BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHỆ TP HỒ CHÍ MINH ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP KHẢO SÁT KHẢ NĂNG DIỆT KHUẨN CỦA SẢN PHẨM GPC8 TM ĐỐI VỚI VI KHUẨN VIBRIO PARAHAEMOLYTICUS GÂY BỆNH TRÊN TÔM THẺ CHÂN TRẮNG Ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Chuyên ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Giảng viên hướng dẫn : Th.s Võ Minh Sơn Sinh viên thực MSSV: 1151110041 : Nguyễn Thụy Thanh Trúc Lớp: 11DSH01 TP Hồ Chí Minh, 2015 LỜI CAM ĐOAN Tôi cam đoan công trình nghiên cứu tơi Các số liệu kết Đồ án trung thực Mọi thông tin trích dẫn Đồ án ghi rõ nguồn gốc Tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm lời cam đoan Tp Hồ Chí Minh, ngày tháng năm 2015 Sinh viên thực Nguyễn Thụy Thanh Trúc LỜI CẢM ƠN Để hồn thành Khóa luận tốt nghiệp, ngồi cố gắng thân, tơi nhận giúp đỡ nhiều Thầy Cô giáo, Anh Chị trước, bạn bè gia đình suốt thời gian thực đề tài Nhân xin gửi lời cảm ơn chân thành đến: Ban giám hiệu Trường Đại học Công Nghệ Thành Phố Hồ Chí Minh, tồn thể q thầy Khoa Cơng Nghệ Sinh Học tận tình giảng dạy truyền đạt nhiều kiến thức bổ ích suốt khóa học để tơi hồn thành tốt đề tài Thầy Phạm Minh Nhựt giáo viên giới thiệu vào làm Luận văn Viện Nghiên cứu Nuôi trồng Thủy sản II Ban Giám Đốc, cô chú, anh chị cán Viện Nghiên cứu Nuôi trồng Thủy sản II tạo điều kiện giúp đỡ tơi q trình thực đề tài Đặc biệt, xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến Thạc Sĩ Võ Minh Sơn, người tận tình hướng dẫn, dạy bảo giúp đỡ suốt trình thực đề tài Đồng thời xin gửi lời cám ơn đến bạn Trần Thái Hoàng Quân bạn giúp đỡ, động viên thực hiệ n đề tài suốt trình học tập trường Cuối xin cảm ơn gia đình người thân ủng hộ động viên tôi, tạo điều kiện tốt cho mặt tinh thần vật chất để hồn thành tốt Khóa luận Tro ng thời gian thực đề tài tốt nghiệp, cố gắng nhiều, nhiên thời gian có hạn kiến thức hạn chế nên khơng thể tránh sai sót Rất mong nhận ý kiến đóng Thầy Cơ để Khóa luận hồn thiện Xin chân thành c ảm ơn! TP Hồ Chí Minh, ngày tháng năm 2015 Sinh viên Nguyễn Thụy Thanh Trúc Đồ án tốt nghiệp MỤC LỤC MỤC LỤC .i DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT iv DANH MỤC BẢNG v DANH MỤC HÌNH ẢNH vi MỞ ĐẦU CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU .4 1.1 Tì nh hình ảnh hưởng dịch bệnh EMS giới Việt Nam 1.2 Vi khuẩn Vibrio parahaemolyticus 1.2.1 Phân loại 1.2.2 Đặc điểm hình thái .7 1.2.3 Đặc điểm sinh hóa 1.2.4 Các yếu tố ảnh hưởng đến phát triển V parahaemolyticus 1.2.5 Vi khuẩn V parahaemolyticus gây bệnh EMS 1.3 Một số chất diệt khuẩn sử dụng nuôi trồng thủy sản (Nguồn: Fishviet net) 14 1.3.1 Vôi (CaCO3, CaO) 14 1.3.2 Chlorine .14 1.3.3 Formaldehyde (Formalin, Formol) 15 1.3.4 Benzalkonium Chloride (BKC) .15 1.3.5 Iodine (Povi done – Iodine, Polyvinyl Pyrrolidone Iodide) 15 1.3.6 Thuốc tím (Kali Permanganate – KMnO4) 15 i Đồ án tốt nghiệp 1.4 Sản phẩm diệt khuẩn GPC8 TM 16 1.4.1 Thành phần 16 1.4.2 Ứng dụng 22 1.5 Tô m thẻ chân trắng 22 1.5.1 Phân loại (Nguồn: Boone, 1931) 22 1.5.2 Đặc điểm 23 1.5.3 Các bệnh thường gặp tôm thẻ chân trắng (Nguồn: UV Vietnam)… 23 CHƯƠNG VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 30 2.1 Địa điểm thời gian nghiên cứu 30 2.2 Vật liệu nghiên cứu 30 2.3 Phương pháp nghiên cứu 33 2.3.1 Khảo sát khả diệt khuẩn sản phẩm GPC8 điều kiện in vitro… 33 2.3.2 Khảo sát khả diệt khuẩn sản phẩm GPC8 điều kiện in vivo… 35 2.3.3 Phương pháp xử lý số liệu 40 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 41 3.1 Kết 41 3.1.1 Kết khảo sát khả diệt khuẩn sản phẩm GPC8 điều kiện in vitro 41 3.1.2 Kết khảo sát khả diệt khuẩn sản phẩm GPC8 điều kiện in vivo 44 3.2 Thảo luận 52 i Đồ án tốt nghiệp CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ .53 4.1 Kết luận 53 4.2 Kiến nghị 53 DANH MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO .54 i DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT AHPNS: Acute hepatopancreatic nerosis syndrome EMS: Early mortality syndrome ĐBSCL: Đồng sông Cửu Long IMNV: Infectious myonecrosis virus IHHNV: Infectious hypodermal and hematopoietic necrosis virus GAV: Gill-associated virus NT: Nghiệm thức NTĐC: Nghiệm thức đối chứng TCBS: Thiosunphate Citrate Bile Salt Sucrose agar TSA: Tryptic Soya Agar TSB: Tryptic Soya Broth TSV: Taura syndrome virus V parahaemolyticus: Vibrio parahaemolyticus Việ n NCNTTS II: Viện Nghiên cứu Nuôi trồng Thủy sản II WSSV: White spot syndrome virus YHV: Yellow head virus DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Khoảng tối ưu khoảng chịu đựng V parahaemolyticus Bảng 1.2 Thành phần hóa học sản phẩm diệt khuẩn GPC8 TM .16 Bảng 1.3 Các sản phẩm thương mại có thành phần Glutaraldehyde phép lưu hành thị trường nuôi trồng thủy sản (theo Quyết định số 15/2006/QĐ-BTS ngày 8/9/2006 Bộ trưởng Bộ Thủy sản) 19 Bảng 2.1 Bố trí thí nghiệm ni chung .34 Bảng 2.2 Bố trí thí nghiệm LC50 36 Bảng 2.3 Bố trí thí nghiệm LD50 38 Bảng 2.4 Bố trí thí nghiệm diệt khuẩn điều kiện in vivo 39 Bảng 3.1 Đường kính vò ng diệt khuẩn .42 Bảng 3.2 Tỷ lệ tơm chết (%) tích lũy theo thời gian thí nghiệm LC50 45 Bảng 3.3 Tỷ lệ tơm chết (%) tích lũy theo thời gian thí nghiệm LD50 48 DANH MỤC HÌNH ẢNH Hình 1.1 So sánh sản lượng tơm nước năm 2013 so với 2012 .6 Hình 1.2 Hình thái vi khuẩn V parahaemolyticus .7 Hình 1.3 Nhuộm Gram vi khuẩn V parahaemolyticus Hình 1.4 Khuẩn lạc V parahaemolyticus môi trường chọn lọc TCBS Hình 1.5 Cơ chế gây bệnh EMS 10 Hình 1.6 Tơ m chết bệnh EMS .11 Hình 1.7 Gan tơm sưng to, có màu bất thường 12 Hình 1.8 Gan tụy tôm bị bệnh EMS, đường ruột đứt khúc đục .12 Hình 1.9 Tơ m bị nhiễm bệnh EMS tơm bình thường 13 Hình 1.10 Một số tơm sau vượt qua bệnh EMS (gọi tôm tre – đốt thể đốt tre) tơm sau chết 13 Hình 1.11 Chất diệt khuẩn GPC8 TM 16 Hình 1.12 Tơm thẻ chân trắng .23 Hình 1.13 Tôm bị bệnh hoại tử IMNV 24 Hình 1.14 Tơm bị bệnh Taura .25 Hình 1.15 Tơm bị bệnh đốm trắng 26 Hình 1.16 Tơm bị bệnh đầu vàng YHV 27 Hình 1.17 Tơm thẻ chân trắng bệnh IHHNV với dấu hiệu c hủy cong quẹo, phần dị hình, biến dạng .28 Hình 2.1 Quy trình nghiên cứu 33 Hình 2.2 Thí nghiệm ni chung 35 Hình 2.3 Hệ thống thí nghiệm LC50 37 Hình 2.4 Hệ thống thí nghiệm LD50 38 Hình 2.5 Hệ thống bể kính thí nghiệm 40 Hình 3.1 Kết thí nghiệm giếng khuếch tán 41 Hình 3.2 Kết kiểm tra mật độ vi khuẩn môi trường TCBS 42 Hình 3.3 Ảnh hưởng nồng độ chất diệt khuẩn GPC8 đến mật độ Vibrio parahaemolyticus 43 Hình 3.4 Đồ thị tỷ lệ tơm chết (%) theo thời gian thí nghiệm 44 Hình 3.5 So sánh tơm khỏe mạnh (A) tơm nhiễm bệnh (B) 46 Hình 3.6 Kiểm tra Vibrio parahaemolyticus tôm bệnh môi trường Compact Dry PI-VP .47 Hình 3.7 Tỷ lệ tơm chết (%) theo ngày thí nghiệm LD5 .47 Hình 3.8 Mật độ vi khuẩn thí nghiệm diệt khuẩn điều kiện in vivo .49 Hình 3.9 Tỷ lệ tơm sống (%) thí nghiệm diệt khuẩn điều kiện in vivo .51 vii CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 4.1 Kết luận - Kết thí nghiệm giếng khuếch tán cho thấy sản phẩm chất diệt khuẩn GPC8 TM có khả diệt khuẩn nồng độ 10000 ppm với đường kính vòng diệt khuẩn 16.66 mm - Kết thí nghiệm ni chung cho thấy sản phẩm chất diệt khuẩn GPC8 TM diệt tốt vi khuẩn nồng độ 5; 10; 20 ppm - Nồng độ chất diệt khuẩn GPC8 TM gây chết 50% tôm (LC50) xác định 22,0 ppm - Mật độ vi khuẩn V parahaemolyticus gây chết 50% tôm (LD50) xác định 1x10 cfu/ml - Tro ng điều kiện in vivo chất diệt khuẩn GPC8 TM có khả diệt khuẩn tốt khoảng thời gian nồng độ 10 20 ppm Sau chất diệt khuẩn bị suy giảm khả diệt khuẩn khiến vi khuẩn phát triển trở lại - Nồng độ thích hợp GPC8 áp dụng vào thực tế (dựa theo khả diệt khuẩn tỷ lệ sống tơm) khuyến cáo cho nhà sản xuất 10 ppm tiếp tục bổ sung chất diệt khuẩn lần thứ hai cách lần thứ 4.2 Kiến nghị - Tiế p tục thử nghiệm diệt khuẩn ngồi ao ni giai đoạn cải tạo ao nuôi thương phẩm nhằm kiểm soát dịch bệnh DANH MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt Đặng Thị Hoàng Oanh Nguyễn Thanh Phương (2012) Các bệnh nguy hiểm tôm ni Đồng Sơng Cửu Long Tạp chí khoa học 22c: 106 - 118 Lê Hồng Phước, Lê Hữu Tài Nguyễn Văn Hảo (2012) Diễn biến hội chứng hoại tử gan tụy ao nuôi tôm thâm canh huyện Trần Đề, Sóc Trăng Lê Hữu Tài, Nguyễn Văn Hảo Lê Hồng Phước, 2012 Một số kết chẩn đốn mơ bệnh học phân tích siêu cấu trúc hội chứng hoại tử gan tụy tôm nuôi Đồng sông Cửu Long Nguyễn Văn Duy, Nguyễn Thị Cẩm Ly, 2012 Phân lập xác định gen độc tố Vibrio Parahaemolyticus hải sản tươi sống Nha Trang Tạp chí khoa học - Công nghệ Thủy sản Nguyễn Trọng Nghĩa, Âu Thị Kim Ngọc, Nguyễn Thị Minh Trang, Đặng Thị Hoàng Oanh, Trương Quốc Phú Phạm Anh Tuấn (2014) Phân lập xác định khả gây hoại tử gan tụy vi khuẩn Vibrio Parahaemolyticus Đồ án tốt nghiệp Thủy sản, Đại học Cần Thơ Tài liệu tiếng Anh Daniel NA, MacKinnon L, Bishop R, Altekruse S, Ray B, Hammond Rm, Thompson S, Bean NH, Griffin PM, Slutsker L (2000) Vibrio Parahaemolyticus infections in the United States, 1973 - 1998 J infect Dis, 181(5):1661 – Flegel, T.W (2012) Historic emergence, impact and current status of shrimp pathogens in Asia Journal of Invertebrate Pathology 110:166 – 173 Lightner, D.V., (1996) Viral disease In A Handbook of Pathology and Diagnostic Procedures for Diseasea of Penaeid Shrimp ed McVey, A pp - 72 Baton Rouge, LA: World Aquaculture Society Lightner, D.V., Redman, R M., Pantoja, C R., Nobel, B L., Loc, T (2012) Early mortality syndrome affects shrimp in Asia Global aquaculture advocate January/Febuary 2014:40 Mooney A (2012) An emerging shrimp disease in Vietnam, microsporidiosis or liver disease? Available at: http://aquatichealth.net/issues/38607 (accessed 24 Feb 2012) Reed M, Muench H (1938) A simple method for estimating fifty percent endpoints Am J Hyg 27:493 – 497 Tài liệu web Australian Go vement Hygiene Protocols for the Prevention and Control of Diseases,http://www.environment.go v.au/system/files/pages/8c8789d3 -aa604063-bfb5-4fdabfe186eb/files/disinfectants.pdf Aquanetviet Bệnh phổ biến tôm nuôi: ngun nhân, chẩn đốn phòng trị bệnh, http://aquanet viet.org/ post/2144907 Bách khoa - Hóa chất ứng dụng, Một số hóa chất sử dụng ni trồng Thủy sản, http://ne ws.bachkho a.net.vn/ Bộ Nông nghiệp Phát triển Nông thơn Tình hình sản xuất thương mại tơm giới, 9/2013, http:// www.mard.go v.vn/pages/ne ws_detail.aspx?Ne ws Id=31596 Hình So sánh sản lượng tôm nước năm 2013 so với 2012, http://thuys anvietnam.com.vn/ hau-dic h-benh-ems-tom-thai-lan- no -luc-phuchoi-article-8844.tsvn Petcity Thuốc sát trùng GPC8, http:// www.petcity.vn/t huoc -sat-trung- gpc8/p753.ht ml Thuốc Thú y - Thủy sản Vemedim Hội chứng chết sớm tôm, http:// www.veme dim.com.vn/be nhvadieutri.php?id=6&b=92 Thuốc Thú y - thuốc Thủy sản Meko vet Bệnh chết sớm tôm (EMS/AHNBS), http://meko vet.com vn/ vi/ dieu-tri-benh.nd11/be nh-chetsom-tren-tom- emsahpns.i259.html Thạc sĩ Huỳnh Trường Giang, Khoa Thủy sản - Đại học Cần Thơ Glutaraldehyde chất sát trùng phổ rộng, http://uvviet nam.com.vn/Ne ws Detail.as px?ne ws Id=1096 Trung tâm nghiên cứu Khoa học Nông vận Cách sử dụng thuốc sát trùng chăn nuôi, http://khoahocchonhanong.com.vn/CSDLKHCN/mo dules.php?name=Ne ws &op= vie wst&si d=1167 Tôm thẻ chân trắng, http://tepbac.com/species/full/42/Tom-the-chan-trang.ht m PHỤ LỤC PHỤ LỤC A: THÀNH PHẦN MÔI TRƯỜNG DINH DƯỠNG SỬ DỤNG TRONG CÁC THÍ NGHIỆM A1 Thành phần mơi trường Tryptone Soya Agar Tryptone Soya Agar (g/l) Tryptone 15,0 Papaic digest of soybean meal 5,0 Sodium chloride 15,0 agar 15,0 o pH (at 25 C) = 7,3 ± 0,2 A2 Thành phần môi trường Tryptone Soya Broth Tryptone Soya Agar (g/l) Tryptone 15,0 Papaic digest of soybean meal 5,0 Sodium chloride 15,0 o pH (at 25 C) = 7,3 ± 0,2 A3 Thành phần môi trường Thiosunphate Citrate Bile Salt Sucrose agar Thiosunphate Citrate Bile Salt Sucrose agar (g/l) Yeast extract 5,0 Proteose Peptone 10,0 Sodium thiosulfate 10,0 Sodium citrate 10,0 Ox gall 5,0 Sodium cholate 3,0 Sucrose 20,0 Sodium chloride 10,0 Ferric citrate 1,0 Bromothymol blue 0,04 Thymol blue 0,04 Agar 15,0 o pH (at 25 C) = 8.8 ± 0,2 PHỤ LỤC B: KẾT QUẢ KHẢO SÁT KHẢ NĂNG DIỆT VI KHUẨN VIBRIO PARAHAEMOLYTICUS CỦA SẢN PHẨM GPC8 TM B.1 Kết đường kính vòng diệt khuẩn thí nghiệm giếng khuếch tán Đường kính vòng diệt khuẩn (mm) Nồng độ GPC8 (ppm) 10000 Trung bình Vòng Vòng Vòng 18 14 18 16,66 ± 2,31 B2 Kết kiểm tra mật độ vi khuẩn V parahaemolyticus mơi trường TCBS thí nghiệm nuôi chung Nồng độ chất diệt khuẩn Mật độ tế bào (cfu/ml) Log (mật độ tế bào) Bình Bình Bình Bình Bình Bình 6,32.108 1,28.108 1,24.108 8,80 8,11 8,09 0.25 2,60.107 1,42.108 7,20.107 7,41 8,15 7,86 0.5 2,20.107 3,20.107 3,60.107 7,34 7,51 7,56 1,10.107 1,84.107 4,20.106 7,04 7,26 6,62 2,00.103 0,00 3,30 0,00 10 0 0,00 0,00 0,00 20 0 0,00 0,00 0,00 GPC8 (ppm) B.4 Số tơm chết thí nghiệm LD50 Mật độ vi khuẩn (cfu/ml) Ngày thí nghiệm Tổ ng tôm chết Tỷ lệ tôm chết (%) 25 0 30 100 5.10 1.10 7 21 70 6.10 6 14 46.67 2.10 2 11 36.67 B.5 Kết mật độ vi khuẩn thí nghiệm khảo sát khả diệt khuẩn GPC8 điều kiện in vivo vào lúc Nồng độ chất diệt khuẩn Mật độ tế bào (cfu/ml) Log (mật độ tế bào) Bình Bình Bình Bình Bình Bình 8,0.102 2,6.104 8,0.102 2,90 4,41 2,90 0.5 8,0.10 3,22.10 2,90 4.51 3,00 1,76.10 2,2.10 4,25 3,68 3,34 3,80.103 1,00.104 5,6.103 3,58 4,00 3,75 10 1,04.105 5,4.103 2,76.104 5,02 3,73 4,44 20 1,8.103 4,0.103 1,5.104 3,26 3,60 4,18 GPC8 (ppm) 4,8.10 1,0.10 B.6 Kết mật độ vi khuẩn thí nghiệm khảo sát khả diệt khuẩn GPC8 điều kiện in vivo vào lúc Nồng độ chất diệt khuẩn Mật độ tế bào (cfu/ml) Log (mật độ tế bào) Bình Bình Bình Bình Bình Bình 3,4.103 1,98.104 5,0.103 3,53 4,30 3,70 0.5 8, 8.10 3,94 4.72 3,15 1,72.10 1,8.103 10 20 GPC8 (ppm) 5,22.10 1,4.10 3,58.10 3,0.10 4,24 4,55 3,48 1,16.104 6,6.103 3,26 4,06 3,82 6,0.101 2,0.101 1,78 1,30 0 0 0 B.7 Kết mật độ vi khuẩn thí nghiệm khảo sát khả diệt khuẩn GPC8 điều kiện in vivo vào lúc 24 Nồng độ chất diệt khuẩn GPC8 (ppm) Mật độ tế bào (cfu/ml) Bình Bình Log (mật độ tế bào) Bình Bình Bình Bình 6,0.10 4,4.10 3,76 3,78 3,64 2,8.10 4,2.10 5,43 3.45 4,62 4,12.10 2,2.10 5,22 5,61 4,34 1,12.105 1,0.106 5,31 5,05 6,00 5,4.105 8,0.103 4,0.103 5,73 3,90 3,60 8,0.103 4,0.103 3,90 3,60 0 5,8.10 0.5 2,72.10 1,66.10 2,02.105 10 20 B.8 Kết số lượng tơm sống thí nghiệm khảo sát khả diệt khuẩn GPC8 điều kiện in vivo thời điểm Nồng độ chất diệt khuẩn Số tơm sống Bình Bình Bình 15 15 15 0.5 15 15 15 15 15 15 15 15 15 10 15 15 15 20 15 15 15 GPC8 (ppm) B.9 Kết số lượng tơm sống thí nghiệm khảo sát khả diệt khuẩn GPC8 điều kiện in vivo thời điểm Nồng độ chất diệt khuẩn Số tơm sống Bình Bình Bình 15 15 15 0.5 15 15 15 15 15 15 15 15 15 10 15 15 15 20 15 14 15 GPC8 (ppm) B.10 Kết số lượng tơm sống thí nghi ệm khảo sát khả diệt khuẩn GPC8 điều kiện in vivo thời điểm 24 Nồng độ chất diệt khuẩn Số tơm sống Bình Bình Bình 14 14 14 0.5 14 14 14 14 14 13 14 14 14 10 14 15 15 20 15 14 15 GPC8 (ppm) PHỤ LỤC C: KẾT QUẢ XỬ LÝ SỐ LIỆU THỐNG KÊ C.1 Kết kiểm tra mật độ vi khuẩn V parahaemolyticus mơi trường TCBS thí nghiệm ni chung ANOVA Table for log by Nongdo Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value 80.01 0.0000 Between groups 277.866 46.311 Within groups 8.103 14 0.578786 Total (Corr.) 285.969 20 Multiple Range Tests for log by Nongdo Method: 95.0 percent LSD Nongdo Count Mean Homogeneous Groups 20 0.0 X 10 0.0 X 1.1 X 6.97333 X 0.5 7.47 XX 0.25 7.80667 XX 8.33333 X C2 Kết mật độ vi khuẩn thí nghiệm khảo sát khả diệt khuẩn GPC8 điều kiện in vivo vào lúc ANOVA Table for H0 by Nong Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 1.86709 0.373419 0.91 0,5065 Within groups 4.92727 12 0.410606 Total (Corr.) 6.79436 17 Multiple Range Tests for H0 by Nong Do Method: 95.0 percent LSD Nong Do Count Mean Homogeneous Groups 3.40333 X 0.5 3.47 X 20 3.68 X 3.75667 X 3.77667 X 10 4.39667 X C3 Kết mật độ vi khuẩn thí nghiệm khảo sát khả diệt khuẩn GPC8 điều kiện in vivo vào lúc ANOVA Table for H6 by Nong Do Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 46.7957 9.35914 24.77 0,0000 Within groups 4.53367 12 0.377806 Total (Corr.) 51.3294 17 Multiple Range Tests for H6 by Nong Do Method: 95.0 percent LSD Nong Do Count Mean Homogeneous Groups 20 X 10 1.02667 X 3.71333 X 3.71667 X 0.5 3.93667 X 4.09 X C4 Kết mật độ vi khuẩn thí nghiệm khảo sát khả diệt khuẩn GPC8 điều kiện in vivo vào lúc 24 ANOVA Table for H24 by Nong Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 17.5519 3.51038 2.71 0,0728 Within groups 15.5372 12 1.29477 Total (Corr.) 33.0891 17 Multiple Range Tests for H24 by Nong Method: 95.0 percent LSD Nong Do Count Mean Homogeneous Groups 20 2.5 X 3.47333 XX 10 4.41 XX 0.5 4.5 XX 5.05667 X 5.45333 X ... hợp để diệt vi khuẩn V parqhaemolyticus gây bệnh tôm thẻ Nội dung nghiên cứu  Khảo sát khả diệt vi khuẩn V parahaemolyticus gây bệ nh tôm thẻ chân trắng sản phẩm GPC8 điều kiện in vitro  Xác... Khảo sát khả diệt khuẩn sản phẩm GPC8 TM vi khuẩn Vibrio parahaemolyticus gây bệnh tơm thẻ chân trắng Mục đích nghiên cứu Thí nghiệm nhằm mục đích tìm nồng độ sản phẩm GPC8 TM thích hợp để diệt. .. Phương pháp nghiên cứu 33 2.3.1 Khảo sát khả diệt khuẩn sản phẩm GPC8 điều kiện in vitro… 33 2.3.2 Khảo sát khả diệt khuẩn sản phẩm GPC8 điều kiện in vivo… 35 2.3.3 Phương pháp xử lý số liệu