Đang tải... (xem toàn văn)
Trong nghiên cứu này, chúng tôi tiến hành hoàn thiện kỹ thuật Microsatellite - DNA và áp dụng kỹ thuật này để xác định người lành mang gen bệnh thông qua việc khuếch đại các vùng trình tự lặp lại STR (short tandem repeat) và so sánh với kết quả phát hiện đột biến bằng kỹ thuật giải trình tự gen. Kỹ thuật giải trình tự gen và kỹ thuật Microsatellite - DNA cho kết quả trùng khớp nhau cho thấy đã hoàn thiện được kỹ thuật Microsatellite - DNA phát hiện người lành mang gen bệnh; 10/10 người mẹ đã được phát hiện là người lành mang gen bệnh, 24/38 thành viên nữ trong gia đình bệnh nhân là người lành mang gen bệnh.
TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC XÁC ĐỊNH NGƯỜI LÀNH MANG GEN BỆNH HEMOPHILIA A BẰNG KỸ THUẬT MICROSATELLITE-DNA Đỗ Thị Hiến, Trần Huy Thịnh, Trần Vân Khánh Trường Đại học Y Hà Nội Hemophillia A bệnh di truyền lặn nhiễm sắc thể giới tính X gây nên thiếu hụt yếu tố đông máu FVIII Xác định đột biến gen, phát người lành mang gen bệnh tư vấn di truyền giải pháp hiệu giúp ngăn ngừa giảm tỉ lệ mắc bệnh Việc phát người lành mang gen bệnh thường thực kỹ thuật phát đột biến trực tiếp gen F8 dựa vào đột biến điểm bệnh nhân Tuy nhiên, số trường hợp không phát thấy đột biến việc phát đột biến gặp khó khăn cấu trúc gen lớn, kỹ thuật phân tích gián tiếp áp dụng dựa vào xác định allele đột biến (Linkage analysis)…Trong nghiên cứu này, chúng tơi tiến hành hồn thiện kỹ thuật Microsatellite - DNA áp dụng kỹ thuật để xác định người lành mang gen bệnh thông qua việc khuếch đại vùng trình tự lặp lại STR (short tandem repeat) so sánh với kết phát đột biến kỹ thuật giải trình tự gen Kỹ thuật giải trình tự gen kỹ thuật Microsatellite - DNA cho kết trùng khớp cho thấy hoàn thiện kỹ thuật Microsatellite - DNA phát người lành mang gen bệnh; 10/10 người mẹ phát người lành mang gen bệnh, 24/38 thành viên nữ gia đình bệnh nhân người lành mang gen bệnh Kỹ thuật Microsatellite - DNA hứa hẹn phương pháp hữu hiệu để phát người lành mang gen bệnh Hemophillia A Việt Nam Từ khóa: Hemophilia A, người lành mang gen bệnh, Microsatellite-DNA I ĐẶT VẤN ĐỀ Hemophillia A bệnh di truyền lặn trai bị bệnh Hemophilia A, gái nhiễm sắc thể giới tính X gây nên thiếu hụt người mẹ mang gen bệnh; chị em dì yếu tố đơng máu FVIII Gen bệnh nằm với người bị bệnh hemophilia A [4] Cùng với nhiễm sắc thể X khơng có allele tương ứng tiến kỹ thuật phân tử, nhiều loại đột nhiễm sắc thể Y, người mẹ mang biến gen F8 phát bao gồm: đột gen bệnh truyền bệnh cho 50% trai biến điểm, đột biến xoá đoạn, đột biến đảo truyền gen bệnh cho 50% gái họ đoạn [5] Việc phát đột biến gen, xác định [1; 2] Bệnh di truyền qua nhiều hệ người lành mang gen bệnh tư vấn di truyền có nhiều người mắc bệnh giải pháp hiệu giúp ngăn ngừa làm gia đình Tại Việt Nam, ước tính có khoảng giảm tỉ lệ mắc bệnh 6000 người bị bệnh Hemophilia A khoảng Ngày nay, phát người lành mang gen 30.000 người mang gen bệnh Hemophilia A [3] bệnh thường thực kỹ thuật Phụ nữ chắn mang gen bệnh có phát đột biến trực tiếp gen F8 dựa vào đột biến điểm bệnh nhân [6; 7] Địa liên hệ: Trần Vân Khánh, Trung tâm Gen - Protein, Trường Đại học Y Hà Nội Email: tranvankhanh@hmu.edu.vn Ngày nhận: 23/12/2016 Ngày chấp thuận: 26/2/2017 24 Tuy nhiên, tỷ lệ đáng kể bệnh nhân chưa phát đột biến việc phát đột biến gặp khó khăn cấu trúc gen lớn, giá thành phân tích cao [8] Kỹ TCNCYH 106 (1) - 2017 TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC thuật phân tích gián tiếp Microsatellite-DNA Kiểm tra độ tinh DNA: dựa vào phân tích vùng trình tự lặp lại phương pháp đo quang, dựa vào tỷ lệ A260nm/ STR áp dụng để xác định allele A280nm = 1,8 ÷ 2,0 đột biến với giá thành rẻ độ xác cao [9; 10] Vì vậy, nghiên cứu tiến hành với mục tiêu: Hồn chỉnh quy trình xác định người lành mang gen bệnh Hemophillia A kỹ thuật Microsatellite-DNA - Kỹ thuật giải trình tự gen xác định đột biến điểm Sử dụng cặp mồi tương ứng với vị trí đột biến điểm bệnh nhân để xác định người mang gen cho thành viên gia đình kỹ thuật giải trình tự gen Exon Xác định người lành mang gen bệnh He- tương ứng với vị trí đột biến gen F8 mophillia A kỹ thuật Microsatellite-DNA khuếch đại kỹ thuật PCR tiến hành thành viên gia đình bệnh nhân giải trình tự theo chiều [5] II ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP - Kỹ thuật Microsatellite-DNA Đối tượng Để xác định allele bệnh người mẹ truyền cho trai bị bệnh, trước tiên cần tiến hành + gia đình bệnh nhân Hemophilia kỹ thuật single PCR sử dụng 14 cặp mồi A xác định đột biến gen F8 dùng để đánh dấu huỳnh quang FXS8061, DXS9897, DXS9901, FXS52, FXS8087, FXS9796, xây dựng quy trình microsatellite-DNA phát người mang gen + gia đình bệnh nhân Hemophilia A chưa xác định đột biến gen F8 FXS7501, FXS7153, FXS1073, FXS7532, FXS1108, DXS1073, F8int13, F8int22 để khuyếch đại vùng trình tự lặp lại STR đặc hiệu mẫu mẹ, chọn mar- Tổng số 38 người gồm 10 mẹ bệnh nhân ker dị hợp tử [11; 12] Tiếp tục, tiến hành với 28 thành viên gia đình (em gái, chị gái, dì, DNA bệnh nhân marker dị hợp tử lựa chọn so sánh kết thu từ mẫu bác gái, bà ngoại, chị họ, em gái họ) Các mẫu máu thu thập Trung tâm nghiên cứu Gen - Protein, Trường Đại học Y Hà Nội Phương pháp 2.1 Thiết kế nghiên cứu: mô tả cắt ngang mẹ mẫu để xác định allele đột biến, đỉnh có kích thước tương đương mẫu mẹ mẫu thể allele đột biến (allele bệnh) Thành phần phản ứng PCR: 1X đệm PCR; 2,5mM dNTP; 0,2µl mồi xi ngược; 0,5unit Taq polymerase; 20ng DNA H2O, tổng thể tích 20µl Chu kỳ nhiệt phản ứng PCR: 2.2 Các kỹ thuật sử dụng nghiên cứu 94oC/30 giây; [94oC/12 giây, 62oC/30 giây, 72oC/30 giây] x 35 chu kỳ; 72oC/5 phút Sản - Tách chiết DNA phẩm khuếch đại PCR điện di hệ DNA tách chiết theo phương pháp thống sequencing hãng Beckman Coulter phenol/chloroform từ bạch cầu máu ngoại vi Kết phân tích phần mềm Ge- người nhà bệnh nhân neMapper v3.2 TCNCYH 106 (1) - 2017 25 TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC Đạo đức nghiên cứu III KẾT QUẢ Bệnh nhân người nhà hoàn toàn tự nguyện tham gia vào nghiên cứu Bệnh nhân hồn tồn có quyền rút lui khỏi nghiên cứu Hồn chỉnh quy trình xác định người lành mang gen bệnh Hemophillia A kỹ thuật Microsatellite DNA không đồng ý tiếp tục tham gia vào nghiên cứu Bệnh nhân người nhà bệnh nhân * Gia đình bệnh nhân mã số HA11: thơng báo kết xét nghiệm gen để - Kết phát người lành mang gen giúp cho bác sỹ tư vấn di truyền lựa F8 bị đột biến kỹ thuật giải trình tự gen chọn phác đồ điều trị phù hợp Các thơng tin gia đình HA11: cá nhân đảm bảo bí mật Người bình thường Bệnh nhân HA Bác gái bệnh nhân HA Mẹ bệnh nhân HA Chị gái bệnh nhân HA Hình Ảnh giải trình tự gen gia đình mã số HA11 Hình ảnh giải trình tự exon 14 gen F8 người mẹ chị gái bệnh nhân HA11 xuất đỉnh chồng lên vị trí đột biến phát bệnh nhân HA11 (c.2776_2777insC), chứng tỏ mẹ chị gái bệnh nhân mang gen F8 đột biến trạng thái dị hợp tử Bác gái bệnh nhân không mang gen bệnh - Kết phát người lành mang gen F8 bị đột biến kỹ thuật Microsatellite-DNA: Marker dị hợp tử tìm thấy khuếch đại vùng STR mẹ bệnh nhân HA11 DXS9901, DXS 9897 26 TCNCYH 106 (1) - 2017 TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC Allele đột biến Allele đột biến Bệnh nhân HA Mẹ bệnh nhân HA Chị bệnh nhân HA Bác gái bệnh nhân HA Hình Ảnh điện di vùng trình tự lặp lại sử dụng cặp mồi DXS9901, DXS9897 gia đình mã số HA11 Kết cho thấy với marker dị hợp tử DXS9901, DXS 9897, mẹ chị bệnh nhân xuất đỉnh, đỉnh tương ứng với allele Ở đỉnh trùng với đỉnh bệnh nhân đỉnh allele đột biến Xb, tức bệnh nhân nhận allele đột biến từ người mẹ, mẹ chị gái bệnh nhân mang gen F8 đột biến trạng thái dị hợp tử Bác gái bệnh nhân khơng có đỉnh trùng với đỉnh allele đột biến Xb nên không mang gen bệnh Kết trùng khớp với kết xác định người lành mang gen bệnh kỹ thuật giải trình tự gen tức mẹ bệnh nhân chị gái bệnh nhân người lành mang gen bệnh - Phả hệ gia đình HA11: Nữ bình thường Nam bình thường Nữ mang gen bệnh Nam bị bệnh Nam bị bệnh tử vong Bệnh nhân tham gia vào nghiên cứu Hình Sơ đồ phả hệ gia đình bệnh nhân HA11 TCNCYH 106 (1) - 2017 27 TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC Hình cho thấy, thành viên nữ (I1, II1, II2, III1) gia đình bệnh nhân HA11 xác định được: - thành viên nữ chắn mang gen F8 đột biến trạng thái dị hợp tử mẹ bà ngoại bệnh nhân (II2; I1) (vì có trai bị bệnh có người đàn ơng họ mẹ bị bệnh) - thành viên nữ (II1 – bác bệnh nhân) không mang gen F8 đột biến trạng thái dị hợp tử - thành viên nữ (II1 – chị bệnh nhân) người lành mang gen bệnh Kết phân tích kỹ thuật Microsa- Xác định người lành mang gen bệnh tellite - DNA trùng khớp với kết xác định người lành mang gen bệnh kỹ thuật Hemophillia A kỹ thuật Microsatellite DNA giải trình tự gen tức mẹ chị gái bệnh Áp dụng quy trình xác định người lành nhân người lành mang gen bệnh, bác gái mang gen bệnh kỹ thuật Microsatellite- người lành mang gen bệnh DNA cho thành viên nữ gia đình Tiến hành tương tự với gia đình HA37, HA02 cho kết tương đồng bệnh nhân Hemophillia A chưa xác định đột biến điểm bệnh nhân phương pháp giải trình tự gen Microstellite- * Kết phát người lành mang gen DNA Như vậy, kết phát người lành F8 bị đột biến kỹ thuật Microsatellite- mang gen bệnh kỹ thuật giải trình tự gen DNAcủa gia đình bệnh nhân HA42: kỹ thuật Microsatellite - DNA cho kết trùng khớp Ở gia đình HA42 marker dị hợp tử tìm FXS 7153, F8int22: Allele đột biến Allele đột biến Hình Ảnh điện di vùng trình tự lặp lại sử dụng cặp mồi FXS7153, F8int22 gia đình mã số HA42 Kết cho thấy marker dị hợp tử: FXS7153, F8int22, mẹ bệnh nhân xuất đỉnh, đỉnh tương ứng với allele Ở đỉnh trùng với đỉnh bệnh nhân đỉnh allele đột biến Xb, tức bệnh nhân nhận allele đột biến từ người mẹ, mẹ bệnh nhân mang 28 TCNCYH 106 (1) - 2017 TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC gen F8 đột biến trạng thái dị hợp tử Em gái bệnh nhân xuất đỉnh không trùng với allele đột biến Xb bệnh nhân nên em gái bệnh nhân không mang gen bệnh Bảng Kết phát người lành mang gen bệnh kỹ thuật Microsatellite-DNA Thành viên gia đình Mang gen bệnh Khơng mang gen bệnh Tổng số Mẹ bệnh nhân 10/10 0/10 10 Thành viên nữ khác* 14/28 14/28 28 Tổng 24/38 14/38 38 * Thành viên nữ khác bao gồm em gái, chị gái, dì, bác gái, bà ngoại, chị họ, em gái họ bệnh nhân Kết bảng cho thấy, 10/10 người mẹ phát người lành mang gen bệnh, 14/28 thành viên nữ khác gia đình bệnh nhân người lành mang gen bệnh IV BÀN LUẬN nhiên, theo nghiên cứu năm 2014, 10,3% Hemophilia A bệnh di truyền lặn liên kết bệnh nhân hemophilia A chưa phát với nhiễm sắc thể giới tính X, khơng có allele đột biến việc phát đột biến thường tương ứng nhiễm sắc thể Y, bệnh di khó khăn cấu trúc gen lớn, kỹ thuật phân truyền qua nhiều hệ nên việc xác định tích gián tiếp Microsatellite - DNA xác dạng đột biến vị trí đột biến áp dụng dựa vào xác định allele đột biến [8] gen F8 bệnh nhân bước Trong nghiên cứu này, trước tiên quan trọng sở khoa học cho tiến hành hồn chỉnh quy trình xác định người phân tích phát người lành mang lành mang gen bệnh Hemophillia A kỹ gen bệnh thuật Microsatellite - DNA cách so sánh Người phụ nữ mang gen bệnh người có kết xác định người lành mang gen bệnh hoạt tính yếu tố VIII máu giảm, nhiên phương pháp giải trình tự gen nhiều trường hợp hoạt tính yếu tố VIII khơng phương pháp Microsatellite - DNA Kết giảm giảm Người phụ nữ chắn phương pháp hoàn tồn trùng khớp mang gen bệnh có trai bị cho thấy hoàn thiện quy trình bệnh có bố bị hemophilia A có kỹ thuật Microsatellite - DNA phát người trai bị bệnh có người đàn ông lành mang gen bệnh Hemophillia A Để xác họ mẹ bị bệnh có trai bị định tình trạng mang gen bệnh Hemophilia A bệnh gia đình họ mẹ có kỹ thuật Microsatellite - DNA, cần phải người chẩn đoán người lành mang tiến hành phân tích vùng trình tự lặp lại gen bệnh [3] Việc xác định người lành mang (short tandem repeat - STR) Trình tự lặp lại gen bệnh thường thực kỹ đoạn lặp nối tiếp ngắn từ đến cặp thuật phát đột biến trực tiếp gen F8 base, có tính đa hình cao Do kích thước dựa vào đột biến điểm bệnh nhân Tuy nhỏ nên trình tự gọi trình TCNCYH 106 (1) - 2017 29 TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC tự lặp lại ngắn số lần lặp lại đặc trưng (chiếm 100%) 24/38 thành viên nữ cho cá thể, mang tính di truyền STR gia đình bệnh nhân (chiếm 63,1%) được ứng dụng chẩn đoán xác định phát người lành mang gen bệnh, kết huyết thống, xác định người mang gen phù hợp với nghiên cứu 102 gia chẩn đốn trước sinh [9 - 13] Trong nghiên đình bệnh nhân Hemophilia A Ấn Độ thấy cứu này, cặp mồi sử dụng khuếch đại tỷ lệ người lành mang gen bệnh 64,5% [7] STR gen F8, nhằm xác định allele mang cao nghiên cứu 50 gia đình bệnh b đột biến X allele không mang gen đột biến nhân Hemophilia A Việt Nam thấy tỷ lệ người X Với kết phân tích STR, người mẹ lành mang gen bệnh 47,4% [15] Có thành viên nữ khác gia đình có khác biệt đối tượng đỉnh tương ứng với allele họ có nhiễm nghiên cứu có tiền sử bệnh khác nhau, mà sắc thể X, bệnh nhân nam nhận nhiễm sắc thể thành viên nữ gia đình có tiền sử Y từ bố nhiễm sắc thể X từ mẹ nên bệnh rõ ràng có nguy mang gen có trình tự lặp lại giống mẹ gen F8 bệnh cao [7] có nhiễm sắc thể X; hình ảnh điện Đây nghiên cứu xác định người lành di cho đỉnh tương ứng với mang gen F8 đột biến thực trình tự STR nhiễm sắc thể X nhận từ mẹ Việt Nam sử dụng kỹ thuật Microsatellite Đỉnh allele đột biến xác định dựa DNA Nghiên cứu phát xác đỉnh allele bệnh nhân Với thành tình trạng mang gen F8 đột biến đối viên gia đình bệnh nhân có đỉnh trùng với tượng sở khoa học cho công tác đỉnh allele đột biến Xb chứng tỏ họ tư vấn di truyền, chẩn đoán trước sinh người lành mang gen bệnh ngược lại chẩn đoán tiền làm tổ (PGD), giúp ngăn ngừa không trùng với đỉnh allele đột biến chứng sinh đứa trẻ bị bệnh Hemophilia A, tỏ họ người lành mang gen tăng hiệu công tác phòng ngừa bệnh [14] bệnh tật, hạn chế tối đa tình trạng chảy máu Thành viên gia đình bệnh nhân HA42 có giảm thiểu khả trở thành tàn marker dị hợp tử: FXS7153, F8int22 Với tật, giảm bớt gánh nặng cho gia đình xã marker dị hợp tử mẹ bệnh nhân xuất hội, nâng cao chất lượng chăm sóc sức khỏe đỉnh, đỉnh tương ứng với allele Ở đỉnh cộng đồng trùng với đỉnh bệnh nhân đỉnh allele đột biến Xb, tức bệnh nhân V KẾT LUẬN nhận allele đột biến từ người mẹ, mẹ Nghiên cứu hồn thiện quy trình bệnh nhân mang gen F8 đột biến trạng thái xác định người lành mang gen bệnh Hemop- dị hợp tử Em gái bệnh nhân xuất đỉnh hilia A kỹ thuật Microsatellite-DNA không trùng với allele đột biến Xb bệnh nhân nên em gái bệnh nhân không mang gen bệnh Trong số 38 thành viên nữ 10 gia đình bệnh nhân Hemophilia A có 10/10 người mẹ 30 Kết cho thấy 10/10 (chiếm 100%) người mẹ mang gen bệnh Hemophilia A 24/38 (chiếm 63,1%) thành viên nữ gia đình bệnh nhân người lành mang gen bệnh Hemophilia A TCNCYH 106 (1) - 2017 TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC Lời cám ơn Nghiên cứu thực với hỗ trợ kinh phí Đề tài cấp nhà nước: “Xây dựng quy trình chẩn đốn trước làm tổ kỹ thuật Microsatellte DNA để sàng lọc số bệnh lý di truyền liên kết nhiễm sắc thể giới tính” thuộc chương trình KC04.17/11-15 bệnh Hemophilia A Tạp chí Nghiên cứu Y học, 91(5), 13 - 18 Machado FB Medina-Acosta E (2009) High-resolution combined linkage physical map of short tandem repeat loci on human chromosome band Xq28 for indirect haemophilia A carrier detection Haemophilia, 15(1), 297 - 308 TÀI LIỆU THAM KHẢO 10 Ding QL., Lu YL., Dai J et al (2012) Characterisation and validation of a novel Gill Swallow ( 2013) Guideline for the Obstetric Management of Carriers of Haemo- panel of the six short tandem repeats for genetic counselling in Chinese haemophilia A philia A and B, NHS Nottingham University Hospitals Cookie Disclaime pedigrees Haemophilia,18(4), 621 - 625, 11 Hussein IR., El-Beshlawy A., Salem Trần Thị Liên Trần Thị Thanh Hương (2014) Di truyền đơn gen, Di truyền y học, Nhà xuất giáo dục, 146 - 149, A et al (2008) The use of DNA markers for carrier detection and prenatal diagnosis of haemophilia A in Egyptian families Haemo- Bộ trưởng Bộ Y tế (2016) Hướng dẫn chẩn đoán điều trị bệnh Hemophilia A philia, 14(5), 1082 - 1087 12 Saha A, Nayak S (2011) A set of five Microsatellite markers linked to F8 gene can detect haemophilia A carriers across India Quyết định số 4984/QD-BYT, Hà Nội, ngày 17 tháng 19 năm 2016 Street AM, Ljung R and Lavery SA (2008) Management of carriers and babies Haemophilia, 17(5), 928 - 935 with haemophilia Haemophilia, 14(3), 181 187 gramm E, Spagnol Perrone AM et al (2007) Azza A.G Tantawy (2010) Molecular genetics of hemophilia A: Clinical perspectives The Egyptian Journal of Medical Human Genetics, 11, 105 – 114 Goodeve AC (1998) Advances in car- 13 De Carvalho FM, De Vargas WolfAnalysis of Factor VIII polymorphic markers as a means for carrier detection in Brazilian families with haemophilia A Haemophilia, 13(4), 409 - 412 14 Massaro JD., Wiezel CE., Muniz YC rier detection in haemophilia Haemophilia, et al (2011) Analysis of five polymorphic DNA (4), 358 - 364 markers for indirect genetic diagnosis of hae- Shetty S, Ghosh K, Bhide A cộng (2001) Carrier detection and prenatal ldiagnosis in families with hemophilia Nat Med J mophilia A in the Brazilian population Haemophilia, 17(5), 936 - 943 15 Bùi Thị Thu Hương, Trần Huy Thịnh, Ind, 14, 81 - 83 Nguyễn Thị Hà, Nguyễn Đức Hinh cộng Lưu Vũ Dũng, Trần Huy Thịnh, Tạ Thành Văn, Nguyễn Đức Hinh, Trần Vân (2014) Phát người lành mang gen Khánh (2014) Phát đột biến gen F8 gây Tạp chí Nghiên cứu Y học, 90(5), - TCNCYH 106 (1) - 2017 bệnh gia đình bệnh nhân Hemophilia A 31 TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC Summary CARRIER DETECTION OF HEMOPHILIA A USING MICROSATELLITE DNA Hemophilia A is an inherited X-linked coagulation disorder caused by the deficiency of factor VIII (FVIII) Carrier detection and genetic counseling are effective solutions to prevent and reduce the incidence of disease Normally, carrier are preferably performed by direct mutation detection; however, in certain situations, indirect family studies may also be useful in cases of undetectable mutation due to of huge structure F8 gene, linkage analysis is a common indirect method for the detection of female carriers in families with Hemophilia A In this study, we aimed to complete Microsatellite - DNA technology to detected female carriers family of HA disease from linkage using STR (short tandem repeat) and compared to sequencing analysis results The result of sequencing analysis is similar to result of Microsatellite - DNA analysis We completed Microsatellite - DNA technology to detected female carriers in family of HA disease 10/10 mother was found to be healthy carriers, 24/38 female family members was detected as carriers in ten families of HA patients In Conclusions: Microsatellite - DNA is cost-effective method to detect hemophilia A carriers in Vietnam Keywords: Hemophilia A, carriers, Microsatellite-DNA 32 TCNCYH 106 (1) - 2017 ... DNA phát người trai bị bệnh có người đàn ông lành mang gen bệnh Hemophillia A Để xác họ mẹ bị bệnh có trai bị định tình trạng mang gen bệnh Hemophilia A bệnh gia đình họ mẹ có kỹ thuật Microsatellite. .. - DNA trùng khớp với kết xác định người lành mang gen bệnh kỹ thuật Hemophillia A kỹ thuật Microsatellite DNA giải trình tự gen tức mẹ chị gái bệnh Áp dụng quy trình xác định người lành nhân người. .. người lành mang gen bệnh, bác gái mang gen bệnh kỹ thuật Microsatellite- người lành mang gen bệnh DNA cho thành viên nữ gia đình Tiến hành tương tự với gia đình HA37, HA02 cho kết tương đồng bệnh