Đang tải... (xem toàn văn)
Tiêu chuẩn Quốc gia TCVN 9043:2012 về Thực phẩm - Xác định hàm lượng phospho tổng số bằng phương pháp đo màu quy định phương pháp xác định hàm lượng phospho tổng số trong thực phẩm bằng đo màu. Mời các bạn cùng tham khảo nội dung chi tiết.
TIÊU CHUẨN QUỐC GIA TCVN 9043:2012 THỰC PHẨM - XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG PHOSPHO TỔNG SỐ BẰNG PHƯƠNG PHÁP ĐO MÀU Foodstuffs - Determination of total phosphorus content by colorimetric method Lời nói đầu TCVN 9043:2012 xây dựng dựa sở AOAC 995.11 Phosphorus (Total) in Foods Colorimetric Methods; TCVN 9043:2012 Cục An toàn vệ sinh thực phẩm tổ chức biên soạn, Bộ Y tế đề nghị, Tổng cục Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng thẩm định, Bộ Khoa học Công nghệ công bố THỰC PHẨM - XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG PHOSPHO TỔNG SỐ BẰNG PHƯƠNG PHÁP ĐO MÀU Foodstuffs - Determination of total phosphorus content by colorimetric method Phạm vi áp dụng Tiêu chuẩn quy định phương pháp xác định hàm lượng phospho tổng số thực phẩm đo màu Giới hạn định lượng phương pháp: từ 0,05 g/100 g đến 1,00 g/100 g Nguyên tắc Mẫu tro hóa khơ để loại bỏ chất hữu Phần phosphat lại tan axit tạo thành phức chất màu xanh [(MoO2.4MoO3)2.H3PO4] với Na2MoO4 dùng axit ascorbic làm chất khử Cường độ màu xanh đo quang phổ bước sóng 823 nm ± nm Thuốc thử Chỉ sử dụng thuốc thử loại tinh khiết phân tích nước cất nước khử khống nước có độ tinh khiết tương đương, trừ có quy định khác 3.1 Axit clohydric đậm đặc, 12 M 3.2 Kẽm oxit (ZnO) 3.3 Dung dịch kali hydroxit (KOH), 50 % (khối lượng/thể tích) Hòa tan 50 g KOH 50 ml nước 3.4 Axit sulfuric (H2SO4) đậm đặc, 18 M 3.5 Dung dịch natri molybdat (Na2MoO4.2H2O) Trộn cẩn thận 140 ml H2SO4 (3.4) với 300 ml nước bình định mức 500 ml Làm nguội đến nhiệt độ phòng thêm 12,5 g Na2MoO4.2H2O Pha lỗng nước đến vạch Trộn 3.6 Dung dịch axit ascorbic Hòa tan g axit ascorbic nước đựng bình định mức 100 ml Pha lỗng nước đến vạch Trộn Chuẩn bị dung dịch ngày sử dụng 3.7 Dung dịch axit ascorbic-molybdat Ngay trước sử dụng, cho 25 phần thể tích dung dịch Na 2MoO4 (3.5) vào 10 phần thể tích dung dịch axit ascorbic (3.6) pha loãng nước đến 100 phần thể tích bình định mức Trộn 3.8 Dung dịch chuẩn gốc phospho, 1,0 mg P/ml Sấy khô KH2PO4 khoảng h nhiệt độ 101 C Hòa tan 1,0967 g KH2PO4 sấy nước đựng bình định mức 250 ml Thêm nước đến vạch trộn 3.9 Dung dịch chuẩn làm việc phospho, 0,01 mg P/ml Chuyển 5,00 ml dung dịch chuẩn gốc phospho (3.8) vào bình định mức dung tích 500 ml pha loãng nước đến vạch Trộn 3.10 Dung dịch phospho dùng để xây dựng đường chuẩn: mg, 0,01 mg, 0,02 mg, 0,03 mg, 0,04 mg, 0,05 mg 0,06 mg phospho Dùng pipet chuyển xác ml, 1,00 ml, 2,00 ml, 3,00 ml, 4,00 ml, 5,00 ml 6,00 ml dung dịch chuẩn làm việc phospho (3.9) cho vào bình định mức 50 ml riêng rẽ Pha loãng dung dịch với khoảng 15 ml nước CHÚ THÍCH: Bảo quản dung dịch 3.8 đến 3.10 °C để giảm thiểu nguy phát triển vi sinh vật Loại bỏ dung dịch bị đục xuất sương mù Thiết bị, dụng cụ CHÚ THÍCH: Các dụng cụ thủy tinh chén nung phải làm chất tẩy rửa không chứa phospho Sử dụng thiết bị, dụng cụ phòng thử nghiệm thơng thường cụ thể thiết bị, dụng cụ sau: 4.1 Máy đo quang phổ, đo bước sóng 823 nm ± nm 4.2 Cuvet, chiều dài đường quang cm 2,5 cm loại dòng chảy 4.3 Cân phân tích, cân xác đến 0,1 mg 4.4 Chén nung, thạch anh, dung tích khoảng 50 ml 4.5 Bình định mức, dung tích 50 ml, 100 ml 500 ml 4.6 Lò nung 4.7 Giấy lọc nhanh 4.8 Bếp điện 4.9 Nồi cách thủy, đun sơi 4.10 Giỏ kim loại, thích hợp để sử dụng với nồi cách thủy 4.11 Đũa thủy tinh, chịu nhiệt độ 525 °C Lấy mẫu Mẫu gửi đến phòng thử nghiệm phải mẫu đại diện Mẫu không bị hư hỏng thay đổi suốt trình vận chuyển bảo quản Cách tiến hành 6.1 Chuẩn bị dung dịch mẫu thử Dùng cân (4.3), cân từ 0,5 g đến 1,5 g phần mẫu thử đồng nhất, xác đến mg, cho vào chén nung (4.4) Để kiểm soát khả bị nhiễm bẩn, chuẩn bị thuốc thử trắng cách sử dụng chén nung rỗng để phân tích Xử lí mẫu trắng thuốc thử theo cách tương tự phần mẫu thử Cho 0,5 g kẽm oxit (3.2) vào chén nung trộn, để đũa thủy tinh (4.11) chén nung Sấy khô từ h đến h nhiệt độ khoảng 110 C Tro hóa sơ bếp điện (4.8) tro có màu đen CHÚ THÍCH: Khơng sấy tro hóa sơ bước sử dụng lò nung trang bị điều chỉnh nhiệt độ theo thời gian Đặt chén nung vào lò nung (4.6) nhiệt độ phòng tăng nhiệt độ đến 525 C Duy trì nhiệt độ h qua đêm Khi sử dụng lò nung trang bị điều chỉnh nhiệt độ theo thời gian, tăng dần nhiệt độ ban đầu để tránh sản phẩm dạng lỏng bị bắn tung tóe Lấy chén nung khỏi lò nung để nguội đến nhiệt độ phòng Cho ml nước ml HCI (3.1) vào chén nung nguội Đậy chén nung mặt kính đồng hồ đun sôi bếp điện (4.8) Lọc lượng chứa chén nung sang bình định mức 100 ml (4.5) Tráng chén nung phía mặt kính đồng hồ ml nước nóng Lặp lại lần việc tráng rửa ml nước nóng chuyển tất nước tráng qua giấy lọc (4.7) vào bình định mức Làm nguội bình định mức đến nhiệt độ phòng, trung hòa dung dịch cách thêm dung dịch kali hydroxit 50 % (3.3) dung dịch có màu trắng đục [Zn(OH) 2] Thêm giọt axit clohydric màu trắng đục Thêm tiếp giọt axit clohydric (3.1) Để dung dịch nguội đến nhiệt độ phòng pha loãng nước đến 100 ml Tùy thuộc vào hàm lượng phospho dự kiến, dùng pipet lấy xác 1,00 ml đến 10,0 ml dung dịch xử lí cho vào bình định mức 50 ml (4.5) Pha lỗng nước đến 15 ml Thêm 20 ml dung dịch axit ascorbic-molybdat (3.7) vào dung dịch thử bình định mức 50 ml làm dung dịch chuẩn phospho (3.10) Khuấy trộn kĩ dung dịch Đặt bình định mức giỏ kim loại (4.10) Đậy nắp bình định mức, chèn dải giấy lọc hẹp nắp để bình khơng bị đóng q chặt Dùng chèn kim loại đai thép không gỉ để chèn chặt bình Nhúng chìm giỏ kim loại nồi cách thủy (4.9) sơi mạnh Giữ bình định mức nồi cách thủy 15 Làm nguội bình vòi nước đến khoảng từ 20 °C đến 30 C sau pha lỗng nước khử ion đến 50 ml trộn 6.2 Xác định Chuyển dung dịch từ 6.1 vào cuvet (4.2) Đo độ hấp thụ dung dịch so với dung dịch mẫu trắng bước sóng 823 nm ± nm Phép đo phải thực vòng h sau phản ứng màu xảy Dựng đường chuẩn độ hấp thụ theo lượng phospho có dung dịch chuẩn (0 mg, 0,01 mg, 0,02 mg, 0,03 mg, 0,04 mg, 0,05 mg 0,06 mg) Nếu độ hấp thụ dung dịch thử vượt độ hấp thụ 0,06 mg phospho lặp lại phản ứng màu, sử dụng lượng nhỏ dung dịch xử lí Tính biểu thị kết Tính hàm lượng phospho có phần mẫu thử, Xo, gam 100 g (g/100 g) theo công thức: X0 = (V2 / V1 )xP x 100 W Trong đó: V1 thể tích dung dịch thử sử dụng phản ứng màu, tính mililit (ml); V2 dung tích bình định mức đựng phần mẫu thử tro hóa, tính mililit (ml) (V = 100 ml); P lượng phospho từ đường chuẩn tương ứng với độ hấp thụ dung dịch thử, tính miligam (mg); W khối lượng phần mẫu thử, tính miligam (mg) Tính hàm lượng phospho có mẫu thử, X1, biểu thị theo phosphatid (lecithin, g/100 g) theo cơng thức: X1 = 30 X0 Tính hàm lượng phospho có mẫu thử, X2, biểu thị theo P2O5, tính g/100 g theo cơng thức: X2 = 2,29 X0 Báo cáo kết đến hai chữ số có nghĩa Báo cáo thử nghiệm Báo cáo thử nghiệm phải bao gồm thông tin sau: a) thông tin cần thiết nhận biết đầy đủ mẫu thử; b) phương pháp lấy mẫu sử dụng, biết; c) phương pháp thử sử dụng, viện dẫn tiêu chuẩn này; d) chi tiết thao tác không quy định tiêu chuẩn này, xem tùy chọn, với tình bất thường ảnh hưởng đến kết quả; e) kết thử nghiệm thu Phụ lục A (Tham khảo) Kết nghiên cứu liên phòng thử nghiệm Bảng A.1 - Kết nghiên cứu liên phòng thử nghiệm xác định hàm lượng phospho tổng số có thực phẩm thành phần thực phẩm phương pháp quang phổ Thống kê Bột khoai Xúc xích tây Dăm bơng Thức ăn công Phomat Sữa gầy thức cho trẻ sơ sinh Đã trừ trường hợp ngoại lệ Số lượng phòng thử nghiệm 10 12 11 11 10 12 Số lượng phòng thử nghiệm ngoại lệ - - - Trung bình lần lặp lại, g/100 g 0,0761 0,166 0,233 0,285 0,641 0,960 Độ lệch chuẩn lặp lại, sr, g/100 g 0,0016 0,0079 0,0091 0,015 0,0096 0,010 2,1 4,8 3,9 5,4 1,5 1,1 Giới hạn lặp lại, r , g/100 g 0,0044 0,022 0,026 0,043 0,027 0,029 Độ lệch chuẩn tái lập, sR, g/100 g 0,0035 0,0115 0,018 0,017 0,027 0,034 4,7 6,9 7,7 6,1 4,1 3,6 0,0099 0,032 0,050 0,049 0,074 0,095 Độ lệch chuẩn tương đối lặp lại, RSDr, % a Độ lệch chuẩn tương đối tái lập, RSDR, % b Giới hạn tái lập, R , g/100 g Chưa trừ trường hợp ngoại lệ Số lượng phòng thử nghiệm Trung bình lần lặp lại, g/100g 12 - 12 - 12 - 0.077 - 0,243 - 0,67 - Độ lệch chuẩn lặp lại, sr, g/100 g 0,016 - 0,054 - 0,12 - Độ lệch chuẩn tương đối lặp lại, RSDr % 20,6 - 22,2 - 17,7 - Giới hạn lặp lại, r , g/100 g 0,045 - 0,151 - 0,33 - Độ lệch chuẩn tái lập, sR, g/100 g 0,017 - 0,053 - 0,12 - Độ lệch chuẩn tương đối tái lập, RSDR, % 21,6 - 22,0 - 17,7 - Giới hạn tái lập, Rb, g/100 g 0,047 - 0,150 - 0,33 - a a r = 2,8 x sr b R = 2,8 x sR THƯ MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] Pulliainen T.K., Wallin H.C.: Determination of total phosphorus in foods by colorimetric measurement of phosphorus as molybdenum blue after dry-ashing: NMKL interlaboratory study, J AOAC Int., 77, 1557(1994) [2] Pulliainen T.K., Wallin H.C.: Determination of total phosphorus in foods by colorimetry: summary of NMKL collaborative study, J AOAC Int., 79, 1408 (1996) ... phương pháp lấy mẫu sử dụng, biết; c) phương pháp thử sử dụng, viện dẫn tiêu chuẩn này; d) chi tiết thao tác không quy định tiêu chuẩn này, xem tùy chọn, với tình bất thường ảnh hưởng đến kết quả;... - Độ lệch chuẩn lặp lại, sr, g/100 g 0,016 - 0,054 - 0,12 - Độ lệch chuẩn tương đối lặp lại, RSDr % 20,6 - 22,2 - 17,7 - Giới hạn lặp lại, r , g/100 g 0,045 - 0,151 - 0,33 - Độ lệch chuẩn tái... Cách tiến hành 6.1 Chuẩn bị dung dịch mẫu thử Dùng cân (4.3), cân từ 0,5 g đến 1,5 g phần mẫu thử đồng nhất, xác đến mg, cho vào chén nung (4.4) Để kiểm soát khả bị nhiễm bẩn, chuẩn bị thuốc thử