Đang tải... (xem toàn văn)
Tiêu chuẩn ngành 10 TCN 924-2006 về qui trình chẩn đoán bệnh giun bao áp dụng để chẩn đoán bệnh giun bao ở các loài động vật có vú, trong phòng thí nghiệm. Mời các bạn cùng tham khảo nội dung chi tiết.
BỘ NƠNG NGHIỆP VÀ PHÁT TRIỂN NƠNG THƠN 10TCN TIÊU CHUẨN NGÀNH 10 TCN 924 2006 QUI TRÌNH CHẨN ĐỐN BỆNH GIUN BAO 10 TCN 9242006 Hà Nội, 2006 TIÊU CHUẨN NGÀNH 10 TCN 9242006 QUI TRÌNH CHẨN ĐỐN BỆNH GIUN BAO (TRICHINELLOSIS) (Ban hành kèm theo Quyết định số /QĐBNNKHCN ngày tháng 12 năm 2006 của Bộ trưởng Bộ Nơng nghiệp và Phát triển nơng thơn) 1. Phạm vi áp dụng Qui trình này được áp dụng để chẩn đốn bệnh giun bao ở các lồi động vật có vú, trong phòng thí nghiệm 2. Khái niệm Bệnh giun bao (còn gọi là giun xoắn) ở động vật gây ra bởi lồi Trichinella spiralis; là một bệnh chung nguy hiểm, truyền lây giữa người và nhiều gia súc có vú; đặc biệt là lợn. Bệnh giun bao phân bố hầu khắp thế giới, có ở nhiều nước châu Âu (Italia), châu Á (Laos), Mĩ la tinh, ít thấy ở châu Úc. Ở Việt Nam, trong thập kỷ 70 thế kỷ XX, các tỉnh như Nghĩa Lộ (cũ), Lai Châu thuộc miền núi phía bắc đã phát hiện thấy giun bao Giun trưởng thành ký sinh trong ruột non của người và gia súc; giai đoạn gây bệnh từ khi ấu trùng xâm nhập vào cơ thể, theo dịch lâm ba vào hệ lâm ba di hành vào cơ vân cư trú và gây xơ hố, vơi hố. Ấu trùng tồn tại rất lâu trong cơ thể; khoảng 20 – 24 năm trong cơ thể người bệnh, ở lợn khoảng 11 năm. Đây là nguồn lây bệnh nguy hiểm cho cộng đồng Người, súc vật bị nhiễm bệnh do ăn phải ấu trùng trong cơ có sức gây nhiễm chưa được nấu chín. Gia súc ăn, uống phải thức ăn, nước uống có lẫn phân có ấu trùng gây nhiễm sẽ nhiễm bệnh 3. Lấy mẫu bệnh phẩm 10 TCN 9242006 Các bước tiến hành như sau: Mổ khám tồn bộ cơ thể bệnh súc nghi nhiễm, quan sát từ ngồi vào trong; đặc biệt chú ý những vùng cơ có vết vơi hố. Những gia súc có biểu hiện viêm Mẫu là cơ vân, chú ý một vài nơi ấu trùng ưa ký sinh là: chân cơ hồnh, cơ lưỡi, cơ hầu. Ngồi ra còn có thể lấy cơ thực quản, cơ tai, cơ mơi trên Đặc biệt chú ý lấy những mẫu cơ vân có biểu hiện viêm, xơ hố hay can xi hố điển hình. tốt Mỗi mẫu lấy 100g; trong một mẫu, lấy được ở nhiều vị trí cơ vân càng Mẫu bệnh phẩm sau khi lấy phải được ghi rõ các nội dung: Tên chủ gia súc, địa điểm lấy mẫu, thời gian, loại gia súc, tuổi, tính biệt, các triệu chứng lâm sàng, bệnh tích. Mẫu lấy xong, phải giữ trong lạnh 40C và gửi ngay về phòng thí nghiệm có chức năng, đầy đủ năng lực để chẩn đốn 10 TCN 9242006 Gia súc nghi ngờ Các thơng tin từ chủ gia súc Các dấu hiệu lâm sàng và dịch tễ Mẫu lấy từ gia súc cần xác định Mẫu cơ vân Mẫu huyết thanh phát hiện KT Phương pháp ép soi ELISA Phương pháp tiêu Kết luận SƠ ĐỒ CHẨN ĐỐN BỆNH GIUN BAO GIA SÚC 4. Các phương pháp chẩn đốn 4.1. Chẩn đốn lâm sàng Dựa vào các triệu chứng lâm sàng điển hình (như lợn) là: Sốt sau 3 – 5 ngày nhiễm, kiết lỵ, nơn mửa và gày sút nhanh chóng. Ở thể nhẹ hơn, lợn có cảm 10 TCN 9242006 giác ngứa và hay cọ xát vào tường, có biểu hiện đau cơ như đi lại khó khăn. Biểu hiện các dấu hiệu lâm sàng kéo dài khoảng 30 ngày sau đó khơng có biểu hiện rõ rệt Dựa vào dịch tễ học: Bệnh thường phát ra khi ăn phải thịt sống hoặc nấu chưa chín mà trong đó có ấu trùng giun xoắn. Bệnh cũng thường gặp những vùng có tập qn sử dụng gỏi thịt sống, nem chua 4.2. Chẩn đốn trong phòng thí nghiệm Trong phòng thí nghiệm thường sử dụng các phương pháp như ép cơ soi trên kính hiển vi để tìm ấu trùng hoặc tiêu cơ trong dung dịch tiêu cơ 4.2.1. Phương pháp ép cơ soi Đây là phương pháp đơn giản và thủ cơng, được áp dụng nhiều trong việc kiểm sốt giết mổ tại thực địa. Phương pháp này dễ thực hiện, khơng đòi hỏi nhiều kinh phí, song khả năng phát hiện ấu trùng khơng cao Các bước tiến hành Chọn phần cơ có biểu hiện viêm hoặc can xi hố; Dùng dao, kéo cắt phần cơ vân của gia súc cần kiểm tra thành ít nhất 28 phần có kích thước 2 x 10 mm; nếu có nhiều loại mẫu cơ vân, thì nên làm để so sánh độ nhạy Đưa mảnh cơ vào kính ép cơ chun dụng, dùng vít ở hai đầu vít chặt cho cơ được dàn mỏng tối đa; Kiểm tra dưới kính hiển vi độ phóng đại 100, 200, 400 lần Kiểm tra kết quả: Dương tính khi thấy ấu trùng nằm cuộn tròn trong cơ, trong vỏ bọc là lớp can xi hố Khơng tìm thấy ấu trùng giun xoắn, chuyển sang phương pháp tiêu cơ 4.2.2. Phương pháp tiêu cơ Là phương pháp có độ chính xác cao; tuy vậy việc thực hiện phương pháp này mất nhiều thời gian, tốn kém vật tư hóa chất. Thường được áp dụng trong nghiên cứu và các chương tình điều tra. Các bước tiến hành Chọn phần cơ có biểu hiện viêm hoặc can xi hố; Dùng dao, kẹp, kéo cắt phần cơ vân của gia súc cần kiểm tra; Dùng dao, kéo cắt nhỏ mẫu vừa lấy thành mảnh (khoảng 0,5 – 1g/mảnh); Cho toàn bộ vào đĩa lồng; Bổ sung dung dịch tiêu cơ; đậy nắp đĩa lồng; 10 TCN 9242006 Ủ ở nhiệt độ 360C – 390C, thời gian 6 – 12 tiếng; Hút bỏ toàn bộ phần nước trong trên, giữ phần cặn đáy rồi đưa lên kính hiển vi kiểm tra Kiểm tra kết quả: Tồn bộ phần cơ bị tiêu hết nhờ dung dịch tiêu cơ, phần cặn sẽ là ấu trùng giun bao (nếu có). Kiểm tra tồn bộ phần cặn trên kính hiển vi độ phóng đại 100, 200, 400 lần Kết luận dương tính khi phát hiện ấu trùng giun bao; âm tính khi khơng tìm thấy ấu trùng giun trong phần cặn Phương pháp phát hiện kháng thể bằng ELISA ít có ý nghĩa trong chẩn đốn, chỉ dùng để điều tra chung. 5. Kết luận bệnh Dương tính: Khi xác định được ấu trùng giun bao trong cơ (ở bất kỳ phương pháp nào) Âm tính: Khi khơng tìm thấy ấu trùng giun bao ở phương pháp tiêu cơ KT. BỘ TRƯỞNG THỨ TRƯỞNG 10 TCN 9242006 PHỤ LỤC I Phương pháp pha dung dịch tiêu cơ Thành phần: Men Pepsin : Nguyên chất (01ml) HCl 1N : Chuẩn (01ml) NaCl : Dung dich nước muối sinh lý (0,85%) (98ml) (Có thể dùng dung dịch tiêu cơ là men Tripsin 0,5% thay cho Pepsin) PHỤ LỤC II Máy móc, dụng cụ, hố chất để chẩn đốn bệnh giun bao 1. máy móc Tủ lạnh; Kính hiển vi độ phóng đại 100, 200, 400 lần; Tủ ấm, tủ sấy; Máy li tâm nhỏ (nếu có); Kính hiển vi quang học 2. Dụng cụ Bộ đồ lấy mẫu gia súc; Dao, kẹp, kéo; Phích lạnh bảo quản mẫu; Bút viết nhãn; Bộ hộp đĩa lồng; Găng tay, khẩu trang; Kính ép cơ chuyên dụng 10 TCN 9242006 3. Hố chất Men Pepsin (hoặc Tripsin); HCl 1N; NaCl TÀI LIỆU THAM KHẢO 1.Phan Lục – Giáo trình Ký sinh trùng và bệnh Ký sinh trùng thú y – NXB Nơng nghiệp, 1997 2.Phạm Văn Kh, Phan Lục – Giáo trình Ký sinh trùng và bệnh Ký sinh trùng thú y – NXB Nông nghiệp, 1996 JICA – National Institute Animal Health of Thailand Standard Diagnostic Manual for livestock Diseases in Thailand, Second edition, 1998 JICA – National Institute Animal Health of Thailand Standard Diagnostic Manual for livestock Diseases in Thailand, Third edition, 2003 OIE – Manual of Standards for Diagnostic Test and Vaccine – 1996. 6.Me’lanie Picherot, Isabelle P Oswald, Martine Cote, Karsten Noeckler, Franck Le Guerhier, Pascal Boireau and Isabelle Valle'e – Swine infection with Trichinella spiralis: Comparative analysis of the mucosal intestinal and systemic immune responses Veterinary Parasitology, In Press, Corrected Proof, Available online 7 September 2006 7.Edoardo Pozio, Pietro Mesina, Franco Sechi, Michele Pira, Manuele Liciardi, Pasquale Cossu, Gianluca Marucci, Giovanni Garippa and Antonio Firinu – Human outbreak of trichinellosis in the Mediterranean island of Sardinia, Italy. Veterinary Parasitology, Volume 140, Issues 12, 31 August 2006, Pages 177180. 8.Somphou Sayasone, Peter Odermatt, Phengta Vongphrachanh, Valy Keoluangkot, Jean DupouyCamet, Paul N. Newton and Michel Strobel – A trichinellosis outbreak in Borikhamxay Province, Lao PDR Transactions of the Royal Society of Tropical Medicine and Hygiene, Volume 100, Issue 12, December 2006, Pages 11261129 ... 10 TCN 9242006 Hà Nội, 2006 TIÊU CHUẨN NGÀNH 10 TCN 9242006 QUI TRÌNH CHẨN ĐỐN BỆNH GIUN BAO... Cho toàn bộ vào đĩa lồng; Bổ sung dung dịch tiêu cơ; đậy nắp đĩa lồng; 10 TCN 9242006 Ủ ở nhiệt độ 360C – 390C, thời gian 6 – 12 tiếng;... Kiểm tra kết quả: Tồn bộ phần cơ bị tiêu hết nhờ dung dịch tiêu cơ, phần cặn sẽ là ấu trùng giun bao (nếu có). Kiểm tra tồn bộ phần cặn trên kính hiển vi độ phóng đại 100 , 200, 400 lần Kết luận dương tính khi phát hiện ấu trùng giun bao; âm tính khi khơng tìm