Đang tải... (xem toàn văn)
2. Giải thích quy trìnhLàmm bằng hỗn hợp ethanol amoniac đậm đặc ether (5 4 10), để yên 12 giờ V alkaloid tồn tại trong Cà độc dượcdạng muối nên làm ẩm với hỗn hợp trên để chuyển alkaloid dạng muối sang dạng base nhờ NH3 đậm đặc Sử dụng hỗn hợp trên để làm ẩm mà không dùng riêng ammonic vamoniac là chất thân nước nên khi cho nhiều ammonic th khi chiết bằng ether (chất thân dầu) sẽ có sự tách lớp > ethanol trong hỗn hợp đóng vai trò là chất trung gian hòa tan giữa chất thân nước với chất thân dầu > tạo hỗn hợp đồng nhấtChi tng etherl n mỗi lần 15 phút, lần 1 100ml ether, lần 2 và lần 350ml ether, chiết bằng phương pháp siêum và có sd ng nhi t V alkaloid dạng base tan trong dung môi hữu cơ k m phân cực nên dùng ether để chiết alkaloid tdược liệu Chiết 3 lần, lần sau sử dụng lượng dung môi t hơn lần trước để đ m b o chiết kiệt được hoạt chất đồng thời phương pháp siêu âm giúp rút ngắn thời gian và t ng hiệu suất chiết (do phương pháp siêu âm tạo cácung động vào tận bên trong tế bào dược liệu > t ng sự hòa tan, khuyếch tán hoạt chất) Nhiệt độ giúp rút ngắn quá tr nh chiết uấtc hơi dịch chi t trên cách th y choay hơi g n h t ether Không bốc hơi hết dung môi v nếu bốc hơi hết ether ch còn lại cắn th khi cho H2SO4 vào sẽ khó hòa tan được cắnThêmml dung dịch acid sulfuricN ti p t cc hơi cho đ n h t ether.cid sulfuric 0,5 N giúp chuyển alkaloid dạng base tdịch chiết ether sang alkaloid dạng muối Bốc hơi hết ether đến khi không thấy váng n i trên bề mặt là do ether là dung môi hữu cơ không phân cực, nước acid thân nước do đó ether và nước acid không hỗn hòa với nhau > tách lớp, ether có t trọng nhỏ hơn nước acid nên n i lên trên.L c dịch l c c n hơim quang để loại tạp và lọc nóng giúp tránh kết tủaalkaloid > tránh mất một phần alkaloid do bị giữ lại trên bông. R aả cặn dược li ungml dung dịch acid sulfuricN vàl n với nước m i l nml để đ m b o lấy được tối đa lượng alkaloid còn d nh lại trên ch n sứGộp các nước r a với dung dịch acid vào trong b nh gạn V khi lắc phân bố dịch chiết nước acid với ether sẽ không thể chiết kiệt được hết alkaloid có trong nước acid > gộp nước rửa với dung dịch acid (sau khi lắc phân bố với ether) để tránh mất mác alkaloid trong dung dịch acid.Chi tl n với chloroform với 10 ml, 5 ml, 5 ml cloroform đến khi chloroform không còn có màu Chloroform có tác dụng loại bỏ các tạp tan trong dầu còn l n trong dịch chiết acid để thu được dịch chiết tinh khiết hơn và loại bỏ sự nh hư ng của tạp trong quá tr nh định lượngGộp các dung dịch chloroform và chi tngml dung dịch acid sulfuricN g nlớp chloroform gộp các dịch chi t acid sulfuric l i Vbước trên khi loại tạp bằng chloroform một phần nhỏ alkaloid tdịch acid sẽ phân bố sang lớp chloroform > lắc phân bố với acid sulfuric để lấy hết alkaloid có l n trong lớp chloroform.Trung h ang amoniac đậm đặc (pH = 7) và thêmml amoniac đậm đặc. NH3 đậm đặc giúp kiềm hóa dịch acid, chuyển alkaloid dạng muối sang alkaloid dạng base.Chi tl n vớimlmlml chloroform V alkaloid dạng base tan trong dung môi hữu cơ k m phân cực nên dùng chloroform chiết alkaloid Chiết3 lần, lần sau sử dụng lượng dung môi t hơn lần trước để t ng hiệu suất chiếtL c các dung dịch chloroform trên c ng một ph u l c cnatri sulphat khan Natri sulphat khan giúp loại bỏ nước có l n trong dịch chloroform, cần ph i loại nước v nước có tsôi cao và tsôi CHCl3 < tsôi H2O nên khi bay hơi dung môi (bước sau), nếu dịch có l n nước th thời gian bay hơi lâu hơn và cần nhiệt độ cao hơn > nh hư ng đến hoạt chất R a ti p ph u l c hai l n m i l n với 4 ml chloroform để hòa tan và lấy được tối đa alkaloid còn d nh lại trên bông.Gộp các dịch chi t cloroform và dịch r ac hơi dung m i trên cách th y Thêmml ethanol trung tính đh a tan c nc hơi đ n khvà ti p t c đun n ng trongph t Để chắc chắn loại bỏ hoàn toàn nước v nước tan được trong ethanol và ethanol là chất dễ bay hơi nên có thể k o theo nước nếu cắn có l n nướcĐun nhẹ đh a tan c n trongml cloroform, cho thêm chínhácml dung dich acid sulfuricN (dung dịch chu n độ) đun cách th y cho c hơi h t chloroform đnguội ở nhi t độ ph ng Nếu cho nước acid vào cắn sẽ không hòa tan được cắn hoặc hòa tan rất t, có lợn cợn Cắn lúc này là alkaloid base nên dùng chloroform để hòa tan cắn sẽ dễ hơn và tạo thành hỗn hợp đồng nhất không bị lợn cợn Đun nhẹ để quá tr nh hòa tan dễ hơn và nhanh hơn Khi cho acid (chất thân nước) vào dịch chloroform (thân dầu) > tách lớp> đun cách thủy để bốc hơi chloroform do tsôi CHCl3 < tsôi nước acid, lúc này alkaloid sẽ phân tán đều vào lớp nước acidcid sulfuric có tác dụng chuyển alkaloid base trong dịch chloroform thành alkaloid dạng muốiThêm–gi t dung dịch đmethyl (ch t ch thị) Chu n động dung dịch NaOHN đ n khiu t hi n màu vàng Phương pháp định lượng là định lượng acid ase thừa trừ NaH sẽ ph n ứng với H2SO4 dư (dư lại sau khi đã chuyển alkaloid base thành muối) tạo muối và nước Khi ph n ứng hết với acid H2SO4 th 1 giọt dư Na H sẽ làm chất ch thị đỏ methyl chuyển sang màu vàng.Giải thích quy trình tiến hành định lượng alkaloid trong Cà độc dược
TRƯỜNG ĐẠI HỌC TÔN ĐỨC THẮNG Khoa Dược BÁO CÁO THỰC TẬP DƯỢC LIỆU Bài ĐỊNH LƯỢNG ALKALOID TRONG CÀ ĐỘC DƯỢC NHÓM 6- Sáng thứ Lê Thị Hồng Duyên H1600037 Phạm Thị Thùy Linh H1600061 Nguyễn Thị Thúy Vy H1600014 Sơ đồ định lượng alkaloid hoa Cà độc dược Cân 10g bột Cà độc dược Hỗn hợp ethanol – amoniac đậm đặc ether (5:4:10) Dược liệu làm ẩm Để yên 30 phút Chiết phương pháp siêu âm với dung môi ether Dịch chiết Cắn + 25 ml dung dịch acid sulfuric 0,5N Bốc đến hết ether Dịch aicd sau bốc Lọc qua dịch acid ấm Dịch aicd sau lọc +5 ml dd acid sulfuric 0,5N để rửa bã + ml nước (2 lần) để rửa bã Dịch sau L-L-E với chloroform lần (10 ml, ml, ml) Dịch chloroform sau gộp Dịch acid lại Gộp dịch acid L-L-E với 10 ml acid sulfuric 0,1N Dịch acid Dịch acid sau gộp Dịch acid lớp Gộp dịch acid + dung dịch NH3 để trung hòa + 2ml dung dịch NH3 đậm đặc Dịch sau bỏ dung dịch NH3 L-L-E với dung dịch CHCl3 lần (20 ml, 15 ml, 15 ml) Dịch chloroform Lọc với Na2SO4 khan Rửa với ml dd CHCl3 (2 lần) Dịch sau rửa Bốc Cắn + ml ethanol trung tính Bốc Cắn + ml dung dịch CHCl3, đun nhẹ + 20 ml H2SO4 0,02N + Đun cách thủy đến bay hết CHCl3 Dịch acid Để nguội + 2-3 giọt dung dịch đỏ methyl Dịch acid + methyl đỏ Chuẩn độ dung dịch NaOH 0,02N Dịch sau chuẩn độ Tính tốn Giải thích quy trình - Làm m hỗn hợp ethanol - amoniac đậm đặc - ether (5 10), để yên 12 V alkaloid tồn Cà độc dược dạng muối nên làm ẩm với hỗn hợp để chuyển alkaloid dạng muối sang dạng base nhờ NH đậm đặc Sử dụng hỗn hợp để làm ẩm mà không dùng riêng ammonic v amoniac chất thân nước nên cho nhiều ammonic th chiết ether (chất thân dầu) có tách lớp -> ethanol hỗn hợp đóng vai trị chất trung gian hòa tan chất thân nước với chất thân dầu -> tạo hỗn hợp đồng - Chi t ng ether l n lần 15 phút, lần 100ml ether, lần lần 50ml ether, chiết phương pháp siêu m có s d ng nhi t V alkaloid dạng base tan dung môi hữu k m phân cực nên dùng ether để chiết alkaloid t dược liệu Chiết lần, lần sau sử dụng lượng dung môi t lần trước để đ m b o chiết kiệt hoạt chất đồng thời phương pháp siêu âm giúp rút ngắn thời gian t ng hiệu suất chiết (do phương pháp siêu âm tạo ung động vào tận bên tế bào dược liệu -> t ng hòa tan, khuyếch tán hoạt chất) Nhiệt độ giúp rút ngắn tr nh chiết uất - c dịch chi t cách th y cho ay g n h t ether Không bốc hết dung môi v bốc hết ether ch lại cắn th cho H2SO4 vào khó hịa tan cắn - Thêm ether ml dung dịch acid sulfuric N ti p t c c cho đ n h t cid sulfuric 0,5 N giúp chuyển alkaloid dạng base t dịch chiết ether sang alkaloid dạng muối Bốc hết ether đến không thấy váng n i bề mặt ether dung môi hữu không phân cực, nước acid thân nước ether nước acid khơng hỗn hịa với -> tách lớp, ether có t trọng nhỏ nước acid nên n i lên - L c dịch l c c n m qua ng để loại tạp lọc nóng giúp tránh kết tủa alkaloid -> tránh phần alkaloid bị giữ lại - R a ả cặn dược li u nước m i l n ng ml dung dịch acid sulfuric N l n với ml để đ m b o lấy tối đa lượng alkaloid d nh lại ch n sứ - Gộp nước r a với dung dịch acid vào b nh gạn V lắc phân bố dịch chiết nước acid với ether chiết kiệt hết alkaloid có nước acid -> gộp nước rửa với dung dịch acid (sau lắc phân bố với ether) để tránh mác alkaloid dung dịch acid - Chi t l n với chloroform với 10 ml, ml, ml cloroform đến chloroform khơng cịn có màu Chloroform có tác dụng loại bỏ tạp tan dầu l n dịch chiết acid để thu dịch chiết tinh khiết loại bỏ nh hư ng tạp tr nh định lượng - Gộp dung dịch chloroform chi t N g n ng ml dung dịch acid sulfuric lớp chloroform gộp dịch chi t acid sulfuric l i V bước loại tạp chloroform phần nhỏ alkaloid t dịch acid phân bố sang lớp chloroform -> lắc phân bố với acid sulfuric để lấy hết alkaloid có l n lớp chloroform - Trung h a ng amoniac đậm đặc (pH = 7) thêm ml amoniac đậm đặc NH3 đậm đặc giúp kiềm hóa dịch acid, chuyển alkaloid dạng muối sang alkaloid dạng base - Chi t l n với ml ml ml chloroform V alkaloid dạng base tan dung môi hữu k m phân cực nên dùng chloroform chiết alkaloid Chiết lần, lần sau sử dụng lượng dung môi t lần trước để t ng hiệu suất chiết - L c dung dịch chloroform c ng ph u l c c natri sulphat khan Natri sulphat khan giúp loại bỏ nước có l n dịch chloroform, cần ph i loại nước v nước có t sơi cao tsơi CHCl3 < tsôi H2O nên bay dung môi (bước sau), dịch có l n nước th thời gian bay lâu cần nhiệt độ cao -> nh hư ng đến hoạt chất - R a ti p ph u l c hai l n m i l n với ml chloroform để hòa tan lấy tối đa alkaloid d nh lại - Gộp dịch chi t cloroform dịch r a Thêm c dung m i cách th y ml ethanol trung tính đ h a tan c n đun n ng c đ n kh ti p t c ph t Để chắn loại bỏ hoàn toàn nước v nước tan ethanol ethanol chất dễ bay nên k o theo nước cắn có l n nước - Đun nhẹ đ h a tan c n dung dich acid sulfuric ml cloroform, cho thêm ác ml N (dung dịch chu n độ) đun cách th y cho c h t chloroform đ nguội nhi t độ ph ng Nếu cho nước acid vào cắn khơng hịa tan cắn hịa tan t, có lợn cợn Cắn lúc alkaloid base nên dùng chloroform để hòa tan cắn dễ tạo thành hỗn hợp đồng không bị lợn cợn Đun nhẹ để tr nh hòa tan dễ nhanh Khi cho acid (chất thân nước) vào dịch chloroform (thân dầu) -> tách lớp -> đun cách thủy để bốc chloroform tsôi CHCl3 < tsôi nước acid, lúc alkaloid phân tán vào lớp nước acid cid sulfuric có tác dụng chuyển alkaloid base dịch chloroform thành alkaloid dạng muối - Thêm – gi t dung dịch đ methyl (ch t ch thị) Chu n độ dịch NaOH ng dung N đ n u t hi n màu vàng Phương pháp định lượng định lượng acid- ase thừa trừ Na H ph n ứng với H2SO4 dư (dư lại sau chuyển alkaloid base thành muối) tạo muối nước Khi ph n ứng hết với acid H2SO4 th giọt dư Na H làm chất ch thị đỏ methyl chuyển sang màu vàng Khoảng đổi màu Methyl red Tính toán - C ng thức % alkaloid = ( ) Trong a (ml) thể t ch Na H m (g) khối lượng bột Cà độc dược - Tính tốn Với a = 17,4 (ml) m = 10 (g) % alkaloid = (20 − 17,4) * 6,068 10 𝑥 1000 𝑥 100 = 0,158 % - Giải thích c ng thức Phương pháp định lượng định lượng acid- ase thừa trừ Na H ph n ứng với H2SO4 dư (H2SO4 dư sau chuyển hết alkaloid base thành alkaloid dạng muối) Do sử dụng Na H 0,02N để định lượng H2SO4 0,02N: CN H2SO4= 0.02N => CM H2SO4= 0.01M CN NaOH= 0.02N => CM NaOH= 0.02M Ta có: 2NaOH + H2SO4 => Na2SO4 + 2H2O x V NaOH = V H2SO4 = x/2 x 0.02 x x 0.01 VNaOH = VH2S dư = a= 17,4 (ml) Nên lượng H2SO4 dư ch nh thể t ch Na H dùng để chuẩn độ Ban đầu dùng lượng dư H2SO4 20 ml VH2S chuyển alkaloid base thành muối = 20 – a = 20 – 17,4 = 2,6 (ml) Theo Dược điển Việt Nam V 1ml dung dịch acid sulfuric 0,02N tương đương với 6,068 mg alkaloid tính theo scopolamine malkaloid = 2,6 𝑥 6,068 = 15,777 (𝑚𝑔) Ban đầu cân 10 (g) = 10 1000 = 10 000 (mg) bột Cà độc dược Suy ra: Theo Dược điển Việt Nam V hàm lượng alkaloid dược liệu không 0,30% t nh theo scopolamine t nh dược liệu khô kiệt K t luận: Hàm lượng alkaloid dược liệu nhỏ h àm lượng alkaloid quy định Dược điển 4 i n luận k t Hàm lượng alkaloid dược liệu nhỏ hàm lượng alkaloid quy định Dược điển, nguyên nhân sau a) Nguyên nh n dược li u - Dược liệu thu hoạch ban đầu khơng có hàm lượng alkaloid đạt tiêu chuẩn - Dược liệu không chế biến k thuật, không b o qu n tốt b) Nguyên nh n tr nh định lượng (dược liệu có hàm lượng alkaloid đạt tiêu chuẩn) - Thời gian làm ẩm chiết uất không đủ theo yêu cầu Dược điển -> không chiết kiệt hoạt chất (nguyên nhân chủ yếu) - Khi cho 25ml H2SO4 0,5N vào dịch ch n sứ bốc gần hết ether, bốc nhiểu ether tạo cắn dung dịch H2SO4 khơng hịa tan cắn -> lượng alkaloid Khi rửa cặn bã dược liệu ch n sứ 5ml H2SO4 0,5N lần với 5ml nước th không lấy hết alkaloid cắn - Số lần lắc phân bố không đủ (Dược điển yêu cầu lắc phân bố lần thực tập ch làm lần) -> không chiết kiệt hoạt chất - Trong tr nh lắc phân bố nhiều lần th phần alkaloid bị dịch bỏ - Lọc bị phần alkaloid bị giữ lại - Thao tác tr nh điều chế dịch alkaloid để định lượng thao tác chuẩn độ chưa ch nh ác Canh lúc đ i màu chất ch thị chưa ch nh ác (để dung dịch chuyển màu vàng đọc số buret -> sai số th a) - Sai số dụng cụ c) Nguyên nh n vừa dược li u kh ng đ t yêu c u vừa thao tác tr nh định lượng ... t nh dược liệu khô kiệt K t luận: Hàm lượng alkaloid dược liệu nhỏ h àm lượng alkaloid quy định Dược điển 4 i n luận k t Hàm lượng alkaloid dược liệu nhỏ hàm lượng alkaloid quy định Dược điển,... H2SO4= 0.02N => CM H2SO4= 0.01M CN NaOH= 0.02N => CM NaOH= 0.02M Ta có: 2NaOH + H2SO4 => Na2SO4 + 2H2O x V NaOH = V H2SO4 = x /2 x 0. 02 x x 0.01 VNaOH = VH2S dư = a= 17,4 (ml) Nên lượng H2SO4 dư... pháp định lượng định lượng acid- ase thừa trừ Na H ph n ứng với H2SO4 dư (H2SO4 dư sau chuyển hết alkaloid base thành alkaloid dạng muối) Do sử dụng Na H 0,02N để định lượng H2SO4 0,02N: CN H2SO4=