BÀI KIỂM NGHIỆM VIÊN NANG PARACETAMOL (Viên nang chứa paracetamol 500mg) Công thức: C8H9NO2 Yêu cầu kỹ thuật:  Tính chất: Nang cứng, bên chứa bột thuốc màu trắng, không mùi  Độ đồng khối lượng: %  Định tính: Phải có phản ứng paracetamol  Giới hạn 4-aminophenol: Không 0,1%  Tạp chất liên quan: Đạt yêu cầu phép thử  Định lượng hàm lượng paracetamol (C8H9NO2): từ 95,0% - 105,0% so với hàm lượng ghi nhãn  Độ hòa tan: :theo phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao Phương pháp thử:  Tính chất : Cảm quan: viên nang cứng, bên chứa bột thuốc màu trắng, không mùi  Kết luận: ĐẠT  Độ đồng khối lượng: dùng phương pháp  Cân khối lượng nang  Tháo rời vỏ nang → dùng lau bên vỏ & cân khối lượng vỏ nang  mthuốc nang = m nang thuốc - mvỏ  Tiến hành tương tự với 24 đơn vị lấy khác lấy ngẫu nhiên ta có thơng số: Khối lượng bột thuốc có nang (g) m = mcả viên thuốc nang - mVỏ nang  m1 = 0,5603  m7 = 0,5451  m13 = 0,5353  m2 = 0,5544  m8 = 0,5394  m14 = 0,5428  m3 = 0,5487  m9 = 0,5388  m15 = 0,5368  m4 = 0,5544  m10 = 0,5429  m16 = 0,5422  m5 = 0,5406  m11 = 0,5422  m17 = 0,5532  m6 = 0,5334  m12 = 0,5409  m18 = 0,5544  Tính khối lượng trung bình bột thuốc có nang: = = = 0,5408g       m19 = 0,5445 m20 = 0,5374 m21 = 0,5357 m22 = 0,5448 m23 = 0,5483 m24 = 0,4615 -15% = 85% -7,5% = 92,5% 100% = +7,5% = 107,5% +15% = 115% 0,5408g 0,4597 0,5002g 0,5814g 0,6219g  So sánh: khối lượng bột thuốc viên với thông số giới hạn vừa tính bên  Nhận xét: có viên (m24 = 0,4615g ) thấp giới hạn – 7,5% cho phép nằm giới hạn -15% Khuấy kỹ  Kết luận: ĐẠT  4.Định tính: A Phản ứng hóa học:  Lấy lượng bột thuốc tương đương khoảng 0,5g paracetamol  Thêm 30ml acetol (TT)  Khuấy kỹ  Lọc → lấy dịch  Làm bay dịch lọc đến cắn ( làm nồi cách thủy đặt tủ hút)  Lấy cắn làm phản ứng sau đây: Lấy khoảng 0,1g cắn cho vào ống nghiệm  Thêm 2ml acid hydrochloric 10%  Đun sôi đèn cồn phút  Thêm 10 ml nước cất vào ống nghiệm đun  Để nguội  Thêm giọt dung dịch kali dicromat 5% (TT)  Nhận xét: xuất màu tím, khơng chuyển sang màu đỏ Lọc lấy dịch Kết B Sắc ký lớp mỏng (Phụ lục 5.4) o Sắc ký đồ thu  Bản mỏng: Silicagel GF254 hoạt hoá 105 C  Hệ dung môi khai triển: Methylen clorid- methanol (4: 1)  Dung dịch thử: Hoà tan lượng bột thuốc nang tương ứng với 10 mg paracetamol 10 ml methanol (TT) → Lọc  Dung dịch đối chiếu : Hoà tan 10 mg paracetamol 10 ml methanol (TT)  Cách tiến hành:  Chấm riêng biệt lên mỏng 20 ml dung dịch Triển khai sắc ký đến dung môi 15 cm Lấy mỏng để khô ngồi khơng khí  Quan sát ánh sáng tử ngoại bước sóng 254 nm: Vết thu sắc ký đồ dung dịch thử phải tương ứng vị trí màu sắc với vết thu sắc ký đồ dung dịch đối chiếu  Nhận xét kết luận: Khơng vết thu sắc ký đồ dung dịch thử không tương ứng với vết thu sắc ký đồ dung dịch đối chiếu hình dáng  Tạp chất liên quan: Phương pháp: sắc ký lớp mỏng (Phụ lục 5.4): Kết Sắc ký đồ thu Chuẩn bị:  Bản mỏng: Silicagel GF254 hoạt hoá 105 oC  Dung môi khai triển: Toluen- aceton- cloroform (10: 25: 65)  Dung dịch thử (1): Lấy lượng bột chế phẩm tương ứng với 1,0 g paracetamol vào ống ly tâm có nắp , thêm xác ml ether ethylic khơng có peroxyd(TT), đậy nắp, lắc học 30 phút Ly tâm với tốc độ 1000 vòng/phút khoảng 15 phút thu dung dịch hồn tồn  Dung dịch thử (2): Lấy xác ml dung dịch thử (1) pha loãng vừa đủ với 10 ml ethanol 96 % (TT)  Dung dịch đối chiếu (1): Chứa 0,0050 % 4′- cloroacetanilid ethanol 96% (TT)  Dung dịch đối chiếu (2): Hòa tan 0,25 g 4′- cloroacetanilid 0,1 g paracetamol vừa đủ 100 ml với ethanol 96 % (TT) Cách tiến hành:  Lượng chấm dung dịch thử (1): 200 ml  Lượng chấm dung dịch thử (2), dung dịch đối chiếu (1) (2): 40 ml  Cho dung môi khai triển bình sắc ký khơng lót giấy đặt mỏng vừa chấm dung dịch vào bình Triển khai sắc ký dung mơi khoảng 14 cm  Sau triển khai để mỏng khơ hồn tồn  Xem tiêu chuẩn nhận xét kết quả: quan sát sáng tử ngoại bước sóng 254 nm: Tiêu chuẩn:  Bất kỳ vết có sắc ký đồ dung dịch thử (1) tương ứng với vết 4′cloroacetanilid không đậm vết sắc ký đồ dung dịch đối chiếu (1)  Bất kỳ vết có sắc ký đồ dung dịch thử (2), có giá trị Rf thấp giá trị Rf 4′- cloroacetanilid không đậm vết sắc ký đồ dung dịch đối chiếu (1)  Thử nghiệm có giá trị sắc ký đồ dung dịch đối chiếu (2)có vết tách rõ ràng, vết tương ứng với 4′- cloroacetanilid phải có giá trị Rf cao Kết quả:  Dung dịch thử (1) ( đậm đặc dung dịch thử ( 2)→ không thu vết  Dung dịch thử (2) thu vết đậm màu vết dung dịch đối chiếu (1)  Kết luận: không đạt  Định lượng: Phương pháp quang phổ hấp thụ UV-Vis ( phụ lục 4.1)  Cân 24 viên nang → tính khối lượng trung bình bột thuốc nang: ( làm phần xác định độ đồng khối lượng ) nghiền thành bột mịn  Cân xác lượng thuốc bột viên tương ứng với khoảng 0,075g paracetamol: Tính tốn: Trong (g) = 0,5408 Vậy mcân ? bột thuốc chứa 0,5g hoạt chất X (yêu cầu cân tương ứng với 0,075g ) mcân = = = 0,08112g  Cân xác 0,08112g bột thuốc nghiền mịn cho vào BĐM 100ml  Dùng ống đong thêm 25 ml dung dịch natri hydroxyd 0,1 M (TT)  Thêm 50 ml nước cất  Thêm nước đến định mức 100ml Lắc → Lọc  Loại bỏ 10 ml dịch lọc đầu ( tránh dịch bị lỗng dùng dung mơi nước để thấm ướt giấy lọc ban đầu) Lắc  Dùng pipet bầu lấy xác 10 ml dịch vừa lọc cho vào bình định mức 100 ml,  Pha lỗng với nước đến định mức 100ml Lắc 15 phút Lọc & bỏ 10ml dd đầu Lắc  Lấy xác 10 ml dung dịch vừa pha cho vào bình định mức 100 ml khác,  Thêm 10 ml dung dịch natri hydroxyd 0,1 M (TT),  Pha loãng với nước đến định mức 100ml Lắc  Đo độ hấp thụ (Phụlục 4.1) dung dịch thu được: Ở bước sóng 257 nm, Cốc dày cm Dùng dung dịch natri hydroxyd 0,01 M làm mẫu trắng  Làm lần mẫu thử ta có thơng số: m1 = 0,0806 m = = 0,08075g m2 = 0,0809 A1 = 0,5348 A2 = 0,5345 A = = 0,53465 Và ta có (g) = 0,5408g  Tính hàm lượng paracetamol, C8H9NO2 theo A(1 %, cm) Lấy 715 giá trị A(1 %, cm) bước sóng 257 nm Lượng paracetamol có viên tính theo cơng thức: X% = x100 = x 100 = 95,48%  Nhận xét: 95,0% X% = 95,48% 105,0%  Kết quả: ĐẠT  Độ hòa tan:theo phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao ... phản ứng sau đây: Lấy khoảng 0,1g cắn cho vào ống nghi m  Thêm 2ml acid hydrochloric 10%  Đun sôi đèn cồn phút  Thêm 10 ml nước cất vào ống nghi m đun  Để nguội  Thêm giọt dung dịch kali... đồ dung dịch đối chiếu (1)  Thử nghi m có giá trị sắc ký đồ dung dịch đối chiếu (2)có vết tách rõ ràng, vết tương ứng với 4′- cloroacetanilid phải có giá trị Rf cao Kết quả:  Dung dịch thử (1)... viên nang → tính khối lượng trung bình bột thuốc nang: ( làm phần xác định độ đồng khối lượng ) nghi n thành bột mịn  Cân xác lượng thuốc bột viên tương ứng với khoảng 0,075g paracetamol: Tính