Đồ án môn học Phân tích thực phẩm: Hạt mè

73 156 1
Đồ án môn học Phân tích thực phẩm: Hạt mè

Đang tải... (xem toàn văn)

Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống

Thông tin tài liệu

Đồ án môn học Phân tích thực phẩm đề tài Hạt mè được nghiên cứu với các nội dung: Tổng quan về hạt mè; Các phương pháp đánh giá chỉ tiêu chất lượng theo TCVN, AOAC; Kết luận và kiến nghị. Để nắm vững kiến thức về đề tài mời các bạn cùng tham khảo tài liệu.

Đồ án môn học                                                                        GVHD: Phan Th ị Xuân Đồ án môn học                                                                        GVHD: Phan Th ị Xuân Đồ án môn học                                                                        GVHD: Phan Th ị   Xuân LỜI CẢM ƠN Em xin gửi lời cảm  ơn chân thành tới tồn thể các thầy cơ giáo trong khoa   Cơng nghệ thực phẩm trường đại học Cơng Nghiệp Thực Phẩm TPHCM đã tạo  điều kiện cho em học tập và nghiên cứu trong một mơi trường học tập khoa học,   giúp cho em có những kiến thức cơ  bản và vững vàng . Đặc biệt em xin chân  thành cảm ơn sự chỉ bảo tận tình của cơ Phan Thị Xn– cơ là những người trực  tiếp hướng dẫn, chỉ  bảo cho em trong suốt q trình hồn thành đồ  án mơn học  phân tích thực phẩm này Đồng thời em cũng xin gửi lời cảm  ơn sâu sắc đến gia đình, bạn bè và tập  thể  lớp 02DHDB1 những người ln đứng sau giúp đỡ, chia sẻ  với em những   khó khăn và thuận lợi trong suốt thời gian qua Đề tài đồ án của em là “ Hạt mè ”, đây là một đề tài nói về hạt mè với các   chỉ tiêu chất lượng cần phải được kiểm tra với những phương pháp kiểm tra phù   hợp.Đây cũng là đề  tài đầu tiêu mà em thực hiện nên khơng tránh khỏi những  thiếu sót  . Vì vậy em rất mong nhận được sự  đóng góp ý kiến của các thầy cơ   giáo và bạn bè để đồ án mơn học của em được hồn thiện hơn Em xin chân thành cảm ơn! Thành phố Hồ Chí Minh, ngày 5 tháng 5 năm 2014 Sinh viên thực hiện Nguyễn Thị Kiều My Đồ án mơn học                                                                        GVHD: Phan Th ị   Xn NHẬN XÉT CỦA GIÁO VIÊN HƯỚNG DẪN  ­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­ ­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­ ­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­ ­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­ ­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­ ­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­ ­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­ ­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­ ­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­ ­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­ ­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­ ­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­ ­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­ ­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­ ­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­­ Thành phố Hồ Chí Minh, tháng 5 năm 2014 Đồ án mơn học                                                                        GVHD: Phan Th ị   Xn DANH MỤC VIẾT TẮT Acid béo bão hòa (SFAs ) Acid béo tự do (FFAs)  Cột miễn nhiễm (IA) Dung dịch đệm phosphat (PBS) Hàm lượng nước (w) Hạt mè (S2*) Hệ số điều chỉnh (Fc) Hiệp hội các nhà hóa học nơng nghiệp chính thức (AOAC:  Association of Official  Agricultural Chemists) Khối lượng (m) Khối phổ ion hóa (MS) Phép đo phổ cộng hưởng từ hạt nhân (NMR) Phương pháp khai thác chất lỏng siêu tới hạn( SFE) Polytetraflo­ etylen (PTFE) Sắc kí lỏng hiệu năng cao (HPLC) Sự phân rã cảm ứng tự do (FID) Đồ án mơn học                                                                        GVHD: Phan Th ị   Xn Trường điện từ xoay chiều ở dạng xung có năng lượng kích hoạt (RF) DANH MỤC BẢNG BIỂU Bảng 1.1 Tên khoa học của lồi cây có dầu cũng như  tên gọi tương  ứng của   ngun liệu và dầu Bảng 1.2 Thành phần hóa học hạt mè Bảng 1.3 Dữ liệu dinh dưỡng – Hạt mè đã xử lý nhiệt so với hạt mè ngun liệu Bảng 1.4 Bảng phân tích thành phần dinh dưỡng các acid amin có trong bột mè và  trong thịt Bảng 1.5 Thành phần acid béo trong hạt mè Bảng 2.1 Khối lượng tối thiểu của mẫu thử Bảng 2.2  Cỡ hạt u cầu Bảng 2.3 – Khối lượng phân tử  tương đối và độ  hấp thụ  phân tử  của aflatoxin   B1, B2, G1 và G2 (Hỗn hợp của toluen và axetonitril 98 + 2) Bảng 2.4 – Chuẩn bị các dung dịch chuẩn Đồ án môn học                                                                        GVHD: Phan Th ị   Xn DANH MỤC HÌNH VẼ Hình 1.1 Hạt mè Hình 1.2 Cây mè Hình 1.3 Dầu mè Hình 2.1  Quang phổ của tiêu chuẩn tham khảo aflatoxin B1 Đồ án mơn học                                                                        GVHD: Phan Th ị   Xn MỤC LỤC Đồ án mơn học                                                                        GVHD: Phan Th ị   Xn LỜI MỞ ĐẦU Hạt mè là một loại hạt trong nhóm hạt có dầu. Chất béo trong mè chủ yếu  là các chất béo chưa bão hòa, có khả năng bảo vệ tim mạch trước nguy cơ bị tổn   thương do lão hóa, đồng thời giúp giảm xơ vữa mạch máu và thiếu máu cơ tim   Trong mè còn chứa hai loại chất xơ đặc biệt là sesamin và sesamolin có tác dụng   làm giảm hàm lượng cholesterol, bảo vệ  gan khỏi nguy cơ  bị ơ­xy hóa và ngăn   ngừa huyết áp cao.  Với 400 mg/100 gr thì hạt mè cũng là hạt chứa nhiều phytosterol nhất, với   cấu trúc gần với sản phẩm từ  động vật, có lợi cho sức khỏe tim mạch. Nhiều   nước châu Mỹ đã bổ sung thêm phytosterol vào các sản phẩm như mứt, margarin,   mayonnaise, nước xốt trộn salad, yaourt và cả  nước ép trái cây. Tuy nhỏ  li ti   nhưng hạt mè lại có hàm lượng chất xơ khơng hòa tan rất cao, nên được đưa vào   thực đơn cho những bệnh nhân ung thư  ruột kết và chế  độ  ăn giảm cân. Khơng    là một nguồn bổ  sung can­xi tuyệt vời, hạt mè còn rất giàu các chất như  mangan, đồng, ma­giê, sắt, phốt­pho, vitamin B1, kẽm, vitamin E, protein tốt và   chất xơ. Magie có trong mè, có tác dụng giãn cơ, giúp ngăn ngừa sự  co thắt   đường hơ hấp Hạt mè được sử  dụng trong nấu nướng, chế  biến các món ăn, làm bánh  kẹo cũng như  trong các loại thuốc truyền thống do những đặc tính dinh dưỡng,   phòng và chữa bệnh Trong đó  ứng dụng chính là   hạt mè được dùng để  ép lấy dầu. Hạt mè  chứa từ 38 đến 50% dầu. Hạt mè dùng làm dầu mè là một loại dầu ăn tốt. Dầu   mè (vừng) được xem là loại dầu có nhiều dinh dưỡng, dùng làm gia vị  nấu ăn,  khơng chỉ tăng hương vị cho món ăn mà còn tăng giá trị  dinh dưỡng ngồi ra còn  phòng ngừa được nhiều bệnh tật Đồ án mơn học                                                                        GVHD: Phan Th ị   Xn MỤC TIÊU ĐỀ TÀI Bên cạnh rất nhiều lợi ích kể  trên  hạt mè cũng có phần nhược điểm là  nằm     danh   sách   thực   phẩm   có   thể   gây   dị   ứng   da,   hệ   tiêu   hóa     hơ  hấp.Ngồi ra, nếu bảo quản khơng tốt, một số mốc có thể phát triển và sinh độc   tố nếu có điều kiện độ ẩm và nhiệt độ thích hợp (độ ẩm trên 85%, nhiệt độ 30º  C).Nếu hạt bị nhiễm mốc A. flavus thì mốc này có thể  sinh độc tố  aflatoxin gây  nguy hiểm cho con người và động vật. Vì vậy, việc kiểm tra các chỉ  tiêu chất   lượng trong hạt mè rất quan trọng và cần thiết.Nên với đề tài này em đã tìm hiểu  về hạt mè cùng với các phương pháp xác định chỉ tiêu chất lượng của nó Trong q trình tìm hiểu đề  tài khơng tránh khỏi những sai sót vì đây lần   đầu em làm một bài đồ án em rất mong nhận được sự góp   ý kiến của cơ, em xin  chân thành cảm ơn!   Tp. Hồ Chí minh ngày 5 tháng 5 năm 2014 10 Đồ án mơn học                                                                        GVHD: Phan Th ị   Xn Hình B.3 ­ Ví dụ 3 về thiết bị Dumas (khí mang Heli) Chú giải 1. ống khí heli 2. van điều chỉnh 3. ống khử 4. lò khử 5. ống hấp thụ khí 6. cột tách khí 7. detector dẫn nhiệt 8. bình chứa oxy 9. bộ điều chỉnh dòng khí oxy 10. bộ đo lưu lượng khí 11. van 12. lối đưa mẫu vào 13. bộ nạp mẫu 14. ống phản ứng 15. lò phản ứng 16. ống kiểm tra q trình đốt 17. bộ ngưng loại nước 18. bộ trộn khí 19. bộ lọc No.1 20. ống đong 21. bộ lọc No.2 22. ống tuần hồn 23. bộ xử lý số liệu 24. khối vận hành bằng khí đẩy để đưa mẫu vào 25. khối vận hành bằng khí đẩy để đưa mẫu vào 26. khay chứa mẫu 27. bộ nâng khay mẫu 28. bơm khí lạnh 59 Đồ án mơn học                                                                        GVHD: Phan Th ị   Xn PHỤ LỤC CHIỆU CHUẨN THIẾT BỊ C.1. Các hợp chất hiệu chuẩn Một số thiết bị bán sẵn đòi hỏi phải điều chỉnh lưu lượng oxy dự kiến Các phép tính tốn trong C.2 là rất cấn thiết đối với một số loại thiết bị (điều tiết  O2 dư  với sự  có mặt của CO2 làm khí mang).Tất cả  các phép tính dựa trên giả  định rằng tất cả các mẫu chỉ gồm các ngun tố C, N, H và O Bảng C.1 ­ Nhu cầu oxy của các hợp chất tinh khiết thích hợp cho việc hiệu  chuẩn thiết bị Hợp chất Hàm lượng  Nhu cầu oxy tối đa  Nhu cầu oxy  nitơ theo lý thuyết thực tế % (phần khối  ml/g ml/g Urê Axit aspartic Tyrosin Axit glutamic Phenylalanin Axit  lượng) 46,65 10,53 7,73 9,52 8,48 9,59 1 305 800 1 391 952 1 593 920 560 631 1 267 800 1 458 767 etylendiamintetraaxetic Axit hippuric 7,82 1 344 1 219 C.2. Các ví dụ về cách tính nhu cầu oxy dự kiến C.2.1. Ví dụ 1 Urê (H2NCONH2): 1 mol tương ứng với 60,06, khối lượng mẫu là 1 000 mg Do đó, 1000 mg urê chứa ­ 199,8 mg C; ­ 66,6 mg H; ­ 466,5 mg N, và 60 Đồ án mơn học                                                                        GVHD: Phan Th ị   Xn ­ 266,4 mg O Lượng oxy cần thiết cho việc đốt hồn tồn urê về cacbon dioxit và nước đã bao  gồm hàm lượng oxy của hợp chất và sau đây: a) thể tích mol của khí lý tưởng là 22,4 I (ở T = 0 0C và p = 0,1 MPa); b) 1 mol của C tương ứng 12 g (12 000 mg); c) 1 mol của H2 tương ứng 2 g (2 000 mg); d) 1mol của N2 tương ứng 28 g (28 000 mg); e) 1 mol của O2 tương ứng 32 g (32 000 mg) Kết quả là cần 1 305 ml oxy để đốt cháy 1 g urê C.2.2 Ví dụ 2 Axit aspartic [HO2CCH2CH(NH2)CO2H]: 1 mol tương  ứng 133,10 g. khối lượng   mẫu 1 000 mg Do đó, 1 000 mg axit aspartic chứa ­ 360,6 mg C; ­ 52,6 mg H; ­ 105,2 mg N, và ­ 480,8 mg O Lượng oxy cần thiết cho việc đốt hồn tồn urê về cacbon dioxit và nước, đã bao  gồm hàm lượng oxy của hợp chất và sau đây: f) thể tích mol của khí lý tưởng là 22,4 I (ở T = 0 °C và p = 0,1 MPa); g) 1 mol của C tương ứng 12 g (12 000 mg); h) 1 mol của H2 tương ứng 2 g (2 000 mg); i) 1 mol của N2 tương ứng 28 g (28 000 mg);  j) 1 mol của O2 tương ứng 32 g (32 000 mg); Kết quả là cần 800 ml oxy để đốt cháy 1 g axit aspartic 61 Đồ án môn học                                                                        GVHD: Phan Th ị   Xuân PHỤ LỤC DCÁC HỆ SỐ CHUYỂN ĐỔI HÀM LƯỢNG NITƠ VỀ HÀM  LƯỢNG PROTEIN Tên sản phẩm Lúa mạch Kiều mạch Cùi dừa Bột ngô Bột hạt bong Bột lanh Hạt kê Bột mù tạt Yến mạch Bột yến mạch Bột lạc Bột hạt cải dầu Gạo (lứt, hạt dài) Gạo   nghiền,   gạo  Chuyển đổi nitơ thành protein 5,68 5,53 5,3 6,25 5,3 5,83 5,83 5,30 5,41 5,68 5,4 5,5 5,83 5,46 5,53 5,95 5,95 xát dối, gạo đổ Gạo lật hoặc gạo  5,95 lứt (chỉ bỏ trấu) Gạo   xát,   gạo  5,95 trắng Bột lúa mạch đen Bột rum 5,3 Bột   hạt   rum  5,3 5,64 5,83 5,3 (rang) Hạt vừng khô 5,3 Bột   đậu   tương  5,71 5,3 (rang) Đậu   tương,   hạt,  5,71 bột     sản  phẩm của chúng Bột   hoa   hướng  5,3 62 Đồ án môn học                                                                        GVHD: Phan Th ị   Xuân dương Hạt   hoa   hướng  5,3 5,3 dương (khơ) Triticale Lúa mì (cứng đỏ) 5,83 Cám mì Mầm lúa mì Bột   lúa   mì   thơ  5,76 5,61 5,26 5,45 6,31 5,83 hoac bột mịn a. Đối với thức ăn chăn ni hệ số chuyển đổi thường là 6,25 PHỤ LỤC E TIÊU CHUẨN AOAC VỀ DẦU TRONG HẠT CĨ DẦU AOAC Official Method 999.02 Oil in Oilseeds Supercritical Fluid Extraction (SFE) Method First Action 1999 AOCS–AOAC Method (Applicable to determination of oil content of soybeans, cottonseed, canola seed,  safflower seed, and sunflower seed.) Caution:    SFE   uses   compressed   gases   as   an   extraction   fluid. See Appendix   B,  Laboratory Safety, for safe handling and storage of compressed gas cylinders. SFE  equipment must be constructed and maintained in proper working order to minimize  the chance of any explosive decompression of extraction fluid. Although CO 2 is a  nontoxic gas, adequate ventilation in the laboratory must be maintained to avoid the  possibility   of   displacing   too   much   oxygen   Adequate   ventilation   must   also   be  maintained when using modifiers to avoid the toxic effects of breathing organic  vapors 63 Đồ án môn học                                                                        GVHD: Phan Th ị   Xuân See Tables 999.02A–C for   the   results   of  the   interlaboratory  study  supporting   the  acceptance of the method A. Principle Oil is extracted from prepared oilseed with a supercritical fluid (liquid CO 2) and  deposited   directly   onto   glass   wool   contained   in   a   collection   apparatus   After  evaporation of moisture and any residual modifier from glass wool and collection  apparatus, the weight of extracted oil is determined and used to calculate the percent  oil in the test sample B. Apparatus (a) Supercritical   fluid   extractor.—Producing   a   pressure   of   51.7 kPa   and   a  temperature of 100°C; equipped with a heated restrictor (adjustable or fixed flow)  keeping   the   temperature   of   the   evolving   CO2 above   40°C   For   extractions   with  CO2 + 15% ethanol, use an on­line modifier pump. Low oil values can result from  leaks in the SFE instrument or inefficient collection of the extracted oil Before   initial   use   of   the   extractor   and   periodically   thereafter,   extract   replicate  400 mg   test   portions   of   soybean   oil   on   granular   diatomaceous   earth   using   the  desired   set   of   conditions   and   drying   procedure   to   verify   equipment   condition,  collection efficiency, and procedure. Recovery of the oil should be >99% and no oil  aerosol should be observed rising above the glass wool during extraction (b) Extraction cells.—5–10 mL internal volume (c) Glass extract collection vessels.—Suitable for extraction system. Vessels must  be capable of holding  1.0 g loosely packed glass wool (d) Analytical balance.—Accurate to ±0.0001 g (e) Vacuum oven and pump.—Capable of maintaining drying conditions as outlined  in 926.12 (see 41.1.02)   with   permissible   oven   temperature   20–25°C   above   bp   of  64 Đồ án môn học                                                                        GVHD: Phan Th ị   Xuân H2O at working pressure  100 mm Hg (13.3 kPa; 72–77° ± 1°C at 100 mm Hg  working pressure; 58–63° ± 1°C at 50 mm Hg working pressure) (f) Forced­air oven.—Operating at 130 ± 1°C. Use if vacuum oven is not available C. Reagents (a) Carbon dioxide.—Welding or industrial grade with dip tube. Purer grades of  CO2 may be used, but are not required (b) Ethanol,   absolute.—HPLC   grade   or   equivalent;   moisture   content   5 ng aflatoxin B1/g.) A. Principle Partially cleaned up B1 extracts are further cleaned up by 2­dimensional thin layer  chromatography. Presence of aflatoxin B1 is confirmed by negative ion chemical  ionization mass spectrometry (MS) B. Apparatus (a) Thin­layer   plates.—20   20   cm   with   0.25   mm   silica   gel   and   silica   gel   60  precoated (E. Merck), or equivalent (b) Development tank.—Glass tank with ground­to­fit cover and metal trough (c) Thin­layer plate scraper.—Kontes 416400­0022, or equivalent (d) Glass fiber filter paper.—4.25 cm, Whatman GF/A, or equivalent (e) Membrane   filter.—0.5  m PTFE,   Millex­SR  filter  unit (Millipore  Corp  SLS  R025NS), or equivalent filter to male Luer outlet of 5 or 10 mL syringe (f) Automatic TLC spot eluter.—CAMAG Eluchrome 75000 (replacement Model  No. 027.5000, CAMAG Scientific, Inc., 1200 N. 23rd St, Wilmington, NC 28405,  USA) (no longer available), or equivalent 68 Đồ án môn học                                                                        GVHD: Phan Th ị   Xuân (g) Concentrator tube.—2 mL, Kontes 422560, or equivalent (h) Mass spectrometer.—Finnigan MAT 3300, Negative Ion Chemical Ionization  Instrument   (Finnigan   MAT   Institute,   Finnigan   Corp.,   4450   Carver   Woods   Dr,  Cincinnati, OH 45242, USA) interfaced to IN­COS 2300, or equivalent, data system  with following operating conditions: 55–655 Daltons scan range, 3.0 s scan time,  0.7 torr   source   pressure,   120°C   source   temperature,   CH4 reagent   gas,   0.50 mA  filament current, and 140 eV electron energy, or equivalent C. Reagents (a) Solvents.—ACS   grade:   acetone,   benzene,   CH 3CN,   CHCl3,   anhydrous   ethyl  ether, isopropanol, and methanol. (Note: Do not use any solvents stored in plastic  ware because leachables may interfere in interpretation of mass spectra.) (b) Mass spectrometer calibrants.—Fomblin (PCR, PO Box 1466, Gainesville, FL  32602,   USA),   or   perfluorotributylamine   (FC­43)   (PCR)   spiked   with   2,   4­ dinitrofluorobenzene (Aldrich Chemical Co., Inc., or equivalent), and trifluoroacetic  anhydride (PCR) (c) Mixed aflatoxin reference standard.—B1 and G1, 0.5  g/mL; B2 and G2, 0.15  g/mL in benzene–CH3CN (98 + 2) (d) Aflatoxin B1 reference standard.—10  g/mL in acetone D. Preparation of Extracts (a) Roasted peanuts.—Prepare extract as in 968.22A–E (see 49.2.08) (b) Cottonseed.—Prepare extract as in 980.20 (see 49.2.19) E. Chromatographic Cleanup Perform additional cleanup using 2­dimensional TLC 69 Đồ án môn học                                                                        GVHD: Phan Th ị   Xuân Take thin layer plates and score as shown in Figure 985.17A. Spot 5  L mixed  aflatoxin reference standard for development in each direction. Dissolve test residue  in   50  L   CHCl3 and   spot   2  L   ca     cm   apart   from   each   standard   spot   Apply  remaining test solution as single spot in corner of TLC plate. Rinse vial with 20  L  CHCl3 and superimpose rinse on test spot. Develop plate in 2 dimensions, using  following solvents: first, acetone–CHCl3 (1 + 9) and second, anhydrous ethyl ether– methanol–H2O (96 + 3 + 1). Let plate stand 10 min in dark between developments  to   remove   solvent   After   second   development,   let   plate   stand   in   hood   5 min   to  evaporate   developing   solvent   Locate   aflatoxin   B 1 spot   of   test   solution   under  longwave   UV   light,   mark,   and   elute   from   TLC   plate   as   described   below.  (Note: Aflatoxin   recovery   will   be   reduced   with   prolonged   exposure   to   UV   and  fluorescent light.) F. Elution of Purified Aflatoxin B1 Elute the aflatoxin B1 spot from 2­dimensional TLC plate by procedure (a), (b), or  (c): (a) TLC   vacuum   scraper.—Proceed   after   development  of   TLC   plate   as   follows:  Expose plate to lowest intensity UV light required to see fluorescent spots. Keep  time and intensity of irradiation by UV light at minimum. With needle, mark off  area containing aflatoxin B1. Collect silica gel from marked off area, using suction  to pull coating loosened by plate scraper into filter portion of device. Elute aflatoxin  from silica gel by swirling with six 1 mL portions CHCl 3. Use filter bell to pull  CHCl3 through fritted glass into 2 dram vial by suction (b) Scrape and filter.—Mark afltoxin spot with needle. Scrape spot onto creased,  10   10 cm piece of Al foil and transfer to glass fiber filter paper, B(d), placed in 25  70 Đồ án môn học                                                                        GVHD: Phan Th ị   Xuân mm funnel (1 cm stem).  Wash Al foil and elute aflatoxin B1 into 2 dram vial with  six 0.5 mL portions of CHCl3. (TLC spot may also be scraped onto weighing paper  and   transferred   dry   onto   filter   without   washing   the   paper.)   Alternatively,   filter  scraped   silica   gel   as   described,   using   glass   syringe   filter, B(e)   Wash   aflatoxin  B1 into 2 dram vial with six 0.5 mL portions of CHCl3 (c) In   situ   elution.—Elute   aflatoxin   B1 spot   with   2.5   mL   CHCl3–acetone– isopropanol (85 + 15 + 5) into concentrator tube, B(g) Evaporate purified aflatoxin solution prepared in (a), (b), or (c) to dryness under  N2 stream in warm H2O bath (50°C). Transfer to 2 mL concentrator tube,B(g). Save  for mass spectrometry. If necessary, store as dry film in freezer G. Quantitation of Aflatoxin B1 Analyze by TLC as in 968.22F (see 49.2.08). Dissolve purified aflatoxin B 1 in 50  L benzene–CH3CN (98 + 2) and spot 5  L on silica gel TLC plate. Also spot 5 and  71 Đồ án môn học                                                                        GVHD: Phan Th ị   Xuân 10  L   mixed   aflatoxin   reference   standard   Develop   with   acetone–CHCl 3 (1   +  9). Rf of   aflatoxin   B1 should   be   ca   0.5   (see 978.22 [see 16.14.10]  and 975.35 [see 49.2.04])   Evaporate   remaining   extract   (45  L)   to   dryness   under  stream of  N2 and  save  for mass  spectrometry.  If necessary,  store  as  dry film in  freezer H. Mass Spectrometry (a) Mass spectrometry of standard aflatoxin B1.—Transfer up to 10  L (100 ng)  B1 reference standard to MS direct inlet probe glass holder Analyze aflatoxin B1 in negative ion mode. Calibrate mass scale from m/z 100 to  500,   using   appropriate   calibrant,   such   as   Fomblin,   or   FC­43   (spiked   with  dinitrofluorobenzene   and  trifluoroacetic   anhydride   to   provide   reference   peaks   in  lower mass range). Optimize source tuning and reagent gas pressure with calibrant.  Adjust instrument parameters to obtain good quality spectrum from 10 ng aflatoxin  B1 by direct probe introduction (Note: Source temperature has pronounced effect on spectrum and must be adjusted  and maintained as constant as possible during course of analysis.) Obtain spectrum  of   aflatoxin   B1 reference   standard   (Figure 985.17B)   and   repeat     times   under  identical   conditions   to   determine   instrument   reproducibility   Major   peaks  are m/z 297,   311,   and   312   Interference   peaks   should   be   less   than   20%   Spectra  without ion at m/z 311 have been produced on some instruments (b) Mass spectrometry of sample.—Dissolve purified residue from G  in acetone to  give 10 ng B1/ L. Add small volume of acetone to clean vial, agitate, and evaporate  to ca 10  L. Transfer quantitatively to inlet probe and run to test for ghost peaks.  72 Đồ án môn học                                                                        GVHD: Phan Th ị   Xuân Transfer 10  L test solution (100 ng B 1) to inlet probe for MS anlaysis. Repeat  analysis   of   aflatoxin   B1 reference   standard   to   verify   instrument   performance.  Confirm presence of aflatoxin B1 in test sample by comparison of spectrum of test  solution to spectrum of standard. Examples are shown in Figure 985.17B References: JAOAC 63, 1052(1980); 68, 636(1985) Revised: March 1996 © 2000 AOAC INTERNATIONAL 73 ... lấy hạt ăn do hạt có hàm lượng chất béo và chất đạm cao. Hạt mè có từ cây mè   là một cây cao cỡ 1­1,5m. Lá đơn và kép 3 lá phụ, có lơng, hoa vàng nhạt, nang có   khía, hạt nhỏ.  12 Đồ án mơn học                                                                        GVHD: Phan Th... đen (Sesamun indicum L.) và mè vàng (Sesamun orientalis L.)  Mè đen cho màu có phẩm chất tốt và hàm lượng dầu cao hơn mè trắng  (nhất là mè đen một vỏ), mè đen có giá trị xuất khẩu cao hơn mè trắng.  Vỏ hạt phân biệt mè một vỏ với mè hai vỏ, vì mè một vỏ cho dầu cao hơn ... phòng và chữa bệnh Trong đó  ứng dụng chính là  hạt mè được dùng để  ép lấy dầu. Hạt mè chứa từ 38 đến 50% dầu. Hạt mè dùng làm dầu mè là một loại dầu ăn tốt. Dầu   mè (vừng) được xem là loại dầu có nhiều dinh dưỡng, dùng làm gia vị

Ngày đăng: 12/01/2020, 01:39

Từ khóa liên quan

Tài liệu cùng người dùng

Tài liệu liên quan