1 ĐẶT VẤN ĐỀ Điếc bẩm sinh tình trạng bệnh lý hoàn toàn khả nghe từ giai đoạn sơ sinh [1], hậu trẻ trở thành điếc câm gây ảnh hưởng nặng nề tới q trình phát triển tâm lý hòa nhập cộng đồng trẻ sau Nếu chẩn đoán phát bệnh can thiệp phục hồi chức nghe nói sớm trẻ nghe, nói, phát triển trẻ bình thường Theo nghiên cứu giới, tỷ lệ điếc bẩm sinh trẻ em từ 0,3% -0,5%, năm có khoảng 400 000 trẻ bị điếc bẩm sinh đời [2] Ở Mỹ, tỉ lệ điếc trẻ em - 3/1 000 trẻ khuyết tật thần kinh sơ sinh phổ biến [1] Ở Úc, 000 trẻ sinh có - trẻ nghe mức độ khác Theo số liệu cơng bố năm 2013 Việt Nam có khoảng triệu trẻ sinh ra, ước tính có khoảng 15 000 trẻ nghe bẩm sinh có khoảng 000 trẻ nghe nặng điếc bẩm sinh [3] Đây tỷ lệ cao, nhu cầu chẩn đốn điều trị phục hồi sức nghe cho trẻ lớn Có hai nhóm nguyên nhân chủ yếu gây điếc bẩm sinh là: di truyền môi trường; đó, nhóm nguyên nhân yếu tố di truyền (do đột biến gen) chiếm 50% [4] Việc chẩn đoán nguyên nhân gây điếc bẩm sinh đột biến gen có vai trò quan trọng tư vấn di truyền phòng biến chứng ưu điểm chẩn đoán sớm thời kỳ bào thai, sơ sinh đặc biệt với gen gây điếc nằm ADN ty thể: trẻ mang đột biến gen bị ảnh hưởng nghiêm trọng tới sức nghe dùng kháng sinh nhóm Aminoglycoside sớm (trước 10 tuổi) Aminoglycoside nhóm kháng sinh quan trọng điều trị nhiễm khuẩn, thuốc có tác dụng mạnh rẻ tiền, kê đơn cách rộng rãi mà khơng có giám sát cần thiết Việt Nam [5] Ngày nay, có nhiều kĩ thuật sinh học phân tử sử dụng để chẩn đoán nguyên nhân điếc di truyền, nhiên hầu hết phương pháp có hiệu thấp tốn thời gian cho việc chẩn đốn đa gen Giải trình tự hệ “tiêu chuẩn vàng” cho việc khảo sát trình tự nucleotide, phương pháp phát đột biến nhanh chóng, xác, tiết kiệm chi phí sức lao động, thơng lượng cao, chẩn đốn đa gen, đa đột biến nhiều bệnh nhân lần thao tác; đặc biệt khả ứng dụng chẩn đoán trước sinh sơ sinh [6], từ có biện pháp can thiệp cho trẻ tiếp cận chương trình giáo dục đặc biệt từ sớm để trẻ điếc bẩm sinh phát triển ngôn ngữ, tư bình thường Tuy nhiên chưa có cơng trình nghiên cứu việc ứng dụng công nghệ giải trình tự gen hệ vào chẩn đốn sớm gen gây bệnh điếc bẩm sinh Việt Nam Vì thế, để tìm hiểu rõ thêm cơng nghệ giải trình tự gen hệ việc ứng dụng vào chẩn đoán sớm gen gây bệnh điếc bẩm sinh nhằm giúp thầy thuốc lâm sàng có sở chẩn đoán, điều trị tư vấn giáo dục sức khỏe cho bệnh nhân, tiến hành nghiên cứu đề tài: “Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, chức nghe gen trẻ điếc bẩm sinh có định cấy điện cực ốc tai” với mục tiêu sau: Mô tả đặc điểm lâm sàng chức nghe trẻ điếc bẩm sinh định cấy điện cực ốc tai Mô tả đặc điểm gen gây điếc bẩm sinh trẻ điếc bẩm sinh định cấy điện cực ốc tai Chương TỔNG QUAN 1.1 Khái niệm tình hình nghiên cứu điếc bẩm sinh 1.1.1 Khái niệm điếc bẩm sinh Để đánh giá mức độ nghe người ta chia mức độ giảm sức nghe theo nhiều nhóm khác Đơn vị đo dB (dexibel) đề cập đến độ lớn hay âm lượng âm Hz (hertz) đề cập đến tần số hay độ cao âm Đánh giá mức độ nghe dựa vào ngưỡng nghe trung bình PTA (Pure Tone Average) ngưỡng nghe trung bình đường khí tần số 500 Hz, 1000 Hz, 2000 Hz tính theo dB Theo hiệp hội thính học tiền đình Hoa Kỳ chia nghe mức độ sau[7]: PTA từ dB đến 15 dB nghe bình thường PTA từ 16 dB đến 25 dB nghe nhẹ - Độ 1: Nghe nhẹ PTA từ 26 dB đến 40 dB, ảnh hưởng tới nghe môi trường tiếng ồn, phải lắng tai nghe, nghe khó với tiếng nói nhỏ, mệt mỏi phải nghe kéo dài - Độ 2: Nghe trung bình: chia nhóm nhỏ: + PTA từ 41 dB đến 55 dB, ảnh hưởng tới q trình phát triển ngơn ngữ, gặp khó khăn nói + PTA từ 56 dB đến 70 dB nghe trung bình nặng, ảnh hưởng nhiều tới q trình phát triển ngơn ngữ, nghe khó nói truyện cường độ nói thơng thường - Độ 3: Nghe nặng PTA từ 71 dB đến 90 dB, ảnh hưởng nhiều tới trình phát triển ngôn ngữ, giọng ngọng nhiều, vốn từ kém, không nghe hội thoại cường độ nói thông thường - Độ 4: Điếc PTA từ 91 dB đến 120 dB khơng có khả học nói dẫn đến câm khơng có trợ giúp máy trợ thính ĐCƠT Điếc tình trạng giảm sức nghe > 90 dB phiếu đo sức nghe đơn âm ASSR Nghe mức độ giảm sức nghe từ 16 - 90 dB Điếc bẩm sinh tình trạng bệnh lý hồn tồn khả nghe từ giai đoạn sơ sinh 1.1.2 Tình hình nghe bẩm sinh giới Năm 2012, WHO công bố số liệu thống kê mức độ phổ biến tình trạng nghe Thống kê dựa 42 nghiên cứu dân số tồn giới Theo đó: - Trên giới có 360 triệu người bị điếc nghe (tương đương với 5,3% dân số) Trong số đó, 328 triệu bệnh nhân (91%) người trưởng thành (183 triệu nam, 145 triệu nữ) 32 triệu bệnh nhân (9%) trẻ em [3] - Tỉ lệ trẻ em có vấn đề thính giác cao Nam Á 2,4% (khoảng 12,3 triệu trẻ), châu Á Thái Bình Dương - 2,0% (khoảng 3,4 triệu trẻ), vùng châu Phi cận Saharan - 1,9% (khoảng 6,8 triệu trẻ) [3] Ở Mỹ, tỉ lệ điếc trẻ em - 3/ 1000 trẻ khuyết tật thần kinh sơ sinh phổ biến Ở Úc, 000 trẻ sinh có - trẻ nghe mức độ khác Theo Giáo sư F Brohm, Cộng hòa Séc, 000 trẻ có 20 - 30 em bị nghe mà chậm nói hay nói ngọng em nghe nặng mà khơng nói Còn theo Giáo sư J C Lafon Pháp, số trẻ bị nghe nhẹ vừa chiếm 3% số trẻ nghe nặng chiếm khoảng 0,2% tổng số trẻ em [2] Trong lịch sử nghiên cứu y học ngành tai mũi họng điếc bẩm sinh lĩnh vực khó ý việc chẩn đốn phát sớm bệnh gặp nhiều trở ngại, chủ yếu dựa phương pháp cận lâm sàng đo thính lực khách quan đại việc điều trị phục hồi sức nghe kịp thời cho trẻ vơ khó khăn, mang lại hiệu tốn Nghiên cứu ốc tai điện tử case cấy điện cực ốc vào năm 1972 đến năm 1982 Holly MDonell, tuổi, đứa trẻ cấy ghép điệc cực ốc tai Nucleus - bước đột phá cho ngành thính học, tạo hội cho người điếc đặc biệt trẻ điếc bẩm sinh có sống gần người bình thường - tạo tiền đề giúp việc chẩn đoán điều trị điếc bẩm sinh ngày phát triển mạnh mẽ - Trước thập niên 70 phương pháp để chẩn đoán nghe phương pháp chủ quan: 1940’s - Đo thính lực đơn âm (Pure tone audiometry); 1950’s - Đo thính lực lời (Speech audiometry) - Đến thập niên 70 nghiệm pháp đo khách quan đời: 1970’s Đo nhĩ lượng đo phản xạ cân bàn đạp (Impedance measurements) - Bước phát triển nhảy vọt chẩn đốn thính học từ thập kỷ 80 kỹ thuật ABR, OAE ASSR đời: 1980’s - Đo điện thính giác thân não (Auditory Brainstem Response - ABR); 1990’s - Đo âm ốc tai (Otoacoustic Emissions - OAEs), gần - Đo đáp ứng trạng thái bền vững thính giác (Auditory Steady State Response - ASSR); khơng giúp cho xác định nhiều bệnh lý khó hệ thống thính giác như, u dây thần kinh thính giác, bệnh lý không đồng thần kinh hệ thống thính giác… đến việc xác định điếc xác định mức độ nghe trẻ sơ sinh trẻ nhỏ Năm 1972, ứng dụng chụp cắt lớp vi tính (CLVT) mở kỷ nguyên ngành chẩn đốn hình ảnh nói chung chun ngành tai mũi họng nói riêng đặc biệt với bệnh lý nghe bẩm sinh để có định điều trị [8] - Năm 1982, với đời cộng hưởng từ cung cấp phương pháp có giá trị đánh giá giải phẫu bệnh lý sọ não, dây thần kinh VIII cấu trúc tai [8] Từ năm 90 kỷ trước với đời CLVT đa dãy đầu dò có lớp cắt 1mm, giúp cho việc tái tạo hình ảnh đa bình diện, thăm khám xương thái dương với nhiều mặt phẳng khác giúp đánh giá cấu trúc ốc tai, tiền đình, ống bán khuyên, chuỗi xương cách chi tiết [9] Chụp cắt lớp vi tính cộng hưởng từ trở thành hai thăm khám bổ xung cho khơng thể thiếu bilan chẩn đốn điếc bẩm sinh đánh giá trước phẫu thuật cấy điện cực ốc tai Chụp CLVT cho phép đánh giá chi tiết cấu trúc tai ngoài, tai giữa, tai nhu mô não - giúp đánh giá cấu trúc giải phẫu bình thường, biến đổi giải phẫu giúp lường trước khó khăn gặp phẫu thuật Chụp cộng hưởng từ cho phép đánh giá chi tiết tai trong, mê đạo màng nhu mô não, phương pháp xác định có hay không diện dây thần kinh ốc tai đưa định lựa chọn loại phẫu thuật cho bệnh nhân Bên cạnh điếc bẩm sinh nguyên nhân di truyền chiếm tới 50% tổng số nguyên nhân gây điếc bẩm sinh giới 20 năm gần việc nghiên cứu chẩn đoán xác định nguyên nhân gây điếc bẩm sinh đột biến gen vấn đề nhiều nước quan tâm: - Green cộng (1999) nghiên cứu miền Trung Tây Hoa Kỳ phát tần số đột biến GJB2 người điếc 42%, đột biến 35delG chiếm 29/41 alen đột biến Tỉ lệ đột biến 35delG trẻ sơ sinh bình thường sàng lọc 2,5% [10] - Satoko Abe cộng (2000) nghiên cứu thấy: bệnh nhân điếc không triệu chứng Nhật Bản đột biến gen GJB2 nguyên nhân phổ biến với đột biến c.235delC thường gặp (73%) [11] - Minárik cộng (2003) nghiên cứu Slovak Caucasian tần số đột biến 35delG bệnh nhân điếc không triệu chứng 50%, đột biến 333334delAA 0,91%, W24X 0% Ở Slovak Gypsy, tỉ lệ bệnh nhân điếc gồm hội chứng mang đột biến W24X 22%, 35delG R127H ,40% 0,92% [12] - Santos (2005) tiến hành nghiên cứu tỷ lệ đột biến gen gây nghe không hội chứng TMC1 dân số Pakistan 4,4% [13] - Yuan cộng (2009) tiến hành nghiên cứu Nội Mông Cổ tỉnh Giang Tô Trung Quốc thấy trẻ em nghe tỷ lệ đột biến gen GJB2 SLC26A4 chiếm tỷ lệ chủ yếu với tần số đột biến gen 18 ,31% 13,73% [14] - Wei (2013) tiến hành nghiên cứu Giang Tơ, Trung Quốc, tìm thấy gen đột biến gen GJB2, tần số đột biến gen GJB2 bệnh nhân điếc 24,92% đột biến c.235delC thường gặp (15 ,5%); c.35delG 0,30%; c.176-191del16 3,19%; c.299delAT 4,71% [15] - Du (2014) tiến hành nghiên cứu tỷ lệ đột biến gen trẻ nghe nặng điếc vùng Tây Nam Trung Quốc 28,43% tỷ lệ đột biến gen GJB2, SLC26A4, gen 12s rRNA ti thể 17,27%; 7,04% 4,12% [16] 1.1.3 Tình hình nghe bẩm sinh Việt Nam Nguyễn Tuyết Xương cộng thực nghiên cứu khám sàng lọc nghe cho trẻ em Hà Nội năm 2011 với 7120 trường hợp Kết sau lần đo OAE, tỷ lệ trẻ có vấn đề nghe 3,5%, trẻ em trai có tỷ lệ 3,7% tỷ lệ trẻ em gái 3,3% [17] Năm 2014, Bệnh viện Phụ sản Hà Nội khám sàng lọc nghe sơ sinh cho 38 331 trẻ, phát 688 ca bị nghe (1,5%) [18]; tỉ lệ thực tế cao có nhiều trường hợp trẻ dần thính lực q trình trưởng thành.Việt Nam có khoảng triệu trẻ sinh năm với tỉ lệ 1,5%, năm có thêm gần 15 000 trẻ nghe bẩm sinh đời có khoảng 000 trẻ nghe nặng điếc bẩm sinh [3] Từ 12/2000 đến 12/2001, trung tâm Tai Mũi Họng Thành phố Hồ Chí Minh Viện Tai Mũi Họng thực điều tra “Bệnh tai nghe kém” tỉnh nước, tỉnh phía Bắc tỉnh phía Nam, kết tỷ lệ nghe khoảng 6% tức 100 người có người nghe Đây tỷ lệ cao.Tuy nhiên tình hình nghiên cứu mối liên quan đột biến gen điếc bẩm sinh Việt Nam hạn chế nhiều nguyên nhân tiến hành vài năm gần với vài nghiên cứu: - Nguyễn Thùy Dương cộng (2014): Xác định đột biến gen GJB2 gia đình bệnh nhân có hai mắc bệnh nghe [19] - Nguyễn Thuỳ Dương cộng (2015) Việt Nam, tỉ lệ đột biến c.235delC gen GJB2 3,95% [20] - Hồ Kim Hoa, Nguyễn Thị Trang cộng (2016): Tỉ lệ đột biến gen nhóm trẻ em nghe 6,8% Trong đột biến gen GJB2 chiếm tỉ lệ cao (5,0%) gen khảo sát: GJB2, GJB3, SLC26A4, MT-RNR1[21] 1.2.Giải phẫu, sinh lý quan thính giác 1.2.1 Đặc điểm giải phẫu ứng dụng [22],[23] Cấu tạo giải phẫu tai bao gồm: - Tai ngoài: gồm vành tai ống tai ngồi - Tai giữa: gồm hòm nhĩ (màng nhĩ chuỗi xương con), tế bào chũm vòi nhĩ Eustache - Tai trong: gồm phần là: + Ốc tai: phụ trách chức nghe + Tiền đình: gồm ống bán khuyên, soan nang cầu nang Tiền đình phụ trách chức thăng Bộ máy thính giác gồm: hệ thống truyền âm tiếp âm 1.2.1.1.Hệ thống truyền âm: tai tai đảm nhiệm Hình 1.1 Giải phẫu tai * Tai ngoài: - Vành tai làm nhiệm vụ thu nhận hướng dẫn âm - Ống tai có nhiệm vụ: khu trú khuyếch đại âm Các đặc tính giải phẫu ống tai ngồi tần số cộng hưởng làm tăng cường xung quanh giải tần số 3500 Hz, điều giải thích khuyết thính học chấn thương âm tập trung quanh tần số * Tai giữa: Hệ thống màng nhĩ, xương phần phụ thuộc làm nhiệm vụ truyền dẫn âm biến đổi lượng để bù trừ vào chỗ hao hụt phần sau Chuyển động chuỗi xương thay đổi tùy theo cường độ âm tới 1.2.1.2 Hệ thống tiếp âm: ốc tai đường thần kinh thính giác đảm nhiệm Tai nằm tồn xương đá, hòm nhĩ ống tai trong, gồm phần: Mê nhĩ xương: Là khối xương rỗng có cấu trúc phức tạp, bị vỡ khơng hàn lại được, gồm phần: 10 - Tiền đình xương: hốc rỗng hình xoăn thẳng đứng với trục xương đá gồm mặt, chứa mê nhĩ màng gồm soan nang cầu nang - Ống bán khuyên xương: gồm ống bán khuyên trên, ống bán khuyên sau ống bán khuyên Ống bán khuyên xương chứa mê nhĩ màng gồm ống bán khuyên màng tương ứng - Ốc tai xương: giống vỏ ốc sên phía trước tiền đình, xoắn vòng rưỡi, có vòng xoắn lồi vào thành hòm nhĩ tạo thành ụ nhơ Có cửa sổ tròn với màng ngăn cách vịn nhĩ - hòm tai, có cửa sổ bầu dục chỗ lắp đế xương bàn đạp giúp rung động chuỗi xương từ tai truyền vào tai 1: Ống bán khuyên 2: Ống chung ống bán khuyên ống bán khuyên sau 3: Ốc tai xương 4: Cửa sổ tròn 5: Cửa sổ bầu dục Hình 1.2 Mê nhĩ xương Mê nhĩ màng: nằm mê nhĩ xương Thành mê nhĩ màng gồm lớp: lớp tổ chức liên kết, lớp tổ chức biểu mơ Mê nhĩ màng có phần: - Tiền đình màng: gồm soan nang cầu nang - Ống bán khuyên màng - Ốc tai màng: phụ trách chức nghe Phụ trách chức thăng N 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 Gen MT-RNR1 MT-CO1 MT-TL1 MT-TS1 Loại đột biến c.497A>G c.421A>G m.1555A>G m.1494C>T m.827A>G m.961delTinsC m.7444G>A m.3243A>G m.7445A>G m.7505T>C N 82 83 84 85 86 87 88 89 90 Gen MT-TH DSPP GPR98 Loại đột biến m.7511T>C m.12201T>C c.52G>T c.10088_10091 delTAAG IVS8+4A>G c.150delT TMC1 c.1334G>A c.625G>A MYO7A c.731G>C DFNA5 N 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 Gen Loại đột biến TECTA c.4525T>G DIABLO c.377C>T c.1535T>C COCH c.1625G>A c.8183G>A MYO15A c.8767C>T c.193G>A c.259A>G PRPS1 c.869T>C c.916G>A PHỤ LỤC BỆNH ÁN NGHIÊN CỨU I HÀNH CHÍNH Họ tên:……………………………………………………………… Ngày sinh:……………………………….Tuổi:……… Giới:………… Địa chỉ:………………………………………………………………… Địa liên lạc: …………………………… Số điện thoại:…………… Ngày nhập viện: ……………………………Số hồ sơ bệnh án:……… II TIỀN SỬ Tiền sử mẹ mang thai: - Trong tháng đầu thai kỳ mẹ có bị sốt mắc bệnh virus không? Rubella HSV CMV HIV Khác: ……………………………………………… Khơng biết Khơng có - Các đặc điểm khác trình mang thai người mẹ: ……… ……………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………… …Tiền sử bệnh nhân: - Tiền sử lúc sinh: Kiểu sinh Đẻ thường Đẻ mổ Số tháng thai kỳ Đủ tháng Thiếu tháng* Cân nặng (kg) * Nếu trẻ đẻ thiếu tháng ghi rõ số tuần tuổi trẻ sinh - Tiền sử trình phát triển có bị bệnh khác(Tiền sử chấn thương vùng đầu, viêm não màng não, sởi, quai bị, Rubella, thủy đậu)…… - Tiền sử sử dụng thuốc kháng sinh Aminoglycoside (Gentamycin, Kanamycin, Streptomycin, Neomycin, Tobramycin ) từ nhỏ khơng? Có Khơng Khơng biết - Ngồi khiếm thính trẻ có gặp phải vấn đề sức khỏe khác khơng? Khơng Có.Nêurõ:…………………………………………………………… ………………………………………………………………………………… Thời gian đeo máy trợ thính:…………………………………………… Tiền sử gia đình: Trong gia đình đời (bên nội bên ngoại) có bị khiếm thính bẩm sinh khơng? Khơng Có Ghi rõ quan hệ với bệnh nhân:……………………………… ………………………………………………………………………………… III BỆNH SỬ Lý nhập viện: Các triệu chứng xảy cách nhập viện: 10.Triệu chứng năng: 11.Thời gian đeo máy trợ thính: IV LÂM SÀNG – CẬN LÂM SÀNG 12.Kết nội soi Tai mũi họng: 13.Test Denver : Denver Kết Bình thường V CẬN LÂM SÀNG: Xét nghiệm thính học: 14 Phản xạ gân bàn đạp 15.Nhĩ lượng đồ 16 OAE 17 ABR: Bất thường (ghi chú) Kết nhĩ lượng, OAE, ABR, ASSR Nhĩ lượng Phải Trái OAE Tổng Pass Tổng Refer ABR Có Khơng có sóng V Tổng sóng V 18 ASSR 500Hz Tai phải ASSR Tai trái ASSR 1000Hz 2000Hz 4000Hz 500Hz 1000Hz 2000Hz 4000Hz 19.CT scan: Hình ảnh CT scan Tình trạng xương chũm Vị trí tĩnh mạch bên Vị trí dây VII Các bất thường khác P T 20.MRI : 21.Xét nghiệm tiền phẫu: cơng thức máu, đơng máu tồn bộ, sinh hóa máu, Xquang tim phổi, điện tim 22 Kết xét nghiệm gen: XN gen Kết Kết mẹ Kết bố Bình thường Gen đột biến Tên đột biến BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NễI PHAM V HNG HANH NGHIÊN CứU ĐặC ĐIểM LÂM SàNG, CHứC NĂNG NGHE Và GEN TRẻ ĐIếC BẩM SINH Cã CHØ CÊY §IƯN CùC èC TAI Chun ngành: Tai Mũi Họng Mã số: 60720155 LUẬN VĂN THẠC SỸ Y HỌC Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS CAO MINH THÀNH TS NGUYỄN THỊ TRANG HÀ NỘI - 2017 LỜI CẢM ƠN Trước tiên, xin trân trọng cảm ơn q Thầy, Cơ hội đồng đóng góp cho tơi nhiều ý kiến q báu để cơng trình nghiên cứu tơi hồn thiện Tơi xin bày tỏ lòng kính trọng biết ơn sâu sắc tới PGS.TS Cao Minh Thành TS Nguyễn Thị Trang Hai Thầy Cơ tận tình hướng dẫn tơi thực đề tài suốt trình học tập năm vừa qua, hai Thầy Cơ giúp đỡ giải nhiều vướng mắc tạo điều kiện thuận lợi để giúp tơi hồn thành luận văn Tôi xin chân thành cảm ơn toàn thể bác sỹ, điều dưỡng, khoa Tai Mũi Họng bệnh viện trường Đại học Y Hà Nội, Bộ môn Y Sinh học - Di truyền trường Đại học Y Hà Nội giúp đỡ tơi hồn thành luận văn Tôi xin bày tỏ lời cảm ơn chân thành tới: - Bộ môn Tai Mũi Họng, Đảng Uỷ - Ban giám hiệu Trường Đại Học Y Hà Nội tạo điều kiện cho tơi học tập, hồn thành khóa học - Đảng ủy, ban giám đốc Bệnh Viện trường Đại học Y Hà Nội tạo điều kiện thuận lợi cho công tác, học tập, thực nghiên cứu hoàn thành luận văn - Khoa Tai Mũi họng, Đảng ủy, ban giám đốc Bệnh viện Đa khoa tỉnh Thái Bình tạo điều kiện giúp đỡ tơi hồn thành khóa học - Những bệnh nhân đồng ý tham gia nghiên cứu giúp tơi hồn thành luận văn Tơi xin chân thành cảm ơn đồng nghiệp, bạn bè động viên giúp đỡ tơi q trình học tập Cuối tơi xin biết ơn gia đình ln động viên giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi giúp tơi hồn thành khóa học Hà Nội, ngày 17 tháng 10 năm 2017 Tác giả luận văn Phạm Vũ Hồng Hạnh LỜI CAM ĐOAN Tôi Phạm Vũ Hồng Hạnh, học viên lớp cao học 24, chuyên ngành Tai Mũi Họng, Trường Đại học Y Hà Nội, xin cam đoan: Đây luận văn thân trực tiếp thực hướng dẫn PGS.TS Cao Minh Thành TS Nguyễn Thị Trang Các số liệu thông tin nghiên cứu hồn tồn xác, trung thực khách quan Cơng trình khơng trùng lặp với nghiên cứu khác công bố Việt Nam Tôi xin hoàn toàn chịu trách nhiệm trước pháp luật cam kết Hà Nội, ngày 17 tháng 10 năm 2017 Người viết cam đoan Phạm Vũ Hồng Hạnh DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT ABR ADN ARN ASSR CLVT dNTP ĐCÔT GJB2 GJB3 NGS NST MRI OAE PCR PTA PXGCB Auditory Brainstem Response Acid Deoxiribonucleic Acid Ribonucleic Auditory Steady State Đo điện thính giác thân não ADN ARN Đo đáp ứng trạng thái bền vững Response thính giác Cắt lớp vi tính Các Nucleotid A, T, C, G Điện cực ốc tai Gen GJB2 Gen GJB3 Giải trình tự gen hệ Nhiễm sắc thể Chụp cộng hưởng từ Đo âm ốc tai Phản ứng chuỗi Polymerase deoxynucleoside triphosphate GapJunctionBeta Gap Junction Beta Next-Generation Sequencing Magnetic Resonance Imaging Otoacoustic Emissions Polymerase Chain Reaction (Phản ứng khuếch đại gen) Ngưỡng nghe trung bình Phản xạ gân bàn đạp Pure Tone Average Đ SLC26A Solute carrier family 26 (anion Gen SLC26A4 SNHL: exchanger), member Sensorineural Non-syndromic Nghe thần kinh thính WHO Hearing Loss World Health Organization giác không hội chứng Tổ chức y tế giới MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ Chương 1: TỔNG QUAN 1.1 Khái niệm tình hình nghiên cứu điếc bẩm sinh 1.1.1 Khái niệm điếc bẩm sinh 3 1.1.2 Tình hình nghe bẩm sinh giới 1.1.3 Tình hình nghe bẩm sinh Việt Nam 1.2.Giải phẫu, sinh lý quan thính giác 1.2.1 Đặc điểm giải phẫu ứng dụng 1.2.2 Đặc điểm sinh lý ứng dụng - Cơ chế nghe 1.3 Nguyên nhân, chế gây điếc bẩm sinh 13 15 1.4.Chẩn đoán điếc bẩm sinh 21 1.4.1.Chẩn đoán xác định điếc bẩm sinh 21 1.4.2.Các xét nghiệm cần thiết để định phẫu thuật cấy ĐCÔT trẻ điếc bẩm sinh 25 1.4.3 Xác định đột biến gen liên quan điếc bẩm sinh28 1.5 Phẫu thuật cấy điện cực ốc tai 28 1.5.1 Chỉ định phẫu thuật cấy điện cực ốc tai 28 1.5.2 Chống địnhphẫu thuật cấy điện cực ốc tai 29 Chương 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 30 2.1 Đối tượng 30 2.1.1 Nguồn bệnh nhân nghiên cứu 30 2.1.2 Địa điểm, thời gian nghiên cứu 30 2.1.3 Tiêu chuẩn chọn mẫu 30 2.1.4 Tiêu chuẩn loại trừ 31 2.1.5 Cỡ mẫu nghiên cứu: 60 bệnh nhân 31 2.2 Phương pháp nghiên cứu31 2.2.1 Thiết kế nghiên cứu 31 2.2.2.Phương pháp chọn mẫu 31 2.2.3.Các nội dung nghiên cứu 31 2.2.4 Quy trình xác định đột biến gen gây điếc bẩm sinh kỹ thuật giải trình tự gen hệ 2.3 Sơ đồ nghiên cứu 36 2.4 Phân tích, xử lý số liệu 36 32 2.5 Đạo đức nghiên cứu 37 Chương 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 38 3.1 Đặc điểm chung 38 3.1.1 Giới 38 3.1.2 Tuổi 39 3.1.3 Tiền sử bệnh mẹ thai kỳ 40 3.1.4 Tiền sử bệnh nhân 40 3.1.5 Tiền sử gia đình 41 3.2 Đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng trước phẫu thuật 41 3.2.1 Lâm sàng 41 3.2.2 Cận lâm sàng 42 3.3 Kết xét nghiệm đột biến gen gây điếc bẩm sinh 3.3.1 Kết đột biến gen 45 45 3.3.2 Đột biến gen GJB2 46 3.3.3 Đột biến gen SLC26A4 47 3.3.4 Đột biến gen ADN ty thể 47 3.3.5 Đột biến gen TMC1 48 3.4 Kết đột biến gen bố mẹ con: 49 3.5.1 Mối liên quan tiền sử thai kỳ kết xét nghiệm gen 50 3.5.2 Mối liên quan tiền sử gia đình kết xét nghiệm gen 50 3.5.3.Mối liên quan tiền sử bệnh nhân kết xét nghiệm gen 51 Chương 4: BÀN LUẬN 52 4.1 Đặc điểm chung 52 4.1.1 Giới 52 4.1.2 Tuổi 52 4.1.3 Tiền sử bệnh mẹ thai kỳ 55 4.1.4 Tiền sử bệnh nhân 56 4.1.5 Tiền sử gia đình 56 4.2 Đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng trước phẫu thuật 57 4.2.1 Lâm sàng 57 4.2.2 Cận lâm sàng trước phẫu thuật 57 4.3 Kết xét nghiệm gen 61 4.3.1 Tỷ lệ đột biến gen điếc bẩm sinh 61 4.3.2 Đột biến gen GJB2 62 4.3.3.Đột biến gen SLC26A4 64 4.3.4 Đột biến gen ADN ty thể 66 4.3.5 Đột biến gen TMC1 70 4.4 Kết đột biến gen bố mẹ con: 71 4.5 Mối liên quan tiền sử kết xét nghiệm gen 71 4.5.1 Mối liên quan tiền sử thai kỳ kết xét nghiệm gen 71 4.5.2 Mối liên quan tiền sử gia đình kết xét nghiệm gen 72 4.5.3 Mối liên quan tiền sử bệnh nhân kết xét nghiệm gen 73 4.6 Ý nghĩa xét nghiệm giải trình tự gen hệ chẩn đoán sớm đột biến gen gây điếc bẩm sinh KẾT LUẬN 76 KIẾN NGHỊ 78 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC 74 DANH MỤC BẢNG Bảng 2.1 Sử dụng kit 100 mutations deafness CapitalBio, Mỹ 33 Bảng 2.2 Thiết bị dùng cho giải trình tự gen 34 Bảng 3.1 Tiền sử mẹ thai kỳ 40 Bảng 3.2 Kết khám nội soi tai mũi họng Bảng 3.3 Đánh giá trí tuệ 41 42 Bảng 3.4 Kết nhĩ lượng 42 Bảng 3.5 Kết PXGCBĐ, TEOAE, ABR 43 Bảng 3.6 Phân độ ngưỡng nghe theo ASSR 43 Bảng 3.7 Kết chụp CLVT, MRI xương thái dương 44 Bảng 3.8: Kết đột biến gen gây ĐBS phát 45 Bảng 3.9: Kết đột biến gen GJB2 46 Bảng 3.10: Kết đột biến gen SLC26A4 47 Bảng 3.11: Kết đột biến gen MT-RNR1 47 Bảng 3.12: Kết đột biến gen MT-TL1 48 Bảng 3.13: Kết đột biến gen MT-TH 48 Bảng 3.14: Kết đột biến gen TMC1 48 Bảng 3.15: Kết đột biến gen trẻ gia đình 49 Bảng 3.16 Mối liên quan tiền sử thai kỳ kết xét nghiệm gen 50 Bảng 3.17 Mối liên quan tiền sử gia đình kết xét nghiệm gen 50 Bảng 3.18.Mối liên quan tiền sử bệnh nhân kết xét nghiệm gen 51 DANH MỤC BIỂU ĐỒ Biểu đồ 3.1 Phân bố đối tượng nghiên cứu theo giới 38 Biểu đồ 3.2 Phân bố đối tượng nghiên cứu theo nhóm tuổi 39 Biểu đồ 3.3 Phân bố đối tượng nghiên cứu theo tiền sử bệnh nhân 40 Biểu đồ 3.4 Phân bố đối tượng nghiên cứu theo tiền sử gia đình Biểu đồ 3.5 Kết đột biến gen 45 41 DANH MỤC HÌNH ẢNH Hình 1.1 Giải phẫu tai Hình 1.2 Mê nhĩ xương 10 Hình 1.3 Tiết diện cắtngang qua ốc tai 12 Hình 1.4 Vị trí gen GJB2 16 Hình 1.5 Hình cắt ngang ốc tai cho thấy nhóm tế bào biểu connexin 26 17 Hình 1.6 Vị trí gen SLC26A4 18 Hình 1.7 Gen ty thể vị trí đột biến 19 Hình 1.8 Vị trí gen GJB3 21 Hình 2.1 Quy trình chuẩn bị thư viện: phản ứng nhân gen PCR Hình 2.2 Sơ đồ nghiên cứu 36 Hình 4.1 Sơ đồ phả hệ gia đình bệnh nhân Nguyễn Viết H.* 73 35 ... tài: Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, chức nghe gen trẻ điếc bẩm sinh có định cấy điện cực ốc tai với mục tiêu sau: Mô tả đặc điểm lâm sàng chức nghe trẻ điếc bẩm sinh định cấy điện cực ốc tai Mô... ốc tai Mô tả đặc điểm gen gây điếc bẩm sinh trẻ điếc bẩm sinh định cấy điện cực ốc tai 3 Chương TỔNG QUAN 1.1 Khái niệm tình hình nghiên cứu điếc bẩm sinh 1.1.1 Khái niệm điếc bẩm sinh Để đánh... hồi sức nghe kịp thời cho trẻ vơ khó khăn, mang lại hiệu tốn Nghiên cứu ốc tai điện tử case cấy điện cực ốc vào năm 1972 đến năm 1982 Holly MDonell, tuổi, đứa trẻ cấy ghép điệc cực ốc tai Nucleus