Đang tải... (xem toàn văn)
Nghiên cứu này nhằm đánh giá tác động hạ glucose huyết và lipid huyết của các cao chiết phân đoạn từ dịch toàn phần ethanol của thân cây đậu bắp. Mời các bạn cùng tham khảo bài viết.
Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 17 * Phụ Số * 2013 Nghiên cứu Y học TÁC DỤNG DƯỢC LÝ CỦA CÁC PHÂN ĐOẠN CHIẾT TỪ THÂN CÂY ĐẬU BẮP ABELMOSCHUS ESCULENTUS L – MALVACEAE TRÊN CHUỘT NHẮT Huỳnh Ngọc Trinh*, Nguyễn Bảo Yến*, Vũ Thị Thanh Thảo*, Trần Thủy Tiên*, Mai Phương Mai* TÓM TẮT Mục tiêu: nghiên cứu nhằm đánh giá tác động hạ glucose huyết lipid huyết cao chiết phân đoạn từ dịch toàn phần ethanol thân đậu bắp Phương pháp: cao toàn phần ethanol chiết phương pháp đun hồi lưu với dichloromethan ethylacetat Chuột gây đái tháo đường thực nghiệm alloxan gây tăng lipid huyết tyloxapol Các cao phân đoạn thu được cho chuột uống ngày Glucose huyết đo ngày vòng 15 ngày thực nghiệm Cholesterol, triglyceride huyết đo 24 sau tiêm tyloxapol Kết quả: vào cuối đợt điều trị, nồng độ glucose huyết nhóm chuột uống cao dichloromethan có giảm nhẹ chưa khác biệt có ý nghĩa thống kê so với nhóm khơng điều trị Cao ethylacetat làm giảm rõ rệt nồng độ glucose cholesterol triglycerid huyết nhóm chuột điều trị với cao Cắn lại sau chiết khơng ảnh hưởng đến nồng độ glucose cholesterol chuột thử nghiệm Kết luận: cao khảo sát, cao ethylacetat đồng thời thể rõ tác động hạ glucose lipid huyết liều 30 60 g/kg Từ khóa: đái tháo đường, tình trạng tăng lipid huyết, Okra ABSTRACT PHARMACOLOGICAL EFFECT OF DIFFERENT FRACTIONAL EXTRACTS FROM PLANTS OF OKRA ABELMOSCHUS ESCULENTUS L MALVACEAE IN MICE Huynh Ngoc Trinh, Nguyen Bao Yen, Vu Thi Thanh Thao, Tran Thuy Tien, Mai Phuong Mai * Y Hoc TP Ho Chi Minh * Vol 17 - Supplement of No - 2013: 429 - 433 Objectives: this study aim to evaluate hypoglycemic and hypolipidemic effects of different fractional extracts obtained from total ethanol extract of Okra plant Methods: total ethanol extract were extracted under reflux condition by using dichloromethane and acetate ethyl Obtained fractional extracts were orally given to alloxan-induced diabetic mice or tyloxapol-induced hyperlipidemic mice at doses equivalent to 30g or 60g of dry powder/kg Blood glucose levels were determined every days during 15 days of treatment Cholesterol and triglyceride levels were determined 24 h after tyloxapol injection Results: at the end of treatment, glucose levels of mice treated with dichloromethane extract were slightly decreased but were not significantly different as compared to untreated mice Acetate ethyl extract significantly lowered glucose as well as cholesterol and triglyceride levels of treated mice Residual extract did not influence glucose and cholesterol levels of experimental mice Conclusion: among studied fractions, acetate ethyl extract exhibited clearly hypoglycemic and hypolipidemic effect at dose of 30g/kg and 60g/kg Keywords: diabetes, hyperlipidemia, Okra * Khoa Dược, Đại học Y Dược TP.HCM Tác giả liên lạc: TS Huỳnh Ngọc Trinh Chuyên Đề Dược Học ĐT: 0838295641 Email: trinhbl81@yahoo.com 429 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 17 * Phụ Số * 2013 ĐẶT VẤN ĐỀ Ngày nay, bệnh đái tháo đường (ĐTĐ) bệnh mãn tính có xu hướng gia tăng giới nói chung Việt Nam nói riêng Ngồi ra, bệnh nhân bị rối loạn dung nạp đường thường kèm theo rối loạn chuyển hóa lipid huyết tăng nguy mắc chứng vữa xơ thành mạch bệnh tim mạch(2) Hiện nay, xu hướng sử dụng thảo dược điều trị bệnh đái tháo đường chứng rối loạn lipid huyết quan tâm tương đối an tồn, tác dụng phụ giúp giảm thiểu chi phí điều trị Trong số đó, đậu bắp Abelmoschus esculentus L sử dụng từ lâu dân gian phương thuốc hỗ trợ điều trị đái tháo đường Những nghiên cứu gần cho thấy cao chiết toàn phần cồn 50% từ thân đậu bắp khơng có tác dụng hạ glucose huyết mà hạ lipid huyết(5) Vì vậy, với mong muốn xa để tìm hiểu khả ứng dụng đậu bắp điều trị, thực nghiên cứu tác dụng dược lý cao chiết phân đoạn từ thân Đậu bắp mơ hình thực nghiệm chuột nhắt VẬT LIỆU -PHƯƠNGPHÁP NGHIÊNCỨU Vật liệu Thú thử nghiệm Chuột nhắt trắng chủng Swiss albino, phái đực, từ 4,5 đến 6,5 tuần tuổi, cân nặng khoảng 18g đến 26g, mua từ Viện Pasteur Nha Trang nuôi thức ăn viên viện cung cấp Chuột nuôi ổn định nhiệt độ phòng 3-4 ngày trước bắt đầu thử nghiệm Trung Quốc) Alloxan (Sigma-Aldrich Chemie Gmbh) Tyloxapol – Triton WR 1339 (Sigma-Aldrich Chemie Gmbh) Glibenclamid (CTCP XNK Domesco) Atorvastatin (Lipitor 20mg- Pfizer) Chất chống đông (EDTA –Sigma) Thuốc thử glucose (ISE, Italy) Thuốc thử cholesterol, thuốc thử triglycerid (Shenzhen Mindray Bio-medical Electronics Co., LTD) Phương pháp Phương pháp chiết Dược liệu sấy khô nhiệt độ 70ºC vòng 3-4 tiếng xay nhỏ rây qua rây 2mm Bột dược liệu chiết kiệt theo phương pháp đun hồi lưu cồn 50% Dịch chiết cô quay nhiệt độ 60°C áp suất giảm đến cao lỏng Cao lỏng cách thủy 70°C đến cao đặc, sau sấy chân không 35°C đến cao khô, tơi xốp Sau đó, cao chiết tồn phần tiếp tục chiết kiệt phương pháp đun hồi lưu với dichloromethan thu dịch chiết T1, đem cô quay cách thủy để bay dung môi, thu cao phân đoạn T1 Phần cắn lại tiếp tục chiết tương tự với dung môi ethylacetat, thu cao phân đoạn T2 Phần cắn lại bình sau bay dung môi thu cao phân đoạn T3 Dược liệu Thân đậu bắp Albelmoschus esculentus L (toàn sau thu hoạch quả, nhổ rễ thân) thái mỏng, phơi khô nắng vừa, bảo quản nơi khô mát, tránh ẩm ướt, mối mọt Khảo sát tác dụng hạ glucose huyết Chuột cho nhịn đói qua đêm trước tiêm alloxan Chuột gây tăng glucose huyết cách tiêm tĩnh mạch dung dịch alloxan liều 60mg/kg (pha nước muối sinh lý) Thời điểm 48 sau tiêm, chuột lấy máu để đánh giá tình trạng ĐTĐ Những chuột có nồng độ glucose huyết cao 200mg/dL lựa chọn vào thí nghiệm khảo sát tác dụng hạ glucose huyết cao dược liệu Hóa chất Dung mơi chiết xuất: ethanol, dichloromethan, ethylacetat (dung môi kỹ thuật, Chuột bị ĐTĐ điều trị ngẫu nhiên cách cho uống thuốc đối chứng (glibenclamid, liều 5mg/kg, lần/ngày) cao phân đoạn 430 Chuyên Đề Dược Học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 17 * Phụ Số * 2013 với liều tương đương 30g 60g bột dược liệu khơ/kg, lần/ngày Đối với nhóm chuột chứng bệnh, chuột cho uống nước cất suốt trình thử nghiệm Chuột điều trị vòng 15 ngày Đánh giá glucose huyết chuột ngày suốt trình điều trị Khảo sát tác dụng hạ lipid huyết cấp Chuột cho nhịn đói qua đêm trước tiến hành thử nghiệm Chuột gây tăng lipid cách tiêm tĩnh mạch dung dịch tyloxapol (pha nước muối sinh lý) liều 250mg/kg Ngay sau đó, chuột cho uống atorvastatin (64mg/kg) cao dược liệu với liều 30g 60g/kg Nghiên cứu Y học Đo nồng độ cholesterol triglycerid huyết vào thời điểm 24 sau tiêm tyloxapol Phương pháp đánh giá kết Các số liệu thu được trình bày dạng Trung bình ± SEM Dùng ANOVA, pair T test để so sánh khác biệt nhóm thử nghiệm thời điểm trước sau điều trị nhóm chuột Sự khác biệt có ý nghĩa p < 0,05 KẾT QUẢ Tác dụng hạ glucose huyết Kết định lượng nồng độ glucose huyết chuột thử nghiệm trình điều trị trình bày bảng Bảng Nồng độ glucose huyết (mg/dL) nhóm chuột q trình điều trị Lơ Chứng bệnh Glibenclamid 5mg/kg Cao T1 60mg/kg Cao T1 30mg/kg Cao T2 60mg/kg Cao T2 30mg/kg Cao T3 60mg/kg Cao T3 30mg/kg n 8 6 Ngày 349,0 ± 30,2 367,5 ± 26,3 328,0 ± 34,8 355,9 ± 28,5 336,3 ± 28,1 350,3 ± 29,4 369,3 ± 25,8 326,4 ± 27,0 Ngày 268,2 ±21,7 256,3 ± 55,7 369,4 ± 54,9 259,2 ± 33,9 200,1 ± 47,7 202,0 ± 39,3 (#) 320,6 ± 47,9 277,6 ± 35,1 Ngày 10 304 ± 38,2 270,7 ± 53,0 273,0 ± 36,5 254,6 ± 37,5 245,2 ± 37,8 297,1 ± 40,2 350,1 ± 23.2 312,1 ± 42,4 Ngày 15 322,8 ± 35,9 213,7 ± 44,2 (#) 259,6 ± 36,3 232,0 ± 36,64 180,9 ± 27,3 (*)(#) 232,3 ± 41,7 287,2 ± 26,1 290,0 ± 37,5 Tỉ lệ giảm (%) 42 21 35 46 34 22 11 Số liệu trình bày dạng Trung bình ± SEM (*) p < 0,05 khác biệt có ý nghĩa so với nhóm chứng (#) P < 0,05 khác biệt có ý nghĩa so với ngày đầu điều trị lô Kết thực nghiệm cho thấy, liều 60mg/kg tiêm tĩnh mạch, alloxan gây tình trạng bệnh tương đối ổn định vòng 15 ngày Sau điều trị glibenclamid 5mg/kg hay với cao khác nhau, glucose huyết chuột thực nghiệm có giảm so với thời điểm ban đầu (bảng 1) Đối với cao T1, hai liều điều trị (30g/kg 60g/kg), cao T1 làm giảm nhẹ glucose huyết sau 15 ngày điều trị chưa khác biệt có ý nghĩa so với lơ chứng so với ngày đầu điều trị Riêng cao T2, sau ngày điều trị, liều 30g/kg 60g/kg làm giảm đáng kể nồng độ glucose huyết so với nhóm chứng bệnh Tuy nhiên, vào thời điểm này, số chuột (30%) lô điều trị có glucose huyết xuống Chuyên Đề Dược Học 126 mg/dL nên chúng tơi giảm liều 60g/kg xuống 30g/kg ngừng cho uống cao T2 lô điều trị với liều 30g/kg Sự thay đổi chế độ điều trị dẫn đến glucose huyết lô chuột tăng trở lại vào lần đo Do đó, chúng tơi trì lại liều điều trị ban đầu từ ngày 10 Kết đo vào cuối đợt thử nghiệm cho thấy glucose huyết lô chuột giảm đáng kể (lần lượt 46% 34% so với thời điểm ban đầu) Đặc biệt lô cho uống cao T2 liều 60g/kg, glucose huyết ngày 15 giảm có ý nghĩa so với thời điểm ban đầu so với lô chứng bệnh (P