TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM BỘ MÔN DƯỢC LÝ Độc lập – Tự – Hạnh phúc KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU ĐỘC TÍNH CẤP VÀ BÁN TRƯỜNG DIỄN CỦA VINATAN TRÊN THỰC NGHIỆM Nơi tiến hành nghiên cứu: Bộ môn Dược lý Trường Đại học Y Hà Nội Thời gian nghiên cứu: 11/2015 Nhóm nghiên cứu: PGS.Ts Nguyễn Trọng Thơng Ts Nguyễn Thị Vân Anh Ths Phạm Thanh Tùng Ths Nguyễn Thanh Hà KTV Nguyễn Kiều Vân KTV Đinh Quang Trường KTV Đàm Đình Tranh KTV Nguyễn Thành Long A ĐỘC TÍNH CẤP 1.1 Nguyên liệu đối tượng nghiên cứu Viên nang Vinatan - Thành phần: + Cao Giảo cổ lam: 350 mg + Bột Polyphenol chè xanh: 150mg + Thành phần khác (talc, magnesi stearat…) vừa đủ viên - Liều người: viên/lần x 2-3 lần/ngày (tương đương 4-6 viên/ngày), uống sau bữa ăn 1.1.1 Nguyên liệu nghiên cứu Lấy 30 viên, bỏ nang, nghiền cối, thêm nước cất thu 45 ml vừa đủ dung dịch đậm đặc, dung dịch đậm đặc cho chuột nhắt trắng uống kim chuyên dụng Dung dịch dùng để nghiên cứu độc tính cấp tính xác định LD50 1.1.2 Đối tượng nghiên cứu Chuột nhắt trắng chủng Swiss, giống, khoẻ mạnh, trọng lượng 18 – 22g Viện Vệ sinh dịch tễ Trung ương cung cấp Chuột ni phòng thí nghiệm Bộ môn Dược lý 5-7 ngày trước nghiên cứu suốt thời gian nghiên cứu thức ăn chuẩn dành riêng cho chuột (do Viện Vệ sinh dịch tễ Trung ương cung cấp), uống nước tự 1.2 Máy móc phục vụ nghiên cứu - Cân điện tử Nhật, độ xác 0,001 gam - Kim đầu tù cho chuột uống - Cốc chia vạch, bơm kim tiêm 1ml 1.3 Phương pháp nghiên cứu Nghiên cứu độc tính cấp thuốc thử viên nang Vinatan theo đường uống chuột nhắt trắng Nghiên cứu độc tính cấp xác định LD 50 thuốc thử viên nang Vinatan chuột nhắt trắng theo đường uống [1], [2], [3], [4] Trước tiến hành thí nghiệm, cho chuột nhịn ăn qua đêm Chuột chia thành lô khác nhau, lô 10 Cho chuột uống thuốc thử viên nang Vinatan với liều tăng dần thể tích để xác định liều thấp gây chết 100% chuột liều cao không gây chết chuột (gây chết 0% chuột) Theo dõi tình trạng chung chuột, trình diễn biến bắt đầu có dấu hiệu nhiễm độc (như nơn, co giật, kích động, tiết…) số lượng chuột chết vòng 72 sau uống thuốc Tất chuột chết mổ để đánh giá tổn thương đại thể Từ xây dựng đồ thị tuyến tính để xác định LD50 thuốc thử Sau tiếp tục theo dõi tình trạng chuột đến hết ngày thứ sau uống viên nang Vinatan 1.4 Xử lý số liệu Các số liệu xử lý thống kê theo thuật toán thống kê T-test Student phần mềm Microsoft Excel Kết nghiên cứu Chuột nhắt trắng uống thuốc thử viên nang Vinatan từ liều thấp đến liều cao Lô chuột uống đến liều 75 ml/kg thể chuột tương đương 0,25 ml/10 g, lần 24 dung dịch đậm đặc Theo dõi khơng có chuột chết, khơng xuất triệu chứng bất thường 72 sau uống thuốc lần suốt ngày Liều 75 ml/kg liều tối đa dùng đường uống để đánh giá độc tính cấp thuốc thử viên nang Vinatan (nồng độ đặc nhất, thể tích uống tối đa, số lần uống tối đa 24 giờ) Bảng 1: Kết nghiên cứu độc tính cấp theo liều Thuốc thử viên nang Vinatan Liều Lô chuột n Liều (ml/kg) Lô 10 30 10,00 Không Lô 10 45 15,00 Không Lô 10 60 20,00 Không Lô 10 75 25,00 Không (g/kg) Dấu hiệu bất thường khác Kết luận: Viên nang Vinatan khơng có biểu độc tính cấp liều 75 ml/kg dung dịch đậm đặc, tương đương 25gam/kg Chưa xác định LD50 chuột nhắt trắng viên nang Vinatan đường uống [1] Viên nang Vinatan với liều gấp 34,72 lần liều tối đa dự định dùng người khơng có độc tính cấp (tính hệ số ngoại suy chuột nhắt 12, tính người lớn trưởng thành nặng 50 kg, tính liều tối đa dự kiến dùng người viên/ngày) Vậy theo Tổ chức Y tế giới, viên nang Vinatan thuốc thử nguồn gốc dược liệu có tính an tồn cao[4] TÀI LIỆU THAM KHẢO Gerhard Vogel H (2008), Drug discovery and evaluation Pharmacological assays, Springer Van den Heuvel, M.J., Clark, D.G., Fielder, R.J., Koundakjian, P.P., Oliver, G.J.A., Pelling, D., Tomlinson, N.J and Walker, A.P (1990) The international validation of a fixed-dose procedure as an alternative to the classical LD50 test Fd Chem Toxicol 28, 469-482 OECD (2001), Guidance Document on the Recognition, Assessment and Use of Clinical Signs as Humane Endpoints for Experimental Animals Used in Safety Evaluation, acute oral toxicity, Environmental Health and Safety Monograph Series on Testing and Assesment No 19 World Health Organization (2000), Working group on the safety and efficacy of herbal medicine, Report of regional office for the western pacific of the World Health Organization B ĐỘC TÍNH BÁN TRƯỜNG DIỄN CHẤT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 1.1 Chất liệu nghiên cứu 1.1.1 Thuốc nghiên cứu: Viên nang Vinatan - Thành phần: + Cao Giảo cổ lam: 350 mg + Bột Polyphenol chè xanh: 150mg + Thành phần khác (tale, magnesi stearat…) vừa đủ viên - Đối tượng dùng + Người có rối loạn lipid máu, cholesterol máu cao + Người béo phì có nguy xơ vữa động mạch, nguy đột quỵ, tai biến mạch máu não + Người mệt mỏi, ăn ngủ kém, tiểu đêm, nhiều người cao tuổi - Liều người: viên/lần x 2-3 lần/ngày (tương đương 4-6 viên/ngày), uống sau bữa ăn 1.1.2 Hóa chất nghiên cứu - Kít định lượng enzym chất chuyển hóa máu: TC, TG, HDL-C, ALT (alanin aminotransferase), AST (aspartat aminotransferase) hãng Hospitex Diagnostics (Italy) hãng DIALAB GmbH (Áo) - Dung dịch xét nghiệm máu ABX Minidil LMG hãng ABX – Diagnostics - Các hóa chất xét nghiệm làm tiêu mô bệnh học 1.1.3 Dụng cụ nghiên cứu: - Máy xét nghiệm sinh hóa bán tự động XC – 55 chemistry analyzer (Trung Quốc) - Máy huyết học Vet abcTM Animal Blood Counter, Pháp - Cân phân tích Nhật 1.2 Động vật thí nghiệm - Chuột cống chủng Wistar, lông trắng, cân nặng 200 ± 20g, Trung tâm cung cấp động vật thí nghiệm Đan Phượng – Hà Tây cung cấp - Chuột nuôi 5-7 ngày trước nghiên cứu suốt thời gian nghiên cứu điều kiện phòng thí nghiệm với đầy đủ thức ăn nước uống Bộ môn Dược lý - Trường Đại học Y Hà Nội 1.3 Phương pháp nghiên cứu Chuột cống trắng chia làm lô, lô 10 - Lô1 (chứng sinh học) (n=10): uống nước cất 1ml/100g/ngày - Lô trị (n=10): uống Vinatan liều 0,36g /kg/ngày (liều có tác dụng tương đương người, tính theo hệ số 6) - Lô trị (n=10): uống Vinatan liều 1,080g/kg/ngày (gấp lần lô trị 1) Chuột uống nước thuốc thử tuần liền, ngày lần vào buổi sáng Các tiêu theo dõi trước trình nghiên cứu: - Tình trạng chung, thể trọng chuột - Đánh giá chức phận tạo máu thông qua số lượng hồng cầu, thể tích trung bình hồng cầu, hàm lượng hemoglobin, hematocrit, số lượng bạch cầu, công thức bạch cầu số lượng tiểu cầu - Đánh giá chức gan thông qua định lượng số chất chuyển hoá máu: bilirubin toàn phần, albumin cholesterol toàn phần - Đánh giá mức độ hủy hoại tế bào gan thông qua định lượng hoạt độ enzym máu: ALT, AST - Đánh giá chức thận thông qua định lượng nồng độ creatinin huyết Các thông số theo dõi kiểm tra vào trước lúc uống thuốc, sau tuần uống thuốc, sau tuần uống thuốc - Mô bệnh học: sau tuần uống thuốc, chuột mổ để quan sát đại thể toàn quan Kiểm tra ngẫu nhiờn cấu trúc vi thể gan, thận 30% số chuột lô Các xét nghiệm vi thể thực Trung tâm Nghiên cứu phát sớm Ung thư (do PGS.TS Lê Đình Roanh đọc kết vi thể) 1.4 Xử lý số liệu Các số liệu thu thập xử lý phương pháp thống kê y sinh học theo t- test - Student test trước sau (Avant-après) Biểu diễn Khác biệt so với lô chứng sinh học (lô 1) ± SD p < 0,05 p < 0,01 * ** p< 0,001 *** KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 2.1.Tình trạng chung Trong thời gian thí nghiệm, chuột lơ hoạt động bình thường, ăn uống tố, nhanh nhẹn, lơng mượt, mắt sáng, phân khô 2.2.Sự thay đổi thể trọng chuột Bảng 2.1.Ảnh hưởng Vinatan đến thể trọng chuột Lô chứng Thời gian Trọng lượng (g) % thay đổi trọng Lô trị Lô trị Trọng % tăng Trọng % thay lượng trọng lượng đổi trọng (g) lượng (g) lượng lượng Trước uống 184,00 ± 189,00 188,00 thuốc Sau tuần 51,52 219,00 ± ± 41,82 208,50 ± 35,84 197,00 uống thuốc 65,74 p trước – sau < 0,05 Sau tuần 208,00 ± uống thuốc p trước – sau 48,49 < 0,05 ↑ 19,17 ↑ 14,38 ± 41,77 > 0,05 207,50 ± 38,75 < 0,05 ↑ 11,25 ↑ 11,34 ± 42,44 > 0,05 201,50 ± 49,44 < 0,05 ↑ 5,06 ↑ 7,15 Kết bảng 2.1 cho thấy: sau tuần tuần uống thuốc thử, trọng lượng chuột lô tăng so với trước nghiên cứu Trọng lượng chuột lơ uống Vinatan tăng so với lơ chứng sinh học, nhiên khác biệt chưa có ý nghĩa thống kê (p > 0,05) Trọng lượng chuột lơ uống Vinatan liều cao tăng lơ uống Vinatan liều thấp, nhiên khác biệt chưa có ý nghĩa thống kê (p > 0,05) 2.3 Đánh giá chức tạo máu Bảng 2.2.Ảnh hưởng Vinatan đến số lượng hồng cầu máu chuột Thời gian Trước uống thuốc Sau tuần uống thuốc p (trước - sau) Sau tuần uống thuốc p (trước - sau) Số lượng hồng cầu ( T/l ) Lô chứng Lô trị Lô trị 7,46 ± 0,82 7,79 ± 0,79 7,30 ± 0,88 7,17 ± 0,72 7,76 ± 0,56 7,13 ± 0,95 > 0,05 > 0,05 > 0,05 7,49 ± 0,63 7,81 ± 0,75 7,31 ± 0,83 > 0,05 > 0,05 > 0,05 Kết bảng 2.2 cho thấy: sau tuần tuần uống Vinatan, số lượng hồng cầu lô trị (uống Vinatan liều 0,36g/kg/ngày) lô trị (uống Vinatan liều 1,080g/kg/ngày) khơng có khác biệt có ý nghĩa so với lô chứng so sánh thời điểm trước sau uống thuốc thử (p > 0,05) Bảng 2.3 Ảnh hưởng Vinatan đến hàm lượng huyết sắc tố máu chuột Hàm lượng huyết sắc tố (g/dl ) Lô chứng Lô trị Lô trị Trước uống thuốc 12,99 ± 0,85 12,97 ± 0,85 13,41 ± 0,33 Sau tuần uống thuốc 12,60 ± 0,74 12,07 ± 1,14 13,16 ± 0,64 p (trước - sau) > 0,05 < 0,05 > 0,05 Sau tuần uống thuốc 12,56 ± 0,77 12,01 ± 0,86 12,53 ± 0,96 p (trước - sau) > 0,05 < 0,05 < 0,05 Kết bảng 2.3 cho thấy: sau tuần tuần uống Vinatan, hàm Thời gian lượng huyết sắc tố lô trị (uống Vinatan liều 0,36g /kg/ngày) lô trị (uống Vinatan liều 1,080g/kg/ngày) có xu hướng giảm so với thời điểm trước uống thuốc thử, đặc biệt sau tuần, mức giảm hàm lượng huyết sắc tố có ý nghĩa thống kê so sánh với thời điểm trước uống thuốc Tuy nhiên khơng có khác biệt so sánh hàm lượng huyết sắc tố lô uống Vinatan với lô chứng sinh học (p > 0,05) Bảng 2.4 Ảnh hưởng Vinatan đến hematocrit máu chuột 10 Thời gian Trước uống thuốc Sau tuần uống thuốc p (trước - sau) Sau tuần uống thuốc p (trước - sau) Hematocrit (%) Lô chứng Lô trị 39,60 ± 4,22 40,37 ± 2,36 37,46 ± 3,66 38,55 ± 2,11 > 0,05 > 0,05 40,07 ± 2,70 40,66 ± 3,21 > 0,05 > 0,05 Lô trị 37,99 ± 2,69 35,68 ± 3,42 > 0,05 38,60 ± 3,13 > 0,05 Bảng 2.5.Ảnh hưởng Vinatan đến thể tích trung bình hồng cầu máu chuột Thời gian Trước uống thuốc Sau tuần uống thuốc p (trước - sau) Sau tuần uống thuốc p (trước - sau) Thể tích trung bình hồng cầu ( fl ) Lô chứng Lô trị Lô trị 53,11 ± 1,68 52,13 ± 4,49 52,39 ± 4,47 51,72 ± 2,01 49,83 ± 3,83 50,64 ± 3,17 > 0,05 > 0,05 > 0,05 53,55 ± 2,01 52,24 ± 3,74 53,05 ± 3,48 > 0,05 > 0,05 > 0,05 11 Bảng 2.6.Ảnh hưởng Vinatan đến số lượng bạch cầu máu chuột Thời gian Trước uống thuốc Sau tuần uống thuốc p (trước-sau) Sau tuần uống thuốc p (trước-sau) Số lượng bạch cầu (G/l) Lô chứng Lô trị Lô trị 8,75 ± 1,50 8,60 ± 1,65 8,56 ± 1,73 10,72 ± 2,28 9,60 ± 1,41 8,84 ± 1,93 > 0,05 > 0,05 > 0,05 10,57 ± 2,63 9,03 ± 1,28 9,46 ± 1,30 > 0,05 > 0,05 > 0,05 Bảng 2.7.Ảnh hưởng Vinatan đến công thức bạch cầu máu chuột Công thức bạch cầu Lô chứng Thời gian Lô trị Lymph Lympho Trung (%) tính (%) Trước uống 66,21 ± 30,30 ± (%) 60,64 ± thuốc Sau tuần 8,26 59,92 ± 8,25 34,30 ± uống thuốc p (trước-sau) Sau tuần 7,97 > 0,05 60,46 ± uống thuốc p (trước-sau) 6,33 > 0,05 Lơ trị Trung Lympho Trung tính (%) (%) tính (%) 35,75 ± 68,78 ± 27,80 ± 10,86 65,24 ± 10,25 30,44 ± 6,21 64,39 ± 5,69 32,06 ± 7,18 > 0,05 31,62 ± 6,25 > 0,05 63,71 ± 5,32 > 0,05 29,91 ± 9,26 > 0,05 58,13 ± 9,49 > 0,05 36,16 ± 5,84 > 0,05 10,42 > 0,05 10,17 > 0,05 11,90 > 0,05 12,60 > 0,05 o 12 Bảng 2.8.Ảnh hưởng Vinatan đến số lượng tiểu cầu máu chuột Thời gian Trước uống thuốc Sau tuần uống thuốc p (trước - sau) Sau tuần uống thuốc p (trước - sau) Số lượng tiểu cầu (G/l) Lô chứng Lô trị Lô trị 364,90 ± 67,06 403,60 ± 126,36 348,40 ± 64,02 377,10 ± 361,10 ± 78,86 410,30 ± 75,99 121,62 > 0,05 > 0,05 > 0,05 463,50 ± 117,29 427,30 ± 75,60 416,20 ± 83,43 > 0,05 > 0,05 > 0,05 Kết bảng 2.4, 2.5, 2.6, 2.7 2.8 cho thấy: sau tuần tuần uống Vinatan, xét nghiệm đánh giá chức tạo máu (hematocrit, thể tích trung bình hồng cầu, số lượng bạch cầu, công thức bạch cầu số lượng tiểu cầu) lô trị (uống Vinatan liều 0,36g /kg/ngày) lơ trị (uống Vinatan liều 1,080g/kg/ngày) khơng có khác biệt có ý nghĩa so với lơ chứng so sánh thời điểm trước sau uống thuốc thử (p > 0,05) 2.4 Đánh giá mức độ hủy hoại tế bào gan Bảng 2.9 Ảnh hưởng Vinatan đến hoạt độ AST (GOT) máu chuột Thời gian Trước uống thuốc Sau tuần uống thuốc p (trước – sau) Sau tuần uống thuốc p (trước – sau) Hoạt độ AST (UI/l) Lô chứng Lô trị Lô trị 103,70 ± 22,50 100,70 ± 17,14 102,60 ± 21,28 115,40 ± 20,24 109,60 ± 24,42 111,90 ± 11,88 > 0,05 > 0,05 > 0,05 90,50 ± 15,68 96,70 ± 21,35 97,30 ± 13,46 > 0,05 > 0,05 > 0,05 13 Bảng 2.10.Ảnh hưởng Vinatan đến hoạt độ ALT (GPT) máu chuột Hoạt độ ALT (UI/l) Lô chứng Lô trị Lô trị 45,40 ± 5,48 50,20 ± 8,42 46,70 ± 10,91 51,20 ± 9,84 50,40 ± 9,14 48,60 ± 7,06 > 0,05 > 0,05 > 0,05 50,30 ± 6,65 49,60 ± 9,45 54,90 ± 11,22 > 0,05 > 0,05 > 0,05 Thời gian Trước uống thuốc Sau tuần uống thuốc p (trước – sau) Sau tuần uống thuốc p (trước – sau) Kết bảng 2.9, 2.10 cho thấy: sau tuần tuần uống Vinatan, xét nghiệm đánh giá mức độ hủy hoại tế bào gan (hoạt độ AST, ALT máu chuột) lô trị (uống Vinatan liều 0,36g /kg/ngày) lô trị (uống Vinatan liều1,080g/kg/ngày) khơng có khác biệt có ý nghĩa so với lơ chứng so sánh hai thời điểm trước sau uống thuốc thử (p>0,05) 2.5 Đánh giá chức gan Bảng 2.11.Ảnh hưởng Vinatan đến nồng độ bilirubin toàn phần máu chuột Thời gian Trước uống thuốc Sau tuần uống thuốc p (trước - sau) Sau tuần uống thuốc p (trước - sau) Bilirubin tồn phần(mmol/l) Lơ chứng Lô trị Lô trị 13,39 ± 0,59 13,34 ± 0,38 13,35 ± 0,47 13,23 ± 0,28 13,00 ± 0,51 13,46 ± 0,40 > 0,05 > 0,05 > 0,05 13,30 ± 0,50 13,39 ± 0,34 13,30 ± 0,50 > 0,05 > 0,05 > 0,05 Bảng 2.12 Ảnh hưởng Vinatan đến nồng độ albumin máu chuột Thời gian Trước uống thuốc Sau tuần uống thuốc Lô chứng 3,89 ± 0,26 3,88 ± 0,33 14 Albumin (g/dl) Lô trị 4,00 ± 0,28 4,09 ± 0,26 Lô trị 3,94 ± 0,28 3,67 ± 0,23 p (trước - sau) Sau tuần uống thuốc p (trước - sau) > 0,05 3,80 ± 0,33 > 0,05 > 0,05 3,80 ± 0,40 > 0,05 > 0,05 3,80 ± 0,33 > 0,05 Bảng 2.13.Ảnh hưởng Vinatan đến nồng độ cholesterol toàn phần máu chuột Thời gian Trước uống thuốc Sau tuần uống thuốc p (trước - sau) Sau tuần uống thuốc p (trước - sau) Cholesterol toàn phần (mmol/l) Lô chứng Lô trị Lô trị 1,44 ± 0,18 1,50 ± 0,21 1,44 ± 0,21 1,66 ± 0,24 1,59 ± 0,18 1,63 ± 0,25 > 0,05 > 0,05 > 0,05 1,40 ± 0,24 1,50 ± 0,18 1,59 ± 0,17 > 0,05 > 0,05 > 0,05 Kết bảng 2.11, 2.12 2.13 cho thấy: sau tuần tuần uống Vinatan, xét nghiệm đánh giá chức gan (nồng độ bilirubin toàn phần, albumin, cholesterol toàn phần) máu chuột lô trị (uống Vinatan liều 0,36g/kg/ngày) lô trị (uống Vinatan liều 1,080g /kg/ngày) khơng có khác biệt có ý nghĩa so với lơ chứng so sánh hai thời điểm trước sau uống thuốc thử (p>0,05) 2.7 Đánh giá chức thận Bảng 2.14 Ảnh hưởng Vinatan đến nồng độ creatinin máu chuột Thời gian Trước uống thuốc Sau tuần uống thuốc p (trước - sau) Sau tuần uống thuốc p (trước - sau) Creatinin (mg/dl) Lô chứng Lô trị Lô trị 1,07 ± 0,07 1,05 ± 0,08 1,05 ± 0,08 1,05 ± 0,10 1,04 ± 0,08 1,04 ± 0,07 > 0,05 > 0,05 > 0,05 1,05 ± 0,07 1,05 ± 0,08 1,05 ± 0,07 > 0,05 > 0,05 > 0,05 15 Kết bảng 2.14 cho thấy: sau tuần tuần uống Vinatan, lô trị (uống Vinatan liều 0,36g /kg/ngày) lô trị (uống Vinatan liều 1,080g /kg/ngày), nồng độ creatinin máu chuột khơng có thay đổi khác biệt có ý nghĩa thống kê so với lô chứng so sánh hai thời điểm trước sau uống thuốc thử (p>0,05) 2.8 Thay đổi mô bệnh học sau tuần uống thuốc Đại thể Trên tất chuột thực nghiệm (cả lô chứng lơ trị), khơng quan sát thấy có thay đổi bệnh lý mặt đại thể quan tim, phổi, gan, lách, tuỵ, thận hệ thống tiêu hố chuột Vi thể - Hình thái vi thể gan + Lơ chứng: hình ảnh tế bào gan thối hóa mức độ nhẹ + Lơ trị (uống Vinatan 0,36g /kg/ngày): hình ảnh tế bào gan thối hóa mức độ nhẹ + Lơ trị (uống Vinatan 1,080g /kg/ngày): hình ảnh tế bào bình thường Ảnh 1: Hình thái vi thể gan chuột lơ chứng (chuột số 157) (HE x 400) Tế bào gan bình thường (HE x 400: Nhuộm Hematoxylin - Eosin, độ phóng đại 400 lần) 16 Ảnh 2: Hình thái vi thể gan chuột lơ Ảnh 3: Hình thái vi thể gan chuột lô trị (chuột số 174) (HE x 400) trị (chuột số 180) (HE x 400) Gan bình thường Tế bào gan bình thường Ảnh 4: Hình thái vi thể gan chuột lơ Ảnh 5: Hình thái vi thể gan chuột lô trị (chuột số 160) (HE x 400) trị (chuột số 162) (HE x 400) Gan bình thường Gan bình thường - Hình thái vi thể thận + Lơ chứng: hình ảnh thận có thối hóa nhẹ tế bào ống lượn gần + Lô trị (uống Vinatan 0,36g/kg/ngày): thận bình thường +Lơ trị (uống Vinatan 1,080g /kg/ngày): thận có thối hóa nhẹ tế bào ống lượn gần 17 Ảnh 6: Hình thái vi thể thận chuột lô chứng (chuột số 157) (HE x 400) Thận bình thường Ảnh 7: Hình thái vi thể thận chuột lơ Ảnh 8: Hình thái vi thể thận chuột lô trị trị (chuột số 174) (HE x 400) (chuột số 180) (HE x 400) Thận bình thường Thận bình thường Ảnh 9: Hình thái vi thể thận chuột Ảnh 10: Hình thái vi thể thận chuột 18 lô trị (chuột số 160) lô trị (chuột số 162) (HE x 400) (HE x 400) Thận bình thường Thận bình thường KẾT LUẬN - Mẫu thuốc thử Vinatan dạng viên nang khơng gây độc tính bán trường diễn chuột cho chuột uống liều 0,36g/kg/ngày (liều có tác dụng tương đương liều dùng người) liều cao gấp lần (1,080g /kg/ngày) tuần liên tục [3], [4] - Tất số theo dõi tình trạng chung, cân nặng, chức tạo máu, chức gan, mức độ hủy hoại tế bào gan, chức thận mô bệnh học gan, thận nằm giới hạn bình thường, khơng có khác biệt rõ rệt so với lơ chứng 19 TÀI LIỆU THAM KHẢO Nguyễn Thế Khánh, Phạm Tử Dương (2001), Xét nghiệm sử dụng lâm sàng, Nhà xuất Y học Vũ Đình Vinh (2001), Hướng dẫn sử dụng xét nghiệm sinh hoá, Nhà xuất Y học, tr 115-287 Gerhard Vogel H (2008), “Chapter H: Analgesic, anti-inflammatory, anti- pyretic activity”, Drug discovery and evaluation Pharmacological assays, Springer World Health Organization (2000), Working group on the safety and efficacy of herbal medicine, Report of regional office for the western pacific of the World Health Organization Hà Nội, ngày 16 tháng 12 năm 2015 Trưởng nhóm nghiên cứu PGS TS Nguyễn Trọng Thơng Trường Đại học Y Hà Nội xác nhận chữ ký PGS TS Nguyễn Trọng Thông Trưởng phòng Tổ chức Cán 20 ... 1ml 1.3 Phương pháp nghiên cứu Nghiên cứu độc tính cấp thuốc thử viên nang Vinatan theo đường uống chuột nhắt trắng Nghiên cứu độc tính cấp xác định LD 50 thuốc thử viên nang Vinatan chuột nhắt... of the World Health Organization B ĐỘC TÍNH BÁN TRƯỜNG DIỄN CHẤT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 1.1 Chất liệu nghiên cứu 1.1.1 Thuốc nghiên cứu: Viên nang Vinatan - Thành phần: + Cao Giảo cổ... đánh giá độc tính cấp thuốc thử viên nang Vinatan (nồng độ đặc nhất, thể tích uống tối đa, số lần uống tối đa 24 giờ) Bảng 1: Kết nghiên cứu độc tính cấp theo liều Thuốc thử viên nang Vinatan