BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ VIỆN SỐT RÉT - KÝ SINH TRÙNG - CÔN TRÙNG TRUNG ƯƠNG -oOo - TRẦN THỊ HUỆ VÂN NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM LÂM SÀNG, CẬN LÂM SÀNG, KẾT QUẢ ĐIỀU TRỊ BỆNH DO Gnathostoma spp, ĐỊNH DANH MẦM BỆNH TRÊN NGƯỜI VÀ VẬT CHỦ TRUNG GIAN TẠI PHÍA NAM VIỆT NAM (2016-2017) LUẬN ÁN TIẾN SỸ Y HỌC HÀ NỘI - NĂM 2019 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ VIỆN SỐT RÉT - KÝ SINH TRÙNG - CÔN TRÙNG TRUNG ƯƠNG -oOo - TRẦN THỊ HUỆ VÂN NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM LÂM SÀNG, CẬN LÂM SÀNG, KẾT QUẢ ĐIỀU TRỊ BỆNH DO Gnathostoma spp, ĐỊNH DANH MẦM BỆNH TRÊN NGƯỜI VÀ VẬT CHỦ TRUNG GIAN TẠI PHÍA NAM VIỆT NAM (2016-2017) LUẬN ÁN TIẾN SỸ Y HỌC Chuyên ngành: Ký sinh trùng y học Mã số: 62.72.01.16 NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: PGS.TS LÊ THỊ XUÂN PGS.TS NGUYỄN THU HƯƠNG HÀ NỘI - NĂM 2019 LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu tơi thực Các số liệu kết luận án hoàn toàn trung thực, chưa cơng bố cơng trình khác Các bước tiến hành đề tài đề cương nghiên cứu, chấp hành quy định y đức tiến hành nghiên cứu Nếu có sai sót tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm Tác giả luận án Trần Thị Huệ Vân LỜI CẢM ƠN Luận án hồn thành với giúp đỡ vơ to lớn quý thầy cô, bạn đồng nghiệp gia đình Với lòng kính trọng biết ơn sâu sắc, xin gửi tới người yêu thương nhất: PGS.TS Lê Thị Xuân, PGS.TS Nguyễn Thu Hương hai giáo viên hướng dẫn khoa học dành nhiều thời gian, tận tình hướng dẫn, truyền đạt kiến thức, giúp đỡ chỉnh sửa luận án động viên q trình học tập hồn thành luận án Xin trân trọng cảm ơn PGS.TS Trần Thanh Dương-Viện trưởng Viện Sốt rét-Ký sinh trùng-Côn trùng Trung ương PGS.TS Nguyễn Văn Chương - Viện trưởng Viện Sốt rét- Ký sinh trùng-Cơn trùng Quy Nhơn khuyến khích, tạo điều kiện cho tham gia nghiên cứu Trân trọng cảm ơn đến GS.TS Lê Bách Quang, PGS.TS Nguyễn Mạnh Hùng, PGS.TS Lê Xuân Hùng, PGS.TS Hoàng Vũ Hùng, PGS.TS Nguyễn Khắc Lực, PGS.TS Lê Trần Anh, PGS.TS Nguyễn Ngọc San, TS Nguyễn Quang Thiều góp ý kiến quý báu qua lần bảo vệ luận án cấp Bộ môn, cấp sở trình học tập Đồng thời, xin gửi lời cảm ơn đến bạn đồng nghiệp khoa Khám bệnh chuyên ngành, Ký sinh trùng, Sinh học phân tử Viện Sốt rét- Ký sinh trùng - Côn trùng Trung ương giúp thu thập số liệu, hoàn thiện luận án Chân thành cảm ơn Ban giám hiệu, Ban Chủ nhiệm Khoa Y, Đại học Y Dược thành phố Hồ Chí Minh tạo điều kiện thuận lợi cho tơi học tập hồn thành khóa học, cảm ơn đồng nghiệp Bộ mơn Vi-ký sinh trùng gánh vác phần trách nhiệm để tơi an tâm học tập cơng tác Kính trân trọng cảm ơn ba mẹ - người mong muốn tiến bộ, cảm ơn chồng nguồn động lực, gánh vác việc gia đình cho tơi n tâm học tập, chun tâm vào nghiên cứu khoa học Cuối cùng, xin cảm ơn đến bệnh nhân chia sẻ thông tin, triệu chứng lâm sàng, kết xét nghiệm tham gia tích cực vào lịch trình nghiên cứu cách đầy đủ để tơi có đầy đủ số liệu hồn chỉnh luận án Tác giả DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT ATDC Ấu trùng di chuyển BCAT Bạch cầu toan BLAST Basic Local Alignment Search Tool (Trung tâm thông tin công nghệ sinh học) CDC Centers for Disease Control and Prevention (Trung tâm kiểm sốt phòng ngừa dịch bệnh) CNCV Công nhân viên chức DNA Deoxyribonucleic acid ELISA Enzyme Linked Immunosorbent Assay (phản ứng hấp thụ miễn dịch liên kết men) ETS External Transcribed Spacer (Vùng ngoại phiên mã) GCPs Good Clinical Practices (Thực hành lâm sàng tốt) ITS-2 Internal Transcribed spacer – mAbs Mono – Antibody (Kháng thể đơn dòng) NTS Non Transeribed Spacer (Vùng khơng phiên mã) OD Optical Density (Mật độ quang) PCR Polymerase Chain Reaction (Phản ứng chuỗi trùng hợp – Phản ứng khuếch đại gen) MỤC LỤC DANH MỤC BẢNG i DANH MỤC HÌNH ii ĐẶT VẤN ĐỀ Chương 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Lịch sử ấu trùng, giun Gnathostoma spp 1.1.1 Lịch sử phát ấu trùng, giun Gnathostoma spp 1.1.2 Lịch sử bệnh Gnathostoma spp người 1.2 Ký sinh trùng Gnathostoma spinigerum 1.2.1 Đặc điểm hình thể Gnathostoma spinigerum 1.2.2 Chu trình phát triển Gnathostoma spinigerum .8 1.3 Đặc điểm dịch tễ học 12 1.3.1 Phân bố giới 12 1.3.2 Phân bố Việt Nam 15 1.4 Bệnh học 18 1.4.1 Sinh bệnh học 18 1.4.2 Triệu chứng lâm sàng 18 1.4.3 Triệu chứng cận lâm sàng 22 1.5 Chẩn đoán bệnh giun đầu gai 27 1.5.1 Chẩn đoán xác định .27 1.5.2 Chẩn đoán phân biệt 27 1.6 Điều trị bệnh giun đầu gai 28 1.6.1 Điều trị nội khoa 28 1.6.2 Điều trị ngoại khoa 30 1.7 Phòng bệnh .30 Chương 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 32 2.1 Mục tiêu 2: Mô tả đặc điểm lâm sàng cận lâm sàng bệnh Gnathostoma spp người phía Nam Việt Nam (2016-2017) Đánh giá kết điều trị bệnh Gnathostoma spp ivermectin điểm nghiên cứu 32 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 32 2.1.2 Địa điểm thời gian nghiên cứu .33 2.1.3 Phương pháp nghiên cứu .33 2.1.4 Nội dung nghiên cứu 35 2.1.5 Các kỹ thuật sử dụng nghiên cứu 36 2.1.6 Các biến số số đánh giá 38 2.1.7 Phương pháp xử lý số liệu 43 2.2 Mục tiêu 3: Xác định loài Gnathostoma spp gây bệnh cho người vật chủ trung gian phương pháp hình thái học sinh học phân tử 44 2.2.1 Đối tượng nghiên cứu 44 2.2.2 Thời gian địa điểm nghiên cứu .44 2.2.3 Phương pháp nghiên cứu .44 2.2.4 Nội dung nghiên cứu 45 2.2.5 Kỹ thuật sử dụng nghiên cứu .46 2.2.6 Các số đánh giá 50 2.2.7 Phương pháp xử lý số liệu 50 2.3 Sai số biện pháp hạn chế sai số 51 2.4 Đạo đức nghiên cứu 51 2.4.1 Sự phê duyệt Hội đồng Khoa học Đạo đức y sinh 51 2.4.2 Cam kết tham gia nghiên cứu thông qua .51 2.4.3 Bảo mật thông tin số liệu 52 2.2.4 Dịch vụ chăm sóc y tế 52 2.4.5 Sự khích lệ động viên đối tượng tham gia hoàn tất theo dõi 52 Chương 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 53 3.1 Mô tả đặc điểm lâm sàng & cận lâm sàng bệnh Gnathostoma spp người phía Nam Việt Nam (2016-2017) 53 3.1.1 Đặc điểm bệnh nhân nghiên cứu 53 3.1.2 Các yếu tố nguy 57 3.1.3 Đặc điểm lâm sàng 57 3.1.4 Đặc điểm cận lâm sàng 61 3.2 Đánh giá kết điều trị bệnh Gnathostoma spp ivermectin điểm nghiên cứu 62 3.2.1 So sánh thay đổi lâm sàng trước (n=112) sau điều trị tháng (n=107) bệnh nhân nghiên cứu 62 3.2.2 So sánh thay đổi cận lâm sàng trước sau điều trị tháng bệnh nhân nghiên cứu 66 3.2.3 So sánh thay đổi lâm sàng trước sau điều trị tháng bệnh nhân nghiên cứu 68 2.2.4 So sánh thay đổi cận lâm sàng trước (n=112) sau điều trị tháng (n=102) bệnh nhân nghiên cứu 71 3.2.5 Đánh giá tác dụng không mong muốn ivermectin 74 3.3 Xác định loài Gnathostoma spp người vật chủ trung gian phương pháp hình thái học & sinh học phân tử 74 3.3.1 Xác định loài Gnathostoma spp vật chủ trung gian .74 3.3.2 Định danh ấu trùng giun Gnathostoma spp hình thái học 76 3.3.3 Định danh ấu trùng giun Gnathostoma spp sinh học phân tử: 78 3.3.4 Kết giải trình tự gen định loài giun đầu gai Gnathostoma spp gen 5.8S rRNA-ITS2 đặc hiệu 80 Chương 4: BÀN LUẬN 83 4.1 Mô tả đặc điểm lâm sàng & cận lâm sàng bệnh Gnathostoma spp người phía Nam Việt Nam (2016-2017) 83 4.1.1 Đặc điểm hành 83 4.1.2 Đặc điểm lâm sàng yếu tố nguy 86 4.1.3 Về triệu chứng cận lâm sàng bệnh nhân mắc Gnathostoma 94 4.2 Đánh giá kết điều trị bệnh Gnathostoma spp ivermectin điểm nghiên cứu 96 4.2.1 Triệu chứng lâm sàng quan sau điều trị 96 4.2.2 Triệu chứng cận lâm sàng sau điều trị .102 4.2.3 Một số tác dụng không mong muốn ivermectin 109 4.3 Xác định loài Gnathostoma spp người vật chủ trung gian phương pháp hình thái học & sinh học phân tử 112 4.3.1 Xác định loài Gnathostoma spp Trên vật chủ trung gian 112 4.3.2 Xác định loài giun đầu gai Gnathostoma spp bệnh nhân 116 KẾT LUẬN 117 KIẾN NGHỊ .119 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC i DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1: Số loài Gnathostoma spp phát .5 Bảng 1.2: So sánh bệnh Gnathostoma bệnh Angiostrongylus 22 Bảng 1.3: Giá trị bạch cầu bạch cầu toan .22 Bảng1.4: Giá trị enzym gan 22 Bảng 2.1: Cỡ mẫu tối thiểu dựa tỷ lệ thất bại lâm sàng ivermectine .34 Bảng 2.2: Các biến số sử dụng nghiên cứu 38 Bảng 2.3: Định nghĩa số, biến số phương pháp thu thập .41 Bảng 2.4: Các số đánh giá kết điều trị 43 Bảng 2.5: Kích thước ấu trùng Gnathostoma spp 47 Bảng 2.6: Số lượng hình dạng gai đầu ấu trùng 47 Bảng 3.1: Phân bố bệnh nhân theo địa nơi (tỉnh/ thành phố) .53 Bảng 3.2: Phân bố bệnh nhân theo tuổi (n = 112) 54 Bảng 3.3: Phân bố bệnh nhân theo tuổi giới tính (n = 112) .55 Bảng 3.4: Phân bố bệnh nhân theo nghề nghiệp (n = 112) 56 Bảng 3.5: Phân bố bệnh nhân theo trình độ học vấn (n = 112) .56 Bảng 3.6: Phân bố bệnh nhân theo dân tộc (n = 112) 56 Bảng 3.7: Phân bố bệnh nhân theo yếu tố nguy (n = 112) 57 Bảng 3.8: Phân bố số ngày biểu bệnh trước nhập viện (n = 112) 57 Bảng 3.9: Lý nhập viện (n = 112) 58 Bảng 3.10: Phân bố triệu chứng lâm sàng (n = 112) 59 Bảng3.11: Triệu chứng da niêm mạc (n=112) 59 Bảng 3.12: Triệu chứng tiêu hóa (n=112) 60 Bảng 3.13: Triệu chứng hô hấp (n = 112) 60 Bảng 3.14: Các triệu chứng thị giác (n = 112) 60 Bảng 3.15: Các triệu chứng thần kinh (n = 112) 61 Bảng Đánh giá tác dụng ngoại ý/ không mong muốn Tác dụng không mong muốn Phản ứng dị ứng Nhức đầu Sốt (đo nách) Mệt mỏi Buồn nôn Nôn Tiêu chảy Tác dụng không mong muốn Niêm mạc, da Đau bụng MỘT SỐ HÌNH ẢNH VỀ TỔN THƯƠNG TRÊN BỆNH NHÂN VÀ ẤU TRÙNG GNATHOSTOMA Ấ Ấ Ấ S T PHỤ LỤC MỘT SỐ HÌNH ẢNH Khám tư vấn bệnh nhân Khám tư vấn bệnh nhân Xử lý, nhập liệu kết Xử lý mẫu Biệt dược ivermectin Định danh hình thái học KHV soi Biên nhận gửi mẫu PCR PHỤ LỤC DANH SÁCH BỆNH NHÂN THAM GIA NGHIÊN CỨU 2016-2017 T T 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 Họ tên Cao Thanh Nguyễn Hoàng Đăng Trần Hữu Hồ Kim Lê Thị Minh Nguyễn Thị Mỹ Lượng Thị Tuyết Võ Thanh Lại Thị Thanh Nguyễn Thị Trương Thị Nguyễn Thị Huỳnh Thị Võ Thị Thu Lê Trọng Nguyễn Văn Lê Anh Hồ Đạo Trương Thị Cù Thị Kim Nguyễn Thị Hồng Lê Thị Hồng Phan Thị Lưu Thị Thu Nguyễn Hữu Trần Thị Lệ Tơn Thọ Đồn Văn Nguyễn Thái Thái Thị Lương Thị Trúc Đào Thanh Tống Thị Kim Nguyễn Thị Thu Đoàn Thị Thanh 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 Võ Thị Hồng Nguyễn Thái Ý Trần Thị Dương Thị Thu Lê Thị Nguyễn Thị Nguyễn Tấn Võ Kim Nguyễn Kim Võ Thị Ngọc Bùi Thị Bạch Nguyễn Thị Ngơ Thị Lê Hồng Ngọc Trần Thị Hồng Trần Thị Trương Văn Lê Thị Phan Thanh Tân Quốc Võ Trí Nguyễn Lý Trương Nguyễn Đinh Thành Trần Thị Nguyễn Thị Ngọc Nguyễn Lê Minh Đặng Thị Trần Thị Mai Đặng Văn Nguyễn Văn Phan Hữu Nguyễn Ngọc Trà Nguyễn Thị Hà Nguyễn Thị Hồ Lê Ái Lê Thị Ngọc Trần Thị Nguyễn Thành Võ Thị Đinh Văn Võ Nam 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 Nguyễn Phạm Uy Hoàng Thị Hà Thị Thu Phạm Thị Kim Trần Thị Kim Phùng Bá Nguyễn Thị Yến Trần Quang Nguyễn Hải Phạm Thị Kim Nguyễn Thị Trần Đình Nguyễn Văn Nguyễn Văn Phạm Thị Nguyễn Văn Cao Thị Lê Thị Nguyễn Thị Diệu Nguyễn Thị Nguyễn Thị Phan Hà Thành Đặng Thị Trần Phạm Vũ Công Lê Văn Hồ Nguyễn Văn Trần Thị Minh Nguyễn Hoài Nguyễn Thị Hà Thị Nguyễn Lê Quang Phạm Thị Thanh Đinh Ngọc Bảo Trần Thị PHỤ LỤC Kích thước số gai ấu trùng bắt từ lươn (n=81) STT 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 Ấu trùng bắt người Kích thước Chiều dài Chiều rộng Hàng gai I Hàng gai II Hàng gai III Hàng gai IV Các triệu chứng lại 21 bệ Bệnh nhân Elisa + + + + + + + + + 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 + + + ... Gnathostoma vật chủ trung gian, thực đề tài ” Nghiên cứu số đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng, kết điều trị bệnh Gnathostoma spp, định danh mầm bệnh người vật chủ trung gian phía Nam Việt Nam (2016. .. tả đặc điểm lâm sàng cận lâm sàng bệnh Gnathostoma spp người phía Nam Việt Nam (2016- 2017) Đánh giá kết điều trị bệnh Gnathostoma spp ivermectin điểm nghiên cứu 32 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu. .. 2017) ” với mục tiêu: Mô tả đặc điểm lâm sàng cận lâm sàng bệnh Gnathostoma spp người phía Nam Việt Nam (2016- 2017) Đánh giá kết điều trị bệnh Gnathostoma spp ivermectin điểm nghiên cứu Xác định