TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM HÀ NỘI KHOA SINH - KTNN ====== PHÙNG THỊ NHƯ QUỲNH NGHIÊN CỨU SO SÁNH KHẢ NĂNG GIẢI PHÓNG THUỐC DICLOFENAC CỦA MÀNG CELLULOSE VI KHUẨN LÊN MEN TỪ MỘT SỐ MƠI TRƯỜNG KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Chuyên ngành: Sinh lý học người động vật Người hướng dẫn khoa học: ThS Phạm Thị Kim Dung HÀ NỘI - 2018 Trần Thị Hoài Giang Page Lời cảm ơn! Trong suốt trình hồn thành khóa luận với đề tài: “ Nghiên cứu so sánh khả giải phóng thuốc Diclofenac màng Cellulose vi khuẩn lên men từ số môi trường”, xin bày tỏ lời cảm ơn chân thành tới: Trước hết xin gửi đến tới ThS, Phạm Thị Kim Dung - Người hướng dẫn, quan tậm, giúp đỡ tơi suốt q trình hồn thành khóa luận Cô người định hướng tận tình bảo, giúp đỡ tơi suốt q trình học tập, nghiên cứu khoa học hoàn thiện luận văn tốt nghiệp Đồng thời, qua tơi xin gửi lời cảm ơn đến Ban Giám hiệu Trường ĐHSP Hà Nội 2, thầy giáo, cô giáo làm việc Viện Nghiên cứu khoa học Ứng dụng- Trường Đại học Sư Phạm Hà Nội 2, thầy cô bạn sinh viên học tập làm việc Bộ môn Sinh lý người động vật, khoa Sinh- KTNN- Trường Đại học Sư Phạm Hà Nội 2, người truyền đạt kiến thức tạo điều kiện thuận lợi giúp đỡ suốt q trình hồn thành khố luận tốt nghiệp Cuối cùng, tơi xin gửi lời cảm ơn tới gia đình bạn bè động viên chỗ dựa vững cho trình học tập nghiên cứu khoa học Tơi xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày tháng năm 2018 Sinh viên Phùng Thị Như Quỳnh LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan viết khóa luận thật Đề tài nghiên cứu không chép tài liệu có sẵn khơng trùng lặp với đề tài khác Các kết nghiên cứu, số liệu trình bày luận văn tất nghiên cứu,thu thập từ thực nghiệm, qua xử lý thống kê, thực tiễn đảm bảo tính trung thực chưa cơng bố cơng trình khoa học, tạp chí chun ngành hội thảo khoa học, sách chuyên khảo,… khác Trong tài liệu tơi có sử dụng số tài liệu số tác giả, xin phép tác giả để bổ sung cho khóa luận Nếu sai tơi hồn tồn chịu trách nhiệm Hà Nội, ngày tháng năm 2018 Sinh viên Phùng Thị Như Quỳnh DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT STT Từ viết tắt Từ đầy đủ A xylinum Acetobacter xylinum CVK Cellulose vi khuẩn ĐHSP Đại học Sư phạm MT1 Môi trường MT2 Môi trường MT3 Môi trường OD Optical density UV – vis Ultraviolet visible Nxb Nhà xuất 10 Rpm Tốc độ quay 100 vòng/ phút 11 Cs Cộng 12 H Giờ DANH MỤC BẢNG BIỂU VÀ SƠ ĐỒ Bảng 1.1 Thành phần dinh dưỡng môi trường chuẩn Bảng 1.2 Thành phần dinh dưỡng nước vo gạo Bảng 1.3 Thành phần nước dừa già Bảng 1.4 Các ứng dụng CVK 10 Bảng 2.1 Thành phần môi trường lên men tạo màng CVK 19 Bảng 2.2 Giá trị OD dung dịch diclofenac nồng độ ( mg/ml) khác nhau(n=3) bước sóng 276 nm 23 Bảng 2.3 Mật độ quang (OD) dung dịch Diclofenac nồng độ(mg/ml) khác (n=3) bước sóng 278nm 24 Bảng 2.4 Mật độ quang (OD) dung dịch Diclofenac nồng độ(mg/ml) khác (n=3) bước sóng 281nm 25 Bảng 3.1 Mật độ quang tiến hành giải phóng thuốc Diclofenac từ màng chuẩn chưa ép thời điểm lấy mẫu với môi trường pH khác nhau( n =3) 34 Bảng 3.2 Mật độ quang tiến hành giải phóng thuốc Diclofenac từ màng chuẩn ép 50% thời điểm lấy mẫu với môi trường pH khác nhau( n =3) 36 Bảng 3.3 Tỉ lệ giải phóng thuốc màng chưa ép mơi trường pH khác khoảng thời gian khác (n = 3) 37 Bảng 3.4 Tỉ lệ giải phóng thuốc màng ép 50% môi trường pH khác khoảng thời gian khác (n = 3) 38 Bảng 3.3 Tỉ lệ thuốc Diclofenac giải phóng từ mơi trường nước vo gạo khơng ép thời điểm lấy mẫu ( n = 40 Bảng 3.4 Tỉ lệ thuốc Diclofenac giải phóng từ mơi trường nước vo gạo ép 50% thời điểm lấy mẫu ( n =3) 41 Bảng 3.5 Tỉ lệ thuốc Diclofenac giải phóng từ môi trường nước dừa già không ép thời điểm lấy mẫu ( n =3) 43 Bảng 3.6 Tỉ lệ thuốc Diclofenac giải phóng từ mơi trường nước vo gạo ép 50% thời điểm lấy mẫu ( n =3) 44 Bảng 3.7 Tỷ lệ giải phóng thuốc màng CVK độ dày khác không ép 24 pH = 6.8 46 Bảng 3.8 Tỷ lệ giải phóng thuốc màng CVK độ dày khác ép 50% 24 pH = 6.8 47 DANH MỤC HÌNH VẼ Hình 2.1 Cơng thức cấu tạo Diclotenac 12 Hình 2.1 Sơ đồ quy trình tinh chế CVK 21 Hình 2.3 Phương trình đường chuẩn Diclofenac bước sóng 276nm 23 Hình 2.4 Phương trình đường chuẩn Diclofenac bước sóng 278 nm 24 Hình 2.5 Phương trình đường chuẩn Diclofenac bước sóng 281 25 Hình 3.1 Màng CVK nuôi cấy môi trường khác 32 Hình 3.2 Màng CVK thu sau ni cấy 33 Hình 3.3 Mẫu rút để đo quang phổ lúc 34 Hình 3.9 Biểu đồ biếu diễn tỉ lệ giải phóng thuốc Diclofenac màng chưa ép pH thời gian khác 45 Hình 3.10 Biểu đồ biếu diễn tỉ lệ giải phóng thuốc Diclofenac màng ép 50% pH thời gian khác 45 Hình 3.11 Tỷ lệ giải phóng thuốc màng CVK độ dày khác không ép 24 pH = 6.8 47 Hình 3.12 Tỷ lệ giải phóng thuốc màng CVK độ dày khác ép 50% 24 pH = 6.8 48 MỤC LỤC MỞ ĐẦU 1.Lí chọn đề tài Mục đích nghiên cứu Nghiên cứu so sánh khả giải phóng thuốc Diclofenac từ màng CVK nạp thuốc số môi trường pH khác Đối tượng phạm vi nghiên cứu Nhiệm vụ nghiên cứu Ý nghĩa khoa học ý nghĩa thực tiễn NỘI DUNG CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tổng quan CVK 1.1.1 Vị trí phân loại A xylinum 1.1.2 Đặc điểm A Xylinum 1.1.3 Môi trường nuôi cấy A xylinum 1.1.4 Đặc điểm cấu trúc màng CVK tạo A xylinum 1.1.5 Tính chất độc đáo màng CVK 1.1.6 Các phương pháp sản xuất màng CVK từ A xylinum 10 1.1.7 Ứng dụng màng CVK 10 1.2 Giới thiệu thuốc Diclofenac 11 1.2.1 Cơng thức hóa học 11 1.2.2 Dược động học chế tác dụng 12 1.2.3 Công dụng thuốc 13 1.2.4.Tác dụng không mong muốn thuốc 13 1.3.Tình hình nghiên cứu giới Việt Nam 14 1.3.1 Tình hình nghiên cứu thuốc 14 1.3.1.1 Trên giới 14 1.3.1.2 Ở Việt Nam 15 1.3.2 Tình hình nghiên cứu màng CVK 15 1.3.2.1 Trên giới 15 1.3.2.2 Ở Việt Nam 16 CHƯƠNG VẬT LIỆU – PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16 2.1 Vật liệu nghiên cứu 16 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 17 2.1.2 Giống vi khuẩn 17 2.1.3 Nguyên liệu hóa chất 17 2.1.4 Thiết bị dụng cụ 17 2.1.4.1 Thiết bị 17 2.1.4.2 Dụng cụ 18 2.2 Phương pháp nghiên cứu 18 2.2.1 Chuẩn bị màng CVK 18 2.2.1.1 Lên men thu màng CVK thô 18 2.2.1.2 Phương pháp xử lý màng CVK trước hấp thụ thuốc 20 2.2.1.3 Đánh giá độ tinh khiết màng 21 2.2.2 Phương pháp xây dựng đường chuẩn 22 2.2.3 Phương pháp xác định khối lượng CVK tạo thành 26 2.2.4 Phương pháp xác định lượng thuốc hấp thụ vào màng CVK 26 2.2.5 Phương pháp pha môi trường đệm PBS 27 2.2.6 Phương pháp xác định lượng thuốc giải phóng thơng qua hệ thống thiết kế 27 2.2.7 Phương pháp phân tích động lực học giải phóng diclofenac 29 2.2.8 Phương pháp xử lí thống kê 29 2.3 Địa điểm nghiên cứu 30 2.4 Cách bố trí nghiệm 30 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 31 3.1 Kết tạo màng xử lý màng CVK A Xylinum từ số môi trường khác 31 3.2 Màng CVK thu sau nuôi cấy 32 3.4.1 Xác định lượng thuốc diclofenac giải phòng từ màng mơi trường chuẩn 34 3.4.2 Xác định lượng thuốc diclofenac giải phòng từ màng mơi trường nước vo gạo 39 3.4.3 Xác định lượng thuốc diclofenac giải phòng từ màng mơi trường nước dừa già 42 3.5 So sánh tỉ lệ giải phóng thuốc màng CVK độ dày khác 24 pH=2 46 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 50 TÀI LIỆU THAM KHẢO 51 MỞ ĐẦU 1.Lí chọn đề tài Diclofenace chất không steroid, thuốc khám phá cách tiếp cận phương pháp nghiên cứu thuốc hợp lí Tác dụng chủ yếu diclofenac hạ sốt tác dụng chống viêm, giảm đau, ức chế mạnh hoạt tính cyclogenase, làm giảm đáng kể tạo thành prostaglandin, prostacyclin thromboxan chất trung gian q trình viêm Diclofenac điều hòa đường lipoxygenase kết tụ tiểu cầu.[1] Tuy nhiên q trình dùng thuốc, người bệnh gặp triệu chứng bất thường thuốc gây nên như: tiêu chảy, đau đầu, chóng mặt, ngủ gà, lú lẫn, trầm cảm, kích động hay chứng to vú đàn ông, bất lực đàn ông, tăng men gan Viêm gan mạn tính, vàng da, rối loạn chức gan, viêm tụy xảy Các phản ứng khỏi ngừng thuốc Đây tác dụng phụ thuốc, triệu chứng gặp liều điều trị Ngoài ra, thuốc gây tương tác với nhiều thuốc khác Cellulose vi khuẩn (CVK) sản phẩm loài vi khuẩn, đặc biệt chủng Acetobacter xylinum( A xylium) Màng sinh học (CVK) có cấu trúc đặc tính giống với cellulose thực vật (gồm phân tử glucose liên kết với liên kết β-1,4 glucozit) cellulose vi khuẩn khác với cellulose thực vật chỗ: không chứa hợp chất cao phân tử ligin, hemicellulose, peptin sáp nến chúng có đặc tính vượt trội với độ dẻo dai, bề [4], [15] Màng CVK coi nguồn polymer mới, giải pháp đường tìm nguồn nguyên liệu Trên giới màng cellulose vi khuẩn ứng dụng nhiều lĩnh vực công nghệ khác nhau: dùng làm màng phân tách cho q trình xử lí nước, chất mang đặc biệt cho pin lượng cho tế bào, dùng làm Bảng 3.4 Tỉ lệ giải phóng thuốc màng ép 50% môi trường pH khác khoảng thời gian khác (n = 3) Thời pH gian Độ dày màng 0,5 cm cm 4,5 0,5 cm cm 0,5 cm 6,8 cm 0,5 giờ 1,5 giờ giờ 12 24 3,70 4,10 4,47 5,02 5,48 8,55 10,42 12,42 14,89 4,17 4,72 5,47 6,35 7,16 10,60 12,74 16,58 20,82 3,90 4,20 5,02 5,26 6,99 12,35 14,50 15,32 15,96 4,15 5,15 5,59 7,90 9,86 14,95 17,28 19,42 20,49 4,04 4,84 5,69 7,52 10,21 14,29 15,81 17,20 18,48 4,32 5,52 5,82 8,45 16,99 18,28 19,88 21,09 21,59 Dựa vào kết tính bảng 3.1 bảng 3.2, sử dụng phần mềm Excel 2010 để vẽ đồ thị biểu diễn tỉ lệ thuốc diclofenac giải phóng thời điểm lấy mẫu từ màng chuẩn, tỉ lệ thuốc diclofenac giải phóng màng chuẩn biểu diễn hình 3.3 hình 3.4 Theo số liệu từ bảng 3.5 3.6, ta thấy tỉ lệ giải phóng thuốc tăng dần, theo khảo sát mơi trường đệm pH = 6,8 màng có khả giải phóng thuốc tốt pH = pH = 4,5 Ở pH = tỷ lệ giải phóng thuốc màng CVK dày 0,5cm đạt cực đại 24 giờ, đạt 14,50% màng không ép; 14,89% màng ép 50% 38 màng dày 1cm đạt cực đại 24 giờ, đạt 16,16% màng không ép, 20,82% màng ép 50% Vậy pH = màng CVK 1cm có khả giải phóng thuốc tốt màng 0,5cm, màng chưa ép có tỉ lệ giải phóng cao Ở pH = 6,8 tỉ lệ giải phóng thuốc đạt cực đại 24 giờ, màng 0,5cm đạt tỉ lệ 18,06% thấp màng 1cm (21,59%) Tương tự với pH = 4,5 ta thu kết tỉ lệ giải phóng cao 24 màng 0,5cm ép 50% Như vậy, môi trường pH = 2, pH = 4,5 pH = 6,8 màng CVK dày có khả giải phóng thuốc Diclofenac tốt màng CVK mỏng Tại pH = 6,8, tỉ lệ thuốc Diclofenac giải phóng từ màng CVK cao nhất, Do Diclofenac tan tốt môi trường axit (dịch dày), khơng có màng CVK làm hệ thống vận chuyển phân phối thuốc sinh khả dụng thuốc Diclofenac thể 50 – 60% nửa đời thải trừ thuốc 3-6 Tuy nhiên sử dụng màng CVK làm hệ thống vận chuyển phân phối thuốc, thời gian giải phóng kéo dài tới 24 ngồi thể, Như dùng màng CVK làm hệ thống giải phóng thuốc Diclofenac qua đường uống, giúp thuốc giải phóng kéo dài, tăng sinh khả dụng, Giá trị OD (y) trung bình mơi trường pH = 6,8 cao 3.4.2 Xác định lượng thuốc diclofenac giải phòng từ màng mơi trường nước vo gạo 39 Bảng 3.3 Tỉ lệ thuốc diclofenac giải phóng từ mơi trường nước vo gạo khơng ép thời điểm lấy mẫu ( n =3) Thời pH gian Độ dày màng 0,5 cm 4,5 cm 0,5 cm cm 0,5 cm 6,8 cm 0,5 giờ 1,5 giờ 3,52 4,12 4,40 5,49 7,45 9,43 3,54 4,30 5,59 6,60 8,86 11,46 13,33 17,53 18,51 3,62 4,15 5,60 5,26 8,60 12,95 15,88 14,88 15,29 3,90 5,39 7,03 9,16 11,47 14,69 17,28 18,45 19,34 3,90 5,33 6,68 7,43 10,86 13,79 16,32 17,51 20,52 4,13 5,33 6,99 9,87 14,17 17,18 18,27 18,61 21,65 40 giờ 12 24 11,42 14,47 15,81 Bảng 3.4 Tỉ lệ thuốc diclofenac giải phóng từ mơi trường nước vo gạo ép 50% thời điểm lấy mẫu ( n =3) Thời pH gian Độ dày màng 0,5 cm cm 4,5 0,5 cm cm 0,5 cm 0,5 giờ 1,5 giờ giờ 12 24 3,63 4,36 5,47 6,74 8,61 11,82 13,51 16,05 23,07 3,94 5,44 6,76 7,79 11,45 15,04 17,35 19,20 24,25 3,92 5,03 7,25 8,10 11,43 13,17 14,82 16,21 25,23 4,00 5,76 7,44 9,58 13,12 15,86 17,82 22,65 25,23 4,05 5,64 7,09 9,16 12,58 15,65 18,32 23,12 24,33 4,45 6,92 8,98 15,25 17,51 21,27 23,13 23,99 27,92 6,8 cm Dựa vào kết tính bảng 3.3 bảng 3.4, sử dụng phần mềm Excel 2010 để vẽ đồ thị biểu diễn tỉ lệ thuốc diclofenac giải phóng thời điểm lấy mẫu từ màng chuẩn, tỉ lệ thuốc diclofenac giải phóng màng chuẩn biểu diễn hình 3.5 hình 3.6 Ở môi trường đệm pH, giá trị OD (y) trung bình thuốc Diclofenac giải phóng từ màng CVK – Diclofenac tăng dần đến thời điểm định dừng lại khơng tăng với độ dày màng, Ở môi trường pH khác giá trị OD (y) trung bình đạt cực đại thời điểm nhau, 41 Ở pH, giá trị OD (y) trung bình thuốc Diclofenac giải phóng từ màng CVK – Diclofenac đạt cực đại giải phóng tốt thời điểm 24 Giá trị OD (y) trung bình mơi trường cao pH = 6,8 3.4.3 Xác định lượng thuốc diclofenac giải phòng từ màng mơi trường nước dừa già Từ giá trị OD (y) trung bình thuốc Diclofenac tiến hành giải phóng từ màng CVK – Diclofenac, thay vào phương trình (1) (2) (3) tính nồng độ CM tương ứng với khoảng thời gian, Thay giá trị nồng độ Diclofenac vừa tính vào cơng thức (6) ta xác định tỉ lệ giải phóng thuốc Diclofenac màng CVK – Diclofenac độ dày, thời gian môi trường pH khác bảng 3.5 42 Bảng 3.5 Tỉ lệ thuốc diclofenac giải phóng từ mơi trường nước dừa già khơng ép thời điểm lấy mẫu ( n =3) Thời gian pH Độ 0,5 giờ 1,5 giờ giờ 12 24 dày màng 0,5cm 8,23 9,23 10,61 11,72 15,33 18,27 19,97 20,9 21,41 1cm 4,35 5,31 6,43 8,16 15,57 17,47 19,78 20,84 21,03 0,5cm 11,06 12,05 12,78 13,59 18,86 20,72 21,12 21,31 1cm 6,68 7,27 9,23 11,32 18,01 18,15 20,31 21,03 21,36 11,76 13,94 15,76 17,49 19,95 21,04 21,14 21,37 5,92 9,99 13,59 15,36 19,86 19,96 20,28 20,98 21,67 21,6 4,5 6,8 0,5cm 1cm 43 21,8 Bảng 3.6 Tỉ lệ thuốc diclofenac giải phóng từ mơi trường nước vo gạo ép 50% thời điểm lấy mẫu ( n =3) Thời gian pH Độ 0,5 giờ 1,5 giờ giờ 12 24 dày màng 0,5cm 7,7 8,98 10,22 11,6 15,55 18,1 19,76 20,49 21,16 1cm 4,59 5,09 6,15 7,62 8,75 17,17 19,66 19,82 20,88 0,5cm 10,35 10,86 11,54 13,55 18,76 20,35 21,12 21,34 21,43 1cm 5,8 6,76 8,76 10,95 15,9 17,75 19,89 21,02 21,55 0,5cm 11,26 13,71 15,55 17,29 20,18 20,51 20,91 21,16 21,45 1cm 5,36 9,85 13,25 15,24 18,56 19,48 19,94 20,53 20,95 4,5 6,8 44 30 TỈ LỆ GIẢI PHÓNG (%) 25 pH=2 0,5cm 20 pH=2 1cm pH=4,5 0,5cm 15 pH=4,5 1cm pH=6,8 0,5cm 10 pH=6,8 1cm 0.5h 1h 1,5h 2h 4h 6h 8h 12h 24h Hình 3.9 Biểu đồ biếu diễn tỉ lệ giải phóng thuốc Diclofenac màng chưa ép pH thời gian khác 30 TỈ LỆ GIẢI PHÓNG (%) 25 pH=2 0,5cm 20 pH=2 1cm pH=4,5 0,5cm 15 pH=4,5 1cm pH=6,8 0,5cm 10 pH=6,8 1cm 0,5h 1h 1,5h 2h 4h 6h 8h 12h 24h Hình 3.10 Biểu đồ biếu diễn tỉ lệ giải phóng thuốc Diclofenac màng ép 50% pH thời gian khác Nhận xét: Qua bảng 3.1; 3.2 hình 3.7; 3.8 thấy: 45 Ở môi trường đệm pH giá trị OD (y) trung bình thuốc Diclofenac giải phóng từ màng CVK – Diclofenac tăng dần đến thời điểm định dừng lại khơng tăng với độ dày màng Ở môi trường pH khác giá trị OD (y) trung bình đạt cực đại thời điểm Ở pH, giá trị OD (y) trung bình thuốc Diclofenac giải phóng từ màng CVK – Diclofenac đạt cực đại 24 Giá trị OD (y) trung bình mơi trường pH = 6,8 cao 3.5 So sánh tỉ lệ giải phóng thuốc màng CVK độ dày khác 24 pH=2 Tỷ lệ giải phóng thuốc màng CVK độ dày khác thể bảng 3.7 hình 3.9 Bảng 3.7 Tỷ lệ giải phóng thuốc màng CVK độ dày khác không ép 24 pH = 6,8 Thời Giải phóng thuốc màng gian chuẩn(%) (giờ) 0,5cm 1cm 24 18,06 21,32 Giải phòng thuốc màng gạo (%) 0,5cm 1cm 20,52 46 21,65 Giải phòng thuốc màng dừa(%) 0,5cm 1cm 21,8 21,67 30 25 20 0.5cm 15 1ccm 10 Màng chuẩn Màng gạo Màng dừa Hình 3.11 Tỷ lệ giải phóng thuốc màng CVK độ dày khác không ép 24 pH = 6,8 Bảng 3.8 Tỷ lệ giải phóng thuốc màng CVK độ dày khác ép 50% 24 pH = 6,8 Thời gian (giờ) 24 Giải phóng thuốc màng chuẩn(%) 0,5cm 1cm 18,48 21,59 Giải phòng thuốc màng gạo (%) 0,5cm 1cm Giải phòng thuốc màng dừa(%) 0,5cm 1cm 24,33 21,45 47 27,92 20,95 30 25 20 0.5cm 15 1cm 10 Màng chuẩn Màng gạo Màng dừa Hình 3.12 Tỷ lệ giải phóng thuốc màng CVK độ dày khác ép 50% 24 pH = 6,8 Nhận xét: qua bảng 3.7 hình 3.11 nhận thấy tỷ lệ giải phóng thuốc màng 0,5cm nhiều màng 1cm, Cụ thể: pH = 6,8; độ dày màng 0,5cm tỷ lệ giải phóng thuốc màng dừa đạt 21,8% cao so với màng gạo 20,52% cao so với màng chuẩn đạt 18,06% Ở độ dày 1cm tỷ lệ giải phóng thuốc màng dừa 21,67% cao so với màng gạo 21,65% cao so với màng chuẩn 21,32% Như vậy, tỷ lệ giải phóng ba loại màng độ dày khác màng gạo giải phóng thuốc tốt Tỉ lệ giải phóng thuốc loại màng gạo nhiều nhất, Điều chứng tỏ rằng, độ dày màng khác nhau, đặc tính khác khả giải phóng thuốc khác 48 Tóm lại: Qua bảng 3.7, 3.8, ta thấy thuốc Diclofenat giải phóng dung dịch đệm pH = 2, pH = 4,5 pH=6,8 phù hợp với mơ hình Korsmeyer – Peppas Mơ hình Korsmeyer - Peppas mơ hình cung cấp nhìn tồn diện vào loại hình nơi thuốc giải phóng theo chế chủ yếu khuếch tán tỷ lệ với trương nở vật liệu mang thuốc trương vật liệu cao tỷ lệ giải phóng thuốc cao ngược lại Qua bảng 3.7, 3.8, mơ hình vận chuyển khuếch tán qua trung gian giải phóng thuốc Có thể giá trị n nhỏ liên quan đến khuếch tán thuốc hay khuếch tán liên quan đến trương nở màng tính chất bên vật liệu CVK phần độ tan hay nhiều thuốc Việc giải phóng thuốc màng 1cm lớn màng 0,5 cm giải thích trương nở màng CVK môi trường pH khác Qua bảng 3.8, 3.9, cho ta thấy tốc độ giải phóng thuốc Diclofenat qua màng CVK phụ thuộc vào độ dày màng, màng có độ dày cao tốc độ giải phóng chậm ngược lại màng có độ dày mỏng tốc độ giải phóng nhanh Ở mơi trường pH = 6,8 có trương nở nhiều dẫn đến tạo khe hở nhiều hơn, liên kết màng trở nên lỏng lẻo hơn, lượng diclofenac giải phóng qua sợi cellulose nhiều nhanh Màng CVK cấu tạo polime cao phân tử bền nên khơng có ăn mòn xảy q trình giải phóng thuốc 49 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận Từ q trình nghiên cứu, tơi thu kết sau: Màng CVK lên men từ ba loại môi trường (môi trường chuẩn, nước dừa nước gạo) với độ dày 0,5cm 1cm tinh chế đánh giá đạt tiêu chuẩn sử dụng làm vật liệu giải phóng thuốc diclofenac Màng CVK có độ dày 1cm giải phóng tốt nhiều so với màng CVK có độ dày 0,5cm Màng CVK giữ nguyên giải phóng cao màng CVK mang ép Lượng thuốc giải phóng từ loại màng CVK môi trường nuôi cấy khác mơi trường nước vo gạo giải phóng tốt sau môi trường dừa môi trường chuẩn Theo thời gian dù ép hay giữ nguyên màng lượng thuốc giải phóng tăng Kiến nghị Cần tiếp tục khảo sát thêm khả giải phóng thuốc diclofenac màng CVK tạo chủng A, xylinum từ loại môi trường tự nhiên khác như: dịch hoa quả, nước chè xanh, nước mía, nước dứa,… để mở rộng nguồn nguyên liệu Tiếp tục nghiên cứu khả giải phóng thuốc diclofenac màng CVK với số lượng mẫu lớn nhằm cung cấp liệu để phục vụ cho nghiên cứu in vivo 50 TÀI LIỆU THAM KHẢO, Tài liệu tiếng việt, Bộ Y tế (2002), Dược điển Việt Nam III, Nhà xuất Y học Hà Nội, tr 33 - 35, 178 - 179 phụ lục (PL - 75, 76) Đặng Thị Hồng Phân lập, tuyển chọn nghiên cứu số đặc tính Sinh học vi khuẩn Acetobacter xylinum chế tạp màng sinh học (CVK) Luận án thạc sỹ Sinh học Đại học Sư phạm Hà Nội, 2007 Trần Công Khánh - vàng đắng - Tạp chí Dược học - số - 1983, BYT xuất bản, tr Phan Quốc Kinh - Nghiên cứu Alcaloid chiết xuất từ thuốc Việt Nam - ĐH Dược khoa Hà Nội, 1971, tr 10, tr 42 Phạm Thanh Kỳ cộng (1998), “Bài giảng dược liệu”, tập II, Trường đại học Dược Hà Nội Huỳnh Thị Ngọc Lan, Nguyễn Văn Thanh, Nghiên cứu đặc tính màng cellulose vi khuẩn từ Acetobacter xylinum sử dụng làm màng trị bỏng, Tạp chí Dược học số 361/2006, trang 18 – 20 Nguyễn Liêm - Chiết xuất Berberin áp lực nóng - Tạp chí Dượchọc, 1980, Bộ Y tế xuất bản, tr 10 Đỗ Tất Lợi (1999), Những thuốc vị thuốc Việt Nam, Xuất lần thứ VIII, Nhà xuất Y học, tr 195 Nguyễn Đức Lương (2000), Công nghệ Vi sinh vật tập - - 3, Nhà xuất Đại học Quốc gia TP, Hồ Chí Minh 10 Chu Văn Mẫn, Ứng dụng tin học sinh học, Nhà xuất Đại học Quốc gia Hà Nội, 2003 11 Nguyễn Thị Nguyệt, Nghiên cứu vi khuẩn Acetobacter xylinum cho màng Bacterial Cellulose làm mặt nạ dưỡng da, Luận án thạc sỹ sinh học Đại học Sư phạm Hà Nội, 2008 12 Ngô Văn Thu (2011), “Bài giảng dược liệu”, tập I, Trường đại học Dược Hà Nội, 13 Viện dược liệu (2004), “Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam”, tập I, tập II, Nhà xuất khoa học kỹ thuật Tài liệu tiếng anh 14 Brown, E, Bacterial cellulose Themoplastic polymer nanocomposites, Master of sience in chemical engineering, Washington state university, 2007 15 Ondetti, M ,; Rubin, B; Cushman, D, (1977), "Thiết kế chất ức chế đặc hiệu enzym chuyển đổi angiotensin: Loại thuốc chống cao huyết áp hoạt động đường uống", Khoa học , 196 (4288) 16 Nam, Doo H; Lee, Choon S; Ryu, Dewey DY (1984), "Tổng hợp cải tiến captopril", Tạp chí Khoa học Dược , 73 (12) 17, Almeida, I,F,, et al, Màng cellulose vi khuẩn hệ thống phân phối thuốc, 2013 18 Amin MCIM, Ahmad N, et al, (2012), “Bacterial cellulose film coating as drug delivery system: physicochemical, thermal and drug release properties”, Sain Malaysiana, 41 (5), 561 – 19 Trovatti E, et al, (2011), “Biocellulose membranes as supports for dermal release of lidocaine”, Biomacromolecules, 12, 4162 - 4168 20 Trovatti E, et al, (2012), “Bacterial cellulose membranes applied in topical and transdermal delivery of lidocaine hydrochloride and ibuprofen: in vitro diffusion studies”, Int J Pharm, 435 (1), 83 – 87 21.Brown, E, Bacterial cellulose Themoplastic polymer nanocomposites, Master of sience in chemical engineering, Washington state university, 2007 ... số môi trường Nghiên cứu so sánh khả giải phóng thuốc Diclofenac từ màng CVK nạp thuốc số môi trường pH khác Đối tượng phạm vi nghiên cứu - Đối tượng nghiên cứu: So sánh khả giải phóng thuốc diclofenac. .. cứu so sánh khả giải phóng thuốc diclofenac màng cellulose vi khuẩn lên men từ số môi trường Mục đích nghiên cứu - Nghiên cứu quy trình chế tạo màng cellulose từ chủng Acetobacter xylinum từ số. .. diclofenac màng cellulose vi khuẩn lên men từ số môi trường - Vật liệu nghiên cứu: Màng CVK làm từ môi trường nước dừa già, nước vo gạo, môi trường chuẩn,… - Phạm vi nghiên cứu: Nghiên cứu thực