NGUYỄN THỊ HỒNG HÀ Nghiªn cøu bμo chÕ vμ sinh khả dụng viên nén paracetamol giải phóng nhanh LUN N TIẾN SĨ DƯỢC HỌC HÀ NỘI – 2011 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI NGUYỄN THỊ HỒNG HÀ Nghiªn cøu bμo chế v sinh khả dụng viên nén paracetamol giải phóng nhanh LUẬN ÁN TIẾN SĨ DƯỢC HỌC CHUYÊN NGÀNH BÀO CHẾ Mà SỐ: 62730105 Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Nguyễn Đăng Hoà PGS.TS Nguyễn Văn Long HÀ NỘI – 2011 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi Các số liệu, kết nêu luận án trung thực chưa công bố công trình khác Nguyễn Thị Hồng Hà i LỜI CẢM ƠN Tơi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới PGS.TS Nguyễn Đăng Hoà PGS.TS Nguyễn Văn Long, người thầy tận tình hướng dẫn tạo điều kiện giúp tơi hồn thành luận án Tôi xin chân thành cảm ơn GS.TS Võ Xuân Minh, PGS,TS Phạm Thị Minh Huệ, TS Nguyễn Thị Kiều Anh, TS Nguyễn Ngọc Chiến, TS Nguyễn Trần Linh tồn thể thầy giáo, kỹ thuật viên Bộ mơn Bào Chế, Bộ mơn Cơng Nghiệp Dược, Phòng Thí Nghiệm Trung Tâm, Bộ mơn Dược Lâm Sàng, Phòng Sau đại học - Trường Đại Học Dược Hà Nội tạo điều kiện thuận lợi giúp đỡ q trình thực luận án Tơi xin cảm ơn cán bộ, nhân viên công ty Dược Khoa, công ty CPDP Sao Kim Trung tâm tương đương sinh học - Viện Kiểm nghiệm thuốc Trung Ương tận tình hỗ trợ tơi q trình nghiên cứu Tơi xin chân thành cảm ơn Ban Giám Đốc, Ban lãnh đạo Khoa Dược toàn thể anh, chị, em bạn đồng nghiệp công tác Bệnh Viện Nhi Trung Ương tạo điều kiện thuận lợi, động viên giúp đỡ tơi suốt q trình nghiên cứu đề tài Tôi xin gửi tới gia đình bạn bè lời cảm ơn chân thành dành cho tơi thời gian, tình cảm, giúp đỡ lời động viên khích lệ giúp tơi hoàn thành luận án Hà Nội, ngày tháng năm 2010 Nguyễn Thị Hồng Hà ii MỤC LỤC Trang phụ bìa Lời cam đoan Lời cảm ơn Mục lục Danh mục chữ viết tắt Danh mục bảng Danh mục hình ĐẶT VẤN ĐỀ Chương 1: TỔNG QUAN 1.1 Viên nén giải phóng nhanh 1.1.1 Khái niệm 1.1.2 Ưu nhược điểm viên nén giải phóng nhanh 1.1.3 Một số kỹ thuật phương pháp bào chế viên giải phóng nhanh 1.1.3.1 Một số kỹ thuật tác động vào dược chất 1.1.3.2 Sử dụng tá dược siêu rã 1.1.3.3 Sử dụng hệ tá dược sủi bọt 1.1.3.4 Phương pháp đông khô 1.1.3.5 Phương pháp đổ khuôn 1.1.3.6 Phương pháp thăng hoa 1.1.3.7 Kỹ thuật rắn lỏng 1.1.3.8 Kỹ thuật “kẹo bông” 1.1.3.9 Kỹ thuật in phun ba chiều 1.1.3.10 Phương pháp xử lý sau dập viên 1.1.4 Phương pháp đánh giá chất lượng viên nén giải phóng nhanh 1.2 Tổng quan paracetamol 1.2.1 Cơng thức, tính chất 1.2.2 Tác dụng dược lý 1.2.3 Dược động học 1.2.4 Chỉ định, chống định, tác dụng không mong muốn 1.2.5 Một số nghiên cứu viên paracetamol giải phóng nhanh 1.2.6 Phương pháp định lượng paracetamol 1.2.6.1 Định lượng paracetamol nguyên liệu chế phẩm 1.2.6.2 Định lượng paracetamol dịch sinh học 1.3 Nghiên cứu sinh khả dụng tương đương sinh học iii i ii iii vii viii xii 3 10 10 11 12 13 14 14 15 16 18 18 19 20 20 21 23 23 27 31 1.3.1 Đánh giá độ hoà tan in vitro 1.3.2 Đánh giá sinh khả dụng in vivo tương đương sinh học Chương 2: NGUYÊN VẬT LIỆU, THIẾT BỊ VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Nguyên vật liệu thiết bị nghiên cứu 2.1.1 Nguyên vật liệu 2.1.2 Thiết bị, phương tiện 2.1.3 Đối tượng nghiên cứu 2.1.4 Địa điểm nghiên cứu 2.2 Phương pháp nghiên cứu 2.2.1 Phương pháp bào chế viên nén paracetamol giải phóng nhanh 2.2.1.1 Phương pháp sử dụng tá dược thăng hoa 2.2.1.2 Phương pháp chế tạo hạt rắn-lỏng 2.2.1.3 Phương pháp bào chế viên sủi nội 2.2.2 Phương pháp hoàn thiện thẩm định qui trình sản xuất 2.2.2.1 Chuẩn bị trước thẩm định 2.2.2.2 Tiến hành thẩm định 2.2.2.3 Kiểm sốt qui trình phương pháp thống kê 2.2.3 Phương pháp đánh giá tiêu chuẩn hoá chất lượng bán thành phẩm thành phẩm viên nén paracetamol giải phóng nhanh 2.2.4 Phương pháp nghiên cứu độ ổn định 2.2.5 Phương pháp đánh giá sinh khả dụng tương đương sinh học 2.2.5.1 Xây dựng thẩm định phương pháp định lượng paracetamol huyêt tương 2.2.5.2 Phương pháp nghiên cứu sinh khả dụng tương đương sinh học 2.2.7 Xử lý kết nghiên cứu Chương 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 3.1 Bào chế viên paracetamol giải phóng nhanh 3.1.1 Sử dụng kỹ thuật thăng hoa 3.1.2 Bào chế viên sử dụng kỹ thuật tạo hạt rắn lỏng 3.1.3 Bào chế viên sủi nội 3.1.3.1 Kết khảo sát yếu tố thành phần công thức 3.1.3.2 Kết đánh giá ảnh hưởng số thông số kỹ thuật đến thời gian rã hoà tan paracetamol từ viên 3.2 Xây dựng tiêu chuẩn chất lượng viên nén paracetamol giải phóng nhanh 3.2.1 Khảo sát tiêu chất lượng 3.2.2 Đề xuất tiêu chuẩn viên nén paracetamol giải phóng nhanh 3.3 Nghiên cứu độ ổn định iv 31 32 37 37 38 39 39 40 40 40 41 42 46 46 46 47 49 51 51 51 52 54 55 55 55 59 62 62 71 77 77 81 83 3.3.1 Đánh giá độ ổn định 3.3.2 Xác định tuổi thọ thuốc 3.4 Hồn thiện thẩm định qui trình sản xuất viên nén paracetmol giải phóng nhanh 3.4.1 Hồn qui trình sản xuất viên nén paracetamol giải phóng nhanh 3.4.1.1 Những thay đổi nâng cỡ lơ 3.4.1.2 Cơng thức viên 3.4.1.3 Tóm tắt quy trình sản xuất 3.4.1.4 Sơ đồ quy trình sản xuất 3.4.2 Thẩm định quy trình sản xuất viên nén paracetamol giải phóng nhanh 3.4.2.1 Đánh giá nguy gây ổn định quy trình sản xuất 3.4.2.2 Lựa chọn thơng số thẩm định 3.4.2.3 Kế hoạch lấy mẫu trình thẩm định 3.4.2.4 Giai đoạn trộn bột khô 3.4.2.5 Giai đoạn nhào ẩm 3.4.2.6 Giai đoạn sấy 3.4.2.7 Giai đoạn sửa hạt 3.4.2.8 Giai đoạn trộn hoàn tất 3.4.2.9 Giai đoạn dập viên 3.4.2.10 Kết thẩm định thông số kiểm soát 3.5 Nghiên cứu sinh khả dụng viên nén paracetamol giải phóng nhanh 3.5.1 Xây dựng thẩm định phương pháp định lượng paracetamol huyết tương 3.5.1.1 Xây dựng phương pháp định lượng 3.5.1.2 Thẩm định phương pháp phân tích 3.5.2 Kết nghiên cứu sinh khả dụng Chương 4: BÀN LUẬN 4.1 Về lựa chọn phương pháp bào chế viên paracetamol giải phóng nhanh 4.2 Về nghiên cứu xây dựng công thức bào chế viên 4.2.1 Lựa chọn kích thước tiểu phân dược chất 4.2.2 Lựa chọn tỷ lệ natri bicarbonat 4.2.3 Lựa chọn tá dược dính 4.2.4 Lựa chọn tá dược rã 4.2.5 Lựa chọn tá dược trơn 4.2.6 Lựa chọn thời gian nhào ẩm 4.2.7 Lựa chọn lực gây vỡ viên v 83 88 90 90 90 92 93 93 95 95 96 98 99 101 103 104 105 106 108 117 117 117 120 128 134 134 137 137 138 139 139 140 140 140 4.2.8 Lựa chọn kỹ thuật tạo hạt 4.3 Về xây dựng tiêu chuẩn chất lượng viên nén paracetamol giải phóng nhanh 4.4 Về độ ổn định chế phẩm 4.4.1 Theo dõi độ ổn định 4.4.2 Dự tính tuổi thọ chế phẩm nghiên cứu 4.5 Về hoàn thiện thẩm định qui trình sản xuất 4.6 Về nghiên cứu sinh khả dụng viên nén paracetamol giải phóng nhanh 4.6.1 Xây dựng thẩm định phương pháp định lượng paracetamol huyết tương 4.6.2 Nghiên cứu sinh khả dụng viên nén tương đương sinh học viên nén paracetamol giải phóng nhanh người tình nguyện KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT DANH MỤC CÁC BÀI BÁO CÓ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC vi 141 141 142 142 143 144 146 146 148 150 152 153 DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT ASEAN : Hiệp hội nước Đông Nam Á (Association of Sounth East Asia Nations) AUC : Diện tích đường cong (Area under the curve) BCS : Hệ thống phân loại sinh dược học (Biopharmaceutics Classification System) BP : Dược điển Anh (Bristish Pharmacopoeia) CE : Điện di mao quản (Capillary electrophoresis) : Nồng độ thuốc cực đại huyết tương Cmax CS : Cộng DĐVN : Dược điển Việt Nam FDA : Cục quản lý thuốc thực phẩm (Food and Drug Administration) FPIA : Phân tích miễn dịch huỳnh quang phân cực (Fluorescence Polarization Immunoassay) HPLC : Sắc ký lỏng hiệu cao (High performance liquid chomatography) HPMC Hydroxypropyl methylcellulose IVIVC : Mối tương quan in vitro – in vivo (In vitro - in vivo correlation) NaCMC : Natri carboxymethyl cellulose NBC Natri bicarbonat PEG : Polyethylen glycol PG : Propylen glycol PVP : Polyvinyl pyrolidon SKD : Sinh khả dụng : Thời gian bán thải (Time terminal half-life) t1/2 : Thời gian thuốc đạt nồng độ cực đại huyết tương Tmax USP : Dược điển Mỹ (United State Pharmacopoeia) UV : Tử ngoại (Ultra violet) Vis : Khả kiến (Visible) vii DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1 Các nguyên liệu, hoá chất sử dụng nghiên cứu 37 Bảng 2.2 Các thiết bị phương tiện sử dụng nghiên cứu 38 Bảng 3.3 Cơng thức mẫu viên giải phóng nhanh ứng dụng kỹ thuật thăng hoa 55 Tỷ trọng độ trơn chảy mẫu hạt paracetamol bào chế kỹ thuật thăng hoa sau trộn hoàn tất (n=5) 56 Độ bền học, độ rã biến thiên khối lượng mẫu viên thực nghiệm bào chế phương pháp thăng hoa (giá trị trung bình ±SD, n=6) 57 Tỷ lệ paracetamol hoà tan từ mẫu viên điều chế kỹ thuật thăng hoa môi trường HCl 0,1 N (n=6) 58 Công thức bào chế số mẫu viên khảo sát ứng dụng hệ rắn lỏng 59 Bảng 3.8 Tỷ trọng biểu kiến hạt rắn lỏng paracetamol-PG 59 Bảng 3.9 Độ rã trung bình mẫu viên rắn- lỏng môi trường nước acid HCl 0,1N 60 Tỷ lệ paracetamol hoà tan từ mẫu viên rắn lỏng môi trường HCl 0,1N (n=6) 61 Bng 3.11 Thnh phần công thức mẫu viên khảo sát nghiên cứu (Mi cụng thc 500 g paracetamol ) 63 Bảng 3.12 Phần trăm paracetamol hồ tan từ mẫu viên có tỷ lệ natri bicarbonat khác (n=6) 65 Độ hoà tan paracetamol từ mẫu viên có thành phần tá dược rã khác 67 Phần trăm paracetamol hoà tan từ mẫu viên có tỷ lệ tá dược rã khác (n=6) 68 Phần trăm paracetamol hoà tan từ mẫu viên có thành phần tá dược trơn khác nhau(n=6) 70 Bảng 3.16 Thời gian rã mẫu viên có thời gian nhào ẩm khác 72 Bảng 3.17 Thời gian rã trung bình mẫu viên có độ cứng khác 73 Tốc độ giải phóng paracetamol từ mẫu viên có độ cứng khác 74 Bảng 3.4 Bảng 3.5 Bảng 3.6 Bảng 3.7 Bảng 3.10 Bảng 3.13 Bảng 3.14 Bảng 3.15 Bảng 3.18 viii Phụ lục 6.17 Sắc đồ mẫu huyết tương người tình nguyện số 18 thời điểm phút, 90 phút 10 sau uống viên Panadol 500 mg UV6K-245nm Retention Time Area 800 mAU 600 400 0.017 16 200 0 Minutes UV6K-245nm Retention Time Area 800 3.790 1369049 mAU 600 400 200 0 Minutes UV6K-245nm 700 Retention Time Area 600 500 300 3.753 51897 200 0.017 25 mAU 400 100 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 Minutes 4.5 5.0 5.5 6.0 6.5 7.0 Phụ lục 6.18 Sắc đồ mẫu huyết tương người tình nguyện số 18 thời điểm phút, 25 phút 10 sau uống viên Panadol ActiFast UV6K-245nm 1500 Retention Time Area 1250 mAU 1000 750 500 250 Minutes 700 UV6K-245nm Retention Time Area 600 500 4.002 1264565 mAU 400 300 0.018 16 200 100 0.0 1000 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 Minutes 4.5 5.0 5.5 6.0 6.5 7.0 UV6K-245nm Retention Time Area 800 400 200 5.350 107 3.575 94686 mAU 600 0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 Minutes 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0 6.5 Phụ lục KẾT QUẢ PHÂN TÍCH DƯỢC ĐỘNG HỌC Phụ lục 7.1 Phân tích phương sai với biến phụ thuộc ln[Cmax] Biến phụ thuộc Ln(Cmax) Ln(Cmax) Ln(Cmax) Ln(Cmax) Đơn vị µg/mL µg/mL µg/mL µg/mL Nguồn biến thiên Tung độ gốc Trình tự Mẫu Giai đoạn Bậc tự tử số 2 Bậc tự mẫu số 12,0 12,0 32,0 32,0 F 4480,63 3,00 3,12 1,59 P_value 0,0000 0,0550 0,0576 0,2200 Phụ lục 7.2 Phân tích phương sai với biến phụ thuộc ln[AUC0-∞] Biến phụ thuộc Ln(AUC0-∞) Ln(AUC0-∞) Ln(AUC0-∞) Ln(AUC0-∞) Đơn vị µg/mL*phút µg/mL*phút µg/mL*phút µg/mL*phút Nguồn biến thiên Tung độ gốc Trình tự Mẫu Giai đoạn Bậc tự tử số 2 Bậc tự F P_value mẫu số 12,0 11179,44 0,0000 12,0 1,09 0,4121 32,0 0,27 0,7637 32,0 2,36 0,1102 Phụ lục 7.3 So sánh giá trị Tmax viên PF viên PA theo phương pháp thống kê phi tham số Phép thử Trình tự Mẫu Giai đoạn Mẫu phần dư (đồng thời) T L 95,5 70,5 67 2,80 P_value 0,3661 0,1801 0,0979 0,2464 Phụ lục 7.4 So sánh giá trị Tmax viên PF viên P theo phương pháp thống kê phi tham số Phép thử Trình tự Mẫu Giai đoạn Mẫu phần dư (đồng thời) T L 86 57,5 75,5 9,17 P_value 0,9645 0,025 0,3702 0,0102 Phụ lục PHIẾU KIỂM NGHIỆM CHẾ PHẨM NGHIÊN CỨU PARACETAMOL FR 500 MG Phụ lục KÉT QUẢ XÁC ĐỊNH BƯỚC SÓNG HẤP THỤ CỰC ĐẠI CỦA DUNG DỊCH PARACETAMOL TRONG HCl O,1N VÀ MỐI TƯƠNG QUAN TUYẾN TÍNH GIỮA NỒNG ĐỘ PARACETAMOL VỚI MẬT ĐỘ QUANG 9.1 Xác định bớc sóng hấp thụ cực đại Tiến hnh quét phổ UV dung dịch paracetamol nồng độ 10 àg/ml HCl 0,1N, dải sóng 200 - 300 nm máy đo quang phổ U-1800 (HITACHI) Kết đợc thể hình 9.1 Hình ảnh phổ cho thấy paracetamol có đỉnh hấp thụ cực đại bớc sóng 242 nm Do đó, chọn bớc sóng ny để khảo sát tơng quan nồng độ dung dịch paracetamol v mật độ quang Hình 9.1 Phổ UV dung dịch paracetamol nồng độ 10 àg/ml HCl 0,1N 9.2 Tơng quan nồng độ v mật độ quang dung dịch paracetamol Pha dung dịch chuẩn paracetamol nồng độ từ 0,511 àg/ml Đo mật độ quang bớc sóng 242 nm v xây dựng đờng chuẩn Kết cho thấy nồng độ paracetamol v mật độ quang có tơng quan tuyến tính khoảng nồng độ khảo sát với hệ số tơng quan l 0,9968 (Hỡnh 9.2) Vì vậy, để đảm bảo độ xác phép đo, mẫu thử đợc pha loãng đến nồng độ paracetamol nằm khoảng 0,511 µg/ml 0.8 0.7 R = 0.9968 Mật độ quang 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0 10 12 Nồng độ dung dịch 4-aminophenol (mcg/ml) Hình 9.2 Đờng chuẩn biểu diễn tơng quan nồng ®é vμ mËt ®é quang cđa dung dÞch paracetamol HCl 0,1 N Phụ lục 10 CÁC TÀI LIỆU LIÊN QUAN KHÁC ... nghiên cứu sinh khả dụng viên nén paracetamol giải phóng nhanh 4.6.1 Xây dựng thẩm định phương pháp định lượng paracetamol huyết tương 4.6.2 Nghiên cứu sinh khả dụng viên nén tương đương sinh học viên. .. pháp nghiên cứu sinh khả dụng tương đương sinh học 2.2.7 Xử lý kết nghiên cứu Chương 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 3.1 Bào chế viên paracetamol giải phóng nhanh 3.1.1 Sử dụng kỹ thuật thăng hoa 3.1.2 Bào. .. phân tích 3.5.2 Kết nghiên cứu sinh khả dụng Chương 4: BÀN LUẬN 4.1 Về lựa chọn phương pháp bào chế viên paracetamol giải phóng nhanh 4.2 Về nghiên cứu xây dựng công thức bào chế viên 4.2.1 Lựa chọn