Đang tải... (xem toàn văn)
Trong nghiên cứu này, hoàn thiện được quy trình vi nhân giống cây chuối sáp. Kết quả nghiên cứu cho thấy, mẫu được khử vô trùng với dung dịch NaOCl 3% trong 12–15 phút tùy kích thước và độ tuổi của mẫu thí nghiệm, chồi được tái sinh tốt trên môi trường Murashige và Skoog 1962 (MS) bổ sung 0,5 mg/L 1-phenyl-3(1,2,3 thiadiazol-5-yl) (TDZ).
TẠP CHÍ PHÁT TRIỂN KHOA HỌC & CƠNG NGHỆ: CHUN SAN KHOA HỌC TỰ NHIÊN, TẬP 2, SỐ 3, 2018 23 Khảo sát quy trình vi nhân giống chuối sáp (Musa balbasiana nhóm BBB) Vũ Thị Bạch Phương, Triệu Thị Yến Nhi, Dương Công Kiên, Quách Ngô Diễm Phương Tóm tắt—Trong năm gần đây, thị trường chuối nước xuất gia tăng mạnh Chuối sáp loại chuối ưa thích nay, nhiên giống chuối gặp phải nhiều nguy thối hóa giống nhiễm bệnh Do đó, việc vi nhân giống chuối sáp nhằm cung cấp nguồn giống bệnh, ổn định di truyền làm phong phú thêm loại chuối thị trường điều cần thiết Trong nghiên cứu này, chúng tơi hồn thiện quy trình vi nhân giống chuối sáp Kết nghiên cứu cho thấy, mẫu khử vô trùng với dung dịch NaOCl 3% 12–15 phút tùy kích thước độ tuổi mẫu thí nghiệm, chồi tái sinh tốt môi trường Murashige Skoog 1962 (MS) bổ sung 0,5 mg/L 1-phenyl-3(1,2,3 thiadiazol-5-yl) (TDZ) Môi trường MS bổ sung mg/L benzylaminopurine (BA) 0,25 mg/L kinetin cho hiệu nhân chồi cao (10,700 ± 0,135 chồi/mẫu) chiều cao chồi ngày thứ 20 3,023 ± 0,018 cm Chuối sáp rễ tốt mơi trường MS khơng bổ sung chất điều hòa tăng trưởng thực vật với 4,533 ± 0,058 rễ/chồi có chiều dài trung bình 2,433 ± 0,067 cm Cây hoàn chỉnh rễ, thân, đưa vườn ươm trồng giá thể cát cho cho tỉ lệ sống cao 91,1%, sau hai tuần, cứng cáp tiến hành chuyển sang giá thể đất để sinh trưởng phát triển tốt Từ khóa—Chuối sáp, Musa balbasiana nhóm BBB, chất điều hòa tăng trưởng thực vật, vi nhân giống GIỚI THIỆU C huối trồng phổ biến khoảng 120 quốc gia giới Chuối Ngày nhận thảo: 10-01-2017, ngày chấp nhận đăng: 25- 09-2018, ngày đăng: 12-09-2018 Tác giả: Vũ Thị Bạch Phương, Triệu Thị Yến Nhi, Dương Công Kiên, Quách Ngô Diễm Phương - Trường ĐH Khoa học Tự nhiên, ĐHQG-HCM – vtbphuong@hcmus.edu.vn loại trái tiêu thụ hàng đầu giới, nguồn lương thực phổ biến quan trọng theo sau gạo, lúa mạch ngô Chuối sáp loại thực phẩm luộc thơm ngon, dẻo Chuối nói chung, chuối sáp nói riêng giàu kalium hỗ trợ người hay bị chuột rút, hàm lượng sắt cao kích thích sản sinh hemoglobin hỗ trợ người có huyết áp thấp, thiếu máu [1] Hiện nay, chuối gặp nhiều nguy giống, nguyên nhân thối hóa giống nhiễm bệnh, virus Vì cần có biện pháp để nhân nhanh chuối nhằm cung cấp cho thị trường giống khỏe mạnh giữ đặc tính đặc trưng loại chuối Nuôi cấy mô in vitro dùng đỉnh sinh trưởng thực vật phương pháp tạo nguồn giống lớn, ổn định, bệnh Ở Việt Nam có nhiều nghiên cứu ni cấy mơ loại chuối như: chuối Laba (Musa sp.) [2], chuối tiêu hồng [3]… chưa có nghiên cứu ni cấy mô chuối sáp Trong năm gần đây, loại nấm bệnh Panama dòng tàn phá nhiều trang trại, đồn điền chuối nước lây lan đến hầu giới Chuối sáp đối tượng gây hại loại nấm Ngoài ra, chuối sáp bị thối hóa giống, sản lượng trái diện tích trồng bị thu hẹp dần trồng nhỏ lẻ số địa phương Vì cần có biện pháp để nhân nhanh chuối nói chung chuối sáp nói riêng nhằm cung cấp cho thị trường giống khỏe bệnh Đề tài nghiên cứu khảo sát trình nhân chồi, tạo rễ, vườn ươm nhằm hoàn thiện quy trình ni cấy mơ chuối sáp tạo tiền đề cho loại chuối khác Quy trình nhân giống phục vụ cho nhu cầu thị trường mà giữ giống, hạn chế thối hóa giống sau 24 SCIENCE AND TECHNOLOGY DEVELOPMENT JOURNAL: NATURAL SCIENCES, VOL 2, ISSUE 3, 2018 VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP Vật liệu Chồi chứa đỉnh sinh trưởng chuối sáp có độ tuổi từ đến tháng thu hái tỉnh Tiền Giang Phương pháp Khử trùng mẫu cấy Đỉnh sinh trưởng chuối sáp rửa xà phòng rửa lại nước cất gọt bớt bẹ Sau chuyển vào tủ cấy, lắc mẫu với cồn 700 phút Tiếp theo lắc ngâm mẫu dung dịch HgCl2 0,1% 10 phút NaOCl % từ 12 đến 15 phút tùy theo kích thước mẫu Rửa mẫu lại cho nước cất vô trùng Mẫu sau khử trùng đặt môi trường MS, sau tuần chuyển mẫu cấy vào môi trường MS bổ sung cytokinin (0,5mg/L TDZ, mg/L BA, mg/L BA) để tăng khả tái sinh chồi Khảo sát ảnh hưởng BA, kinetin lên tạo cụm chồi Cụm chồi chuối sáp in vitro thu bước khử trùng mẫu, tiến hành tách thành cụm chồi nhỏ, hủy đỉnh khoảng 0,5–1 cm Mẫu cấy loại bỏ bớt lớp đen bao xung quanh đặt môi trường MS bổ sung BA nồng độ mg/L; mg/L; mg/L; mg/L; kinetin nồng độ 0,25 mg/mL kết hợp với BA nồng độ 0,5 mg/L; mg/mL; 1,5 mg/L; mg/mL Theo dõi khả tạo cụm chồi, tính số chồi trung bình mẫu cấy, kích thước chồi nghiệm thức Khảo sát ảnh hưởng NAA cho việc tạo rễ môi trường MS KS Chọn chồi khỏe mạnh đồng có chiều cao từ 3–4 cm từ thí nghiệm khảo sát tạo cụm chồi Sau cấy vào môi trường MS (Murashige Skoog) KS (Knudson’C) có bổ sung NAA nồng độ 0,2 mg/mL 0,4 mg/mL Quan sát theo dõi số rễ hình thành mẫu cấy chiều dài rễ Khảo sát giá thể vườn ươm Cây nuôi cấy mơ khỏe mạnh có rễ phát triển tốt đưa điều kiện bình thường khoảng vài ngày Sau tiến hành trồng sang giá thể chuẩn bị trước như: cát xây dựng hấp khử trùng, vụn xơ dừa hấp khử trùng, đất Tribat Công ty TNHH Công Nghệ Sinh học Sài Gòn Xanh Quan sát theo dõi tỉ lệ sống, đặc điểm hình thái vườn ươm Điều kiện nuôi cấy Các mẫu cấy in vitro nuôi điều kiện thời gian chiếu sáng giờ/ngày, cường độ ánh sáng 3000 lux, nhiệt độ 25 ± 0C, độ ẩm 75 – 80 % Tất môi trường điều chỉnh pH 5,8 trước hấp khử trùng nhiệt độ 121 0C, atm, 15 phút Phương pháp phân tích xử lý số liệu Mỗi thí nghiệm lặp lại lần, số liệu phân tích xử lý phần mềm Microsoft Excel phần mềm SPSS KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN Khử trùng mẫu Kết khử trùng cho thấy mẫu khử trùng với dung dịch HgCl2 0,1% 10 phút nhiễm sống gần hồn tồn (Hình 1) Mẫu khử với NaOCl 3% lắc 15 phút mẫu nhỏ dễ bị úng chết lắc thời gian 12 phút mẫu lớn dễ nhiễm, tùy theo kích thước mẫu mà điều chỉnh thời gian khử trùng quan trọng Thời gian khử trùng HgCl2 0,1% ngắn so với NaOCl 3% số mẫu vô trùng nhiều tác dụng khử trùng HgCl2 mạnh NaOCl [4] Do thời gian khử mẫu HgCl2 ngắn nên mẫu xanh tái sinh chồi khỏe so với NaOCl HgCl2 dung dịch khử mẫu tốt so với NaOCl HgCl2 độc, nguy hiểm với người tiếp xúc mẫu cấy tích tụ độc tố, nên hạn chế việc sử dụng HgCl2 khử mẫu Tóm lại, để tạo mẫu vơ trùng cần khử mẫu với dung dịch NaOCl 3% khoảng từ 12 đến 15 phút tùy theo kích thước mẫu cấy TẠP CHÍ PHÁT TRIỂN KHOA HỌC & CƠNG NGHỆ: CHUN SAN KHOA HỌC TỰ NHIÊN, TẬP 2, SỐ 3, 2018 25 Hình sápvơ vơtrùng trùng Hình1.1.Mẫu Mẫu chuối chuối sáp Mẫu cấy vô trùng sau tuần chuyển vào môi trường MS bổ sung cytokinin để tái sinh chồi Môi trường MS bổ sung 0,5 mg/L TDZ giúp chuối sáp tái sinh chồi nhanh mg/L BA mg/L BA Riêng môi trường chứa mg/L BA mẫu tái sinh thời gian sau mẫu bị đen chết (Hình 2) Điều cho thấy mg/L BA nồng độ chất điều hòa tăng trưởng cao gây ức chế việc hình thành chồi chuối sáp Môi trường MS bổ sung mg/L BA cảm ứng tái sinh chồi TDZ 0,5 mg/L, thời gian mẫu xanh nhú chồi lâu hơn, phát triển chồi chậm TDZ chất điều hòa tăng trưởng mạnh, phá vỡ trạng thái miên trạng chồi, làm chồi phát triển nhanh so với BA Kết phù hợp với nhận xét Hamide Gubbuk Mustafa năm 2006 đối tượng chuối sáp, việc hình thành kéo dài chồi mẫu cấy cho thấy TDZ tốt so với BA [5] Hình2.2.Mẫu Mẫu cấy cấy sau sau 15 mơi trường MSMS có chứa cytokinin Hình 15ngày ngàyđặt đặttrên mơi trường có chứa cytokinin a: 0,5 mg/l BA; c: 5c:mg/l BA BA a: 0,5 mg/l mg/lTDZ; TDZ;b:b: 2mg/l BA; mg/l Bảng Ảnh hưởng BA, Kinetin lên tạo cụm chồi chuối sáp Nghiệm Môi trường Chiều cao chồi 10 ngày Số chồi/ cụm chồi (10 ngày) thức MS bổ sung (mg/L) (cm) C0 BA 4,233d ± 0,088 0,463f ± 0,007 C1 BA 9,433b ± 0,240 1,240c ± 0,025 C2 BA 4,733d ± 0,176 1,143d ± 0,024 C3 BA 4,733d ± 0,145 1,057e ± 0,015 C4 BA 11,100a ± 0,058 1,167cd ± 0,015 C5 0,5 BA + 0,25 Ki 9,200b ± 0,173 1,543b ± 0,023 a C6 1,0 BA + 0,25 Ki 10,700 ± 0,153 1,997a ± 0,032 C7 1,5 BA + 0,25 Ki 9,233b±0,219 1,230c ± 0,040 C8 2,0 BA + 0,25 Ki 8,200c±0,153 1,226cd ± 0,015 Các mẫu tự khác biểu diễn mức độ sai biệt có ý nghĩa (theo cột) độ tin cậy 95% Khảo sát ảnh hưởng BAP, Kinetin lên tạo cụm chồi Kết khảo sát ảnh hưởng BA, Kinetin lên tạo cụm chồi chuối sáp trình bày Bảng Hình Nghiệm thức đối chứng C0 không bổ sung chất điều hòa tăng trưởng thực vật có số chồi chiều cao chồi thấp so với nghiệm thức lại Điều chứng tỏ có lượng nhỏ cytokinin nội sinh mẫu cấy Chiều cao chồi 20 ngày (cm) 1,180f ± 0,036 1,563d ± 0,019 1,593d ± 0,044 1,423e ± 0,009 1,993c ± 0,023 2,273b ± 0,038 3,023a ± 0,018 1,430e ± 0,015 1,373e ± 0,030 giúp việc hình thành chồi mơi trường khơng có chất điều hòa tăng trưởng Các nghiệm thức bổ sung BA C1, C2, C3, C4 có chồi to chậm cao, chiều cao khơng đồng đều, hình thành chồi nhỏ Ở nghiệm thức C6 (môi trường MS chứa mg/L BA kết hợp với 0,25 mg/L Kinetin) có số chồi, chiều cao chồi phát triển vượt trội so với nghiệm thức C5, C7, C8 Đây mơi trường thích hợp cho việc nhân nhanh chồi 26 SCIENCE AND TECHNOLOGY DEVELOPMENT JOURNAL: NATURAL SCIENCES, VOL 2, ISSUE 3, 2018 chuối sáp Sự kết hợp chất điều hòa tăng trưởng cho thấy có phát triển rõ rệt chồi chuối sáp thí nghiệm, chiều cao chồi nghiệm thức C6 thời điểm 20 ngày nuôi cấy tăng 51,3% so với 10 ngày Do đó, mơi trường tối ưu cho việc nhân nhanh chồi chuối sáp thí nghiệm mơi trường MS bổ sung mg/L BA kết hợp với 0,25 mg/L kinetin Tất nghiệm thức tạo rễ sau 15 ngày cấy sang môi trường rễ (Hình 4) M0 K0 hai nghiệm thức khơng bổ sung chất điều hòa tăng trưởng thực vật mẫu cấy chuối sáp rễ Nghiệm thức M0 môi trường MS cho kết rễ tốt với 4,5 rễ hình thành có chiều dài trung bình 2,4 cm (Bảng 2), kết trùng với nghiên cứu Kamnoon Kanchanapoom (2012) nghiên cứu chuối [6] Nghiệm thức K0 môi trường KS cho rễ chuối sáp tương đối tốt không to môi trường MS Các nghiệm thức môi trường MS tạo rễ chuối tốt so với mơi trường KS, hàm lượng khống cao mơi trường giúp chuối phát triển tốt hơn, to hơn, đồng thời sản sinh auxin tốt giúp việc hình thành rễ nhanh Điều chứng tỏ chuối sáp có hàm lượng auxin nội sinh cao hình thành trình phát triển chồi Khảo sát giá thể vườn ươm Đưa vườn ươm giai đoạn khó khăn ni cấy mơ điều kiện ổn định dinh dưỡng, ánh sáng, nhiệt độ, độ ẩm,… nên chuyển vườn ươm với điều kiện tự nhiên hoàn toàn khác: dinh dưỡng thấp, nhiệt độ cao, ánh sáng mạnh, độ ẩm thấp dễ nước, héo chết Để đảm bảo có tỉ lệ sống cao, vườn ươm phải mát, có độ che phủ cao để giảm cường độ ánh sáng, trì độ ẩm Ngồi ra, chọn giá thể thích hợp cơng việc quan trọng để tăng tỉ lệ sống đưa vườn ươm Kết thí nghiệm khảo sát giá thể vườn ươm trình bày Bảng Hình 5, 6, Hình Ảnh hưởng BA, Kinetin lên tạo cụm chồi chuối sáp sau 20 ngày môi trường khác C1, C2, C3, C4, C5, C6, C7, C8 tên nghiệm thức bảng Khảo sát ảnh hưởng NAA cho việc tạo rễ môi trường MS KS Bảng Ảnh hưởng nồng độ NAA việc tạo rễ môi trường MS KS Nghiệm thức Mơi trường Số rễ/chồi Chiều dài trung bình rễ (cm) M0 MS + mg/L NAA 4,533a ± 0,058 2,433ab ± 0,067 M2 MS + 0,2 mg/L NAA 3,100d ± 0,100 1,367d ± 0,088 M4 MS + 0,4 mg/L NAA 3,433c ± 0,116 2,200b ± 0,115 K0 KS + mg/L NAA 3,833b ± 0,058 2,533a ± 0,088 K2 KS + 0,2 mg/L NAA 2,467e ± 0,153 1,600d ± 0,058 K4 KS + 0,4 mg/L NAA cd 3,267 ± 0,153 Các mẫu tự khác biểu diễn mức độ sai biệt có ý nghĩa (theo cột) độ tin cậy 95% 1,867c ± 0,033 TẠP CHÍ PHÁT TRIỂN KHOA HỌC & CÔNG NGHỆ: CHUYÊN SAN KHOA HỌC TỰ NHIÊN, TẬP 2, SỐ 3, 2018 27 Hình Ảnh hưởng nồng độ NAA cho việc tạo rễ môi trường MS KS M0, M2, M4, K0, K2, K4 tên nghiệm thức Bảng Bảng Kết thí nghiệm khảo sát giá thể vườn ươm Nghiệm thức Giá thể Tỉ lệ sống trung bình (%) V1 Cát 91,11a ± 2,22 V3 Vụn xơ dừa 78,89b ± 3,00 V4 Đất 44,44c ± 3,00 Các mẫu tự khác biểu diễn mức độ sai biệt có ý nghĩa (theo cột) độ tin cậy 95% Có khác biệt rõ rệt tỉ lệ sống ba giá thể thí nghiệm Cát xây dựng hấp khử trùng giá thể cho tỉ lệ sống cao với 91,11%, vụn xơ dừa hấp khử trùng với tỉ lệ 78,89%, trồng giá thể đất tỉ lệ sống có 44,44% Đất chứa nhiều dinh dưỡng, giữ nước nên điều kiện thuận lợi cho vi khuẩn, nấm xâm nhiễm gây úng thối gốc chuối (Hình 6) Vì tỉ lệ chết 50 % nên giá thể đất khơng thích hợp cho việc vườn ươm chuối nuôi cấy mô giai đoạn đầu Vụn xơ dừa sử dụng rộng rãi trồng trọt nguồn cung cấp dồi dào, giá thành thấp, giữ nước cho Nhưng vụn xơ dừa trường hợp không cho tỉ lệ sống cao, có 78,89% Bộ rễ chuối ni cấy mơ yếu, mơi trường q ẩm dễ bị ngộp ảnh hưởng đến hút nước cây, chất tanin có xơ dừa ảnh hưởng đến sinh trưởng tăng trưởng rễ chuối sáp Cát nghèo dinh dưỡng lại cho tỉ lệ sống cao vườn ươm chuối sáp, cát nghèo dinh dưỡng nên hạn chế phát triển vi khuẩn, nấm tác nhân gây hại đồng thời cát có độ nước tốt giúp rễ không bị ngộp úng Tuy nhiên, lớn cần nhiều chất dinh dưỡng nước để phát triển giá thể cát khơng có chất dinh dưỡng cho hấp thu, không phát triển tốt giá thể vụn xơ dừa đất Do đó, để đưa chuối sáp từ điều kiện in vitro vườn ươm có tỉ lệ sống cao, khỏe mạnh phát triển tốt thì: giai đoạn đầu vườn ươm nên trồng giá thể cát, sau khoảng đến tuần cứng cáp tiến hành chuyển sang giá thể đất để sinh trưởng phát triển tốt Giá thể đất tốt cho giai đoạn phát triển chứa nhiều dinh dưỡng cho cây, đồng thời giữ ẩm tốt Sau tuần vườn, giá thể đất cao xanh đậm so với vụn xơ dừa (Hình 7) 28 SCIENCE AND TECHNOLOGY DEVELOPMENT JOURNAL: NATURAL SCIENCES, VOL 2, ISSUE 3, 2018 Hình Cây chuối sáp sau tuần giá thể vườn ươm Hình Cây chuốia:sáp saub:3 Vụn tuần xơ trêndừa; c: giáĐất thể vườn ươm Cát; Hình Cây chuối sáp sau tuần giá thể vườn ươm a: Cát; b: Vụn xơ dừa; c: Đất a: Cát; b: Vụn xơ dừa; c: Đất Hình Cây chuối bị sápnấm bị nấm hạigiá trênthể giá đất Hình Cây chuối xâmhạixâm hại đấtthể Hình Cây chuốisáp sáp bị nấm xâm giá thể đất Hình Cây chuối sáp sau tuần trồng giá thể xơ dừa (A) đất (B) KẾT LUẬN Trong nghiên cứu này, chúng tơi thiết lập quy trình vi nhân giống chuối sáp (Musa balbasiana nhóm BBB) với bước sau: khử trùng chồi chứa đỉnh sinh trưởng chuối sáp có độ tuổi từ đến tháng với NaOCl 3% thời gian từ 12 đến 15 phút tùy theo kích thước mẫu đặt môi trường MS, sau tuần chuyển mẫu vô trùng sang mơi trường MS có bổ sung 0,5 mg/L TDZ để tăng khả tái sinh chồi Sự tạo chồi chuối sáp phát triển tốt môi trường MS bổ sung mg/L BA kết hợp với 0,25 mg/L kinetin Môi trường MS không bổ sung chất điều hòa tăng trưởng thích hợp cho hình rễ chuối sáp Khi đưa vườn ươm, giai đoạn đầu cát giá thể tốt cho tỉ lệ sống cao, sau khoảng tuần cứng khỏe chuyển sang giá thể đất để phát triển tốt TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] [2] [3] [4] [5] H.K Bukhru, Foods that heal: The natural way to good health, Orient Paperbacks, Delhi, 1995 Đ.Đ Giáp, P.N Vinh, T.T Tuấn, N.T.H Trang, P.N.A Thư, T.X Du, Tăng hệ số nhân nhanh chồi Laba (Musa sp.) nuôi cấy in vitro cách sử dụng ánh sáng, myoinositol adenin sulphate, Tạp chí Sinh học, 34, 3, 180– 187, 2012 N.V Nghiêm, N.T Thanh, N.X Phong, V.V Thắng, Đ.T.V Lan, Kết nghiên cứu hoàn thiện quy trình kĩ thuật thâm canh chuối tiêu hồng, Tạp chí khoa học cơng nghệ nơng nghiệp Việt Nam, 1, 24–33, 2009 M Dayarani, M.S.Dr Dhanarajan, Dr Uma S, In-Vitro Response of Ornamental Banana (Musa Spp.) International Journal of Chemical, Environmental & Biological Sciences 1, 3, 545–548, 2013 G Hamide, P Mustafa, in vitro propagation of banana TẠP CHÍ PHÁT TRIỂN KHOA HỌC & CÔNG NGHỆ: CHUYÊN SAN KHOA HỌC TỰ NHIÊN, TẬP 2, SỐ 3, 2018 [6] (Musa spp.) using thidiazuron and activated charcoal, Acta Agriculturae Scandinavica Section B-Soil and Plant Science, 56, 1, 65–69, 2006 K Kanchanapoom, N Promsorn, Micropropagation and in vitro germplasm conservation of endangered Musa 29 balbisiana ‘Kluai Hin’ (BBB group), African Journal of Biotechnology 11, 24, 6464–6469, 2012 Micropropagation of Musa balbasiana (BBB group) Vu Thi Bach Phuong, Trieu Thi Yen Nhi, Duong Cong Kien, Quach Ngo Diem Phuong University of Science, VNU-HCM Corresponding author: vtbphuong@hcmus.edu.vn Received: 10-01-2017, Accepted: 25-09-2017, Published: 12-09-2018 Abstract—The banana domestic market as well as global market are growing Musa balbasiana (BBB group) is now one of the preferred banana types; however, this banana group is facing up to risk of degeneration and disease Therefore, the micropropagation of banana to provide genetic stability, disease-free seedlings, and enriching the types of bananas in the market is essential In this study, we have completed the process of Musa balbasiana (BBB group) micropropagation The study results showed that the samples were sterilized with NaOCl 3% solution in 12-15 minutes depending on the size and age of the samples, buds were regenerated on Murashige and Skoog medium (MS) added 0.5 mg/L 1-phenyl-3 (1,2,3 thiadiazol-5-yl) (TDZ) MS medium supplemented with mg/L benzylaminopurine (BA) and 0.25 mg/L kinetin made high efficiency shoot initation (10.700 ± 0.135 buds/sample) and the shoot height at the day of 20 was 3.023 ± 0.018 cm Musa balbasiana (BBB group) had been the most induced roots on MS medium without plant growth regulators with 4.533 ± 0.058 roots/shoot and the roots were 2.433 ± 0.067 cm in length Complete seedlings (with roots, stems, and leave) were transferred to the nursery and planted on sand with the highest survival rate of 91.1 % After two weeks, the survival plants were moved to grown on clean soil for the best growth and development Index-Term—a balbasiana BBB group, plant growth regulators, micropropagation ... LUẬN Trong nghiên cứu này, thiết lập quy trình vi nhân giống chuối sáp (Musa balbasiana nhóm BBB) với bước sau: khử trùng chồi chứa đỉnh sinh trưởng chuối sáp có độ tuổi từ đến tháng với NaOCl... Vụn xơ dừa; c: Đất Hình Cây chuối bị sápnấm bị nấm hạigiá trênthể giá đất Hình Cây chuối xâmhạixâm hại đấtthể Hình Cây chuốisáp sáp bị nấm xâm giá thể đất Hình Cây chuối sáp sau tuần trồng giá... biệt có ý nghĩa (theo cột) độ tin cậy 95% Khảo sát ảnh hưởng BAP, Kinetin lên tạo cụm chồi Kết khảo sát ảnh hưởng BA, Kinetin lên tạo cụm chồi chuối sáp trình bày Bảng Hình Nghiệm thức đối chứng