ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Nghiên cứu khả phân hủy Cyanide vỏ sắn thải từ nhà máy tinh bột vi sinh vật MỤC LỤC LỜI NÓI ĐẦU i LỜI CẢM ƠN ii NHẬN XÉT CỦA GVHD iii NHẬN XÉT CỦA GVPB iv DANH MỤC TỪ NGỮ VIẾT TẮT DANH MỤC BẢNG DANH MỤC HÌNH MỞ ĐẦU ĐẶT VẤN ĐỀ MỤC TIÊU CỦA ĐỀ TÀI 2.1 Mục tiêu chung 2.2 Mục tiêu cụ thể ĐỐI TƯỢNG VÀ GIỚI HẠN CỦA ĐỀ TÀI 3.1 Đối tượng đề tài 3.2 Phạm vi đề tài 3.3 Địa điểm thí nghiệm NỘI DUNG NGHIÊN CỨU PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 10 5.1 Phương pháp phân lập vi sinh vật 10 5.2 Phương pháp định tính định lượng hoạt độ enzyme vi sinh vật 13 5.3 Phương pháp phân tích hóa lý 15 5.4 Phương pháp thống kê xử lý số liệu 16 5.5 Phương pháp tổng hợp tài liệu 16 Ý NGHĨA CỦA ĐỀ TÀI 16 6.1 Ý nghĩa thực tiễn 16 6.2 Ý nghĩa khoa học 16 CHƯƠNG XỬ LÝ CHẤT THẢI RẮN TRONG NGÀNH SẢN XUẤT TINH BỘT SẮN 18 SVTH: VÕ DUY MINH MSSV: 0450020442 GVHD: PGS TS NGUYỄN THỊ VÂN HÀ ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Nghiên cứu khả phân hủy Cyanide vỏ sắn thải từ nhà máy tinh bột vi sinh vật 1.1 QUY TRÌNH SẢN XUẤT TINH BỘT SẮN 18 1.2 CHẤT THẢI RẮN TRONG SẢN XUẤT TINH BỘT SẮN 20 1.2.1 Nguồn phát sinh tải lượng 20 1.2.2 Đặc trưng chất thải rắn 22 1.3 PHƯƠNG PHÁP XỬ LÝ CHẤT THẢI TỪ SẮN 23 1.3.1 Xử lý tái sử dụng vỏ sắn theo phương pháp – lý – hóa học 23 1.3.2 Xử lý tái sử dụng vỏ sắn theo phương pháp sinh học 26 1.4 GIỚI THIỆU VỀ NHÀ MÁY SẢN XUẤT TINH BỘT MỲ HÙNG DUY 29 CHƯƠNG KHÁI QUÁT VỀ CYANIDE TRONG VỎ SẮN VÀ QUÁ TRÌNH PHÂN GIẢI CYANIDE 31 2.1 ĐỘC TÍNH VÀ SỰ CHUYỂN HĨA CYANIDE TRONG SẮN 31 2.2 TỔNG QUAN QUÁ TRÌNH PHÂN GIẢI CYANIDE BẰNG SINH HỌC 33 2.2.1 Con đường thủy phân (hydrolytic pathway) 35 2.2.2 Con đường oxy hóa (Oxidative pathway) 40 2.2.3 Con đường khử (Reductive pathway) 42 2.2.4 Con đường thay chuyển hóa (Substitution/transfer pathway)42 2.2.5 Con đường tổng hợp (Syntheses pathway) 44 2.3 KẾT QUẢ CÁC NGHIÊN CỨU LIÊN QUAN 47 2.3.1 Kết nghiên cứu nước 47 2.3.2 Kết nghiên cứu giới 48 2.3.3 Đặc tính sinh học chủng vi sinh vật kết đề tài 49 CHƯƠNG KẾT QUẢ ĐỀ TÀI THÍ NGHIỆM 53 3.1 ĐÁNH GIÁ ẢNH HƯỞNG CỦA CYANIDE LÊN QUÁ TRÌNH TĂNG TRƯỞNG CỦA VI SINH VẬT 53 3.1.1 Mục tiêu 53 3.1.2 Bố trí thí nghiệm 53 3.1.3 Kết 53 3.2 PHÂN LẬP VI SINH VẬT PHÂN GIẢI CYANIDE TỪ VỎ SẮN 56 3.2.1 Mục tiêu 56 3.2.2 Bố trí thí nghiệm 56 SVTH: VÕ DUY MINH MSSV: 0450020442 GVHD: PGS TS NGUYỄN THỊ VÂN HÀ ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Nghiên cứu khả phân hủy Cyanide vỏ sắn thải từ nhà máy tinh bột vi sinh vật 3.2.3 Kết 56 3.3 ĐỊNH LƯỢNG KHẢ NĂNG PHÂN GIẢI CYANIDE TRONG NƯỚC 60 3.3.1 Định lượng thông qua đầu vào đầu [CN] 60 3.3.2 Định lượng thông qua kết hợp đo quang đo OD 62 3.3.3 Đặc điểm hình thái kết định danh chủng phân giải cyanide 67 3.4 KẾT HỢP CÁC CHỦNG PHÂN GIẢI CYANIDE VÀ CELLULOSE VÀO PHÂN HỦY VỎ SẮN 69 3.4.1 Mục tiêu 69 3.4.2 Bố trí thí nghiệm 70 3.4.3 Kết 70 CHƯƠNG ĐỀ XUẤT CÁC GIẢI PHÁP KỸ THUẬT HỖ TRỢ ỨNG DỤNG VI SINH VÀO XỬ LÝ VỎ SẮN TỪ NHÀ MÁY SẢN XUẤT TINH BỘT SẮN THEO PHƯƠNG PHÁP SINH HỌC 75 4.1 GIẢI PHÁP KĨ THUẬT 75 4.1.1 Lựa chọn vi sinh vật xử lí 75 4.1.2 Xác định yếu tố ảnh hưởng đến trình sinh trưởng vi sinh vật sử dụng ủ compost 75 4.1.3 Đề xuất bố trí thêm số thí nghiệm 76 4.2 GIẢI PHÁP QUẢN LÍ 81 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 83 KẾT LUẬN 83 KIẾN NGHỊ 83 TÀI LIỆU THAM KHẢO 85 PHỤ LỤC HÌNH ẢNH 86 SVTH: VÕ DUY MINH MSSV: 0450020442 GVHD: PGS TS NGUYỄN THỊ VÂN HÀ ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Nghiên cứu khả phân hủy Cyanide vỏ sắn thải từ nhà máy tinh bột vi sinh vật DANH MỤC TỪ NGỮ VIẾT TẮT PTN Phòng thí nghiệm PP Phương pháp VSV Vi sinh vật FAO Food and Agriculture Organization PNPG ρ-Nitrophenyl-β-D-glucuronide RPM Rad per minutes SCP Single cell protein SSF Solid State Fermentation SmF Submerged Fermentation TNHH Trách nhiệm hữu hạn HCN Hydrogen cyanide HNL Hydroxynitrile lyase TT Thông tư BNNPTNT Bộ Nông Nghiệp Phát Triển Nông Thôn CTR Chất thải rắn SVTH: VÕ DUY MINH MSSV: 0450020442 GVHD: PGS TS NGUYỄN THỊ VÂN HÀ ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Nghiên cứu khả phân hủy Cyanide vỏ sắn thải từ nhà máy tinh bột vi sinh vật DANH MỤC BẢNG Bảng Thành phần môi trường phân lập chủng phân giải cyanide 11 Bảng Các bước tiến hành phân lập vi sinh 12 Bảng 1 Kết thử nghiệm mẫu vỏ sắn 22 Bảng Thành phần tro bã sắn (g/100g trọng lượng sấy khô) 23 Bảng Tổng hợp chủng vi sinh có khả xử lý vỏ, lá, bã sắn 28 Bảng Đặc điểm enzim Cyanide hydratase từ vi sinh vật 36 Bảng 2 Đặc điểm hydratases nitrile từ vi sinh vật khác 37 Bảng Đặc điểm vi sinh vật khác từ cyanidase 38 Bảng Đặc điểm nitrilase từ vi sinh vật khác 39 Bảng Đặc điểm enzym rhodanese từ vi sinh vật khác 43 Bảng Ảnh hưởng cyanua lên trình sinh trưởng vi sinh vật 54 Bảng Kết phân lập sau lần test hoạt tính 57 Bảng 3 Kết đo vòng phân giải màu vàng môi trường thạch PNPG 58 Bảng Kết phân giải cyanide nước chủng tuyển chọn 61 Bảng Kết so màu chủng VSV bước sóng 425 nm 64 Bảng Thành phần pha chế môi trường Czapek – dox 76 Bảng Thành phần chất chuẩn bị cho thí nghiệm a 77 Bảng Thành phần chất chuẩn bị cho thí nghiệm b 78 Bảng 4 Dự báo khối lượng vỏ sắn tăng 2016 - 2025 79 SVTH: VÕ DUY MINH MSSV: 0450020442 GVHD: PGS TS NGUYỄN THỊ VÂN HÀ ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Nghiên cứu khả phân hủy Cyanide vỏ sắn thải từ nhà máy tinh bột vi sinh vật DANH MỤC HÌNH Hình Quy trình thực thí nghiệm đề tài đề tài 10 Hình Ngun lý tạo vòng phân giải 11 Hình Máy chưng cất Nitơ 15 Hình Dãy chuẩn sử dụng đo Amoni với nồng độ tự 0,2 – mg/l 15 Hình 1 Quy trình sản xuất tinh bột sắn 20 Hình Cân vật chất sản xuất tinh bột sắn 21 Hình Sự hấp phụ ion Ni2+ vào phân tử bề mặt 24 Hình Nhà máy sản xuất tinh bột mỳ Hùng Duy 29 Hình Sơ đồ chế biến tinh bột khoai mì nhà máy Hùng Duy 30 Hình Cơng thức cấu tạo Linamarin 31 Hình 2 Cơng thức cấu tạo Lotaustralin 32 Hình Quá trình chuyển đổi Cyanogenic glucosides xúc tác enzyme linamarase 33 Hình Sơ đồ mô tả đường khác phân giải cyanide 35 Hình Chủng L plantarum tiêu nhuộm gram chủng 47 Hình Kết sinh vật tăng trưởng đĩa petri cấy trang 57 Hình Kết chủng vi sinh vật tăng trưởng đĩa petri cấy ziczac 58 Hình 3 Vòng phân giải chủng mạnh chọn 59 Hình Quá trình phân giải chuyển đổi sang màu vàng chanh 60 Hình Kết đo CN thiết bị cầm tay HACH DR890 61 Hình Kết màu phản ứng test kit HACH [CN] đầu đầu vào 62 Hình Biểu đồ biểu thị mật độ hấp thụ quang chủng vi sinh vật sau 36h bước sóng 660 nm (A – Chủng NM09 ; B – Chủng -57, C – Chủng -32; D – Chủng -51) 63 Hình Ống nghiệm chứa chủng vi sinh với thuốc thử PNPG sau ngày 64 Hình Quá trình tăng trưởng sinh khối chủng VSV sau 48h 65 Hình 10 Quá trình chuyển màu chủng VSV sau 36h 66 Hình 11 Hình dạng đục lỗ chủng tuyển chọn 67 Hình 12 Kết định danh giải trình tự tra cứu chủng D 68 Hình 13 Kết định danh giải trình tự tra cứu chủng A 69 SVTH: VÕ DUY MINH MSSV: 0450020442 GVHD: PGS TS NGUYỄN THỊ VÂN HÀ ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Nghiên cứu khả phân hủy Cyanide vỏ sắn thải từ nhà máy tinh bột vi sinh vật Hình 14 Kết cấy trang chủng gửi định danh 69 Hình 15 Giá trị pH theo thời gian nghiệm thức phân hủy 70 Hình 16 Sự thay đổi hàm lượng amoni HCN chuyển hóa cyanide vỏ sắn 72 Hình 17 Sự thay đổi % nitơ tổng mẫu qua thời gian 96 73 Hình Quy trình sản xuất compost cho nhà máy Hùng Duy 80 Hình Hầm ủ biogas xử lý nước thải sản xuất nhà máy Hùng Duy 81 Hình Bột bã sắn sau trình sấy nghiền 82 Hình 4 Vỏ sắn thải bị thải bỏ cánh đồng 82 SVTH: VÕ DUY MINH MSSV: 0450020442 GVHD: PGS TS NGUYỄN THỊ VÂN HÀ ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Nghiên cứu khả phân hủy Cyanide vỏ sắn thải từ nhà máy tinh bột vi sinh vật MỞ ĐẦU ĐẶT VẤN ĐỀ Sắn hay gọi khoai mì, bảy thực phẩm quan trọng giới (lúa gạo, lúa mì, bắp, bo-bo, khoai mì, khoai tây khoai lang), ưa trồng vùng nhiệt đới bán nhiệt đới giới Theo FAO (Lương Nông Quốc Tế) giới sản xuất 230 triệu sắn (2008), Thái Lan nước xuất cảng nhiều sản lượng sắn giới (chiếm 77%), Việt Nam đứng thứ hai với 13,6% Củ sắn chứa tinh bột, cung cấp đến 30% nguồn lượng hàng ngày cho người (chủ yếu nước Châu Á, Châu Phi,…) Ở nước ta nước nông nghiệp người dân vùng trung du miền núi, điều kiện thời tiết đất đai không thuận lợi nên sản lượng lúa gạo vùng thấp nên họ phải dựa vào lương thực dễ trồng củ sắn Ngoài ra, củ sắn lương thực quan trọng đứng thứ ba sau lúa ngô Việt Nam ta, củ sắn chuyển từ lương thực thực phẩm thành cơng nghiệp hàng hóa có lợi cạnh tranh cao Qua ta thấy tầm quan trọng sắn nước phát triển Tuy nhiên, thành phần củ sắn có chất Linamarin chứa nhóm cyanide (CN) hấp thụ vào thể sinh axit xyanhidric (HCN), chất gây say, nơn mửa chí dấn đến tử vong Hiện trình chế biến, sản xuất tinh bột nhà máy, xí nghiệp thải ngồi mơi trường lượng lớn chất thải rắn, vỏ sắn chiếm đa số, chưa có phương pháp xử lý hiệu quả, gây bốc mùi, ô nhiễm, suy thoái đất ảnh hưởng đến mỹ quan xung quanh, có nguy tạo mầm bệnh Hàm lượng độc tố cyanua chứa lượng lớn chất dinh dưỡng (N, P, K), xử lý cách để tận dụng chất dinh dưỡng vỏ sắn có tiềm trở thành chế phẩm phân bón hữu giá rẻ thích hợp phục vụ cho nông nghiệp Với xu trọng sử dụng công nghệ sạch, công nghệ xử lý giảm thiểu ô nhiễm, tránh ô nhiễm cách sử dụng tài nguyên, nguyên vật liệu cách có hiệu nhất, gia tăng tỷ lệ tái chế nguyên vật liệu việc thải bỏ vỏ sắn khơng làm giảm hiệu suất sinh thái mà gia tăng rủi ro cho người mơi trường Do đó, đề tài “Nghiên cứu khả phân hủy Cyanide vỏ sắn thải từ nhà máy tinh bột vi sinh vật” ứng dụng vi sinh vật nhằm tăng cường khả phân hủy, giảm thời gian phân hủy cyanide vỏ sắn tạo tiền đề cho trình phân giải vỏ sắn trở nên hiệu hơn, góp phần mở hội chuyển hóa vỏ sắn thành chế phẩm nông nghiệp, giảm thiểu ô nhiễm, tiết kiệm tài nguyên đặc biệt mang lại hiệu kinh tế cao SVTH: VÕ DUY MINH MSSV: 0450020442 GVHD: PGS TS NGUYỄN THỊ VÂN HÀ ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Nghiên cứu khả phân hủy Cyanide vỏ sắn thải từ nhà máy tinh bột vi sinh vật MỤC TIÊU CỦA ĐỀ TÀI 2.1 Mục tiêu chung Đề tài nhằm mục đích tìm kiếm, phân lập chủng vi sinh vật có khả phân giải Cyanide có vỏ sắn thải từ nhà máy tinh bột, qua đánh giá khả phân giải chúng mơ hình phòng thí nghiệm, từ đề xuất giải pháp xử lý vỏ sắn phù hợp, giảm thiểu ô nhiễm môi trường 2.2 Mục tiêu cụ thể - Phân lập chủng vi sinh vật có khả phân giải Cyanide có vỏ sắn - Đánh giá khả phân giải chủng vi sinh vật phân lập - Kết hợp chủng vi sinh vật có khả phân giải cellulose cyanide, qua đánh giá chuyển hóa Nito Amoni khả phân giải cyanide chủng kết hợp, từ đề xuất hướng xử lý CTR cho nhà máy tinh bột sắn ĐỐI TƯỢNG VÀ GIỚI HẠN CỦA ĐỀ TÀI 3.1 Đối tượng đề tài - Vỏ sắn thải (vỏ lụa củ sắn) - Các chủng vi sinh vật có khả phân giải Cyanide 3.2 Phạm vi đề tài - Các chủng vi sinh vật phân lập trực tiếp từ vỏ sắn thải nhà máy sản xuất tinh bột sắn điều kiện phòng thí nghiệm - Thực áp dụng chủng vi sinh phân lập vào phân giải cyanide giai đoạn phân hủy vỏ sắn thải điều kiện phòng thí nghiệm - Nhà máy sản xuất tinh bột sắn chọn lấy mẫu thử nghiệm ứng dụng là: nhà máy sản xuất tinh bột sắn Hùng Duy – Huyện Châu Thành - Tỉnh Tây Ninh 3.3 Địa điểm thí nghiệm - Thời gian: 10/2016 – 04/2017 - Phòng thí nghiệm cơng nghệ mơi trường – Viện kỹ thuật công nghệ cao NTT – Trường Đại Học Nguyễn Tất Thành; - Phòng thí nghiệm Vi sinh Viện Sinh Học Nhiệt Đới NỘI DUNG NGHIÊN CỨU - Nội dung 1: Khái quát cyanide vỏ sắn trình phân giải cyanide - Nội dung 2: Phân lập chủng vi sinh vật phân giải cyanide từ vỏ sắn thải SVTH: VÕ DUY MINH MSSV: 0450020442 GVHD: PGS TS NGUYỄN THỊ VÂN HÀ ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Nghiên cứu khả phân hủy Cyanide vỏ sắn thải từ nhà máy tinh bột vi sinh vật - Nội dung 3: Đánh giá khả phân giải cyanide chủng vi sinh vật phân lập - Nội dung 4: Đánh giá khả chuyển hóa thành Amoni suy giảm hàm lượng cyanide (thực nghiệm vỏ sắn) trình phân giải vỏ sắn thải - Nội dung 5: Đề xuất giải pháp quản lý chất thải rắn từ nhà máy sản xuất tinh bột sắn theo phương pháp sinh học Phân tích đánh giá giá trị thành phần vỏ sắn thải Xem xét kinh nghiệm Việt Nam Quốc Tế phương pháp xử lý Phân lập chủng vi sinh vật phân hủy cyanide Thí nghiệm PP thí nghiệm Bố trí thí nghiệm đánh giá định tính định lượng chủng vi khuẩn PP phân tích hóa lý Bố trí thí nghiệm đánh giá khả chuyển hóa Amoni suy giảm Cyanide PP phân tích hóa lý PP thống kê xử lý số liệu Kết luận – kiến nghị Hình Quy trình thực thí nghiệm đề tài đề tài PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 5.1 Phương pháp phân lập vi sinh vật - Phân lập vi sinh vật q trình tách riêng lồi vi sinh vật (cần thiết) từ quần thể ban đầu đưa dạng khiết SVTH: VÕ DUY MINH MSSV: 0450020442 GVHD: PGS TS NGUYỄN THỊ VÂN HÀ 10 ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Nghiên cứu khả phân hủy Cyanide vỏ sắn thải từ nhà máy tinh bột vi sinh vật Hình Tham gia hội thảo khoa học ICESE – TP Quy Nhơn (Phần Poster) Hình Khu vực nạp nguyên liệu địa điểm lấy mẫu SVTH: VÕ DUY MINH MSSV: 0450020442 GVHD: PGS TS NGUYỄN THỊ VÂN HÀ 88 ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Nghiên cứu khả phân hủy Cyanide vỏ sắn thải từ nhà máy tinh bột vi sinh vật PHỤ LỤC MỘT SỐ HÌNH ẢNH TRONG QUÁ TRÌNH THÍ NGHIỆM Hình Thực cấy truyền giữ giống chủng ống nghiệm Hình Kết CN thiết bị đo cầm tay HACH DR-890 SVTH: VÕ DUY MINH MSSV: 0450020442 GVHD: PGS TS NGUYỄN THỊ VÂN HÀ 89 ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Nghiên cứu khả phân hủy Cyanide vỏ sắn thải từ nhà máy tinh bột vi sinh vật Hình Dãy erlen chứa vỏ sắn thực thí nghiệm Hình Ống nghiệm để nghiêng sau hấp khử trùng SVTH: VÕ DUY MINH MSSV: 0450020442 GVHD: PGS TS NGUYỄN THỊ VÂN HÀ 90 ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Nghiên cứu khả phân hủy Cyanide vỏ sắn thải từ nhà máy tinh bột vi sinh vật PHỤ LỤC DỤNG CỤ THÍ NGHIỆM Bảng Một số thiết bị dùng thí nghiệm STT THIẾT BỊ Nồi hấp vô trùng Tủ cấy vô trùng Tủ sấy dụng cụ mẫu Tủ ủ ấm vi sinh SVTH: VÕ DUY MINH HÌNH ẢNH MÔ TẢ MSSV: 0450020442 GVHD: PGS TS NGUYỄN THỊ VÂN HÀ 91 ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Nghiên cứu khả phân hủy Cyanide vỏ sắn thải từ nhà máy tinh bột vi sinh vật Cân phân tích số số Máy khuấy từ gia nhiệt Máy lắc Tủ lạnh bảo quản mẫu SVTH: VÕ DUY MINH MSSV: 0450020442 GVHD: PGS TS NGUYỄN THỊ VÂN HÀ 92 ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Nghiên cứu khả phân hủy Cyanide vỏ sắn thải từ nhà máy tinh bột vi sinh vật Máy phá mẫu chưng cất nito 10 Máy so quang UV VIS Thermo Scientific 11 Máy đo pH cầm tay SVTH: VÕ DUY MINH MSSV: 0450020442 GVHD: PGS TS NGUYỄN THỊ VÂN HÀ 93 ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Nghiên cứu khả phân hủy Cyanide vỏ sắn thải từ nhà máy tinh bột vi sinh vật Bảng Một số dụng cụ dùng thí nghiệm STT DỤNG CỤ Đĩa petri Erlen Ống nghiệm Micropipet SVTH: VÕ DUY MINH HÌNH ẢNH MÔ TẢ MSSV: 0450020442 GVHD: PGS TS NGUYỄN THỊ VÂN HÀ 94 ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Nghiên cứu khả phân hủy Cyanide vỏ sắn thải từ nhà máy tinh bột vi sinh vật Bình định mức Vortex Đèn cồn Que cấy SVTH: VÕ DUY MINH MSSV: 0450020442 GVHD: PGS TS NGUYỄN THỊ VÂN HÀ 95 ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Nghiên cứu khả phân hủy Cyanide vỏ sắn thải từ nhà máy tinh bột vi sinh vật PHỤ LỤC CÁC PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH Yêu cầu chung Lấy mẫu chuẩn bị mẫu khâu định cho đắn kết phân tích Những yêu cầu việc lấy mẫu vỏ sắn chuẩn bị mẫu là:  Mẫu phải đại diện cho đối tượng nghiên cứu  Mẫu phải xử lý tốt, nghiền nhỏ, đồng nhất, xử lý bảo quản để giữ ngun tính chất Lấy mẫu xử lý mẫu Dựa vào mục đích đề tài khảo sát, chọn phương pháp lấy mẫu hỗn hợp Nghĩa mẫu hỗn hợp từ nhiều mẫu riêng biệt ban đầu thành mẫu chung Các mẫu ban đầu gom lại thành mẫu hỗn hợp chung có khối lượng 10kg Xử lý mẫu: Mẫu vỏ sắn đem phòng phân tích phải hong khơ cách cho tồn mẫu đất vào khay nhựa sạch, để nơi khơ thống, khơng có khí H2S, NH3, HCl Khơng phơi trực tiếp ngồi nắng, tốt phơi phòng sáng có máy hút ẩm Trộn mẫu vỏ sắn khơ khơng khí, nghiền nhỏ cho vào hộp nhựa ghi ký hiệu mẫu, ngày lấy mẫu Phương pháp phân tích a Xác định tiêu Nitơ tổng vỏ sắn theo phương pháp Kjeldahl Giai đoạn phá mẫu Cân 0,5g mẫu vỏ sắn chuẩn bị cân phân tích cho vào ống phá mẫu Kjeldahl khơ, cho thêm chất xúc tác 2g K2SO4, 0,5g CuSO4 1g FeSO4 Dùng bình tia chứa nước cất tráng xung quanh thành ống cuối cho thêm 15 ml H2SO4 đậm đặc lắc nhẹ để acid H2SO4 thấm mẫu Đặt ống phá mẫu chuẩn bị vào máy phá mẫu Cài đặt máy nung nhiệt độ 370oC nung (hoặc đến mẫu có màu xanh CuSO4 suốt mẫu đất có màu trắng) Trong thời gian chờ phá mẫu chuẩn bị bình Erlen 250ml chứa 30ml acid Boric 3% giọt thị màu hỗn hợp, sau nhỏ thị có màu tím nhạt (nếu thị dùng Bromosol xanh) màu hồng (nếu thị hỗn hợp metyl xanh – đỏ) Giai đoạn chưng cất Khi mẫu phá xong để nguội đem mẫu erlen chứa acid Boric 3% qua máy chưng cất Kjeldahl Chuẩn bị cho máy chưng cất, xem có đủ vòi vào SVTH: VÕ DUY MINH MSSV: 0450020442 GVHD: PGS TS NGUYỄN THỊ VÂN HÀ 96 ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Nghiên cứu khả phân hủy Cyanide vỏ sắn thải từ nhà máy tinh bột vi sinh vật bình chứa nước cất vòi vào bình chứa NaOH, thiết lập chương trình chạy, cài đặt máy chưng cất với NaOH = 100ml thời gian – phút Lấy erlen chứa dung dịch hấp thụ sau chưng cất xong Erlen acid boric sau chưng cất có màu xanh nhạt Sau lần chạy mẫu cần phải rửa ngược hệ thống, lấy ống phá mẫu Kjeldahl cho vào khoảng 50ml nước lắp vào hệ chưng cất, chạy chưng cất không dùng NaOH (chỉnh lượng NaOH 0) – phút Giai đoạn chuẩn độ Chuẩn độ dung dịch sau hấp thụ (bình acid boric sau hấp thụ) dung dịch H2SO4 0,02N, đến dung dịch bắt đầu chuyển từ màu xanh sang màu hồng nhạt ngừng Ghi lại thể tích dd acid chuẩn độ (V1) Đồng thời tiến hành thí nghiệm với mẫu trắng – tiến hành bước hồn tồn khơng có mẫu đất Ghi lại thể tích dd acid chuẩn độ mẫu trắng (V0) Tính kết N(%) = (V1 – V0).N.0.014.100 m Trong đó: V1: thể tích H2SO4 0,02N định phân mẫu (ml) V0: thể tích H2SO4 0,02N định phân mẫu trắng (ml) m: khối lượng mẫu đất đem phân tích (g) SVTH: VÕ DUY MINH MSSV: 0450020442 GVHD: PGS TS NGUYỄN THỊ VÂN HÀ 97 ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Nghiên cứu khả phân hủy Cyanide vỏ sắn thải từ nhà máy tinh bột vi sinh vật b Quy trình phân tích Cyanide nước – nước thải Sử dụng máy HACH DR890 Test kit: Cyanide Reagent Set (100 Tests), 10 mL code 24302-00 SVTH: VÕ DUY MINH MSSV: 0450020442 GVHD: PGS TS NGUYỄN THỊ VÂN HÀ 98 ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Nghiên cứu khả phân hủy Cyanide vỏ sắn thải từ nhà máy tinh bột vi sinh vật c Quy trình phân tích Cyanide mẫu rắn AOAC Official Method 915.03 Hydrocyanic Acid in Beans Titrimetric Methods SVTH: VÕ DUY MINH MSSV: 0450020442 GVHD: PGS TS NGUYỄN THỊ VÂN HÀ 99 ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Nghiên cứu khả phân hủy Cyanide vỏ sắn thải từ nhà máy tinh bột vi sinh vật Bước Sử dụng 10 - 20g mẫu vào ống Kjeldahl 800 mL, châm thêm 200 ml nước cất vào để yên vòng - 4h Bước Tiến hành chưng cất (khơng châm thêm cả), chuẩn bị dung dịch hấp thụ NaOH (0.5g khan 20ml nước cất), tiến hành thu khoảng 150 - 160 ml dd chưng cất Bước Định mức dung dịch chưng cất lên 250ml Rút 100 ml mẫu thêm ml 6M NH4OH 2mL 5% KI Bước Tiến hành chuẩn độ dd AgNO3 0.02M Điểm kết thúc điểm đổi màu có màu tối Cơng thức tính tốn nồng độ quy đổi mL 0.02M AgNO3 sử dụng = 1.08 mg HCN SVTH: VÕ DUY MINH MSSV: 0450020442 GVHD: PGS TS NGUYỄN THỊ VÂN HÀ 100 ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Nghiên cứu khả phân hủy Cyanide vỏ sắn thải từ nhà máy tinh bột vi sinh vật PHỤ LỤC 5: KẾT QUẢ ĐỊNH DANH Hình Kết định danh chủng Penicillium Simplicissimum SVTH: VÕ DUY MINH MSSV: 0450020442 GVHD: PGS TS NGUYỄN THỊ VÂN HÀ 101 ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Nghiên cứu khả phân hủy Cyanide vỏ sắn thải từ nhà máy tinh bột vi sinh vật Hình Kết định danh chủng Aspergillus fumigatus SVTH: VÕ DUY MINH MSSV: 0450020442 GVHD: PGS TS NGUYỄN THỊ VÂN HÀ 102 ... NGHIỆP Nghiên cứu khả phân hủy Cyanide vỏ sắn thải từ nhà máy tinh bột vi sinh vật CHƯƠNG XỬ LÝ CHẤT THẢI RẮN TRONG NGÀNH SẢN XUẤT TINH BỘT SẮN 1.1 QUY TRÌNH SẢN XUẤT TINH BỘT SẮN Vi t Nam nước xuất. .. Nghiên cứu khả phân hủy Cyanide vỏ sắn thải từ nhà máy tinh bột vi sinh vật 1.1 QUY TRÌNH SẢN XUẤT TINH BỘT SẮN 18 1.2 CHẤT THẢI RẮN TRONG SẢN XUẤT TINH BỘT SẮN 20 1.2.1 Nguồn phát sinh. .. ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Nghiên cứu khả phân hủy Cyanide vỏ sắn thải từ nhà máy tinh bột vi sinh vật 1.4 GIỚI THIỆU VỀ NHÀ MÁY SẢN XUẤT TINH BỘT MỲ HÙNG DUY - Nhà máy sản xuất tinh bột mỳ Hùng Duy thuộc