Đang tải... (xem toàn văn)
Bài viết trình bày đánh giá thay đổi nồng độ interleukin (IL)-17 huyết thanh và mối liên quan giữa nồng độ IL-17 huyết thanh với nồng độ IL-6 và yếu tố hoại tử u-alpha huyết thanh ở bệnh nhân viêm khớp dạng thấp.
Tạp chí y - dợc học quân số 6-2019 KHẢO SÁT NỒNG ĐỘ INTERLEUKIN-17 HUYẾT THANH VÀ MỐI LIÊN QUAN VỚI NỒNG ĐỘ INTERLEUKIN-6 VÀ YẾU TỐ HOẠI TỬ U ALPHA HUYẾT THANH Ở BỆNH NHÂN VIÊM KHỚP DẠNG THẤP Nguyễn Huy Thông1; Nguyễn Đặng Dũng2; Quyền Đăng Tuyên2 TÓM TẮT Mục tiêu: đánh giá thay đổi nồng độ interleukin (IL)-17 huyết mối liên quan nồng độ IL-17 huyết với nồng độ IL-6 yếu tố hoại tử u-alpha huyết bệnh nhân viêm khớp dạng thấp Đối tượng phương pháp: 82 bệnh nhân viêm khớp dạng thấp 30 người khỏe mạnh Đánh giá mức độ hoạt động bệnh viêm khớp dạng thấp số DAS28 Định lượng nồng độ IL-6, IL-17 TNF-α huyết phương pháp hấp phụ miễn dịch vi hạt huỳnh quang Kết quả: nồng độ IL-17 huyết bệnh nhân viêm khớp dạng thấp nhóm chứng 0,59 ± 0,92 0,62 ± 0,94 pg/ml Khơng có khác biệt nồng độ IL-17 huyết bệnh nhân viêm khớp dạng thấp nhóm chứng Tuy nhiên, thay đổi nồng độ IL-17 huyết dường ảnh hưởng tới nồng độ IL-6 TNF-α huyết Kết luận: khơng có khác biệt nồng độ IL-17 huyết bệnh nhân viêm khớp dạng thấp nhóm chứng Thay đổi nồng độ IL-17 huyết dường ảnh hưởng tới nồng độ IL-6 TNF-α huyết Tuy nhiên, cần nhiều nghiên cứu với cỡ mẫu lớn để khẳng định vai trò xác IL-17 xuất tiến triển bệnh viêm khớp dạng thấp * Từ khóa: Viêm khớp dạng thấp; Interleukin-6; Interleukin-17; TNF-α ĐẶT VẤN ĐỀ Viêm khớp dạng thấp (VKDT) bệnh khớp viêm mạn tính, đặc trưng tình trạng sưng, đau phá hủy màng hoạt dịch khớp, dẫn đến tàn phế nặng nề tử vong sớm [1] Mạng lưới cytokine đóng vai trò quan trọng q trình viêm phá hủy khớp bệnh VKDT [2] Interleukin (IL)-17 cytokine tiền viêm, có vai trò quan trọng chế bệnh sinh bệnh VKDT IL-17 kích thích q trình sản xuất chất trung gian hóa học viêm, đóng vai trò hàng đầu điều tiết mối quan hệ cytokine Trong vai trò này, IL-17 khơng hoạt hóa tế bào lympho B sản xuất tự kháng thể mà kích thích tế bào đại thực bào, nguyên bào sợi màng hoạt dịch, tế bào sụn sản xuất cytokine, bao gồm IL-1, IL-6, TNF-α enzyme tiêu chất sụn khớp (matrix metalloproteinase - MMPs) [4, 5] Cho nên, nồng độ IL-17 huyết liên quan với nồng độ IL-6 TNF huyết Do vậy, nghiên cứu tiến hành với mục tiêu: Khảo sát nồng độ IL-17 huyết vai trò IL-17 điều tiết nồng độ IL-6 TNF-α huyết bệnh nhân VKDT Bệnh viện Quân y 103 Học viện Quân y Người phản hồi (Corresponding): Nguyễn Đặng Dũng (dzung@yahoo.com) Ngày nhận bài: 26/06/2019; Ngày phản biện đánh giá báo: 22/07/2019 Ngày báo đăng: 06/08/2019 44 T¹p chí y - dợc học quân số 6-2019 I TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU * Xét nghiệm nồng độ cytokine: Thu thập mẫu máu BN nhóm Đối tượng nghiên cứu chứng ống xét nghiệm vơ khuẩn, * Bệnh nhân: khơng có chất chống đơng, lưu trữ nhiệt Nghiên cứu thực Khoa Khớp Nội tiết, Bệnh viện Quân y 103 từ tháng - 2012 đến - 2015 86 bệnh nhân (BN), 75 nữ 11 nam chẩn đoán VKDT theo tiêu chuẩn phân loại ACR/EULAR 2010 [1] Trước vào nghiên cứu, 43 BN điều trị glucocorticoid conventional synthetic disease-modifying antirheumatic drugs (DMARDs) Những BN mắc bệnh khớp khác, nhiễm khuẩn nặng, bệnh tự miễn mạn tính, và/hoặc điều trị bio-DMARDs khơng lựa chọn vào nghiên cứu * Nhóm chứng: 30 người khỏe mạnh (tuổi trung bình 41,60 ± 4,57; từ 35 - 50 tuổi), 26 nữ nam Phương pháp nghiên cứu * Các tiêu lâm sàng xét nghiệm thường quy: Tính mức độ hoạt động bệnh VKDT số DAS28 CRP [6] Đánh giá BN mức độ ảnh hưởng tình trạng viêm khớp đến sức khỏe đánh giá thầy thuốc tình trạng bệnh dựa thang điểm đánh giá mức độ hoạt động bệnh VKDT (Visual Analog Scale Formats for assessment of disease activity) Bên cạnh đó, BN xét nghiệm tốc độ lắng hồng cầu, nồng độ CRP huyết tương độ -80oC làm xét nghiệm Sử dụng kỹ thuật hấp phụ miễn dịch vi hạt huỳnh quang (Fluorescence covalent microbead immunosorbent assay - FCMIA hệ thống R&D systems MN, Mỹ) để định lượng nồng độ TNF-α, IL-6 IL-17 Kỹ thuật xét nghiệm tiến hành theo hướng dẫn nhà sản xuất Nồng độ cytokine tính theo đơn vị pg/ml * Xử lý thống kê: Tất thông số thống kê xử lý phần mềm the Statistical Package for the Social Sciences (SPSS), version 18.0 for Windows (SPSS, Chicago, IL, USA) Các biến số biến thiên liên tục biểu diễn dạng trung bình ± độ lệch chuẩn trung vị Độ phân bố biến số đánh giá test Kolmogorov-Smirnov So sánh nhóm sử dụng thuật tốn t-test student’s cho biến số có phân bố chuẩn U test Mann-Whitney cho biến số khơng có phân bố chuẩn Đánh giá tương quan biến, sử dụng hệ số tương quan Sperman Pearson Giá trị p < 0,05 coi có ý nghĩa thống kê Giá trị ngưỡng (cut-off) nồng độ IL-6, IL-17 TNF-α huyết nhóm bệnh nhóm chứng xác định đường cong ROC (Receiver Operating Curve) 45 T¹p chÝ y - dợc học quân số 6-2019 KT QU NGHIÊN CỨU Các tiêu dịch tễ học lâm sàng BN VKDT nhóm chứng Bảng 1: Đặc điểm tuổi, giới, lâm sàng, xét nghiệm BN VKDT nhóm chứng Tuổi trung bình ± SD, - max (năm) Giới tính (nữ/nam) Thời gian mắc bệnh trung bình ± SD (năm) Nhóm BN (n = 86) Nhóm chứng (n = 30) 53,44 ± 7,30; 35 - 66 41,60 ± 4,57; 35 - 50 75/11 26/4 4,29 ± 5,34 Số lượng khớp đau trung bình ± SD (trung vị) 14,13 ± 9,08; 13,00 Trung bình số lượng khớp sưng ± SD (trung vị) 10,52 ± 7,38; 9,00 Thời gian cứng khớp trung bình buổi sáng (phút) 37,25 ± 33,82; 30,00 ĐGBN trung bình ± SD (cm) 7,16 ± 2,25 ĐGTT trung bình ± SD (cm) 5,65 ± 1,92 TĐLHC trung bình ± SD (mm/giờ) 79,68 ± 44,37 7,63 ± 3,92 Nồng độ CRP huyết tương trung bình ± SD (mg/l) 68,37 ± 47,24 0,52 ± 0,36 DAS28 CRP trung bình ± SD (min - max) DAS28 CRP Điều trị trước vào nghiên cứu 6,19 ± 1,36; 2,81 - 8,50 Thấp trung bình (n; %) 17; 20,5 Cao (n; %) 66; 79,5 Glucorticoids (n, %) 43 (50,6) DMARDs (n, %) (4,7) (DAS28 CRP bị thiếu BN) (CRP: C-reative protein; DAS28: Disease Activity Score; TĐLHC: Tốc độ lắng hồng cầu; ĐGBN: đánh giá BN mức độ ảnh hưởng tình trạng viêm khớp đến sức khỏe (cm); ĐGTT: đánh giá thầy thuốc tình trạng bệnh tại; SD: Độ lệch chuẩn) Khơng có khác biệt giới BN nhóm chứng Tuổi đời trung bình nhóm chứng thấp BN VKDT Chỉ số DAS28 CRP trung bình 6,19 ± 1,36 (từ 2,81 - 8,50); 20,5% (17/83) 79,5% BN (66/83) có mức độ hoạt động bệnh thấp, trung bình cao 46 T¹p chÝ y - dợc học quân số 6-2019 Nng độ IL-17, IL-6 TNF-α huyết liên quan nồng độ IL-17 huyết với nồng độ IL-6 TNF-α huyết BN VKDT Bảng 2: So sánh nồng độ IL-6, IL-17 TNF-α huyết BN nhóm chứng BN Nhóm chứng n = 82 n = 30 X ± SD 19,06 ± 22,94 9,19 ± 8,43 Trung vị 10,49 7,18 IQR 3,69 - 25,55 2,84 - 11,41 X ± SD 0,59 ± 0,92 0,62 ± 0,94 Trung vị 0,30 0,27 IQR 0,00 - 0,07 0,00 - 1,07 X ± SD 2,37 ± 2,69 3,87 ± 2,11 Trung vị 1,68 3,69 IQR 0,48 - 2,82 2,42 - 4,84 Nồng độ cytokine (pg/ml) IL-6 IL-17 TNF-α p < 0,05* > 0,05 < 0,001* (*: Test Mann - Whitney, IQR: Interquartile Range) Trung vị nồng độ IL-6 huyết BN VKDT cao rõ rệt so với nhóm chứng (3,31 pg/ml) (p = 0,042) Khơng có khác biệt có ý nghĩa thống kê trung vị nồng độ IL-17 huyết BN VKDT nhóm chứng (p = 0,879) Trung vị nồng độ TNF-α huyết BN VKDT thấp rõ rệt so với nhóm chứng (2,01 pg/ml) (p < 0,001) 17,10% 26,80% Bình thường Tăng đơn độc nồng độ IL-17 36,60% 19,50% Tăng kết hợp nồng độ IL-17 với nồng độ TNF-α IL-6 IL-6 TNF-α Tăng nồng độ IL-6 TNF-α IL-6 TNF-α Biểu đồ 1: Phân bố BN VKDT theo nồng độ IL-17 huyết Kết nghiên cứu cho thấy 73,20% BN VKDT có tăng nồng độ cytokine (tăng 1, cytokine) huyết thanh, nhóm BN VKDT tăng nồng độ IL-17 huyết 56,10% (tăng đơn độc, tăng kết hợp nồng độ IL-17 với nồng độ IL6 và/hoặc TNF-α huyết thanh); đó, nhóm BN tăng nồng độ IL-6 TNF-α IL-6 TNF-α huyt l 17,10% 47 Tạp chí y - dợc häc qu©n sù sè 6-2019 Bảng 3: So sánh nồng độ IL-6 TNF-α huyết theo phân nhóm nồng độ IL-17 huyết Bình thường Tăng n = 36 n = 46 X ± SD 16,70 ± 23,19 20,68 ± 22,86 Trung vị 6,81 12,87 IQR 2,94 - 20,19 6,30 - 26,28 X ± SD 1,81 ± 2,53 2,81 ± 2,76 Trung vị 1,06 2,24 IQR 0,48 - 2,24 0,89 - 3,50 IL-17 huyết IL-6 huyết (pg/ml) TNF-α huyết (pg/ml) p 0,068* < 0,05* (*: Test Mann - Whitney; IQR: Interquartile Range) Khảo sát thay đổi nồng độ IL-6, TNF-α huyết theo phân nhóm nồng độ IL-17 huyết BN VKDT, kết cho thấy trung vị nồng độ TNF-α huyết nhóm BN VKDT tăng nồng độ IL-17 huyết cao nhóm có nồng độ IL-17 bình thường (1,18 pg/m) (p < 0,05) Trung vị nồng độ IL-6 huyết nhóm BN VKDT tăng nồng độ IL-17 huyết có xu hướng cao nhóm có nồng độ IL-17 bình thường (p = 0,068) BÀN LUẬN Nghiên cứu khảo sát nồng độ IL-17, IL-6, TNF-α mối liên quan nồng độ IL-17 huyết với nồng độ IL-6 TNF-α huyết Kết nghiên cứu cho thấy khơng có khác biệt trung vị nồng độ IL-17 huyết BN VKDT nhóm chứng (p = 0,879, test Mann - Whitney) (bảng 2) Tuy nhiên, tỷ lệ phần trăm BN VKDT có tăng nồng độ IL-17 huyết 56,10%, cao so với tỷ lệ BN VKDT tăng nồng độ IL-6 TNF-α huyết (biểu đồ 1) Ngược lại, nhiều nghiên cứu cho thấy nồng độ IL-17 huyết BN VKDT cao rõ rệt so với người khỏe mạnh [8, 9, 10], BN thối hóa khớp [11] Nồng độ IL-17 không tăng huyết mà dịch khớp 48 BN VKDT giai đoạn sớm bệnh chưa điều trị, nồng độ IL-17 dịch khớp tương quan thuận với nồng độ IL-17 huyết [9, 12] Kết nghiên cứu cho thấy nồng độ IL-17 huyết không tăng BN VKDT so với người khỏe mạnh Điều nồng độ IL-17 huyết giảm thấp BN VKDT giai đoạn có biểu lâm sàng so với trước khởi phát bệnh, tương tự nhận định Kokkonen H CS (2010), tác giả thấy trung vị nồng độ IL-17 huyết đối tượng trước xuất triệu chứng bệnh VKDT 28,7 pg/ml, sau giảm xuống 6,0 pg/ml giai đoạn trở thành bệnh VKDT thật sự, thấp so với người khỏe mạnh tuổi, giới 21,1 pg/ml Sự khác biệt đối tượng phát trin thnh bnh VKDT Tạp chí y - dợc học qu©n sù sè 6-2019 nhóm chứng có ý nghĩa thống kê với p = 6,1 x 10-5 [13] Bên cạnh đó, mặt lý thuyết, q trình sản xuất phần lớn cytokine tế bào Th1, IL-1β, IL-2, IL-3, IL-6, TNF, interferon-γ tế bào Th17, IL-17, yếu tố kích thích tạo cụm bạch cầu hạt đại thực bào (granulocyte-macrophage colony-stimulating factor - G-MCSF) bị ức chế corticoid [14] Trong nghiên cứu này, 50,6% BN dùng corticoid trước xét nghiệm cytokine (bảng 1), yếu tố làm giảm nồng độ IL-17 huyết Tuy nhiên, phân tích thống kê, kết nghiên cứu cho thấy khơng có khác biệt trung vị nồng độ IL-17 huyết hai nhóm BN VKDT có điều trị khơng điều trị corticoid trước nghiên cứu Mặt khác, theo kết nghiên cứu, thay đổi nồng độ IL-17 dường có ảnh hưởng tới thay đổi nồng độ IL-6 TNF-α huyết Kết biểu đồ bảng cho thấy nồng độ IL-17 huyết tăng đồng thời với tăng nồng độ IL-6 TNF-α huyết Kết tương đồng với quan điểm Miossec P (2007): IL-17 dường có vai trò trung tâm chế bệnh sinh bệnh VKDT, thơng qua việc kích thích tế bào đại thực bào, nguyên bào sợi màng hoạt dịch tế bào có tua sản xuất cytokine tiền viêm, có IL-6 TNF-α [4], đồng thời IL-17 “nhạc trưởng” điều tiết mối quan hệ cytokine [5] Nghiên cứu chúng tơi có số hạn chế: cỡ mẫu nghiên cứu tương đối nhỏ, nhiều BN điều trị glucocorticoid DMARDs trước nghiên cứu Các phác đồ điều trị ảnh hưởng tới nồng độ cytokine Mặt khác, nghiên cứu mô tả, nồng độ cytokine không đánh giá để so sánh với BN VKDT giai đoạn sớm chưa điều trị Hơn nữa, BN VKDT nghiên cứu chủ yếu giai đoạn muộn bệnh VKDT KẾT LUẬN Kết nghiên cứu cho thấy khơng có khác biệt nồng độ IL-17 huyết BN VKDT nhóm chứng Tuy nhiên, nồng độ IL-17 huyết dường ảnh hưởng tới thay đổi nồng độ IL-6 TNF-α huyết BN VKDT Tuy nhiên, cần nhiều nghiên cứu với cỡ mẫu lớn để xác định xác vai trò IL-17 mối liên quan với IL-6 TNF-α bệnh VKDT phát triển TÀI LIỆU THAM KHẢO Aletaha D, Neogi T, Silman A.J et al Rheumatoid arthritis classification criteria: An American College of Rheumatology/European League Against Rheumatism collaborative initiative Arthritis & Rheumatism 2010, 62 (9), pp.2569-2581 Shah A, St Clair E.W Rheumatoid Arthritis In: Harrison's Principles of Internal Medicine 19 edition, McGraw-Hill Education 2015, pp.2136-2148 Gaffen S.L The role of interleukin-17 in the pathogenesis of rheumatoid arthritis Current Rheumatology Reports 2009, 11 (5), pp.365-370 Miossec P Interleukin-17 in fashion, at last: Ten years after its description, its cellular source has been identified Arthritis & Rheumatism 2007, 56 (7), pp.2111-2115 49 Tạp chí y - dợc học quân sù sè 6-2019 Veldhoen M Interleukin 17 is a chief orchestrator of immunity Nature Immunol 2017, 18 (6), pp.612-621 Prevoo M.L, Van 't Hof M.A, Kuper H.H et al Modified disease activity scores that include twenty-eight-joint counts Development and validation in a prospective longitudinal study of patients with rheumatoid arthritis Arthritis & Rheumatism 1995, 38 (1), pp.44-48 Pincus T, Bergman M, Sokka T et al Visual analog scales in formats other than a 10 centimeter horizontal line to assess pain and other clinical data Journal of Rheumatology 2008 35 (8), pp.1550-1558 Prado A.D, Bisi M.C, Piovesan D.M et al Ultrasound power Doppler synovitis is associated with plasma IL-6 in established rheumatoid arthritis Cytokine 2016, pp.8327-8332 Metawi S.A, Abbas D, Kamal M.M et al Serum and synovial fluid levels of interleukin17 in correlation with disease activity in patients with RA Clinical Rheumatology 2011, 30 (9), pp.1201-1207 50 10 Hanan M.A, Gaber R.A Zaytoun H.A Th-17 cells and serum IL-17 in rheumatoid arthritis patients: Correlation with disease activity and severity The Egyptian Rheumatologist 2016, pp.381-387 11 Zhao P.W, Jiang W.G, Wang L et al Plasma levels of IL-37 and correlation with TNF-alpha, IL-17A, and disease activity during DMARD treatment of rheumatoid arthritis Public Library of Science One 2014, (5), e95346 12 Rosu A, Margaritescu C, Stepan A et al IL-17 patterns in synovium, serum and synovial fluid from treatment-naive, early rheumatoid arthritis patients Romanian Journal of Morphology and Embryology 2012, 53 (1), pp.73-80 13 Kokkonen H, Soderstrom I, Rocklov J et al Up-regulation of cytokines and chemokines predates the onset of rheumatoid arthritis Arthritis & Rheumatism 2010, 62 (2), pp.383-391 14 Jacobs J.W, Bijlsma W.J Glucocorticoid Therapy In: Kelley’s Textbook of Rheumatology th Edition, Saunders, Philadelphia 2013, pp.1137-1160 ... (66/83) có mức độ hoạt động bệnh thấp, trung bình cao 46 T¹p chí y - dợc học quân số 6-2019 Nồng độ IL-17, IL-6 TNF-α huyết liên quan nồng độ IL-17 huyết với nồng độ IL-6 TNF-α huyết BN VKDT Bảng... Trung vị nồng độ IL-6 huyết nhóm BN VKDT tăng nồng độ IL-17 huyết có xu hướng cao nhóm có nồng độ IL-17 bình thường (p = 0,068) BÀN LUẬN Nghiên c u khảo sát nồng độ IL-17, IL-6, TNF-α mối liên. .. hóa khớp [11] Nồng độ IL-17 không tăng huyết mà dịch khớp 48 BN VKDT giai đoạn sớm bệnh chưa đi u trị, nồng độ IL-17 dịch khớp tương quan thuận với nồng độ IL-17 huyết [9, 12] Kết nghiên c u cho