Đang tải... (xem toàn văn)
Tiêu chuẩn ngành 10 TCN 582:2003 này áp dụng cho việc giám định rệp sáp vảy thuộc danh mục đối tượng kiểm dịch thực vật (KDTV) của Việt Nam ban hành kèm theo Quyết định số 117/2000/QĐ-BNN-BVTV ngày 20/11/2000 của Bộ trưởng Bộ Nông nghiệp và PTNT.
TIÊU CHUẨN NGÀNH 10 TCN 582:2003 QUI TRÌNH GIÁM ĐỊNH RỆP SÁP VẢY LÀ ĐỐI TƯỢNG KIỂM DỊCH THỰC VẬT CỦA VIỆT NAM The procedure of identification for armoured scale insects - Plant Quarantine Pests of Vietnam Phạm vi đối tượng áp dụng 1.1 Phạm vi Qui trình áp dụng thống phạm vi toàn quốc 1.2 Đối tượng Qui trình áp dụng cho việc giám định rệp sáp vảy thuộc danh mục đối tượng kiểm dịch thực vật (KDTV) Việt Nam ban hành kèm theo Quyết định số 117/2000/QĐ-BNN-BVTV ngày 20/11/2000 Bộ trưởng Bộ Nơng nghiệp PTNT Tiêu chuẩn trích dẫn Tiêu chuẩn Việt Nam TCVN 3937 - 2000 “Kiểm dịch thực vật - Thuật ngữ Định nghĩa”, 1999 Tiêu chuẩn Việt Nam TCVN 4731 – 89 “Kiểm dịch thực vật - Phương pháp lấy mẫu”, 1989 Tiêu chuẩn ngành 10 TCN 336 - 98 “Kiểm dịch thực vật - Phương pháp kiểm tra củ, xuất, nhập cảnh”, 1998 Tiêu chuẩn ngành 10 TCN 337 - 98 “Kiểm dịch thực vật - Phương pháp kiểm tra loại hạt xuất, nhập cảnh”, 1998 Tiêu chuẩn ngành 10 TCN 338 - 98 “Kiểm dịch thực vật - Phương pháp kiểm tra xuất, nhập cảnh”, 1998 Thuật ngữ định nghĩa Trong Tiêu chuẩn thuật ngữ hiểu sau: 3.1 Đối tượng kiểm dịch thực vật loài sinh vật có tiềm gây tác hại nghiêm trọng tài ngun thực vật vùng mà lồi sinh vật chưa xuất xuất có phân bố hẹp 3.2 Thực vật phận sống bao gồm hạt giống 3.3 Vật thể thuộc diện kiểm dịch thực vật thực vật, sản phẩm thực vật, phương tiện sản xuất, bảo quản, vận chuyển vật thể khác có khả mang đối tượng kiểm dịch thực vật 3.4 Dịch hại thực vật lồi, dòng, dạng sinh học thực vật, động vật tác nhân gây hại cho thực vật sản phẩm thực vật 3.5 Lô vật thể lượng định vật thể có điều kiện yếu tố giống khả nhiễm dịch 3.6 Mẫu khối lượng thực vật, sản phẩm thực vật đất lấy theo qui tắc định 3.7 Mẫu ban đầu khối lượng mẫu thực vật, sản phẩm thực vật đất lấy từ vị trí lô vật thể 3.8 Mẫu chung mẫu gộp mẫu ban đầu 3.9 Mẫu trung bình khối lượng thực vật, sản phẩm thực vật đất lấy từ mẫu chung theo qui tắc định, dùng để làm mẫu lưu mẫu phân tích 3.10 Mẫu phân tích khối lượng thực vật, sản phẩm thực vật đất dùng để phân tích rệp sáp vảy phòng thí nghiệm 3.11 Tiêu mẫu vật điển hình tiêu biểu rệp sáp vảy dùng cho việc định loại, nghiên cứu, giảng dạy, phổ biến kỹ thuật bảo tàng 3.12 Rệp sáp vảy côn trùng thuộc Họ rệp sáp vảy (Diaspididae), Bộ cánh (Homoptera) 3.13 Phần cuối bụng (Pygidium) đốt cuối thân liên kết với hoá cứng tạo thành Phương pháp thu thập bảo quản mẫu 4.1 Thu thập mẫu - Đối với hàng xuất, nhập khẩu, cảnh vận chuyển nước: Tiến hành lấy mẫu theo tiêu chuẩn Việt Nam TCVN 4731 - 89 - Đối với trồng đồng ruộng: Lấy mẫu theo phương pháp Tiêu chuẩn ngành 10 TCN 224 – 2003 4.2 Bảo quản mẫu - Bảo quản khô cắt phần thực vật bị hại có mang theo rệp sáp vảy để bơng phong bì giấy điều kiện độ ẩm tương đối khơng khí nhỏ 70% - Bảo quản ướt ngâm phận thực vật bị hại có mang theo rệp sáp vảy cồn 70% Phương pháp làm tiêu mẫu giám định Chỉ làm tiêu cố định rệp sáp vảy trưởng thành Có hai phương pháp làm tiêu cố định rệp sáp vảy: 5.1 Phương pháp - Tách rệp khỏi vảy, cho vào dung dịch KOH 10%, đun nóng nhiệt độ 90 - 95 oC (khơng sơi) 10 phút sau vớt - Chuyển tiêu vào nước cất, rửa sáp; sáp rửa cồn 96% - Ngâm tiêu vào dung dịch Carbolxylen (gồm phần Xylen + phần Carbolic tinh thể) - Ngâm tiêu vào hỗn hợp gồm 20% Axít Acetic + 80% cồn 50%, sau vớt để -5 phút - Nhuộm màu tiêu hỗn hợp 0,5gam Axít Fuchsine + 25ml HCl 10% + 300ml nước cất - Vớt tiêu ra, rửa thuốc nhuộm cồn 96% - phút, sau rửa cồn tuyệt đối - Chuyển tiêu vào dầu đinh hương(Clove oil) 20 phút - Cố định tiêu keo Canada 5.2 Phương pháp - Tách rệp khỏi vảy + Đối với mẫu sống dùng kim cắm côn trùng làm thủng lỗ phía đầu thể, ngâm mẫu rệp cồn 70% 10 - 15 phút + Đối với mẫu khô ngâm mẫu rệp dung dịch kiềm (NaOH KOH 10%) 24 đun cách thuỷ 30 phút - Rửa mẫu dung dịch kiềm nóng - Rửa lại mẫu nước cất - Ngâm mẫu cồn 70% 10 - 15 phút - Nhuộm mẫu Axit Fuchsine (bão hoà cồn 96 o) - Vớt mẫu chuyển mẫu vào ngâm cồn 96% 10 - 15 phút - Vớt mẫu đặt vào giọt dầu đinh hương lam kính, để 30 phút - Hút dầu giấy lọc - Cố định tiêu keo Canada Trình tự giám định 6.1 Mẫu rệp trưởng thành chưa làm tiêu bản: - Quan sát kính lúp soi có độ phóng đại từ 40 - 70 lần tiêu sau - Hình dạng đo kích thước rệp đực - Hình dạng vảy, số đốt bàn chân, đốt râu hình dạng râu rệp đực - Phần phụ miệng, bụng vùng hậu môn 6.2 Mẫu tiêu cố định: Quan sát kính hiển vi tiêu sau - Lỗ thở bụng, lỗ hậu mơn phía cuối bụng (ở mặt lưng), lỗ sinh dục cuối bụng (mặt bụng) - Các mấu lồi “L”, khe, gai tuyến hình trụ, hình đĩa phần cuối bụng (pygidium) Đặc điểm hình thái Rệp sáp dâu Pseudaulacaspis pentagona Targioni rệp sáp vảy ốc đen Quadraspidiotus perniciosus Comstock trình bày phụ lục Thẩm định kết giám định báo cáo Sau khẳng định kết giám định rệp sáp vảy đối tượng kiểm dịch thực vật Việt Nam, đơn vị giám định phải báo cáo Cục Bảo vệ thực vật (kèm phiếu kết giám định), đồng thời gửi tiêu mẫu rệp Trung tâm Phân tích giám định thí nghiệm KDTV để phúc tra Đơn vị lần giám định phát rệp sáp vảy đối tượng KDTV Việt Nam phải gửi mẫu tiêu Trung tâm Phân tích giám định thí nghiệm KDTV để thẩm định trước định công bố dịch xử lý Đơn vị giám định phải lưu mẫu thời hạn tháng để giải khiếu nại kết giám định (nếu có) Mẫu phiếu kết giám định phụ lục kèm theo PHỤ LỤC 1 Đặc điểm nhận dạng rệp sáp dâu Pseudaulacaspis pentagona Targioni - đối tượng kiểm dịch thực vật nhóm II Việt Nam 1.1 Vảy rệp cái: Dài mm - 2,5 mm, hình tròn, lồi, màu trắng xám giống vỏ Xác tuổi nằm phía trước lệch sang bên 1.2 Rệp cái: - Màu vàng da cam đỏ, thân dài gần mm, hình lê dẹt, ngực rộng, bụng chia đốt, bên cạnh lồi múi - Cơ thể không chia thành đầu, ngực, bụng rõ ràng - Râu đầu thối hố mấu lồi, khơng có cánh, khơng mắt, vòi dài khơng có chân Cơ thể bao phủ vảy cứng dễ tách khỏi thể Xung quanh lỗ thở trước mặt bụng đốt ngực thứ có 18 tuyến đĩa - Phần cuối bụng “Pygidium” rộng, thuỳ (L1) phát triển, đỉnh lượn tròn, rìa có cưa Gờ phía tuyến gai mặt bụng phát triển Thuỳ bên (L2) nhỏ (L1), đỉnh nhọn tròn chia làm hai múi Thuỳ (L3) chia hai múi - Các tuyến gai bên đốt thứ nằm tách biệt Đỉnh tuyến gai phân thành gai nhỏ Từ mép ngồi vào pygidium, tuyến hình trụ lớn rõ đốt thứ giảm dần đến đốt thứ đốt ngực trước đốt ngực cuối có vài tuyến gai tuyến ống - Lỗ hậu môn nằm mặt lưng pygidium, phần cuối pygidium hoá cứng Lỗ sinh dục nằm mặt bụng cuối pygidium, xung quanh có nhóm tuyến hình đĩa Tuyến gai bên L3 L2 L1 L3 L2 L1 Hình Phần cuối bụng (Pygidium) rệp sáp dâu Pseudaulacaspis pentagona Targioni 1.3 Vảy rệp đực: Dài 0,8 - mm, hai bờ bên song song, vảy có rãnh dọc rõ, màu trắng xám, xác tuổi phía đỉnh màu vàng da cam 1.4 Rệp đực: - Hình thoi, dài 0,6 - 0,7 mm, màu đỏ da cam, mắt kép màu đen - Râu đầu hình sợi có 10 đốt, dài thân Bàn chân đốt có móng đơn - Một đơi cánh rộng, màu trắng xám, dài thân - Bụng dài, gai sinh dục dài 1/3 thân 1.5 Ấu trùng: Màu vàng đến đỏ da cam, thân dẹt, tuổi có chân phát triển Tuổi có hình dáng giống rệp cái, khơng có mắt, chân râu Đặc điểm nhận dạng rệp sáp vảy ốc đen Quadraspidiotus perniciosus Comstock - đối tượng kiểm dịch thực vật nhóm I Việt Nam 2.1 Vảy rệp cái: Đường kính 1,5 – mm, hình tròn, màu xám, phía vảy màu xám Màu sắc, hình dạng kích thước vảy thay đổi theo ký chủ 2.2 Rệp cái: - Cơ thể bao phủ vảy cứng dễ tách khỏi thể - Hình tròn, màu vàng chanh, khơng mắt, không râu, không cánh không chân - Cơ thể không chia thành đầu, ngực, bụng rõ ràng - Vòi dài gấp chiều dài thân - Hai đơi lỗ thở ngực trước sau Bên cạnh lỗ thở có số tuyến - Lỗ hậu mơn phía cuối bụng mặt lưng 1/3 pygidium tính từ xuống - Lỗ sinh dục phía cuối bụng mặt bụng xung quanh khơng có tuyến - Phần cuối bụng “Pygidium” có 02 thuỳ (L1 L2) phát triển, L1 lớn L2, đỉnh thuỳ lượn tròn Mặt lưng thuỳ L1 có chấm lõm Mặt bụng thuỳ L2 có chấm lõm rõ Thuỳ L3 không rõ ràng, gồm gai nhỏ giống hình lược - Các tuyến gai bên đốt bụng thứ chia thành mấu gai nhỏ hình lược Hai tuyến gai phía chia thành 02 gai nhỏ, tuyến phía chia thành 06 gai nhỏ Đỉnh pygidium có gờ cụt Các lược phía ngồi to phía 2.3 Vảy rệp đực - Hình van, kích thước x 0,6 mm, màu sắc gần giống vảy rệp 2.4 Rệp đực - Cơ thể chia phần đầu, ngực, bụng rõ ràng - Hình thoi, dài 0,5 – mm, màu da cam - Râu đầu 10 đốt, đơi chân, bàn chân đốt có móng đơn, cánh phát triển, vòi thối hố Lưu ý: Thơng thường, số lượng cá thể nghiên cứu phải đảm bảo 30 (n=30) Trong trường hợp số lượng cá thể phát cá thể rệp có đặc điểm nhận dạng cho phép kết luận Pseudaulacaspis pentagona Targioni Quadraspidiotus perniciosus Comstock (chỉ áp dụng đơn vị giám định rệp sáp vảy Pseudaulacaspis pentagona Quadraspidiotus perniciosus Comstock) L1 L2 L3 Tuyến gai bên Hình Phần cuối bụng (Pygidium) rệp sáp vảy ốc đen Quadraspidiotus perniciosus Comstock PHỤ LỤC CỘNG HOÀ XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập - Tự - Hạnh phúc ngày tháng năm 200 PHIẾU KẾT QUẢ GIÁM ĐỊNH RỆP SÁP VẢY LÀ ĐỐI TƯỢNG KDTV CỦA VIỆT NAM Tên lô hàng trồng: Nước xuất địa điểm gieo trồng nước: Nước xuất xứ: Phương tiện vận chuyển: Địa điểm lấy mẫu: Ngày lấy mẫu: Người lấy mẫu: Tình trạng mẫu trồng bị hại: Ký hiệu mẫu: 10 Số mẫu lưu: 11 Người giám định: Khối lượng: 12 Phương pháp giám định: Theo Tiêu chuẩn ngành số 10 TCN 582 - 2003 “Qui trình giám định rệp sáp vảy đối tượng kiểm dịch thực vật Việt Nam” 13 Kết giám định: Tên khoa học: Họ: Diaspididae Bộ: Homoptera Là đối tượng KDTV nhóm thuộc Danh mục đối tượng kiểm dịch thực vật Việt Nam Thủ trưởng Đơn vị Trưởng phòng kỹ thuật (Ký tên đóng dấu) (hoặc người giám định) TÀI LIỆU THAM KHẢO Pháp lệnh Bảo vệ Kiểm dịch thực vật công bố Lệnh Chủ tịch nước số 11/2001/LCTN ngày 08 tháng 08 năm 2001 Điều lệ kiểm dịch thực vật ban hành kèm theo Nghị định số 58/2002/NĐ-CP Chính phủ ngày 03 tháng 06 năm 2002 Đường Hồng Dật - Chủ biên (1996) Từ điển bách khoa Bảo vệ thực vật, Nhà xuất Nông nghiệp Viện Bảo vệ thực vật (1997) Phương pháp nghiên cứu Bảo vệ thực vật, tập 1, Nhà xuất Nông nghiệp Hill, D S (1983) Agricultural Insects of the Tropical and their Control, Cambridge University Smith, I M (EPPD); McNamara, D G (EPPD); Scott, P R (CABI); Holderness, M (CABI) (1997) Quarantine Pest for Europe, CAB International, Cambridge University Williams, D J and Watson, G W (1998) The Scale insects of the Tropical South Pacific Region, part 1, The Armoured scales (Diaspididae), C.A.B International, Cambrian New Ltd, Aberystwyth - UK European and Mediterranean Plant Protection Organization (1979) Data Sheet on Quarantine Organisms, Paris 1, rue Le Nôtre ... mẫu: Tình trạng mẫu trồng bị hại: Ký hiệu mẫu: 10 Số mẫu lưu: 11 Người giám định: Khối lượng: 12 Phương pháp giám định: Theo Tiêu chuẩn ngành số 10 TCN 582 - 2003 “Qui trình giám định rệp sáp vảy...- Đối với trồng đồng ruộng: Lấy mẫu theo phương pháp Tiêu chuẩn ngành 10 TCN 224 – 2003 4.2 Bảo quản mẫu - Bảo quản khô cắt phần thực vật bị hại có mang theo rệp... 95 oC (khơng sơi) 10 phút sau vớt - Chuyển tiêu vào nước cất, rửa sáp; sáp rửa cồn 96% - Ngâm tiêu vào dung dịch Carbolxylen (gồm phần Xylen + phần Carbolic tinh thể) - Ngâm tiêu vào hỗn hợp gồm