TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI NGUYỄN CÔNG TUẤN NHẬN XÉT KẾT QUẢ CỦA XÉT NGHIỆM GENXPERT MTB/RIF TRONG BỆNH PHẨM GÂY KHẠC ĐỜM Ở BỆNH NHÂN NGHI LAO ĐỀ CƯƠNG LUẬN VĂN CHUYÊN KHOA CẤP II Người hướng dẫn khoa học: TS PHAN THU PHƯƠNG ĐẶT VẤN ĐỀ TỔNG QUAN TÀI LIỆU ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NC DỰ KIẾN KẾT QUẢ DỰ KIẾN BÀN LUẬN VÀ KẾT LUẬN NỘI DUNG ĐẶT VẤN ĐỀ   Bệnh lao có từ lâu NN Gây tử vong toàn giới WHO (2016) mắc lao 10,4 triệu, chết lao 1,3 triệu, tỷ lệ đa kháng thuốc 4,1% lao mới,19% số lao điều trị lại   Việt nam đứng thứ 15 30 nước có số người bệnh lao, lao đa kháng thuốc cao toàn cầu CĐ lao: Ls, xq phổi, soi trực tiếp, nuôi cấy, PCR, mô bệnh ĐẶT VẤN ĐỀ  XN GeneXpert chẩn đốn lao phổi • WHO (2010): GeneXpert bước đột phá chẩn đoán, Tích hợp cơng nghệ (tách, nhân nhận biết gen) • • Phát VK lao, VK lao kháng R, độ nhạy cao, có KQ sau Việt Nam (2011): triển khai GeneXpert ĐẶT VẤN ĐỀ - Mặc dù có GenXpert phương tiện chẩn đốn nhanh độ đặc hiệu cao BN nghi lao khạc đờm tự nhiên, khạc đờm mẫu AFB(-) cần phải lấy bệnh phẩm KT xâm lấn (SPQ, đặt sonde dày…) - KT Gây khạc đờm biện pháp lấy đờm, dịch phế quản cách kích thích gây ho sau khí dung nước muối ưu trương máy khí dung siêu âm ĐẶT VẤN ĐỀ - Kỹ thuật GKĐ có hiệu cao tương đương với NSPQ cao khạc đờm tự nhiên chẩn đoán lao phổi  KT an toàn, dễ thực hiện, giá trị cao, xâm lấn, thực lại nhiều lần, giá thành rẻ Tại Việt Nam kỹ thuật khí dung muối ưu trương máy khí dung siêu âm áp dụng MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU Mô tả số đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng bệnh nhân nghi lao phổi Điều trị Trung tâm Hô hấp Bệnh viện Bạch Mai Nhận xét kết xét nghiệm GeneXpert bệnh phẩm gây khạc đờm bệnh nhân nghi lao phổi Trung tâm hô hấp Bệnh viện Bạch Mai TỔNG QUAN • • • • Lao bệnh truyền nhiễm vi khuẩn Mycobacterium Tuberculosis gây nên Bệnh lao phát từ trước Công nguyên Ấn Độ, Hy Lạp, Ai Cập nước vùng Trung Á Năm 1882 Robert Koch tìm vi khuẩn lao Hiểu biết người bệnh lao rõ Năm 1944, Waksman tìm Streptomycin, thuốc kháng sinh điều trị lao TỔNG QUAN  Chẩn đoán Bệnh nhân nghi lao phổi: - T/C toàn thân H/c nhiễm trùng nhiễm độc mạn tính; sốt nhẹ, sốt kéo dài thường chiều, mồ hôi đêm, mệt mỏi, ăn kém, ngủ sút cân - T/C năng; Ho kéo dài, ho máu, đau ngực, khó thở - T/C thực thể; Nghe phổi ral ẩm, ral nổ, ral rít, ral ngáy phế quản - XQ phổi: thâm nhiễm, nốt, xơ hang - Bằng chứng VSV lao bệnh phẩm: AFB, nuôi cấy MGIT, PCR, Lowenstein, GenXpert - MBH có tổn thương nang lao TỔNG QUAN  Nguyên lý GeneXpert • • • Tách gen: VK bị tiêu hủy sóng siêu âm mạnh, chiết tách ADN VK lao Nhân gen: realtime PCR (độ nhạy kỹ thuật) Xác định đoạn gen: - Đặc hiệu VK lao - Phát kháng Rifampicin: đánh giá dựa primer đặc hiệu probe phân tử ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NC  Tiêu chuẩn loại trừ • • • Dưới 16 tuổi Khơng đồng ý tham gia NC Nghi lao phổi có chống định với kỹ thuật gây khạc đờm khí dung nước muối ưu trương ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NC  Phương pháp NC • • • Nghiên cứu mô tả cắt ngang Nghiên cứu hồi cứu, tiến cứu Lấy mẫu thuận tiện ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NC Các bước tiến hành • BN chẩn đoán theo dõi nghi lao phổi vào viện hỏi bệnh, thăm khám lâm sàng, định xét nghiệm huyết học, sinh hố, chẩn đốn hình ảnh, xét nghiệm AFB đờm, PCR-MTB, nuôi cấy MGIT, GenXpert theo mẫu bệnh án nội dung nghiên cứu theo mẫu thống • Những bệnh nhân khơng khạc đờm tự nhiên, đờm AFB âm tính mẫu làm khí dung siêu âm ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NC KỸ THUẬT GÂY KHẠC ĐỜM Được thực phòng riêng biệt, thống khí, giám sát chặt chẽ nhân viên y tế PHƯƠNG TIỆN CỦA KỸ THUẬT GÂY KHẠC ĐỜM - Dụng cụ thuốc cấp cứu ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NC Các bước tiến hành • Người bệnh phải giải thích nội dung, mục đích cần thiết phải thực thủ thuật tác dụng phụ người bệnh gặp • Bệnh nhân nhịn ăn trước làm thủ thuật • Xúc miệng 200ml nước trước khí dung • Khí dung nang Ventolin 5mg trường hợp có nguy co thắt phế quản • Sau tiếp tục cho vào bầu khí dung 40 ml Natriclorua 5%, cho bệnh nhân khí dung qua đường miệng, phút ngưng khí dung lần, yêu cầu bệnh nhân xúc miệng ho khạc vào hộp chứa bệnh phẩm vô trùng ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NC Các bước tiến hành • Trong khí dung hướng dẫn người bệnh hít sâu hạt khí dung qua đường miệng Hết phút khí dung người bệnh phải hít sâu sau gắng sức ho khạc đờm vào lọ chuẩn bị Sau bệnh nhân lại tiếp tục khí dung phút lấy đủ bệnh phẩm • Người bệnh cần ho, khạc đờm có điều khiển để lấy mẫu đờm sâu ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NC Các bước tiến hành - Nếu qua 15 phút khí dung (3 lần khạc) khơng đủ bệnh phẩm, trường hợp cho bệnh nhân khí dung thêm phút - Ngừng thủ thuật khi: + Bệnh nhân khạc đủ số lượng bệnh phẩm (tối thiểu 2ml) + Có triệu chứng khó thở thở rít - Người bệnh phòng cách ly hết ho - Người bệnh nên đeo trang rời khỏi phòng cách ly - Dụng cụ khử khuẩn sau lần làm khí dung ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NC Các bước tiến hành - Kiểm tra chất lượng mẫu đờm: Mẫu đờm có chất lượng tốt phải - Đờm đặc khạc sâu từ phổi, nứơc bọt phải lấy lại mẫu đờm - Số lượng từ 2ml trở lên - Để mẫu đờm nơi mát (tốt để ngăn mát tủ lạnh) - Chuyển mẫu đờm đến nơi làm xét nghiệm sớm tốt (tốt ngày) - Xét nghiệm GenXpert thực Labo vi sinh Bệnh Viện Phổi Trung Ương Kết thúc thao tác KTV Mẫu tự động lọc rửa để tập trung VK Sóng siêu âm phân hủy VK màng lọc giải loại bỏ yếu tố ức chế phóng ADN Các phân tử ADN hòa trộn với hóa chất Phản ứng chuỗi plymerase phát sản phẩm Dùng pipet lấy 2ml hỗn dịch cho vào hộp test Chăt bỏ nước nổi, bất hoạt VK dd đệm RS tỷ lệ 3:1 Bệnh phẩm đờm thêm nước cất ly tâm 15’ KQ báo hình máy tính ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NC Nội dung nghiên cứu - Đặc điểm chung; tuổi giới, nghề nghiệp, tiền sử tiếp xúc nguồn lây, tiền sử bệnh - Mục tiêu 1: Đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng bệnh nhân nghi lao phổi ; Triệu chứng toàn thân, T/c năng, T/c thực thể, xét nghiêm huyết học, sinh hoá, chẩn đốn hình ảnh, thăm chức năng, Xét nghiệm vi sinh AFB, Mgit, PCR, vi khuẩn lao - Mục tiêu 2: Kết xét nghiệm GenXpert bệnh phẩm gây khạc đờm bệnh nhân nghi lao phổi trung tâm hơ hấp bệnh viện bạch mai + Tính tốn giá trị triệu chứng nhóm nghiên cứu: Độ nhậy (Se), độ đặc hiệu (Sp), trị số dự đốn dương tính (PPV), trị số dự đốn âm tính (NPV) ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NC Thu thập xử lý số liệu • Số liệu thu thập theo mẫu bệnh án thống • Xử lý, phân tích phần mềm SPSS 16.0 • Sự khác biệt có ý nghĩa thống kê với P