BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI HOÀNG THỊ HẢO NGHIÊN CỨU ĐIỀU CHẾ VÀ XÂY DỰNG MỘT SỐ CHỈ TIÊU CHẤT LƢỢNG CỦA CAO ĐẶC BỔ TRUNG ÍCH KHÍ LUẬN VĂN THẠC SĨ DƢỢC HỌC HÀ NỘI - 2019 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI HOÀNG THỊ HẢO NGHIÊN CỨU ĐIỀU CHẾ VÀ XÂY DỰNG MỘT SỐ CHỈ TIÊU CHẤT LƢỢNG CỦA CAO ĐẶC BỔ TRUNG ÍCH KHÍ LUẬN VĂN THẠC SĨ DƢỢC HỌC CHUYÊN NGÀNH: DƢỢC LIỆU- DƢỢC HỌC CỔ TRUYỀN MÃ SỐ: 8720206 Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: PGS.TS Bùi Hồng Cƣờng HÀ NỘI - 2019 LỜI CẢM ƠN Trong q trình nghiên cứu hồn thành luận văn tơi nhận đƣợc giúp đỡ quý báu thầy cô giáo, chuyên gia lĩnh vực nghiên cứu bạn bè gia đình Trƣớc hết tơi xin chân thành cảm ơn Ban giám hiệu, phòng Sau Đại học Trƣờng Đại học Dƣợc Hà Nội tạo điều kiện thuận lợi cho tơi q trình học tập nghiên cứu Tơi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới PGS TS Bùi Hồng Cƣờng, ngƣời tận tình hƣớng dẫn, ln quan tâm bảo tạo điều kiện thuận lợi cho suốt q trình học tập nghiên cứu Tơi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến DS Trần Văn Cƣơng Công ty cổ phần Dƣợc phẩm VCP, DS Đỗ Trung Hiếu Công ty cổ phần thƣơng mại Dƣợc phẩm Quốc tế WINSACOM cung cấp dƣợc liệu, chất chuẩn hỗ trợ kinh phí cho thực đề tài Tôi xin cảm ơn PGS TS Nguyễn Mạnh Tuyển thầy cô môn Dƣợc Học Cổ Truyền tạo điều kiện thuận lợi cho tơi q trình làm thực nghiệm Tơi xin cảm ơn ThS Nguyễn Tuấn Anh, DS Bạch Thị Thắm anh chị Phòng Đơng dƣợc Viện Kiểm nghiệm Thuốc Trung ƣơng giúp đỡ trình làm thực nghiệm Cuối lời cảm ơn sâu sắc nhất, tơi muốn gửi tới gia đình, ngƣời thân bạn bè bên cạnh ủng hộ tơi q trình học tập nghiên cứu Hà Nội, ngày 01 tháng 04 năm 2019 Hoàng Thị Hảo MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ Chƣơng TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan bệnh trĩ 1.1.1 Theo quan điểm y học đại 1.1.2 Theo quan điểm y học cổ truyền 1.2 Phƣơng thuốc bổ trung ích khí 1.2.1 Công thức .3 1.2.2 Công chủ trị phƣơng thuốc 1.3 Thông tin vị thuốc .5 1.3.1 Hoàng kỳ 1.3.2 Đảng sâm 1.3.3 Đƣơng quy 10 1.3.4 Bạch truật 12 1.3.5 Thăng ma 14 1.3.6 Sài hồ 16 1.3.7 Trần bì 17 1.3.8 Cam thảo 19 1.4 Phƣơng pháp điều chế cao đặc .21 1.4.1 Định nghĩa cao thuốc 21 1.4.2 Đặc điểm cao thuốc 21 1.4.3 Yêu cầu chất lƣợng cao thuốc 22 1.4.4 Phƣơng pháp điều chế cao 22 Chƣơng ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 24 2.1 Đối tƣợng, phƣơng tiện nghiên cứu 24 2.1.1 Đối tƣợng nghiên cứu 24 2.1.2 Thiết bị, máy móc 24 2.1.3 Hóa chất, chất chuẩn 25 2.2 Phƣơng pháp nghiên cứu 25 2.2.1 Nghiên cứu điều chế cao đặc .25 2.2.2 Xây dựng số tiêu chất lƣợng cao đặc 26 2.3 Xử lí số liệu 31 Chƣơng KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 32 3.1 Bào chế cao đặc 32 3.1.1 Khảo sát thông số điều chế cao 32 3.1.2 Khảo sát tiêu vật lý 34 3.1.3 Xác định hàm ẩm tỷ lệ cao thu đƣợc .34 3.1.4 Xác định pH 35 3.2 Khảo sát tiêu định tính .36 3.2.1 Định tính nhóm chất cao đặc phản ứng hóa học .36 3.2.2 Định tính cao đặc sắc ký lớp mỏng 37 3.3 Định lƣợng AGS- IV cao đặc sắc kí lỏng hiệu cao .50 3.3.1 Thẩm định phƣơng pháp định lƣợng 50 3.3.2 Định lƣợng AGS-IV mẫu cao đặc 57 Chƣơng BÀN LUẬN 59 4.1 Về điều chế dạng cao đặc 59 4.2 Về xây dựng số tiêu chất lƣợng cao đặc 59 4.2.1 Về định tính 59 4.2.2 Định lƣợng AGS-IV 61 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 65 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CAC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT Logarit số e nồng độ AGS-IV Astragalosid IV Ln (C ) ALT Aspartate Amino Transferase Ln (Spic) Logarit số e diện tích pic AST Alanin Amino Transferase NF- B Nuclear Factor-kappa B BT Bạch truật NO Nito oxit CT Cam thảo PGE2 Prostaglandin E2 DĐTQ Dƣợc điển Trung Quốc PL Phụ lục DĐVN Dƣợc điển Việt Nam SH Sài hồ ĐQ Đƣơng quy SKLM Sắc kí lớp mỏng ĐS Đảng sâm TB Trần bì ĐT Định tính TM Thăng ma HK Hồng kỳ IGF Insulin-like growth factor Inos Inducible nitric oxide synthase DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 3.1 Kết khối lƣợng làm khô, tỷ lệ cao thu đƣợc, thể chất mẫu cao 35 Bảng 3.2 Kết pH cao đặc 35 Bảng 3.3 Kết định tính phản ứng hoá học 36 Bảng 3.4 Kết SKLM định tính Hồng kỳ, cao AGS-IV sau phun thuốc thử màu 39 Bảng 3.5 Kết SKLM định tính Đảng sâm, cao, quan sát bƣớc sóng 254 nm 41 Bảng 3.6 Kết SKLM định tính Đƣơng quy, cao, quan sát bƣớc sóng 254 nm 44 Bảng 3.7 Kết SKLM định tính Cam thảo, cao, quan sát bƣớc sóng 254 nm 45 Bảng 3.8 Kết SKLM định tính Bạch truật, cao sau phun thuốc thử màu 46 Bảng 3.9 Kết SKLM định tính Trần bì cao bƣớc sóng 254 nm .47 Bảng 3.10 Kết SKLM định tính Thăng ma cao bƣớc sóng 366 nm 48 Bảng 3.11 Kết SKLM định tính Sài hồ cao sau phun thuốc thử màu 49 Bảng 3.12 Kết độ đặc hiệu 50 Bảng 3.13 Kết độ thích hợp hệ thống 52 Bảng 3.14 Kết khảo sát khoảng tuyến tính định lƣợng AGS-IV 53 Bảng 3.15 Kết khảo sát độ lặp lại độ xác trung gian 54 Bảng 3.16 Kết độ phƣơng pháp 56 Bảng 3.17 Kết định lƣợng AGS - IV mẫu cao nghiên cứu 57 Bảng 4.1 Một số nghiên cứu định lƣợng AGS-IV 62 DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 2.1 Các dƣợc liệu thuốc Bổ trung ích khí 24 Hình 3.1 Sắc ký đồ ĐT Hồng kỳ, cao AGS- IV sau phun thuốc thử màu 39 Hình 3.2 Sắc kí đồ ĐT Đảng sâm, cao bƣớc sóng 254 nm 41 Hình 3.3 Sắc kí đồ ĐT Đƣơng quy, cao bƣớc sóng 254 nm 44 Hình 3.4 Sắc ký đồ ĐT Cam thảo, cao bƣớc sóng 254 nm .45 Hình 3.5 Sắc ký đồ ĐT Bạch truật, cao sau phun thuốc thử màu 46 Hình 3.6 Sắc ký đồ ĐT Trần bì, cao bƣớc sóng 254nm 47 Hình 3.7 Sắc ký đồ ĐT Thăng ma, cao bƣớc sóng 366 nm 48 Hình 3.8 Sắc kí đồ ĐT Sài hồ, cao sau phun thuốc thử màu 49 Hình 3.9 Sắc ký đồ AGS-IV .51 Hình 3.10 Đồ thị biểu diễn mối tƣơng quan logarit số e nồng độ logarit số e diện tích pic AGS-IV 53 Hình 3.11 Sắc k‎ý đồ AGS-IV mẫu cao nghiên cứu .58 ĐẶT VẤN ĐỀ Bệnh trĩ bệnh thƣờng gặp, đứng đầu bệnh lý hậu môn-trực tràng, phổ biến giới với tỷ lệ ngƣời mắc bệnh cao Nghiên cứu gần Nguyễn Mạnh Nhâm cộng tỉnh miền Bắc phát đƣợc 1446/2651 ngƣời dân mắc bệnh trĩ chiếm tỷ lệ 55% [12] Tuy không gây tử vong có biến chứng nặng nề nhƣng bệnh trĩ lại trực tiếp ảnh hƣởng tới chất lƣợng sống ngƣời bệnh Bổ trung ích khí thuốc cổ phƣơng đƣợc giới thiệu y văn dùng điều trị trĩ Lý Đơng Viên cho tạng tỳ đóng vai trò quan trọng hoạt động thể ngƣời Sự suy yếu hoạt động chức tạng tỳ dẫn tới trung khí bất túc, khí hƣ hạ hãm, hội làm cho nhiều bệnh lý khác đƣợc hình thành, điển hình nhƣ trĩ, sa trực tràng, sa sinh dục Bài thuốc “Bổ trung ích khí” có tác dụng ơn bổ tỳ vị, ích khí thăng đề, giúp điều trị chứng sa giáng, khí hƣ hạ hãm, giải nguyên gây bệnh Trên thị trƣờng có số cơng ty phát triển thuốc Bổ trung ích khí đời sản phẩm điều trị trĩ : viên hoàn cứng Tottri (Traphaco); viên nang cứng Hermonic (Trƣờng Anh Pharm)… Mong muốn phát huy tính ƣu việt thuốc cổ truyền, tiện dùng cho ngƣời bệnh, việc nghiên cứu bào chế tiêu chuẩn hoá phƣơng thuốc với dạng bào chế đại cần thiết, cao đặc dạng bán thành phẩm trung gian để tiếp tục bào chế thành phẩm, tiện cho việc sử dụng thuốc Từ lý trên, đề tài “Nghiên cứu điều chế xây dựng số tiêu chất lƣợng cao đặc Bổ trung ích khí” đƣợc thực với mục tiêu: - Nghiên cứu điều chế cao đặc Bổ trung ích khí - Khảo sát số tiêu chuẩn định tính, định lƣợng dạng cao đặc Bổ trung ích khí CHƢƠNG TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan bệnh trĩ 1.1.1 Theo quan điểm y học đại - Bệnh trĩ búi mạch máu mô liên kết diện ba cột ống hậu môn: trƣớc-bên phải, sau-bên phải bên trái.[11] - Cơ chế bệnh sinh: Tấm đệm hậu môn cấu trúc bình thƣờng bề mặt ống hậu mơn, có vai trò việc ngăn ngừa són phân (khi ho, rặn, đệm phồng lên, bít kín ống hậu mơn) hình thành cảm giác chủ thể (cảm giác cứng mềm, chất dịch hay ) Bình thƣờng đệm phồng lên vị trí tƣơng ứng với xoang tĩnh mạch trĩ (trực tràng trên) xoang tĩnh mạch trĩ dƣới (trực tràng dƣới) Các chỗ phồng đƣợc gọi búi trĩ Các búi trĩ diện ngƣời bình thƣờng, búi trĩ gây triệu chứng, bệnh nhân than phiền triệu chứng này, chúng đƣợc gọi bệnh trĩ [2] - Yếu tố nguy cơ: Gắng sức đại tiện (đây nguyên nhân quan trọng nhất), thai kỳ, tăng áp lực thắt trong, viêm trực tràng mạn tính [2] - Điều trị: phụ thuộc mức độ triệu chứng bệnh nhân Điều trị: trĩ nội độ I hầu hết trĩ nội độ II bao gồm tăng chế độ ăn nhiều chất xơ uống nhiều nƣớc, thuốc làm mềm phân tránh rặn đại tiện Trĩ độ II III điều trị thủ thuật thắt trĩ vòng cao su [11] 1.1.2 Theo quan điểm y học cổ truyền - Trĩ bệnh mạn tính mạch trực tràng hậu môn bị giãn xung huyết Tĩnh mạch xung huyết thành búi nhiều búi, tùy vị trí tĩnh mạch trực tràng hậu môn, đƣợc phân chia lâm sàng thành trĩ nội hay trĩ ngoại Theo Y học cổ truyền, tỳ vị suy yếu khơng vận hóa đƣợc thủy cốc, không làm chủ đƣợc nhục, không thống nhiếp huyết khiến thấp nhiệt, đàm trọc ứ đọng làm phát sinh búi trĩ, tạo thành dịch tiết gây ngứa ngáy vùng hậu môn, nhục bị nhẽo (khí hƣ gây hạ hãm), nên búi trĩ khối da, vùng hậu môn sa xuống Phụ lục 7.4 Độ xác trung gian Phụ lục 7.5 Độ ... loạn nhịp tim cải thi n chức tim tốt bệnh nhân có thi u máu cục [50] - Tác dụng đƣờng huyết Flavonoid, polysaccharid, saponin Hồng kỳ có tác dụng giảm đƣờng máu, giảm cân nặng cải thi n dung nạp... lại trực tiếp ảnh hƣởng tới chất lƣợng sống ngƣời bệnh Bổ trung ích khí thuốc cổ phƣơng đƣợc giới thi u y văn dùng điều trị trĩ Lý Đơng Viên cho tạng tỳ đóng vai trò quan trọng hoạt động thể ngƣời... dùng cho ngƣời bệnh, việc nghiên cứu bào chế tiêu chuẩn hoá phƣơng thuốc với dạng bào chế đại cần thi t, cao đặc dạng bán thành phẩm trung gian để tiếp tục bào chế thành phẩm, tiện cho việc sử dụng