KẾ HOẠCH LÀM THÍ NGHIỆM WINOGRADSKY COLUMN SULFUR METABOLIZING BACTERIA Giới thiệu Winogradsky Column  Được phát minh vào năm 1880, nhà vi sinh vật học người Nga, tên Sergei Nikolaievich Winogradsky  Winogradsky Column hệ sinh thái thu nhỏ, dùng để nghiên cứu mối quan hệ vi sinh vật với với mơi trường sống, thơng qua phân chia nhóm chúng  Cột Winogradsky có hình trụ, suốt, dùng để chứa đựng mơi trường khép kín vi sinh vật  Đồng thời có hình trụ nên dẫn đến thay đổi gradients Oxygen Sulfite theo hướng Oxygen giảm dần hình thành vùng hiếu khí, khí kị khí ( thay đổi phân bố vi sinh vật), đồng thời ngược lại Sulfite tăng dần CẤU TẠO  Ở đáy cột, cellulose dạng giấy vụn bị nhóm vi khuẩn Clostridium phân hủy thành sản phẩm lên men, vi khuẩn Desulfovbro sử dụng sản phẩm lên men làm chất khử, SO4 làm chất oxi hóa sinh sản phẩm phụ H2S H2S khuếch tán lên vùng nước bên trên, tạo gradient nồng độ H2S cột  Tiếp theo phát triển mạnh mẽ vi khuẩn quang tự dưỡng kị khí Chlorobium Chromatium, tạo vùng có màu xanh ơliu tím Vi khuẩn quang tự dưỡng sử dụng H2S chất khử cho điện tử, CO2 nguồn cacbon  Bên là lượng phong phú vi khuẩn tiá không lưu huỳnh thuộc chi Rhodospirium Rhodopseudomona Vi khuẩn quang di dưỡng sử dụng chất hữu nguồn cho điện tử thường hoạt động vùng có nồng độ S 2- thấp  Ở phần cột, có mặt oxi (do khuếch tán từ xuống) H2S nơi hoạt động vi sinh vật thich nghi khác vi khuẩn Beggiatoa Thiothrix, chúng sử dụng lưu huỳnh dạng khử H2S chất khử oxi chất oxi hóa  Phần nơi sống tảo cát vi khuẩn lam  Vi sinh vật hoạt động tich cực chiều vi nguồn chất khử ban đầu cellulose có hạn Khi dùng hết chất khử này, toàn thành phần cột chuyển sang dạng oxi hóa, vi sinh vật quang tự dưỡng phụ thụôc S2- vi sinh vật ki khơng tồn hệ sinh thái 2 Mục tiêu  Quan sát lớp (tầng), lồi vi khuẩn chuyển hóa sulfur màu sắc đặc trưng  Quan sát chuyển hóa vi khuẩn sulfur bị ảnh hưởng nồng độ oxy  Biết thành phần vi sinh vật nguồn nước, từ đưa biện pháp xử lý hiệu 3 Vật liệu phương pháp 3.1 Vật liệu  Cột thủy tinh hình trụ (đã nhận)  CaSO4: Cung cấp nguồn lưu huỳnh đệm pH CaSO4 cho vào sẽ giải phóng anion SO42­, ion này được các  sulfite         reducing bacteria dùng làm chất nhận điện tử ở điều kiện kỵ  khí sản  phẩm  cuối cùng tạo ra hiđro sulfua, hiđro sulfua được các  sulfur  bacteria dùng làm chất nhận điện tử khi quang hợp  CaCO3: Cung cấp nguồn cacbon  Bùn, đất nước: Đặc tính bùn dùng cho cột: + Bùn cần lấy mẫu thu thập từ môi trường đất ngập nước + Bùn cần có nguồn vi khuẩn sunfat dồi để đáp ứng mục đích + Bùn chứa vi khuẩn sunfat (thường có màu đen H2S làm sắt có đất biến thành màu đen) + Bùn giàu vi kuẩn lưu huỳnh tìm thấy gần suối nước nóng khu vực núi lửa, mỏ muối dọc theo bờ biển từ mỏ dầu, khí đốt Cần lấy bùn nơi không bị ô nhiễm chất độc hại, giàu nguồn vi khuẩn lưu huỳnh ( bùn có màu đen) Lấy bùn sông Vàm Thuật – nhánh sơng Sài Gòn  Để thuận tiện việc lấy bùn ta lấy nước sơng rút vị trí lấy men bờ sông  Khu vực lấy gần bờ kênh xã nước thải sinh hoạt nhà máy sản xuất bún  Khơng có nhà máy thải chất thải nguy hại xung quanh sông  Bùn hồn tồn tự nhiên khơng ảnh hưởng nhiều chất động hóa học nguy hại, dễ lấy, giàu nguồn vi khuẩn sơng hình thành từ lâu  Nguồn sáng: Sử dụng bóng LED 9W (tương đương với bóng dây tóc 60W), treo cạnh cột để quan sát hai nửa sáng tối 3.2 Phương pháp  Bước 1: Chuẩn bị lượng bùn đất chiếm khoảng 2/3 cột, loại bỏ đá, cành vướng bùn Sau trộn bùn với 5g CaCO3, 5g CaSO4, 10g băm nhỏ (trộn kỹ đều, tránh bọt khí)  Bước 2: Điều chỉnh pH bùn, khoảng từ –  Bước 3: Cho bùn chuẩn bị vào trước, sau cho đất vào (không trộn lên) Bước 4: Đổ nước sông cho cột cao thêm – 4cm, sau đậy nắp cột lại Bước cột 5: Đánh dấu mực nước Kế hoạch thực Thời gian 21/01/2019 22/01/2019 Nhiệm vụ Chuẩn bị hóa chất, đèn, set up vị trí làm Lấy bùn, đất, nước, làm cột (kiểm tra cột 1) Phân công Minh, Hân, Lộc Vinh, Vinh 23/01/2019 Kiểm tra cột Vinh Trần + Hân 24/01/2019 Kiểm tra cột Vinh Dương + Lộc 25/01/2019 Kiểm tra cột Minh + Hân 26/01/2019 Kiểm tra cột Vinh + Lộc 27/01/2019 Kiểm tra cột Vinh Dương + Hân 28/01/2019 Kiểm tra cột Lộc + Minh 04/02/2019 Kiểm tra cột Vinh Trần + Hân 11/02/2019 Kiểm tra cột Vinh Dương + Minh 18/02/2019 Kiểm tra cột 10 Minh +Lộc 25/02/2019 Kiểm tra cột 11 Hân + Minh 04/03/2019 Kiểm tra cột 12 Vinh Trần + Vinh Dương 11/03/2019 Kiểm tra cột 13 Vinh Trần + Hân 18/03/2019 Kiểm tra cột 14 Vinh Dương + Lộc 25/03/2019 Kiểm tra cột 15 Minh + Hân 01/04/2019 Kiểm tra cột 16 Vinh + Lộc 08/04/2019 Kiểm tra cột 17 Vinh Dương + Hân 15/04/2019 Kiểm tra cột 18 Lộc + Minh 22/04/2019 Kiểm tra cột 19 Vinh Trần + Hân 29/04/2019 Kiểm tra cột 20 Vinh Dương + Lộc 06/05/2019 Kiểm tra cột 21 Minh + Hân 13/05/2019 Kiểm tra cột 22 Vinh + Lộc 20/05/2019 Kiểm tra cột 23 Vinh Dương + Hân 27/05/2019 Kiểm tra cột 24 Vinh Trần + Hân 03/06/2019 Kiểm tra cột 25 Vinh Dương + Lộc *NOTE: Mỗi lần kiểm tra: Đo pH, quan sát, đánh giá, màu, mùi cột 5 Kết mong đợi  Phân loại vi khuẩn phổ biến, vùng cột có màu sắc đặc trưng 6 Khó khăn Khó khăn việc chọn bùn Việc quan sát tượng qua tuần, khơng biết có ý muốn khơng Điều chỉnh nắp đậy khơng q chặt, trách tích tụ áp lực gây nổ bình THANKS FOR LISTENING ! BÀI TRÌNH BÀY CỦA CHÚNG EM ĐẾN ĐÂY LÀ KẾT THÚC CẢM ƠN THẦY VÀ CÁC ANH CHỊ ĐÃ CHÚ Ý LẮNG NGHE ! ...1 Giới thiệu Winogradsky Column  Được phát minh vào năm 1880, nhà vi sinh vật học người Nga, tên Sergei Nikolaievich Winogradsky  Winogradsky Column hệ sinh thái thu nhỏ, dùng... Bước 4: Đổ nước sông cho cột cao thêm – 4cm, sau đậy nắp cột lại Bước cột 5: Đánh dấu mực nước Kế hoạch thực Thời gian 21/01/2019 22/01/2019 Nhiệm vụ Chuẩn bị hóa chất, đèn, set up vị trí làm... nghiên cứu mối quan hệ vi sinh vật với với mơi trường sống, thơng qua phân chia nhóm chúng  Cột Winogradsky có hình trụ, suốt, dùng để chứa đựng mơi trường khép kín vi sinh vật  Đồng thời có