BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI -*** - VŨ THỊ TUẤT ẢNH HƯỞNG CỦA CHẤT LƯỢNG TINH TRÙNG ĐẾN KẾT QUẢ THỤ TINH TRONG ỐNG NGHIỆM TIỂU LUẬN TỔNG QUAN HÀ NỘI – 2018 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI VŨ THỊ TUẤT ẢNH HƯỞNG CỦA CHẤT LƯỢNG TINH TRÙNG ĐẾN KẾT QUẢ THỤ TINH TRONG ỐNG NGHIỆM Người hướng dẫn: PGS.TS Nguyễn Khang Sơn Cho đề tài: Nghiên cứu ảnh hưởng chất lượng tinh trùng đến kết thụ tinh ống nghiệm Chuyên ngành : Sản phụ khoa Mã số : 62720131 TIỂU LUẬN TỔNG QUAN HÀ NỘI – 2018 MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ I TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Nghiên cứu hình dạng tinh trùng xét nghiệm tinh dịch đồ thường quy 1.1.1 Nhóm tinh trùng bình thường theo tiêu chuẩn WHO 2010 1.2 Nhóm tinh trùng dị dạng 1.2.1 Tiêu chuẩn hình thái bất thường theo WHO 2010 1.2.2 Các dị dạng bất thường hình thái 1.2.3 Điều trị bất thường hình thái 1.3 Liên quan bất thường hình thái tinh trùng với bất thường nhiễm sắc thể 1.4 Các xét nghiệm kiểm tra khả sống, chết tinh trùng: 10 1.5 Kết ICSI/IVF với tinh trùng bất động .14 II ĐẠI CƯƠNG VỀ ĐỨT GÃY DNA CỦA TINH TRÙNG 15 2.1 Nguyên nhân gây bệnh chế tổn thương DNA tinh trùng .16 2.2 Các xét nghiệm kiểm tra tính tồn vẹn DNA tinh trùng 16 2.3 Đánh giá ảnh hưởng đứt gãy DNA tinh trùng kết thụ tinh 19 2.4 Vai trò chất chống oxy hố, chiến lược điều trị 21 2.4.1 Vai trò chất chống oxy hoá 21 III Một số yếu tố ảnh hưởng đến kết IVF/ICSI – tr35 Hồ Sỹ Hùng 22 3.1 Hiệu phương pháp IVF/ICSI .22 3.2 Hiện tượng hồng thể hố sớm kích thích buồng trứng 25 3.3 Chuyển phơi đơng lạnh 28 3.4 Kết IVF/ICSI .34 TÀI LIỆU THAM KHẢO DANH MỤC BẢNG Bảng Chỉ số tinh dịch đồ theo tiêu chuẩn WHO 2010 Bảng Tiêu chuẩn hình thái tinh trùng bình thường bất thường .5 ĐẶT VẤN ĐỀ Mục tiêu cuối phương pháp hỗ trợ sinh sản tạo em bé khoẻ mạnh, … mang lại niềm vui, niềm hạnh phúc cho cặp vợ chồng vô sinh ổn định cân xã hội Kết phương pháp TTTON kết hợp trứng tinh trùng, phơi chất lượng để có thai nhi, em bé khoẻ mạnh không dị tật Tìm hiểu, nghiên cứu hình thái tinh trùng có ảnh hưởng đến kết TTTON xét nghiệm tinh dịch đồ thường quy hay sâu hơn, đánh giá chất lượng tinh trùng qua xét nghiệm đứt gãy DNA (Halo Sperm), để tìm hiểu đứt gãy DNA đến hình thái DNA với kết TTTON Đứt gãy DNA không đồng với tổn thương bệnh lý nhiễm sắc thể Một số yếu tố ảnh hưởng đến hình thái tinh trùng số yếu tố ảnh hưởng đến DNA tinh trùng từ đưa kiến nghị, liệu trình IVF/ICSI Có nên chọn lọc hình thái tinh trùng, dị dạng tinh trùng làm ICSI, hình thái tinh trùng không nên làm tổn thương DNA mức độ làm ICSI, mức độ khơng nên làm ICSI Kiến nghị việc dùng thuốc, thực phẩm chức đàn ông vô sinh trước làm ICSI/IVF không? Giảm tải tỷ lệ vô sinh, vô sinh nữ, vô sinh nam vô sinh chung Áp dụng phương pháp, kỹ thuật hỗ trợ sinh sản tiên tiến giới vào Việt Nam đem lại nhiều thành công cao Từ vấn đề tiến hành tổng quan tài liệu về: “ Anh hưởng chất lượng tinh trùng đến kết thụ tinh ống nghiệm” với mục tiêu sau: Đặc điểm hình thái tinh trùng bình thường bất thường Đại cương đứt gãy DNA tinh trùng xét nghiệm đánh giá phân mảnh DNA tinh trùng Phương pháp hỗ trợ sinh sản IVF thường quy, IVF/ICSI kết I TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Nghiên cứu hình dạng tinh trùng xét nghiệm tinh dịch đồ thường quy 1.1.1 Nhóm tinh trùng bình thường theo tiêu chuẩn WHO 2010[4] - Xét nghiệm tinh dịch đồ thăm dò bắt buộc cho tất cặp vợ chồng muộn xét nghiệm đơn giản, dễ làm, khơng tốn kém, không xâm nhập - Bệnh nhân nam không sinh hoạt tình dục 2-7 ngày trước xét nghiệm, mẫu tinh dịch lấy thủ dâm, chờ 30 phút để tinh dịch ly giải hồn tồn, sau đọc kính hiển vi điện tử * Đánh giá tinh trùng Bảng Chỉ số tinh dịch đồ theo tiêu chuẩn WHO 2010 Thể tích ≥ 1,5ml pH ≥ 7,2 Mật độ ≥ 15x106 /ml ∑tinh trùng ≥ 39x106 Tinh trùng sống ≥ 58% Di động PR≥32%; NR+PR ≥40% Bình thường hình thái ≥4% Tế bào ≤1000 * Kết bình thường - Ngay sau xuất tinh, tinh dịch thường đóng vón khác Tinh dịch thường ly giải vòng 60 phút, nhiệt độ phòng lồng ấp, chiều dài giọt rơi xuống từ đầu pipet nên nhỏ cm, ly giải không đầy đủ làm sai lệch kết - Tinh dịch lỏng bình thường đồng màu xám đục Nó đục nồng độ tinh trùng thấp, bệnh lý thường thường có màu nâu đỏ, màu vàng… - Thể tích tinh dịch bình thường ≥ 1,5ml, khuyến cáo để xác định khối lượng cân lọ trước sau thu thập tinh trùng Khối lượng riêng tinh dịch xấp xỉ với 1g ml Chẩn đoán phân biệt giảm lượng tinh dịch cho sau: thu tinh dịch khơng đầy đủ, xuất tinh ngược dòng, tắc nghẽn ống xuất tinh thiểu sinh dục - pH dung dịch: + pH bình thường tinh dịch từ 7,2 -8,0 Để xác định độ pH, tinh trùng phải hoá lỏng, phạm vi giấy quỳ nên đặt G pH 6-10 Độ acid (với tinh trùng tinh dịch giảm khối lượng) báo tắc nghẽn ống dẫn xuất tinh dị dạng đường tinh (thiếu túi tinh) * Kiểm tra kính hiển vi điện tử mẫu vật tươi - Ngưng kết tinh trùng: + Ngưng kết hoạt lực tinh trùng đầu với đầu, đầu với đuôi đuôi với đuôi + Ngưng kết tinh trùng cho thấy tồn kháng thể kháng tinh trùng Việc ngưng kết tinh trùng di động với phải tách riêng biệt khỏi tinh trùng bất động từ kết dính tinh trùng di chuyển với tế bào biểu mô mảnh vụn - Các tế bào khác: + Soi kính hiển vi tinh dịch cho thấy bên cạnh tinh trùng tế bào biểu mơ, tế bào tròn mà bạch cầu tế bào mầm non Sự phân biệt tế bào tròn làm cách nhuộm peroxidase, tế bào có peroxidase (+) bạch cầu bình thường số lượng tế bào tròn ≤ 1000 * Đánh giá khả vận động tinh trùng - Hoạt lực tinh trùng đánh giá tốt sau kho hoá lỏng tinh dịch Độ dày lớp chất lỏng lam kính nắp kính nên 20 micron - Đánh giá hoạt lực tinh trùng với độ phóng đại vật kính 20, với 200 tinh trùng đánh giá khả vân động phân loại sau: + Khả vận động tiến tới (PR): hoạt động tuyến tính hay chuyển động cong phía trước + Khả vận động tiến tới (PR): hoạt động tuyến tính hay chuyển động phía trước di chuyển phía trước tròn + Immotility (IM): tinh trùng bất động Tỷ lệ di động ≥40% hoạt lực tinh trùng (PR+NP), >32% tinh trùng di động tiến tới - Số lượng tinh trùng: Tổng số lượng tinh trùng tương quan với thời gian mang thai tỷ lệ có thai Mật độ ≥15 triệu/ml tổng số tinh trùng ≥39x106 - Hình thái học tinh trùng: Việc đánh giá tinh trùng thực với kính hiển vi độ phóng đại 1000, nhuộm tinh trùng GiêmSa Phân loại hình thái tinh trùng theo WHO 2010 [47] Hình thái tinh trùng bình thường ≥ 4% Bảng Tiêu chuẩn hình thái tinh trùng bình thường bất thường [46] Hình thái bình thường Hình thái bệnh lý Đầu Hình dạng thơng thường hình bầu dục Khu vực acrosome khơng có khơng bào thể tích chiếm 40-70% đầu Quá lớn, nhỏ, mỏng dài, hình lê, tròn, vơ định hình với không bào acrosome (>2 nhiều so với 20 %), acrosomes nhỏ lớn Trung gian Nối đầu với đuôi Giọt bào Kết nối không đối xứng vào đầu, tương midpiece nên 30% Đuôi Đuôi mỏng midpiece, chiều Quá ngắn, nhiều đuôi, độ dày không dài đầu Đuôi cong đều, hình xoắn ốc khơng có nút thắt đột ngột 32 - Độ (phôi xấu) : phơi ngày có tế bào phơi ngày có ≤4 tế bào ; tỷ lệ mảnh vỡ ≥50% Đánh giá phôi rã đông trước chuyển : Rã đông phôi ngày 2, nuôi qua đêm thành phôi ngày : - Độ (phôi tốt): ngày rã đơng ngun vẹn 3-4 tế bào, ngày có 6-8 tế bào, tế bào đồng đều, tỷ lệ mảnh vỡ