15.3 XÁC ĐỊNH ĐỘ PHÂN TÁN CỦA VẮC XIN BCG Nguyên lý Vắc xin BCG đông khô sau hoàn nguyên với nước để pha thuốc tiêm để kiểm tra độ phân tán vắc xin Nếu vắc xin có độ phân tán kém, tạo cụm nhiều có nguy gây sưng hạch sưng hạch mủ cho trẻ tiêm vắc xin Tiến hành Vắc xin BCG đơng khơ hồn ngun nước muối sinh lý (pha từ nước để pha thuốc tiêm) để có đậm độ mg/ml Sử dụng nước muối sinh lý dùng để hoàn nguyên vắc xin BCG làm dung dịch mẫu trắng để chuẩn máy đo Huyền dịch vắc xin lắc kỹ trước đo mật độ quang ( OD) Đo mật độ quang hỗn dịch vắc xin bước sóng: 434 nm 630 nm Tính kết Sau đo OD huyền dịch vắc xin BCG bước sóng nêu trên, tính kết theo cơng thức: Lg OD1 - Lg OD2 Độ phân tán = -lg λ2 - lg λ1 Trong đó: OD1: Mật độ quang hỗn dịch vi khuẩn đo bước sóng 434 nm (lọc màu xanh lam) OD2: Mật độ quang hỗn dịch vi khuẩn đo bước sóng 630 nm (lọc màu đỏ) Ở công thức mẫu số (lgλ2 - lgλ1) số 0,1618 Nếu loạt vắc xin BCG đông khô không đạt yêu cầu phải nhắc lại thử nghiệm: - Nếu thử nghiệm lần có giá trị (valid test) phải nhắc lại thử nghiệm với số lượng mẫu thử nghiệm gấp đôi so với thử nghiệm lần - Nếu thử nghiệm lần khơng có giá trị (invalid test) cần nhắc lại thử nghiệm với số lượng mẫu thử nghiệm thử nghiệm lần Kết lần thử nghiệm nhắc lại không đạt yêu cầu loạt vắc xin BCG đơng khơ coi không đạt yêu cầu độ phân tán phải huỷ bỏ; đạt yêu cầu loạt vắc xin BCG đơng khơ coi đạt u cầu độ phân tán Tiêu chuẩn chấp thuận: Độ phân tán vắc xin BCG cho phép ≥ 0,9