0,69 0,80 0,88 0,77 0,83 0,87 0,82 0,68 0,68 0,65 T14 T15 T16 T17 T18 T19 0,82 0,80 0,74 0,76 0,68 0,77 0,81 0,81 0,81 0,81 0,76 0,80 0,86 0,86 0,80 0,80 0,75 0,79 0,85 0,83 0,85 0,85 0,76 0,86 0,83 0,81 0,81 0,79 0,78 0,80 0,71 0,66 0,64 0,66 0,70 0,69 0,82 0,82 0,78 0,80 0,79 0,79 0,85 0,85 0,81 0,81 0,76 0,82 T20 0,77 0,82 0,81 0,86 0,80 0,67 0,79 T21 T22 T23 0,72 0,80 0,79 0,77 0,83 0,80 0,78 0,83 0,85 0,81 0,83 0,83 0,73 0,81 0,78 0,58 0,68 0,63 T24 0,74 0,77 0,84 0,81 0,75 T25 T26 T27 T28 T29 T30 0,83 0,81 0,73 0,80 0,78 0,70 0,84 0,86 0,80 0,85 0,85 0,79 0,89 0,87 0,79 0,86 0,84 0,76 0,86 0,86 0,86 0,89 0,59 0,85 0,82 0,82 0,78 0,81 0,81 0,83 T1 1,00 T2 T3 T4 T5 T10 T11 T12 T13 T14 T15 T16 T17 T18 T19 0,81 0,90 0,80 1,00 0,85 0,88 1,00 0,86 1,00 0,68 0,64 0,66 0,68 0,74 0,72 0,85 0,83 0,79 0,81 0,80 0,80 0,90 0,81 0,79 0,79 0,74 0,82 0,89 0,89 0,83 0,81 0,76 0,80 0,82 0,69 0,80 0,86 0,72 0,80 0,77 0,75 0,83 0,82 0,58 0,66 0,65 0,75 0,83 0,80 0,58 0,74 0,77 0,62 0,69 0,69 0,65 0,71 0,70 0,64 0,83 0,83 0,83 0,84 0,88 0,78 0,80 0,86 0,80 0,87 0,85 0,79 0,69 0,69 0,72 0,71 0,75 0,70 0,93 0,84 0,80 0,80 0,75 0,83 1,00 0,85 0,85 0,85 0,80 0,86 1,00 0,87 0,87 0,78 0,82 1,00 0,89 0,78 0,86 1,00 0,82 0,90 1,00 0,81 1,00 0,82 0,85 0,88 0,80 0,84 0,90 0,79 0,92 1,00 0,79 0,83 0,82 0,77 0,85 0,84 0,80 0,86 0,83 0,83 0,90 0,88 0,77 0,85 0,82 0,73 0,83 0,80 0,77 0,83 0,78 0,70 0,80 0,75 0,74 0,84 0,81 0,77 0,81 0,81 0,78 0,81 0,77 0,73 0,71 0,70 0,86 0,86 0,82 0,87 0,87 0,81 0,88 0,84 0,82 0,85 0,85 0,83 0,88 0,86 0,82 0,85 0,87 0,81 0,89 0,83 0,81 0,86 0,84 0,82 0,93 0,86 0,88 0,89 0,90 0,85 0,84 0,86 0,78 0,87 0,85 0,79 0,80 0,80 0,80 0,83 0,87 0,83 0,82 0,84 0,80 0,85 0,87 0,81 0,79 0,79 0,79 0,82 0,86 0,76 59 T20 T21 T22 T23 T24 0,78 0,82 0,81 1,00 0,83 0,82 1,00 0,90 1,00 0,76 0,78 0,85 0,83 0,88 1,00 0,85 0,87 0,85 0,86 0,90 0,86 0,87 0,89 0,85 0,86 0,88 0,86 0,84 0,76 0,78 0,79 0,81 0,77 0,93 0,88 0,88 0,89 0,89 0,82 0,92 0,87 0,85 0,88 0,88 0,78 0,86 0,84 0,84 0,81 0,83 0,75 T25 T26 T27 T28 T29 T30 1,00 0,89 0,89 0,90 0,90 0,84 1,00 0,83 0,91 0,88 0,82 1,00 0,86 0,93 0,86 1,00 0,92 0,85 1,00 0,89 1,00 Kết phân tích bảng 3.8 cho thấy, hệ số tương đồng di truyền 30 giống đậu xanh nghiên cứu dao động từ 0,58 đến 0,93 Trong đó, cặp giống có hệ số đồng dạng di truyền cao (0,93) là: T13 T14, T14 T25, T22 T25, T27 T29 cặp giống có hệ số đồng dạng di truyền nhỏ (0,58) là: T6 T21, T6 T24, T9 T21 P II Nhóm II Nhóm I PI Hình 3.14 Sơ đồ quan hệ di truyền 30 giống đậu xanh Sơ đồ hình tính theo hệ số SM kiểu phân nhóm UPGMA (hình 3.14) mức độ sai khác di truyền 30 giống đậu xanh Mức độ khác biểu hệ số sai khác giống Các giống có hệ số di truyền giống tương tự xếp thành nhóm, nhóm lại có liên hệ với 60 Biểu đồ hình tạo phân tích 30 giống đậu xanh với 10 mồi ngẫu nghiên chia làm nhóm chính: * Nhóm I: Bao gồm giống T6 có nguồn gốc từ Xuất Hố - Bắc kạn T9 có nguồn gốc từ Hàm Yên - Tuyên Quang, hai giống có hệ số tương đồng 0,81 có hệ số di truyền sai khác so với giống khác thuộc nhóm II 33% (1 - 0,67) * Nhóm II: Bao gồm 28 giống lại tiếp tục phân thành nhánh phụ (PI PII): + Nhánh phụ I: Gồm giống T18 có nguồn gốc từ Đình Bảng - Bắc Ninh, giống có hệ số di truyền sai khác với giống nhánh phụ II 23% (1 - 0,77) + Nhánh phụ II: Gồm 27 giống lại, chia thành cụm: - Cụm I: Gồm giống T21, T24, có hệ số tương đồng di truyền 0,85 có hệ số di truyền sai khác với cụm II 21% (1 - 0.79) - Cụm II, gồm 25 giống lại, cặp giống T13 T14, T14 T25, T22 T25, T27 T29 giống nhiều cả, hệ số sai khác chúng 7% (1 - 0,93) Từ kết phân nhóm chúng tơi nhận thấy tính đa hình 30 giống đậu xanh phạm vi phân tích 10 mồi ngẫu phản ứng RAPD chứng minh cho khác cấu trúc DNA giống đậu xanh Tuy nhiên, đậu xanh tự thụ phấn hệ gen bảo thủ, hệ số sai khác giống nghiên cứu thấp Điều này, thể kết Nguyễn Vũ Thanh Thanh (2008) Điêu Thị Mai Hoa (2006) nghiên cứu quan hệ di truyền đậu xanh [8], [26] 61 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ KẾT LUẬN 1.1 Khối lượng 1000 hạt giống đậu xanh dao động từ 40,27g đến 65,44g Trong đó, giống T8 có khối lượng hạt cao (65,44g), thấp giống T15 (40,27g) 1.2 Đánh giá chất lượng hạt cho thấy, hàm lượng protein lipid đạt mức trung bình Hàm lượng protein hạt 30 giống đậu xanh dao động khoảng 19,27% đến 29,12%, hàm lượng lipid khoảng 1,7% đến 4,2% 1.3 Đã tách chiết DNA tổng số từ non 30 giống đậu xanh nghiên cứu Qua kiểm tra cho thấy, mẫu DNA tổng số tách chiết có chất lượng tốt, sử dụng cho nghiên cứu 1.4 Bằng kỹ thuật RAPD với việc sử dụng 10 mồi ngẫu nhiên nhận 1208 phân đoạn DNA nhân ngẫu nhiên từ hệ gen 30 giống đậu xanh Trong 10 mồi ngẫu nhiên sử dụng có 10 mồi biểu tính đa hình 1.5 Kết phân tích cho thấy, 30 giống đậu xanh nghiên cứu chia thành nhóm chính, hệ số tương đồng di truyền nhóm 67% (tức sai khác 33%) ĐỀ NGHỊ Cần tiếp tục sử dụng kỹ thuật RAPD với nhiều mồi ngẫu nhiên kết hợp nhiều kỹ thuật khác SSR, AFLP, RFLP để xác định mối quan hệ di truyền giống đậu xanh có độ tin cậy nhằm tạo sở cho việc lai tạo giống đậu xanh có hiệu 62 CƠNG TRÌNH CƠNG BỐ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN VĂN Nguyễn Vũ Thanh Thanh, Hoàng Thị Thao, Đỗ Tiến Phát, Chu Hồng Mậu (2010), “ Phân tích mối quan hệ di truyền số giống đậu xanh (Vigna radiata (L.) Wilczek) dựa thị RAPD” (Bài gửi đăng tạp chí khoa học cơng nghệ Đại học Thái Nguyên) 63 TÀI LIỆU THAM KHẢO TÀI LIỆU TIẾNG VIỆT Đái Duy Ban (2006), Công nghệ gen, NXB KH & KT Phạm Thị Trân Châu, Nguyễn Thị Hiền, Phùng Gia Tường (1998), Thực hành Hoá sinh học, NXB Giáo dục Nguyễn Mạnh Chính, Nguyễn Mạnh Cường (2008), Trồng đậu xanh, NXB Nông Nghiệp, Hà Nội, tr 3-9 Đường Hồng Dật (2006), Cây đậu xanh Kỹ thuật thâm canh biện pháp tăng suất, chất lượng sản phẩm, NXB Lao Động - Xã Hội, tr - 31 Trần Thị Ngọc Diệp (2009), Nghiên cứu tính đa dạng di truyền số giống ngô (Zea mays L.), Luận văn thạc sĩ Sinh học, Trường Đại học Sư phạm - Đại học Thái Nguyên Vũ Anh Đào (2009), Nghiên cứu đa dạng di truyền số giống đậu tương (Glycine max (L.) Merrill) địa phương, Luận văn thạc sĩ Sinh học, Trường Đại học Sư phạm - Đại học Thái Nguyên Phạm Thành Hổ (2006), Di truyền học NXB Giáo dục Điêu Thị Mai Hoa (2006), Nghiên cứu số đặc điểm nông học, sinh lý sinh học phân tử liên quan đến tính trạng chín tập trung đậu xanh Luận án Tiến sĩ Sinh học, Viện Khoa học Công nghệ Việt Nam, tr.51-63 Nguyễn Đăng Khôi (1997), “Các đậu ăn hạt Việt Nam”, Tạp chí Sinh học, số 2, tr - 10.Kết nghiên cứu khoa học đậu đỗ 1991 - 1995 (1996), Viện Khoa học kỹ thuật Nông nghiệp, Việt Nam, tr - 188 11 Kết nghiên cứu khoa học nông nghiệp 2000 (2001), NXB Nông 12.Trần Văn Lài, Trần Nghĩa, Ngô Quang Thăng, Lê Trần Trung, Ngô Đức Dương (1993), Kỹ thuật gieo trồng đậu lạc vừng, NXB NN Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên 64 13.Võ Thị Thương Lan cộng (1999), “Nghiên cứu tính đa dạng số loài rong câu vùng ven biển miền nam Việt Nam kỹ thuật RAPD - PCR”, Báo cáo khoa học hội nghị toàn quốc, tr 1321 - 1327 14 Nguyễn Thị Kim Liên (2003), Nghiên cứu định vị locus số tính trạng hình thái lúa cạn phục vụ cho việc chọn dòng lúa chịu hạn, Luận án Tiến sĩ Sinh học, Viện Công nghệ Sinh học Hà Nội, tr 24 - 34 15 Trần Thị Phương Liên (1999), Nghiên cứu đặc tính hoá sinh sinh học phân tử số giống đậu tương có khả chịu nóng, chịu hạn Việt Nam, Luận án tiến sĩ Sinh học, Viện Công nghệ Sinh học, Hà Nội 16 Đỗ Tất Lợi (1997), Những thuốc vị thuốc Việt Nam NXB KH & 17 Trần Đình Long, Lê Khả Tường (1998), Cây đậu xanh, NXB NN 18.Lê Đình Lương, Quyền Đình Thi (2002), Kỹ thuật di truyền ứng dụng, NXB Đại học Quốc Gia, Hà Nội 19.Chu Văn Mẫn (2003), Ứng dụng tin học sinh học, NXB Đại học Quốc Gia, Hà Nội, tr 20 - 215 20.Chu Hoàng Mậu (2001), Sử dụng phương pháp đột biến thực nghiệm để tạo dòng đậu tương đậu xanh thích hợp cho miền núi Đông Bắc Việt Nam, Luận án tiến sĩ Sinh học, Viện Công nghệ Sinh học, Hà Nội 21.Chu Hồng Mậu, Nơng Thị Man, Lê Xn Đắc, Đinh Thị Phòng, Lê Trần Bình (2002), “Đánh giá genome số dòng đậu tương đột biến kỹ thuật phân tích đa hình DNA nhân ngẫu nhiên”, Tạp chí sinh học 22, tr 21 - 27 22.Đinh Thị Phòng (2001), Nghiên cứu khả chị hạn chọn dòng chịu hạn lúa cơng nghệ tế bào thực vật, Luận án tiến sĩ Sinh học, Viện Cơng nghệ Sinh học, Hà Nội Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên 65 23.Nguyễn Minh Quế (2009), Đánh giá mối quan hệ di truyền số mẫu dẻ nghiên cứu bảo tồn nguồn gen dẻ Trùng Khánh - Cao Bằng kỹ thuật nuôi cấy mô - tế bào thực vật, Luận văn thạc sĩ Sinh học, Trường Đại học Sư phạm - Đại học Thái Nguyên 24.Khuất Hữu Thanh (2006), Kỹ thuật gen nguyên lý ứng dụng, NXB KH & KT 25 Nguyễn Vũ Thanh Thanh (2003), Nghiên cứu thành phần hố sinh hạt tính đa dạng di truyền số giống đậu xanh có khả chịu hạn khác nhau, Luận văn thạc sĩ Sinh học, Trường Đại học Sư phạm - Đại học Thái Nguyên 26.Nguyễn Vũ Thanh Thanh (2008), Nghiên cứu tính đa dạng di truyền phân lập số gen liên quan đến tính chịu hạn đậu xanh (Vigna radiata (L.) Wilczeck), Luận án tiến sĩ Sinh học, Viện Công nghệ Sinh học, Hà Nội 27.Phạm văn Thiều (1997), Cây đậu xanh kỹ thuật trồng chế biến sản phẩm, NXB Nông nghiệp 28.Nguyễn Thị Tâm (2003), Nghiên cứu khả chịu cóng chọn dòng chịu nóng lúa công nghệ tế bào thực vật, Luận án tiến sĩ Sinh học, Viện Công nghệ Sinh học, Hà Nội 29.Nguyễn Hải Tuất, Ngô Kim Khôi (1996), Xử lý thống kê kết nghiên cứu thực nghiệm nông lâm ngư nghiệp máy vi tính, NXB Nơng nghiệp Hà Nội 30.Vũ Thanh Trà, Trần Thị Phương Liên (2006), “Nghiên cứu đa dạng di truyền số giống đậu tương địa phương có phản ứng khác với bệnh gỉ sắt thị SSR” Tạp chí nông nghiệp phát triển nông thôn, tr 21, 30 - 32 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên 66 31.Trương Quang Vinh, Nguyễn Thị Tâm, Đỗ Tiến Phát, Nguyễn Thành Danh (2008), “Đánh giá đa hình DNA số giống khoai tây (Solanum tuberosum L.) kỹ thuật RAPD”, Tạp chí nơng nghiệp phát triển nông thôn, số 32 Vander Maesen L J G (1996), Tài nguyên thực vật Đông Nam Á, Tập Các đậu ăn hạt, NXB KH & KT, tr 16 - 86 TÀI LIỆU TIẾNG ANH 33 Afzal M.A., Muynul Haque M., and Shanmugasundaram S (2004), “Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD) analysys of selected mung bean (Vigna radiata L Wilczek) cultivars”, Asian Journal of Sciences, 3(1), pp 20 - 24 34 Awan F S., (2007), “Study of genetic divergence among wheat genotypes through random amplied polymorphic DNA, centre of Agricultural biochemistry and biotechnology”, Unversity of Agricultural Faisalabad Pakistan, 6(3), pp 476 - 481 35 Betal S., (2004) Roy C.P., Kundu S., Sen R.S, “Estimation of geneetic variability of Vigna radiata cultivars by RAPD analysis”, Biologia plantrum, 48(2), pp 205 - 209 36 Chen Y., Wang D., Arelli P., Ebrahimi M., Nelson R.L., (2006), “Molecular marker diversity of SCN-resistant sources in soybean”, Genome; 49, 8; ProQuest Central 37 Dey N., Subarsana B., Chaudhuri T.R.,Dey S.R., mitu De,Ghose T.K., (2005), “RAPD - base genetic diversity analysis of aromatic rice”, Cababstractsplus, 6(3/4), pp 133 - 142 38.Doldi M., Vollmann J., Lellry T., (1997), Genetic doversity in soybean as determined by RAPD and microsatellite analysis, pp 331 - 335 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên 67 39.Foolad M R., Arulsekar S., Rodrigues R.L.,(1995), “Application of polymerase chain reaction (PCR) in plant genome analysys”, In:Gamborg OL, Pjillips GC (eds), Fundamental methods of plant cell, tissue and organ culture and laboratory operation, Springer Verlag, Berlin, Heidelberg-New York-Tokyo, pp 281 - 298 40 Gawel N.J., Jarret R.H., (1991), Geneomic DNA isolation 41 Humphry M.E., Magner T., McIntyre C.L., Aitken E.A., Liu C.J., (2003), “Identification of a major locus conferring resistance to powdery mildew (Erysiphe polygoni DC) in mungbean [Vigna radiata (L.) Wilczek] by QLT analysis”, Geneome, 46(5), pp 738 - 744 42.Hyung - Jin Baek, Jung - Hoon Kang, Tae - San Kim, Nam - Chon Paek (2008), “Genetic Diversity and Population Structure of Korean Soybean Landrace [Glycine max (L.) Merrill]”, J Crop Sci Biotech (June) 11 (2), pp 83 - 90 43.Jorge (2003), “Genetic diffrentiation of Portugues tea plant using RAPD markers”, Hrt Science, 38(6), pp 1191 - 1197 44.Karuppanapandian T., Karuppudurai T., Sinha P B., Kamarul Haniya A, Ma noharan K (2006), “Genetic diversity in green gram (Vigna radiata L.) landraces analyzed by using random amplified polymorphic DNA (RAPD)”, African Jounal of Biotechnology, pp 1214 - 1219 45 Lakhanpaul S., Chadha S., Bhat K.V (2000), “Random amplified polymorphic DNA (RAPD) analysis in Indian mung bean (Vigna radiata L Wilczek) cultivars”, Genetica, 109(3), pp 227 - 234 46.Lambrides C J., Lawn R J., Godwin I D., Manners J., Imrie B C (2004), “Two genetic linkage maps of mungbean (Vigna radiata L Wilczek) using RFLP and RAPD markers”, Australian Journal of Agricultural Research , 51(4), pp 415 - 425 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên 68 47.Li Z., Nelson R.L., (2002), “RAPD Marker Diversity among Cultivated and Wild Soybean Accessions from Four Chinese Provinces”, Crop Science, 42, pp 1737 - 1744 48 Moretzsohn M.C., Hopkins M.S., Mitchell S.E., Kresovich S, valls J.F., Ferreira M.E (2004), “Genetic diversity of peanut (Arachis hypogaea L.) and its wild relatives based on the analyis of hypervariable regions of the genome”, BMC plant Biol, 14,4(1) 49 Muthusamy S., Kanagarajan S., Ponnusamy S.(2008), “Efficiency of RAPD and ISSR markers system in accessing genetic variation of rice bean (Vigna umbellata) Landraces”, Electronic Journal of Biotechnology, 11(3) 50 Orozco C., Chalmers K J., Powell W., Waugh R., (1996), “RAPD and organelle specific RCR re-affirms taxonomic relationships within the genus Coffea”, Plant Cell Reports, 15(5), pp 337 - 341 51 Paulo S., (2004), “Genetic diversity among maize (Zea mays L.) landraces assessed by RAPD markers”, Genetics and molecular biology, 27(2) 52.Raghunathachari P., Khanna V K., Singh U S., Singh N K., RAPD analysis of genetic variability in Indian Scented germplasm (Oryza sativa L.) 53 Raina S.N.V, Kojima T., Ogihara Y., Singh K.P., Devarumath R.M., (2001), “RAPD and ISSR figerprints as useful genetic marker for analysis of genetic diversity, varietal identification, and phylogenetic relationships in peanut (Arachis hypogaea L.) cultirs and wild species”, Genome, 44(5), pp 763 - 72 54 Ranade R., Gopalakrishna T (2001), “Characterization of blackgram [Vigna mungo (L.) Hepper] varieties using RAPD”, Plant varieties & Seeds, 14(3), pp 227-233 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên 69 55 Saini A., Reddy S K., Jawali N., (2004), “Evaluation of long primers for AP-PCR analysis of mungbean [Vigna radiata (L.) Wilczek]: Genetic relationships and fingerprinting of some genotypes”, Indian Journal of Biotechnology, pp 511 - 518 56.Sangsiri C., Sorajjapinun W, Srinivesc P., (2005) “Gamma Radiation Induced Mutations, function, gene expression and regulation” Colloids and surface, B Biointerfaces, 45(3-4), pp 131 - 135 57 Santalla M., Power J B, Davey M R., (1998), “Genetic diversity in mung bean [Vigna radiata (L.) Wilczek] germplasm revealed by RAPD markers”, Plant Breeding, pp 473 - 478 58 Li Z., Nelson R.L., (2002), “RAPD Marker Diversity among Cultivated and Wild Soybean Accessions from Four Chinese Provinces”, Crop Science, 42, pp 1737 - 1744 59 Sholihin, Hautea D.M., (2002), “Molecular mapping of drought resistance in mungbean (Vigna radiata L.): 1.QTL linked to drought resistance, 2.Linkage map in mungbean using AFLP markers”, Jurnal Bioteknologi Pertanian, 7(1-2), pp 17 - 61 60.Singh S., Reddy K.S., Jawali N., (2000), “PCR analysis of mungbean genotypes using anchored simple sequence repeat primer”, In: DAE-BRNS symposium on the use of nuclear and molecular techniques in crop improvement, BARC, pp 359 - 369 61 Subramanian V., Gurtu S., Nageswara R.C., Nigam S N., (2000), “Identification of DNA polymorphism in cultivated groundnut using random amplified polymorphic DNA (RAPD) assay”, Maharastra Hybrid Seeds Company (MAHYCO) Ltd., Andhra Pradesh, India, 43(4), pp 656 660 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên 70 62 Venkata C L., Sreedhar R.V., Bhagyalakshmi N., (2007), “The use of genetic markers for detecting DNA polymorphism among banana cultivars”, Plant Cell Biotechnology Department, Central FoodTechnological Research Institute, KRS Road, Mysore, Karnataka 570 020, India, 18(12) 63 William J.G.K., Kubelik A.R., Livak K.J., Rafalski J.A., Tingey S.V., (1990), “DNA polymorphisms amplified by arbitrary primers are useful as genetic markers”, Nucleic Acids Reseach, pp 6531 - 6535 64.Young N.D, Kumar L., Menancio - Hautea, Danesh D., Talekar N.S,Shanmugasundarum S., Kim D.H., (1992), “RFLP mapping of a major bruchid resistance gene in mungbean (Vigna radiata L Wilczek)”, Theoretical and Applied genetics, 44(7-8), pp 839 - 844 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên 71